丁香苷抑制大鼠椎间盘退变

背景:椎间盘退变是由于椎间盘内部髓核和纤维环组织发生损伤和退化导致的椎间盘结构和功能发生变化,目前尚无有效的治疗药物。目的:探讨丁香苷抑制大鼠椎间盘退变的作用。方法:取10只雄性SD大鼠,将每只大鼠的尾椎Co_(4)/Co_(5)椎间盘设为模型组、Co_(5)/Co_(6)椎间盘设为丁香苷组、Co_(6)/Co_(7)椎间盘设为对照组,对照组不进行任何处理,模型组、丁香苷组采用微型穿刺针进行纤维环全层穿刺建立椎间盘退变模型,造模后即刻,模型组、丁香苷组椎间盘分别注射2.5μL的生理盐水、丁香苷溶液(5μmol/L)。注射4周后取材,采用苏木精-伊红和番红O-固绿染色观察大鼠椎间盘退变程度,免疫组化染色分析大鼠椎间盘组织内Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖及基质金属蛋白酶3,13的表达。结果与结论:①苏木精-伊红染色显示,模型组椎间盘高度降低,软骨终板变薄且有裂隙出现,纤维环结构紊乱且出现裂隙,髓核消失;丁香苷组椎间盘高度正常或略低于对照组,软骨终板退变程度较模型组轻,纤维环排列较模型组相对规整且无裂隙,髓核部分皱缩。②番红O-固绿染色显示,模型组椎间盘软骨终板出现缺损且软骨钙化层变薄,出现明显退变;丁香苷组椎间盘软骨终板结构形态有一定程度恢复。③免疫组化染色显示,与对照组比较,模型组椎间盘软骨组织内Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖的表达降低(P<0.0001),基质金属蛋白酶3,13的表达升高(P<0.0001);与模型组比较,丁香苷组椎间盘软骨组织内Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖的表达升高(P<0.001,P<0.0001),基质金属蛋白酶3,13的表达降低(P<0.001,P<0.0001)。④结果表明,丁香苷可通过抑制基质金属蛋白酶3,13的表达、提高Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的表达来改善椎间盘的结构和功能,预防和减缓椎间盘退变过程。

紫丁香苷联合吉西他滨对胰腺癌细胞生长的影响

目的探究紫丁香苷联合吉西他滨对胰腺癌细胞生长的影响,并预测其可能的分子机制。方法(1)应用GDSC数据库,从三种不同类型的胰腺癌细胞中,筛选出对吉西他滨耐药性最强的细胞。(2)MTT方法检测紫丁香苷、吉西他滨以及两者联用对人胰腺癌细胞AsPC-1存活率的影响,并得出紫丁香苷、吉西他滨作用于AsPC-1细胞的半数抑制浓度(IC50)。(3)台盼蓝实验进一步验证联合用药对AsPC-1细胞的影响。(4)通过CTD数据库寻找与紫丁香苷和吉西他滨有关的基因,并绘制韦恩图,得出共同基因。(5)使用Kaplan-Meier plotter数据库对筛选出的共同基因进行生存分析,得到与紫丁香苷和吉西他滨联合用药的作用密切相关的基因。结果(1)三种胰腺癌细胞中耐药性最强的细胞为AsPC-1细胞。(2)吉西他滨、紫丁香苷以及两者联用均可抑制AsPC-1细胞的存活率:紫丁香苷的IC50值为(41.76±0.37)mmol/L,吉西他滨的IC50值为(0.01±0.07)mmol/L。(3)与紫丁香苷和吉西他滨有关的基因包括TNF、MPO、NFKBIA、IFNG、IL-4、IL-13、RELA和IL-6。(4)与联合用药作用有关的基因包括TNF、IL-13和IFNG。结论紫丁香苷与吉西他滨联合应用可能通过TNF、IL-13和IFNG基因抑制胰腺癌细胞的生长。

