半胱胺对鸡小肠粘膜中分泌型IgA细胞和上皮内淋巴细胞的影响

实验组肉鸡在灌喂半胱胺 2 0mg·kg-1(CY Ⅰ )和 80mg·kg-1(CY Ⅱ )后 ,应用鸡新城疫弱毒苗 (NDV) (Ⅳ系苗 )以口腔注入法进行免疫 ,检查小肠粘膜中分泌型免疫球蛋白A (sIgA)阳性细胞和上皮内淋巴细胞 (iIEL)数量的变化。结果表明 ,CY Ⅰ在NDV首免后第 4周 ,十二指肠中sIgA阳性细胞数量极显著增加 (P <0 0 1) ;CY Ⅰ和CY Ⅱ组在NDV首免后第 4周iIEL数量显著增加 (P <0 0 5 ) ;首免后第 5周CY Ⅰ组十二指肠中iIEL数量显著增加 (P <0 0 5 ) ;而盲肠扁桃体中这两种细胞数量的变化不大。提示生长抑素 (SS)可抑制小肠粘膜中sIgA阳性细胞和iIEL的分化和增殖 ,半胱胺通过耗竭鸡小肠中SS的含量可提高鸡的粘膜免疫力。

小鼠肠上皮内淋巴细胞在粘膜免疫应答中的形态学研究

采用免疫组织化学和电镜方法，观察了ＢＡＬＢ／ｃ小鼠灌服伤寒杆菌后回肠及集合淋巴小结圆顶区肠上皮内淋巴细胞（ｉｎｔｒａｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ，ＩＥＬ）的形态和分布特征，以探讨ＩＥＬ在抗原诱导下的粘膜免疫应答中的作用。经免疫组织化学方法证实灌服伤寒杆菌后回肠及集合淋巴小结圆顶区肠上皮内含Ｂ和Ｔ两种淋巴细胞，以Ｂ淋巴细胞为主；电镜下可见上皮内淋巴细胞主要由小和中等淋巴细胞组成，且后者有两种形态。一种细胞器较少，与上皮微绒毛之间有紧密接触。另一种细胞器丰富，内质网呈扩张状态。同时观察到ＩＥＬ有的位于上皮细胞内，有的位于相邻的上皮细胞间隙内。本研究提示，小肠上皮不仅为粘膜免疫效应部位，而且也是免疫诱导部位。提示伤寒杆菌能诱导淋巴细胞向小肠上皮和圆顶区上皮迁移，且圆顶区上皮比小肠上皮更易接受抗原刺激。

大豆生物活性肽对肉鸡肠道黏膜上皮内淋巴细胞和IgA^+生成细胞的影响

500只1日龄爱维因肉鸡随机分为五组:分别饲喂添加了不同浓度的大豆生物活性肽(三组)、抗生素和不含大豆生物活性肽的日粮,在28、49日龄取材,采用HE染色方法和免疫组织化学方法检测肉鸡十二指肠、空肠、盲肠扁桃体的上皮内淋巴细胞(IntraepithelialLymphocyte,IEL)和IgA+生成细胞数量,观察大豆生物活性肽对肉鸡肠道黏膜免疫细胞的影响。结果表明:日粮中添加80g/kg～120g/kg大豆生物活性肽能够调解肉鸡的肠道黏膜免疫。

新生犊牛小肠黏膜结构的早期发育及上皮内淋巴细胞和杯状细胞的数量变化

应用组织学和组织化学方法研究了1日龄和20日龄新生犊牛小肠黏膜结构的早期发育及部分黏膜免疫相关细胞的分布与数量变化规律。结果显示，从1日龄到20日龄，小肠绒毛变短，尤其十二指肠的绒毛长度约缩短了61．58％（P〈0．05），绒毛长度与隐窝深度比值（V／C比值）减小了59．04％～91．32％（P〈0．05）；而黏膜和肌层厚度分别增加了8．66％～41．28％和36．22％～299．10％。小肠各段上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量随年龄增长而逐渐增多（P〈0．05），20日龄比1日龄分别增加了78．80％～163．05％和28．23％～101．46％；但比较同一年龄的小肠不同肠段，从十二指肠至回肠，上皮内淋巴细胞的数量逐渐减少，而杯状细胞的数量则呈增多趋势。

雌激素对大鼠肠黏膜结构及上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量、分布的影响

为了研究雌激素对肠黏膜屏障结构的影响,将18只健康Wistar雌性大鼠进行同期发情处理,于发情间情期随机分为3组:对照组,进行假手术;OVX组,双侧卵巢摘除;OVX+E2组,双侧卵巢摘除,苯甲酸雌二醇100μg/kg.d连续用药7 d,然后观察小肠黏膜上皮细胞、上皮内淋巴细胞(IEL)、杯状细胞形态结构和数量的变化。结果表明:和对照组相比,OVX组大鼠的小肠黏膜结构有明显的损伤,绒毛萎缩,绒毛高度和隐窝深度的比值(V/C)明显降低,IEL数量和杯状细胞的数量减少(P<0.05);OVX+E2组的各项指标明显高于OVX组,但是部分指标低于对照组。结论:卵巢摘除对大鼠小肠黏膜屏障结构有严重影响,补充适量雌激素可以在一定程度上改善这一影响。

