三七总甙对成骨细胞增殖、分化及OPG表达影响的研究

目的 观察不同剂量的三七总甙对体外培养大鼠成骨细胞增殖、分化及OPG表达的影响,探索体外作用的机制和最佳剂量。方法 第2代培养的成骨细胞分别加入终浓度为Oμg/ml、10μg/ml、50μg/ml、100μg/ml的三七总甙,观察细胞生长、钙结节形成情况,碱性磷酸酶(ALP)染色、分泌量检测,骨钙素(OCN)检测,MTT法观察成骨细胞增殖,免疫组化SP法结合阳性细胞计数法检测成骨细胞OPG表达。结果 成骨细胞在7d可铺满瓶壁,30d可形成钙结节,三七总甙可促进成骨细胞的增殖ALP、OCN的分泌,以50μg/ml时作用明显。三七总甙可促进成骨细胞OPG的表达,在50μg/ml时作用明显。结论 三七总甙可促进大鼠成骨细胞的增殖、分化,促进成骨细胞OPG的表达,以50μg/ml时作用明显。

三七总甙对人肾成纤维细胞的影响

目的 :研究三七总甙 (PNS)对人肾成纤维细胞 (KFB)增殖、分泌I型胶原、表达整合素 β1的影响。方法 :体外培养KFB ,分别采用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)法、ELISA法、流式细胞仪检测PNS对KFB增殖、分泌Ⅰ型胶原及表达整合素β1的影响。结果 :PNS在最佳浓度范围和作用时间内可明显抑制KFB细胞增殖及分泌Ⅰ型胶原 (与空白对照组比较 ,P <0 0 5 ) ,同时显著降低了KFB上整合素β1的表达 (与空白对照组比较 ,P <0 0 5 )。结论 :PNS可成为防治肾间质纤维化的有效药物。

三七总甙对NB4细胞促凝活性及诱导分化的影响

目的 :研究三七总甙对NB4细胞促凝活性和组织因子表达及诱导分化作用的影响。方法 :用三七总甙处理NB4细胞 ,测定复钙时间观察NB4细胞的促凝活性 (procoagulantactivity ,PCA) ,RT PCR检测TF mRNA的表达 ;采用四唑蓝 (MTT)法检测三七总甙对NB4细胞增殖抑制作用 ;以NBT还原实验、细胞形态学观察及流式细胞术分析研究三七总甙对NB4细胞诱导分化的影响。结果 :(1)不同浓度三七总甙均可显著延长NB4细胞的复钙时间 ,降低NB4细胞的PCA水平 ,呈时间浓度依赖性 ,同时下调组织因子TF mRNA的表达 ;(2 )三七总甙可部分抑制NB4细胞的增殖 ;(3)三七总甙可提高NB4细胞NBT还原能力(P <0 0 5 ) ,细胞形态方面显示单核 /巨噬细胞分化趋势。结论 :三七总甙可降低NB4细胞的促凝活性及TF mRNA的表达 ,诱导NB4细胞部分分化 ,有望作为新的抗凝药物。

三七总甙对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖及胶原合成的作用

目的 观察三七总甙对体外培养的人增生性瘢痕成纤维细胞增殖及胶原合成的作用 ,以寻找治疗人增生性瘢痕的有效药物。方法 体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞 ,分别应用MTT比色法和3H 脯氨酸掺入法检测三七总甙作用后细胞增殖及胶原合成的变化。结果 和对照组相比 ,三七总甙能够显著抑制成纤维细胞增殖及胶原合成 (P <0 0 1)。结论 三七总甙具有体外抗纤维化作用 。

三七总甙对肝星状细胞增殖及胶原生成的影响

目的:探讨三七总甙抗肝纤维化作用机制。方法:按常规方法分离正常大鼠肝星状细胞,用三七总甙药物温育液作用于传一代培养的肝星状细胞,~3H-TdR掺入观察细胞增殖,ELISA法测定上清及细胞层Ⅰ型胶原含量,改良Lowry's法测定细胞层总蛋白以校正细胞数。结果:三七总甙不同浓度组均能抑制肝星状细胞增殖及细胞内外Ⅰ型胶原生成,尤以细胞外的抑制更为明显,与对照组及2.5×10^(-7)M秋水仙碱组比较差异显著。结论:三七总甙抗肝纤维化作用可能是通过抑制肝星状细胞增殖及细胞内外Ⅰ型胶原生成来实现的。