百色地区野生宽筋藤总生物碱及紫丁香苷的含量分析

目的:分析测定百色地区野生宽筋藤及其不同药用部位的总生物碱、紫丁香苷含量差异和不同季节含水量区别,为产地采收加工宽筋藤提供理论支持。方法:采用紫外-可见分光光度计法测定总生物碱的含量;采用HPLC法测定紫丁香苷含量;采用烘干法测定不同季节宽筋藤的水分含量计算其折干率。结果:宽筋藤不同药用部位总生物碱的含量差异明显,皮部含量明显高于木质部;不同直径的宽筋藤总生物碱含量差异较大,中等藤与细藤差异不明显,在较粗的宽筋藤中总生物碱含量最高;不同药用部位的紫丁香苷含量差异不显著;不同直径的宽筋藤中紫丁香苷的含量差异显著,随着藤茎的直径的增加含量越高;冬季含水量较低。结论:在一定范围内,宽筋藤总生物碱与紫丁香苷含量与生长年限呈正相关;冬季采收效益最高。

紫丁香苷对LPS/D-GalN诱导的急性肝损伤的保护作用研究

旨在探究紫丁香苷(syringin,SY)对脂多糖(LPS)联合D-半乳糖胺盐酸盐(D-GalN)、(LPS/D-GalN)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用及其潜在机制。将40只昆明鼠随机分为4组,分别为正常对照组(NC)、LPS/D-GalN模型(LD)组、SY低剂量(LSY+LD)组、SY高剂量(HSY+LD)组,每组10只。LSY+LD组、HSY+LD组采用腹腔注射方式给予SY(25、50 mg/kg),NC组和LD组分别腹腔注射等量的生理盐水,连续3 d,在第3天预防性给药1 h后,腹腔注射LPS/D-GalN建立急性药物肝损伤模型。造模6 h后,试验小鼠眼静脉取血,处死小鼠;检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性;检测肝匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GSH)、过氧化氢酶(CAT)的水平,观察肝脏氧化应激的水平;制作肝组织切片,采用苏木精伊红(HE)观察肝脏的组织变化;利用免疫组化观察激活的核转录因子p65(NF-κBp65)入核状态;ELISA法检肝匀浆IL-6、IL-1β、TNF-α炎性因子的水平。结果表明:与NC组相比,LD组AST、ALT的水平显著增高(P<0.01),肝血管严重出血,肝脏大面积实质性坏死,胞核碎裂、崩解,肝脏中SOD、GSH、CAT水平显著降低(P<0.05),NF-κBp65核转移率提高,肝脏中IL-6,IL-1β、TNF-α炎性因子水平显著升高(P<0.01);SY组可显著降低小鼠血清中AST、ALT的活性(P<0.05),肝组织病理变化明显减轻,肝脏SOD、CAT的活性与GSH的水平提高(P<0.05);NF-κBp65核转移发生抑制;IL-6,IL-1β、TNF-α水平显著降低(P<0.05)。结果表明SY(25、50 mg/kg)对LPS/D-GalN诱导的小鼠肝脏损伤具有保护作用且具有剂量依赖性,其作用机制与SY可提高抗氧化酶活性,抑制炎性因子的产生有关。

紫丁香苷对低剂量辐射小鼠生殖系统损伤的防护作用初探

目的探索紫丁香苷对低剂量辐射导致小鼠生殖系统损伤的防护作用。方法通过对小鼠进行连续5 d的低剂量照射(0.12 Gy·d^(-1)×5 d累计0.6 Gy)建立低剂量辐射小鼠损伤模型,设立对照组、辐照组、低剂量给药组(紫丁香苷10 mg·kg^(-1))、高剂量给药组(紫丁香苷20 mg·kg^(-1)),照射结束后24 h和48 h分别通过酶联免疫吸附(ELISA)法测定小鼠睾丸内细胞因子如白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α),以及睾酮含量,试剂盒测定睾丸内氧化应激水平如丙二醛(MDA)含量、超氧物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)含量变化。结果照射结束后24及48 h,相比于辐照组,紫丁香苷给药组能够明显调节小鼠睾丸内细胞因子紊乱,改善小鼠睾丸内氧化应激水平,恢复小鼠睾丸内睾酮含量水平。结论紫丁香苷能够改善低剂量辐射导致小鼠睾丸内细胞因子调节紊乱,有效降低小鼠生殖系统损伤,可作为低剂量辐射生殖系统损伤防护药物潜在研究对象。