小鼠小肠上皮内淋巴细胞的提取与抗原表型测定和功能的初步研究

目的 :建立一种提取小肠上皮内淋巴细胞的方法 ,并对其功能进行初步研究。方法 :采用机械分离法和Percoll非连续密度梯度离心法提取小鼠小肠上皮内淋巴细胞 ,经间接荧光染色后用流式细胞仪检测表型。应用乳酸脱氢酶法检测其自然杀伤功能。结果 :应用该法可获得小鼠小肠上皮内淋巴细胞 2× 10 6 ～ 4× 10 6 只鼠 ,活力测定 >95 %。抗原表型中73 8%以上表达CD8分子 ,TCRγδ为 43 8%。而且自然杀伤活性明显高于小鼠脾淋巴细胞。结论 :表明采用该法提取小鼠小肠上皮内淋巴细胞有效。

枸杞多糖对小鼠肠道上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量、分布及对IL-2水平影响

为了研究枸杞多糖(LBP)对肠黏膜屏障结构的影响,给10只C57BL/J健康小鼠连续灌服枸杞多糖7d后,显微镜观察小肠上皮内淋巴细胞(IEL)、杯状细胞(GC)数量和分布变化及测定肠黏膜白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)水平。结果表明,应用枸杞多糖小鼠的肠黏膜IEL数量和GC的数量明显增加,且有向肠内层移动趋势,同时肠黏膜IL-2水平升高。证实枸杞多糖在一定程度上可促进小鼠小肠黏膜屏障结构趋于完整并提高其免疫功能。

大豆异黄酮对大鼠肠道上皮内淋巴细胞、杯状细胞及瘦素长型受体的影响

大豆异黄酮具有广泛的生理作用,其对免疫系统的影响近年来成为一个焦点。为了研究大豆异黄酮对肠黏膜屏障结构的重要组成部分(上皮内淋巴细胞、杯状细胞)及免疫调节因子瘦素受体(长型)的影响,本实验采用高脂饲料喂饲大鼠,建立肥胖模型;然后将筛选出的肥胖大鼠分别灌胃剂量为对照(I:0mg/kg)、低(Ⅱ:50mg/kg)、中(Ⅲ:150mg/kg)、高剂量(Ⅳ:450mg/kg)的大豆异黄酮,并设置基础对照组(Ⅴ:溶媒为0.5%羧甲基纤维素钠),连续4周用HE、PAS染色观察小肠上皮内淋巴细胞、杯状细胞数量和分布变化;用免疫组织化学SABC法测定瘦素受体(长型)水平。结果表明:大鼠上皮内淋巴细胞以小型淋巴细胞为主,主要分布于上皮的基底膜附近;大鼠杯状细胞分布在肠黏膜上皮层;瘦素受体(长型)阳性细胞分布于黏膜层。应用大豆异黄酮高剂量组较对照组大鼠的肠黏膜上皮内淋巴细胞数量和杯状细胞的数量明显增加,且有向肠内层移动趋势,同时肠黏膜瘦素受体(长型)水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。表明大豆异黄酮在一定程度上可促进大鼠小肠黏膜屏障结构趋于完整并提高其免疫功能。

不同剂量乳猪壮对仔猪小肠黏膜上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量变化的试验

利用组织化学法和图像分析法研究庆大霉素和不同剂量的"乳猪壮"在防治仔猪大肠杆菌病时对仔猪小肠的上皮内淋巴细胞、杯状细胞的数量变化。试验选用60头刚出生的0日龄的杜×大×长三元杂交健康仔猪,随机分6个处理组,每个处理组设10只(雌雄均有),分别饲喂生理盐水、庆大霉素和4种不同剂量的"乳猪壮",试验期为7d。结果显示,各试验组仔猪小肠黏膜上皮内淋巴细胞数量由十二指肠向空肠、回肠逐渐减少;杯状细胞的数量由十二指肠向空肠、回肠逐渐增加。4mL乳猪壮组对仔猪小肠黏膜上皮内淋巴细胞、杯状细胞的数量明显高于其他组且差异极显著(P<0.01)。结果显示,4mL乳猪壮组对改善仔猪小肠黏膜的防御功能,提高肠道的防御能力有一定作用,可以防治仔猪大肠杆菌病。