三七总甙对骨髓间质干细胞体外成骨潜能的影响

目的:种子细胞的来源是骨组织工程中的研究热点,探讨含三七总甙的条件培养基对骨髓间质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)体外成骨潜能的影响,为优化骨组织工程的种子细胞提供实验依据。方法:采用含三七总甙的条件培养基(A组)与常规条件培养基(B组)两种方法将兔骨髓间质干细胞进行体外培养后,对各组细胞进行形态学观察、组织学检测以及采用ALP与BGP检测试剂盒进行定量分析,以判断两种培养基对骨髓间质干细胞体外成骨能力的影响。结果:A组B组碱性磷酸酶(ALP)分泌量(U/L)分别为9.31±0.59,6.13±0.57;骨钙素(BGP)分泌量(μg/L)分别为27.13±1.51,16.62±1.69。结论:体外条件培养的MSCs具有一定的成骨能力,使用含有三七总甙的条件培养基可以大大提高其成骨能力。

三七总甙对糖尿病皮肤溃疡大鼠内皮素-1水平的影响

目的观察三七总甙(PNS)对糖尿病皮肤溃疡(DSU)大鼠血管内皮功能的影响。方法成年雄性Wist-ar大鼠50只随机分为对照组、DSU模型组和PNS高、中、低剂量组,每组10只。采用放射免疫法检测大鼠血清内皮素(ET-1)水平,采用反转录-聚合酶链反应技术和Western blotting技术检测大鼠溃疡处组织中ET-1的表达。结果DSU模型组和PNS高、中、低剂量组大鼠血清ET-1水平显著高于对照组(P<0.05),PNS高、中、低剂量组大鼠血清ET-1水平及溃疡组织中ET-1 mRNA和蛋白表达显著低于DSU模型组(P<0.05),PNS高剂量组大鼠血清ET-1水平及溃疡组织中ET-1 mRNA和蛋白表达明显低于PNS中、低剂量组(P<0.05),PNS中剂量组大鼠血清ET-1水平及溃疡组织中ET-1 mRNA和蛋白表达明显低于PNS低剂量组(P<0.05)。结论 PNS可降低DSU大鼠ET-1的表达。

三七总甙对糖尿病皮肤溃疡大鼠肿瘤坏死因子-α水平的影响

目的探讨三七总甙对糖尿病皮肤溃疡(DSU)大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法 DSU模型制作成功的Wistar大鼠60只随机分为对照组(生理盐水组)和三七总甙高剂量组(200 mg.kg-1.d-1)、中剂量组(100 mg.kg-1.d-1)、低剂量组(50 mg.kg-1.d-1),灌胃30 d,右心房取血,放射免疫法检测血清TNF-α水平,反转录聚合酶链式反应、蛋白质印迹法检测溃疡组织中TNF-αmRNA及蛋白表达。结果与对照组比较,三七总甙高、中、低剂量组血清TNF-α水平随三七总甙剂量的升高而降低(P<0.05),低剂量组高于中剂量组(P<0.05),中剂量组高于高剂量组(P<0.05)。与对照组比较,三七总甙高、中、低剂量组溃疡组织TNF-αmNRA及蛋白表达均下调,低剂量组表达高于中、高剂量组(P<0.05),中剂量组高于高剂量组(P<0.05),差异均有统计学意义。结论三七总甙可降低DSU大鼠TNF-α的表达,在一定剂量范围内可有效控制DSU炎症进展。

三七总甙对尿毒血清诱导的HK-2细胞增殖及总胶原分泌的影响

目的 :探讨三七总甙 (PNS)对尿毒血清诱导的人肾小管上皮细胞株 (HK - 2 )增殖及总胶原分泌的影响。方法 :采用MTT比色法检测PNS对尿毒血清诱导的HK - 2细胞增殖的影响 ;采用流式细胞术检测PNS对尿毒血清作用下的HK - 2细胞周期、细胞增殖指数 (PI)的影响 ;采用消化法检测细胞培养上清中羟脯氨酸的含量 ,换算成总胶原分泌量。结果 :MTT法示 :10 %尿毒血清组A490 值高于正常对照组 ,PNS 2 0 0～ 80 0mg/L可抑制细胞增殖 ,有明显的剂量依赖性。流式细胞术示 :10 %尿毒血清组G1期细胞低于正常对照组 ,PI高于正常对照组 ,PNS 4 0 0～80 0mg/L使G1期细胞显著增高 ,PI显著降低 ;10 %尿毒血清组羟脯氨酸的含量及总胶原分泌量均高于正常对照组 ,PNS 4 0 0～ 80 0mg/L可降低细胞培养上清中羟脯氨酸的含量及总胶原分泌量 ,且随着PNS浓度的升高而降低。 结论 :PNS可通过抑制尿毒血清诱导的肾小管上皮细胞增殖及总胶原的分泌 ,从而延缓肾小管 -间质纤维化进程 ,改善肾功能。

三七总甙不同时间给药对脑出血患者的疗效观察

1996年12月-2002年11月,我们分别于脑出血后当日及7日用三七总甙(PNS)治疗115例脑出血患者,观察不同时间给药的疗效有无差异,现报告如下.