RP-HPLC法检测甜梦口服液(甜梦合剂)中淫羊藿苷、紫丁香苷和23-乙酰泽泻醇B的含量

目的建立同时检测甜梦口服液(甜梦合剂)中的淫羊藿苷、紫丁香苷和23-乙酰泽泻醇B含量的RP-HPLC法。方法利用Shimadzu CLC ODS C 18(4.6 mm×250 mm,5μm)分离甜梦口服液中3种成分(淫羊藿苷、紫丁香苷和23-乙酰泽泻醇B)。测定波长:淫羊藿苷为271 nm、紫丁香苷为265 nm和23-乙酰泽泻醇B为207 nm;柱温30℃,进样体积10μl。流动相:0.3%磷酸溶液(流动相A)-乙腈(流动相B),洗脱程序:0~4 min(95%A)、4~7 min(95%~78%A)、7~10 min(78%~38%A)、10~16 min(38%~26%A)、16~23 min(26%~19%A)、23~28 min(19%A)、28~28.5 min(19%~95%A)。外标法检测3种成分的含量。结果紫丁香苷、23-乙酰泽泻醇B和淫羊藿苷分别在0.1962~19.62μg/ml,0.7544~75.44μg/ml和0.1966~19.66μg/ml质量浓度范围内存在良好的线性关系,线性系数R 2均大于0.995;平均加标回收率分别为99.47%,98.68%和100.26%;仪器精密度和方法重复性RSD(n=6)均在5.0%以内。结论建立的RP-HPLC法具有线性范围广、检测结果准确等优点,可以用于甜梦口服液(甜梦合剂)供试品的质量控制。

紫丁香苷调控PI3K/Akt/mTOR信号通路诱导乳腺癌细胞凋亡的研究

目的研究紫丁香苷的抗乳腺癌作用及分子机制,为紫丁香苷的临床应用提供理论依据。方法MTT检测紫丁香苷对乳腺癌细胞增殖的抑制作用;台盼蓝、TUNEL和Annexin V-FITC/PI染色检测细胞的凋亡状况,Western bolt检测Caspase-3的活化情况,判断细胞凋亡是否发生;检测凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)的表达,结合JC-1染色探讨紫丁香苷对线粒体凋亡途径的影响;运用PI3K激动剂Recilisib做对比,qRT-PCR和Western bolt检测紫丁香苷调控PI3K/Akt/mTOR通路诱导癌细胞凋亡的作用。结果紫丁香苷对乳腺癌细胞的增殖具有时间和剂量依赖的抑制作用,能诱导癌细胞发生凋亡。进一步研究发现,紫丁香苷处理后,细胞内Caspase-3被激活,Bcl-2表达下降,线粒体膜电位明显丧失,PI3K、Akt和mTOR的mRNA与蛋白质水平表达无明显变化,但蛋白质磷酸化水平明显下降;Recilisib处理后部分抵消了紫丁香苷对乳腺癌细胞凋亡的作用。结论紫丁香苷对乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7具有良好的抑制作用,其通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路的活化来抑制细胞增殖并诱导细胞发生线粒体途径的凋亡。紫丁香苷是具有开发潜力的抗乳腺癌药物。