大蒜溶液对小鼠小肠黏膜结构、上皮内淋巴细胞和杯状细胞的影响

用组织学和组织化学方法研究不同浓度的大蒜素溶液对小鼠小肠黏膜结构及部分黏膜免疫相关细胞分布与数量的影响。试验选用8周龄BALB/C雄鼠50只,分为5组,每组10只,每组分别饲喂5种不同浓度的大蒜素溶液,每天80m l,实验期为10天。结果显示,1%大蒜素溶液对小鼠小肠肠绒毛长度、V/C比值、黏膜厚度,黏膜免疫相关细胞数量影响最大,对改善和增强小鼠小肠的消化吸收功能,提高肠道的防御能力效果最佳。

日粮锌、硒添加量对肉鸡肠黏膜结构及上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量的影响

为了探讨微量元素锌和硒互作对肉鸡肠道黏膜屏障结构的影响,将24只1d龄AA肉鸡随机分3组,分别饲喂添加有高锌高晒(锌1000 mg/kg、硒5 g/kg)、低锌低晒(锌34mg/kg、晒0.08m/kg)和常锌常硒(锌50 mg/kg、硒0.15mg/kg)的日粮45 d后,观察小肠黏膜上皮细胞、上皮内淋巴细胞、杯状细胞的形态结构变化,结果表明:高锌高硒或低锌低硒组肉鸡的肠黏膜结构有明显的损伤,表现为肠黏膜上皮细胞萎缩,上皮内淋巴细胞数量和杯状细胞数量减少;尤其是高锌高硒组的损伤最为严重。而常锌常硒组肉鸡肠黏膜结构和上皮内淋巴细胞数和杯状细胞数正常。结论:日粮中按锌50 mg/kg、硒0.15 mg/kg的比例添加,对于维持肠道黏膜的正常屏障结构是合适的。 过高或过低的锌和硒对肠黏膜有毒性作用,破坏其屏障功能;而且高锌和高硒可相互促进以增强其毒性作用。

中草药抗热应激蛋鸡小肠上皮内淋巴细胞的组织学观察

本试验旨在研究蛋鸡热应激情况下中草药对其小肠上皮内淋巴细胞的影响。选取120只88日龄蛋鸡,随机平均分为6个组。任取其中3个组为中草药试验组,分别加入高、中、低浓度的中草药;另3个组为对照组,一组加入维生素C,一组置于高温环境中,一组于室温条件下饲养。分别在试验的第1天、第4天、第8天和第10天随机选取5只鸡致死,取小肠部分做石蜡切片,H.E染色后在显微镜下观察小肠上皮内淋巴细胞的变化。试验表明,添加中草药的试验组小肠上皮内淋巴细胞数显著多于对照组,且浓度高的效果好。由此显示了中草药可有效对抗热应激,提高蛋鸡生理机能。

大承气颗粒药物血清对小鼠肠上皮内淋巴细胞产生/分泌IL-2的作用

目的:探讨大承气颗粒药物血清对小鼠肠上皮内淋巴细胞产生/分泌白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)的作用。方法:以不同浓度的大承气颗粒剂灌胃大鼠后不同时间点于无菌条件下采取腹腔静脉血,制备药物血清;分离培养肠上皮内淋巴细胞(intestinal intraepithelial lymphocytes,IELs),以药物血清作用于IELs,设培养液对照、IEL对照、正常血清对照,采用放射免疫分析法测定IL-2。结果:不同浓度大承气颗粒的药物血清在多数时间点的作用明显强于培养液对照、IEL对照及正常大鼠血清对照。正常大鼠血清对照组与IEL对照组的IL-2水平很接近。同时间点的药物血清比较,在30min和12h时,4%大承气颗粒的药物血清作用强;在3h时,40%大承气颗粒的作用最强。4%、20%大承气颗粒的药物血清使小鼠分泌IL-2的作用在1.5h达峰值,在24h出现第二个峰值;40%大承气颗粒药物血清使IEL分泌IL-2的峰值在3h。结论:不同浓度的大承气颗粒制备的药物血清具有使IEL产生/分泌IL-2的作用;该作用涉及到药物本身和药物在体内的活性代谢物和/或其诱导的内源性活性物质的作用。