三七总甙对增生性瘢痕的作用

背景:增生性瘢痕的传统治疗手段如手术切除、类固醇激素、抗代谢药、免疫抑制剂和放射疗法等,均易复发或有严重的不良作用而限制了其临床应用。近年来应用活血化瘀类中药提取成分治疗增生性瘢痕取得了较为理想的进展,而且不良反应小。目的:通过组织染色及相关基因检测的方法,观察三七总甙对兔耳增生性瘢痕的作用以及对转化生长因子β1mRNA表达的影响。方法:创建兔耳增生性瘢痕模型,约术后4周,按随机数字表法将24只大耳白兔分为3组,三七总甙组、曲安奈德组及空白对照组每组8只。以曲安奈德为阳性对照,分组分次瘢痕基底局部给药,用药5次后取瘢痕组织,以苦味酸酸性复红染色法、苏木精-伊红染色法对胶原纤维、成纤维细胞进行观察,应用反转录PCR方法检测细胞内转化生长因子β1基因的表达情况。结果与结论:苏木精-伊红染色结果示三七总甙组兔耳瘢痕中成纤维细胞数量低于空白对照组,与曲安奈德组无明显差异。苦味酸酸性复红染色结果示三七总甙组兔耳瘢痕中胶原纤维较空白对照组排列整齐,与曲安奈德组无明显差异。基因检测结果显示三七总甙组、曲安奈德组转化生长因子β1mRNA的表达显著低于空白对照组(P<0.05)。提示三七总甙及曲安奈德均能通过抑制转化生长因子β1mRNA的表达,降低转化生长因子β1在瘢痕组织中的含量,从而抑制成纤维细胞的过度增殖及以胶原为主的细胞外基质过度沉积,进而降低胶原纤维合成,来达到有效抑制瘢痕组织过度增生的目的。

三七总甙对人瘢痕疙瘩成纤维细胞的作用

目的:观察三七总甙对体外培养的人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖及胶原合成的作用,以寻找治疗人瘢痕疙瘩的有效药物。方法:体外培养人瘢痕疙瘩成纤维细胞,分别应用噻唑蓝(MTT)比色法和H3-脯氨酸掺入法检测三七总甙作用后细胞增殖及胶原合成的变化。结果:与空白对照组相比,三七总甙含量在0.5,1.0和1.5g/L时均能够显著抑制成纤维细胞增殖及胶原合成(P<0.01),但在1.5g/L时对细胞具有毒性作用。结论:三七总甙具有体外抗纤维化作用,可能成为治疗瘢痕疙瘩的有效药物。

三七总甙对NB4细胞核转录因子-κB及组织因子表达的影响

目的 通过核转录因子NFκB及其抑制因子IκB的表达探讨三七总甙 (PanaxnotoginsengsaponinsPNS)对NB4细胞组织因子的调控机制。方法 用三七总甙处理NB4细胞 ,分别于处理后 2 4h、4 8h、72h、96h、12 0h收获细胞 ,半定量逆转录PCR检测TF mRNA的表达 ;Western蛋白印迹检测细胞内NFκB的亚单位 p6 5及IκBα的蛋白 ,以及核蛋白p6 5的表达。 结果 三七总甙处理NB4细胞 2 4h ,TF mRNA表达开始下降 ,12 0h完全抑制。Westernblot显示三七总甙抑制细胞内IκBα及核蛋白 p6 5的表达。结论 三七总甙抑制组织因子的表达 ,可能是通过抑制NFκB的活化起作用。

三七总甙片与洛汀新治疗早期糖尿病肾病的对比研究

目的 :探讨三七总甙片和洛汀新治疗早期糖尿病肾病 (DN )的疗效和机理。方法 :48例早期 DN患者随机分为三七总甙片组 (2 4例 ,三七总甙片 3片 /次 ,每日 3次 )和洛汀新组 (2 4例 ,洛汀新 10 mg,每日 1次 ) ,采用对比研究方法 ,观察治疗早期 DN的疗效和相关指标变化。结果 :两组患者的尿蛋白 (AL B) ,β2 -微球蛋白 (β2 -MG)均显著下降 (P<0 .0 1)。且洛汀新组高于三七总甙片组 (P<0 .0 5 )。两组患者的肌酐清除率 (CCr均明显下降 (P<0 .0 1)。结论 :三七总甙片和洛汀新治疗早期 DN均具有降低尿白蛋白和改善肾功能功效。