基于mTOR/p70S6K信号通路探究紫丁香苷对高糖诱导的小鼠足细胞MPC5损伤的影响

目的:探究紫丁香苷对高糖诱导的小鼠足细胞MPC5损伤及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)信号通路的影响。方法:将小鼠足细胞MPC5分为:对照组(5.5mmoL/L葡萄糖)、高糖诱导组(30mmoL/L葡萄糖)、紫丁香苷低浓度组(2.5μmoL/L紫丁香苷+30mmoL/L葡萄糖)、紫丁香苷中浓度组(5μmoL/L紫丁香苷+30mmoL/L葡萄糖)、紫丁香苷高浓度组(10μmoL/L紫丁香苷+30mmoL/L葡萄糖)。各组向RPMI 1640培养基中加入上述浓度的相应试剂或药物,培养72h。酶标仪测定各组MPC5细胞吸光度值,计算细胞活力;流式细胞仪测定各组MPC5细胞凋亡情况;鬼笔环肽染色观察各组MPC5细胞骨架形态;荧光定量PCR和蛋白印迹法分别测定各组MPC5细胞mTOR、p70S6K信使核糖核酸(mRNA)和蛋白表达。结果:对照组MPC5细胞骨架形态正常,细胞长轴呈线性分布,荧光染色明显;与对照组比较,高糖诱导组MPC5细胞骨架断裂,细胞萎缩,荧光染色黯淡,吸光度值、细胞活力显著降低,凋亡率、mTOR、p70S6K mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与高糖诱导组比较,紫丁香苷低、中、高浓度组MPC5细胞骨架结构恢复清晰,荧光强度逐渐变亮,足突趋于明显,吸光度值、细胞活力依次升高,凋亡率、mTOR、p70S6K mRNA和蛋白表达水平依次降低(P<0.05)。结论:紫丁香苷对高糖诱导的MPC5细胞损伤具有保护作用,能明显促进MPC5细胞增殖,抑制其凋亡;其机制可能与紫丁香苷抑制高糖状态下MPC5细胞中mTOR/p70S6K通路的激活有关。

丁香苷的核磁共振研究

从产于黑龙江省的五加科植物刺五加茎叶中分离得到一化合物：丁香苷．利用１ＨＮＭＲ，１３Ｃ ＮＭＲ 和２Ｄ ＮＭＲ 等谱学方法对其１Ｈ

刺五加中紫丁香苷的提取分离及抗肿瘤作用研究

目的研究紫丁香苷的体内外抗肿瘤作用。方法应用MTT法观察紫丁香苷对体外培养的4种人癌细胞的抑制作用,构建S180实体瘤小鼠模型研究紫丁香苷的体内抗肿瘤作用。结果紫丁香苷对体外培养的4种人癌细胞有一定的抑制作用,并且能抑制小鼠S180实体瘤。结论紫丁香苷具有一定的体内外抗肿瘤活性。

刺五加丁香苷和总黄酮含量及其季节动态

本文研究了刺五加(Acanthopanaxsenticosus)丁香苷和总黄酮含量的季节变化。结果表明,丁香苷主要存在于茎干系统,其中在枝中的含量最高,平均含量可达2.94%。从季节动态来看,刺五加地上部分枝和茎中丁香苷的含量呈明显的季节变化,即春秋季含量较高,夏季含量较低;地下部分根和根茎中丁香苷含量的季节变化不明显。刺五加全株均含有总黄酮,刺五加地上部分总黄酮的含量呈明显的季节变化,其叶片总黄酮在5月中下旬林分郁闭之前含量最高,平均含量可达3.8%;茎干中总黄酮春季较高,夏季降低,而到晚秋时含量最高,其中枝中总黄酮平均含量可达3.75%。地下部分总黄酮含量的季节变化不十分明显。本文对丁香苷和总黄酮季节变化的原因进行了分析。