大承气颗粒药物血清对小鼠肠上皮内淋巴细胞增殖的作用

[目的]探讨大承气颗粒药物血清对小鼠肠上皮内淋巴细胞(IELs)的增殖作用及其作用途径。[方法]分离、鉴定、培养Balb/c小鼠IELs;制备不同浓度的大承气颗粒单次灌胃大鼠的药物血清和临床等效剂量的大承气颗粒多次灌胃大鼠的药物血清,并与大黄素、大黄酚等比较,观测其对IELs增殖及IELs[Ca2+]i的作用。[结果]IELs是CD3阳性细胞为(82.76±2.61),CD8阳性细胞为(72.48±3.57),CD4阳性细胞为(9.91±2.52)的淋巴细胞。单次灌胃的药物血清和多次灌胃的药物血清均能显著刺激IELs增殖。单次灌胃的药物血清对IELs的作用与大承气颗粒的浓度、采血时间、药物血清的作用时间等有关。稀释的药物血清比其原液及正常血清原液作用强。等摩尔浓度的大黄酚、大黄素、厚朴酚的作用以大黄酚较强。大鼠正常血清、药物血清和植物血凝素均能增加IELs[Ca2+]i。[结论]大承气颗粒药物血清能显著刺激IELs增殖,其作用途径之一是增加IELs[Ca2+]i,对维护肠免疫屏障有重要意义。

3Gy全身辐射对小鼠小肠粘膜上皮内淋巴细胞数量和功能的影响

采用昆明种小鼠3Gy全身照射为模型，分离培养照后8h～15d共6个时相点全小肠粘膜上皮内淋巴细胞，并对其数量、细胞增殖活力、细胞毒力、TNF－α和TGF－β分泌水平进行检测。结果表明小肠上皮内淋巴细胞数量显著下降，增殖活力和细胞毒力明显受抑，表现为照后8h下降，72h达低值。上皮内淋巴细胞分泌TNF－α和TGF－β显著增多，表现为照后8h增高，72h达峰值。小肠上皮内淋巴细胞数量减少和功能降低成为全身放射损伤时造成肠粘膜免疫屏障功能受损的一个重要原因。

双歧杆菌DNA对小鼠肠上皮内淋巴细胞产生γ干扰素和白介素2作用的研究

目的:研究双歧杆菌DNA对小鼠肠上皮内淋巴细胞(iIEL)γ干扰素(IFN-γ)和白介素2(IL-2)产生水平的影响,探讨其对小鼠iIEL免疫激活作用。方法:提取双歧杆菌DNA,肌肉注射免疫小鼠,提取小鼠iIEL,以IFNγ和IL-2作为检测指标,测定其变化。结果:DNA免疫小鼠产生IFN-γ和IL-2的水平与对照组相比明显提高(P<0.01)。结论:双歧杆菌DNA明显提高小鼠iIEL产生IFN-γ和IL-2的能力。

放射损伤小肠上皮内淋巴细胞的变化及其对肠上皮细胞影响的实验研究

放射损伤小肠上皮内淋巴细胞的变化及其对肠上皮细胞影响的实验研究Ｅｆｅｃｔｓｏｆｉｏｎｉｚｉｎｇｒａｄｉａｔｉｏｎｏｎｍｕｒｉｎｅｓｍａｌｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｉｎｔｒａｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓａｎｄｉｔｓｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｎｉｎ...

放射损伤小鼠小肠上皮内淋巴细胞增殖活力变化的实验研究

目的：探讨辐射损伤对肠粘膜免疫的影响。方法：小鼠分别受３Ｇｙ、８Ｇｙ、１２Ｇｙ全身照射后８ｈ至１５ｄ６个时相，分离全小肠上皮细胞内淋巴细胞（Ｉｎｔｒａｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ，ＩＥＬ），用佛波酯、ＣｏｎＡ联合ｒｈＩＬ－２刺激，以３Ｈ－ＴｄＲ参入的计数值反映增殖活力。结果：①３种剂量组ＩＥＬ增殖活力下降明显，都表现出以伤后８ｈ下降，７２ｈ达低值，然后逐渐回升的过程；１２Ｇｙ组的抑制出现更早（８ｈ），程度更重；两种刺激剂的变化态势相同。②正常小鼠分离的ＩＥＬ经体外照射１Ｇｙ～１０Ｇｙ亦导致增殖活力下降；３Ｇｙ和８Ｇｙ同一剂量的整体和离体照射相比较，对增殖活力抑制程度无明显的差异。结论：３种剂量的照射都造成肠粘膜免疫功能的下降。

肠上皮内淋巴细胞促L929细胞增殖活性的研究

目的:了解应激性溃疡模型中肠上皮内淋巴细胞(iIEL)培养上清促L929细胞增殖活性的变化。方法:采用水浸限制刺激法制备小鼠应激性溃疡模型。分别提取iIEL和脾T淋巴细胞,在含ConA的培养液中培养。采用MTT法检测iIEL和脾T淋巴细胞培养上清的促L929细胞增殖活性。结果:正常鼠iIEL培养上清促L929细胞增殖活性显著高于脾T细胞培养上清(P<0.05)。应激性溃疡发生后,iIEL培养上清促L929细胞增殖活性显著下降,于第4天降至最低(P<0.05),1周后恢复正常。结论:iIEL培养上清中可能含有高水平的促进L929细胞增殖的因子,这种因子的活性在应激性溃疡中可能发生变化。