三七总甙注射液治疗冠心病的疗效

目的观察三七总甙(PNS)注射液治疗冠心病(CHD)的疗效。方法将137例CHD患者随机分成PNS组和对照组。在常规治疗基础上,PNS组加用静脉滴注PNS注射液,治疗前后记录患者的心绞痛发作频率、心电图ST-T变化以及观察毒副作用,心脏超声测量心功能的变化。结果PNS组患者心绞痛缓解率87%,心功能缓解总有效率为76%,心电图ST-T改善总有效率为39%,显著优于对照组的73%、35%和18%(P<0.05),PNS组超声测定的左室射血分数、左室收缩末容积、每搏量比治疗前好转,效果优于对照组,未发现明显的毒副作用。结论PNS能明显缓解心绞痛、改善心电图和心功能,对CHD患者有明显的疗效。

三七总甙对经皮冠状动脉腔内成形术后心肌肌钙蛋白I的影响

目的:用血清心肌肌钙蛋白I(cardiactroponinI,cTnI)作为心肌损伤标记物评价三七总甙片对经皮冠状动脉腔内成形术(percutaneoustranslu-minalcoronaryangioplasty,PTCA)后心肌损伤的保护作用。方法:将240例术前cTnI正常的行PTCA的冠心病患者随机分为对照组(n=120),治疗组(n=120),对治疗组患者术前行三七总甙治疗9.34d。分别测定两组术前,术后6,12,24,48,72h的血清cTnI水平及进行随访,分析相关因素,比较两组间cTnI升高及出院后发生的心脏事件。结果:对照组中120例患者中23例术后cTnI升高,治疗组120例患者中12例术后cTnI升高,两组cTnI升高差异有显著性意义(χ2=2.71,P<0.05);随访发现:两组间心脏事件比较,差异无显著性意义(P>0.05)。结论:三七总甙能减少PTCA术后cTnI的升高,对PTCA术造成的心肌损伤有保护作用。

三七总甙对大鼠肺纤维化过程中血浆MIP-1α、MCP-1含量的影响

目的 初步探讨三七总甙 (PNS)对肺纤维化大鼠血浆中MIP 1α、MCP 1的抑制作用及其机制。方法 应用酶联免疫吸附试验 (ELISA)测定各实验组大鼠不同时相点血浆中MIP 1α、MCP 1含量的动态变化。结果 肺纤维化模型组各时相点血浆中MIP 1α、MCP 1水平均高于三七总甙组 ,并随病情进展而逐渐升高 ,第 2 8天达最高水平。PNS组MIP 1α、MCP 1受到明显抑制 ,接近对照组。结论 PNS能有效抑制血浆中MIP 1α、MCP 1水平 ,减轻肺泡炎症程度 。

三七总甙治疗缺血性心肌病心力衰竭的疗效观察

目的 :观察三七总甙 (PNS)治疗缺血性心肌病 (ICM)心力衰竭的疗效。方法 :将 16 0例 ICM患者随机分成PNS组和对照组 ,每组 80例 ;PNS组静脉滴注 PNS(40 0 mg,每日 1次 ,10 d) ,对照组给予静脉滴注复方丹参注射液 ,10 d后观察心功能变化。结果 :PNS组患者心功能纠正总有效率为 89% ,明显优于对照组的 5 6 % ,超声测定的射血分数、左室收缩末容积、每搏量比治疗前好转 ,效果优于对照组。结论 :PNS对

三七总甙抗肝纤维化活性的实验研究

<正> 三七,又名田七,性温、味微苦,既能活血化瘀,又擅止血定痛,是临床防治肝病常用的一种中药材。三七总甙(Panax notoginseng saponins,简称PNS,下同)是三七中的一类主要化学成分,研究表明,有改善微循环、保护肝细胞、促进肝细胞再生等功能。肝纤维化是肝细胞损伤后所引起的大量细胞外基质在肝内增生沉积的一种病理改变。慢性肝病有此特征性病理变化。为了探讨PNS是否具有抗肝纤维化活性,本文观察了PNS及三七对成纤维细胞增殖及Ⅰ型胶原合成与分泌的影响。1 材料1.1 NIH/~3T3细胞(小鼠胚胎成纤维细胞)株