HPLC测定不同产地刺五加中紫丁香苷的含量

目的：为制定刺五加的质量标准提供参考数据。方法：利用Alltech高效液相色谱仪对不同产地刺五加中的紫丁香苷含量进行测定。色谱柱为ODS-C18（4．6mm×250mm，5um）；流动相：乙腈-水（20：80）；检测波长：265nm。结果：临江刺五加四年茎皮中紫丁香苷含量较高，达0．313％；临江刺五加四年根皮中紫丁香苷含量较高，达0．466％。紫丁香苷在0．1～2．0ug与峰面积具有良好的线性关系。结论：本方法简便可靠、快速、重现性好，适用于刺五加中紫丁香苷的含量测定。

黔产大接骨丹药材不同用药部位中紫丁香苷和总黄酮含量的经时变化特征分析

目的:研究黔产大接骨丹药材不同用药部位(根皮、树皮、叶)中紫丁香苷和总黄酮含量的经时变化特征,为该药材的开发和应用提供参考。方法:分别以不同采收期(1-12月)大接骨丹药材的根皮、树皮和叶部位为样品。采用高效液相色谱法测定其中紫丁香苷含量,色谱柱为Agela Promosil C18、流动相为0.5%磷酸溶液-乙腈(梯度洗脱)、流速为1.0 mL/min、检测波长为210 nm、柱温为35℃、进样量为5μL。采用紫外-可见分光光度法测定其中总黄酮含量,检测波长为510 nm。结果:紫丁香苷、总黄酮的质量浓度线性范围分别为0.0959~1.1508 mg/mL(r=0.9996)、0.0722~1.0830 mg/mL(r=0.9999);精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于3%(n=6);平均加样回收率分别为101.74%(RSD=2.36%,n=6)、99.63%(RSD=2.19%,n=6)。不同采收期内,大接骨丹药材根皮、树皮、叶中紫丁香苷含量分别在8、5、9月最高,总黄酮含量分别在2、12、9月最高。紫丁香苷含量在3个药用部位的大小依次为树皮>根皮>叶,其中树皮部位中紫丁香苷含量普遍较高;总黄酮含量在3个药用部位的大小依次为根皮>树皮>叶,且3个用药部位中总黄酮含量均普遍较低。根皮部位中总黄酮含量在当年2月最高,且当月根皮部位中紫丁香苷含量仅次于当年8月;树皮部位中紫丁香苷含量在5月最高,且当月树皮部位中总黄酮含量仅次于当年10、12月;叶部位中总黄酮含量与紫丁香苷含量均在当年9月最高。结论:建议大接骨丹药材根皮部位在2月采收为宜,树皮部位在5月采收为宜,叶部位在9月采收为宜。

HPLC法测定不同产地党参中党参炔苷和丁香苷的含量

建立高效液相色谱法同时测定不同产地党参中党参炔苷和丁香苷含量的方法。采用Thermo scientific C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,以乙腈和水为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长266 nm,柱温为25℃。实验结果表明,党参炔苷与丁香苷色谱峰分离良好。二者分别在10-200μg/mL与0.5-10μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系。平均加样回收率分别为100.65%与98.78%。党参炔苷和丁香苷在10个不同产地的党参中含量分别介于0.1963-1.4532 mg/g与0.0051-0.0951 mg/g。该方法操作简便、快速,结果稳定可靠,适用于党参2种主要成分的定量分析。

HPLC法测定黑龙江省不同地区刺五加紫丁香苷的含量

刺五加(Acanthopanax senticosus(Rupr.EtMaxim.)Harms)是五加科植物,是全球畅销的植物药之一,含有大量生物活性物质,其中所含有的刺五加苷类具有抗疲劳、抗衰老、抑制肿瘤生长等作用,紫丁香苷则是其中的主要活性成分之一。用HPLC法测定黑龙江省不同地区刺五加中紫丁香苷的含量,确定了刺五加紫丁香苷用超声波提取1.5 h、60%甲醇作提取溶剂、提取温度为55℃的最佳提取条件组合。HPLC条件则是以检测波长为266 nm、流动相为甲醇/水(V/V)=28/72、流速为1 mL.m in-1、柱温为25℃。对黑龙江省不同地区类似生境条件下,同龄野生刺五加中紫丁香苷的含量进行比较,在所调查的7个地区中,以五营丰林国家自然保护区的生长在红松原始林下的刺五加紫丁香苷含量最高,五大连池雪洞风景区和牡丹江镜泊湖地区的刺五加紫丁香苷的含量最低。该研究结果对刺五加的采集和种植生境的选择具有积极的指导意义。

新资源短梗五加及其同属植物根皮中紫丁香苷的HPLC测定研究

目的:测定新资源短梗五加及糙叶藤五加、红毛五加、刺五加、白毛五加、韩五加、细柱五加、白簕五加等8种五加属植物根皮中紫丁香苷的含量。方法:采用RP-HPLC测定紫丁香苷的含量。色谱柱为ODSC18柱,流动相为20%甲醇溶液,流速为1.0ml/min,检测波长为265nm,柱温35℃。采用正交试验法考察乙醇浓度、提取时间、溶剂用量对提取效果的影响。结果:紫丁香苷在0.0148～0.074mg/ml(r=0.9999)范围内,进样量与峰面积具有良好的线性关系,回归方程:Y=15234560X-7881.767,R2=0.9999,平均回收率为98.24%。8种五加属植物中,糙叶藤五加紫丁香苷含量最高,短梗五加次之。最佳提取工艺为用水做提取剂,料液比1:15、煮沸提取3.5h。结论:本法简便,结果可靠,可用于新资源短梗五加及其同属植物的质量控制。

不同采收期野生和仿生刺五加根与茎中紫丁香苷和总黄酮含量测定

目的:为了对刺五加的质量进行综合评价,制定刺五加的质量标准提供参考数据,测定临江苇沙河地区不同采收期野生与仿生刺五加茎中紫丁香苷和总黄酮含量以控制其质量。方法:利用Alltech高效液相色谱仪对不同采收期刺五加根与茎中的紫丁香苷含量进行测定。色谱柱为ODS-C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-水(20∶80);检测波长:265 nm;应用比色法,以芦丁为对照品,在420nm下测定吸光度,计算刺五加根与茎中总黄酮的含量。结果:紫丁香苷在0.1~2.0μg与峰面积具有良好的线性关系,以10月25日采收的仿生刺五加根中紫丁香苷含量最高为0.204%;在0.059 mg^0.206 5 mg范围内,芦丁mg数与吸光度A值线性关系良好,平均回收率为100.46%,R2=0.999,RSD=0.77%;茎中总黄酮含量以4月6日采收的野生品中含量最高为5.30%。根中总黄酮含量以10月25日采收的仿生刺五加根中最高为16.12%。结论:本方法简便、快速、可靠、易行、重现性好,适合刺五加紫丁香苷和总黄酮的含量测定。

HLPC比较刺五加茎与短梗五加茎中紫丁香苷及异嗪皮啶的含量

目的:为了开发利用刺五加茎与短梗五加茎资源提供参考依据。方法:利用Alltech高效液相色谱仪对刺五加与短梗五加茎中紫丁香苷及异嗪皮啶的含量进行测定。色谱柱为ODS-C18测定紫丁香苷的流动相为乙腈-水(20∶80);体积流量:1 mL/min;柱温:室温;检测波长:265 nm。测定异嗪皮啶的流动相为乙腈-甲醇-水-冰醋酸(17∶3∶80∶1);体积流量:0.9 mL/min;柱温:30℃;检测波长:344 nm。结果:紫丁香苷在0.1～2.0μg与峰面积具有良好的线性关系。异嗪皮啶在0.005～0.1μg与峰面积具有良好的线性关系;刺五加茎与短梗五加茎中紫丁香苷及异嗪皮啶的含量差异较大。结论:本方法简便可靠、快速、重现性好,适用于刺五加茎与短梗五加茎中紫丁香苷及异嗪皮啶含量测定,为进一步研究两者的成分提供了参考数据。