普通叶酸与活性叶酸补充对于MTHFR 677TT型不明原因反复流产患者红细胞叶酸水平的影响

目的·研究普通叶酸与活性叶酸补充对亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)677TT型不明原因反复流产(unexplained recurrent pregnancy loss,URPL)患者红细胞叶酸水平的影响。方法·选取2021年1—12月于北京大学第三医院生殖医学中心就诊的MTHFR 677TT型URPL患者45例。按照叶酸补充方式将其分为3组,包括A组16例(研究开始前尚未接受任何形式的叶酸补充,研究开始后进行活性叶酸补充),B组15例(研究开始前进行过普通叶酸的补充,研究开始后进行活性叶酸补充),以及C组14例(研究开始前进行过普通叶酸的补充,研究开始后进行普通叶酸与活性叶酸联合补充)。分别于入组时(第一次)、入组补充后(第二次)对3组患者的红细胞5-甲基四氢叶酸(5-methyltetrahydrofolate,5-MTHF)浓度进行检测,并开展比较。结果·在3组患者中,任意2组的第一次红细胞5-MTHF浓度间差异均无统计学意义。与第一次红细胞5-MTHF浓度相比,3组患者的第二次红细胞5-MTHF浓度均有提高(均P=0.000),且B组患者的红细胞5-MTHF浓度的增幅高于A组(t=2.373,P=0.049),但与C组间差异无统计学意义。结论·与补充普通叶酸相比,补充活性叶酸可以更好地在短时间内提高MTHFR 677TT型URPL患者的红细胞叶酸水平。

低剂量静脉注射人免疫球蛋白治疗不明原因反复流产的效果及对可溶性人白细胞抗原G的影响

目的评估低剂量静脉注射人免疫球蛋白(IVIG)治疗不明原因反复流产(URSA)的效果及对外周血可溶性人白细胞抗原G(sHLA-G)的影响。方法将60例URSA患者分为试验组和对照组两组,每组30例。试验组在妊娠前静脉给予IVIG0.2g/kg;确定妊娠后给予同等剂量IVIG,每4周1次,至妊娠20周。对照组给予传统中药或孕激素治疗。观察两组的活产率和有效率(超过以往妊娠4周及以上为有效)。于治疗前和妊娠6～8周随机留取试验组和对照组静脉血各15份,同期健康育龄期未孕及早孕6～8周妇女的静脉血标本各20份。采用酶联免疫吸附法检测血清sHLA-G、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)和白细胞介素-10(IL-10)水平。结果试验组应用IVIG后的妊娠率为93.3%(28/30)。试验组的活产率和有效率分别为85.7%(24/28)和92.9%(26/28),明显高于对照组的56.7%(17/30)(P=0.021)和63.3%(19/30)(P=0.011)。试验组应用IVIG后有1例(3.3%)患者发生轻微恶心,减慢IVIG输入速度后反应消失。对照组和试验组患者孕前血清sHLA-G水平分别为(61.37±35.57)和(62.70±37.24)U/ml,明显低于健康育龄期妇女的(88.49±25.37)U/ml(P<0.05)。妊娠后试验组患者的血清sHLA-G和IL-10水平分别为(34.19±14.21)U/ml和(11.71±2.75)pg/ml,明显高于对照组的(23.71±12.83)U/ml(P=0.043)和(8.71±3.01)pg/ml(P=0.008)。结论孕前后应用低剂量IVIG治疗URSA安全有效,其可能是通过上调患者体内sHLA-G和IL-10水平来改善胚胎发育。

不明原因反复流产者T细胞中PD-1的表达及其临床意义

目的探讨不明原因反复流产(URSA)者T细胞中程序性细胞死亡分子-1(PD-1)的表达及其临床意义。方法选择2018年5月至2019年5月收治的URSA患者20例(URSA组),选择同期行人工流产的正常健康早孕妇女20例作为对照组。检测2组外周血和蜕膜组织中T细胞中PD-1的表达,及外周血白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素10(IL^-10)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果与对照组比较,URSA组外周血及蜕膜组织CD3^+PD-1^+T细胞的表达水平、IL-4、IL^-10水平更低,IFN-γ、TNF-α水平更高,(P<0.05);经Pearson相关性检验,URSA与外周血PD-1、蜕膜PD-1、IL-4、IL^-10呈负相关(r=-0.869^-0.619,P<0.05),与IFN-γ、TNF-α呈正相关(r=0.864、r=0.435,P<0.05)。结论PD-1通过调节多种细胞因子而影响免疫平衡,参与URSA的发病,可为治疗URSA潜在靶点提供理论依据。

低分子肝素联合主动免疫治疗不明原因反复流产的效果观察

目的:探讨联合应用低分子肝素与主动免疫治疗不明原因所致反复流产的效果。方法:将70例不明原因反复流产的患者随机分成观察组(35例)与对照组(35例),对照组应用主动免疫治疗,观察组则给予低分子肝素联合主动免疫治疗,观察两组患者治疗前后血β-HCG与孕酮水平变化、治疗效果及不良反应发生情况。结果:两组患者在治疗后血β-HCG、孕酮水平均显著提升,但是观察组提升幅度要大于对照组(P <0. 05);观察组治疗有效率为88. 57%,高于对照组62. 86%(P<0.05);两组患者不良反应总发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:应用低分子肝素联合主动免疫治疗不明原因反复流产患者疗效较好,可改善患者的血流情况,用药不良反应低。

淋巴细胞免疫治疗不明原因反复流产的妊娠结局分析

目的探讨分析淋巴细胞免疫治疗不明原因反复流产的妊娠效果。方法选取2016年6月到2017年6月接受治疗的100例患者随机分组,主要分为对照组(实施常规治疗方法,n=50),观察组(实施淋巴细胞免疫治疗,n=50),比较两组患者妊娠结局的状况。结果观察组的妊娠成功率是85.5%,对照组的妊娠成功率是63.3%,观察组明显高于对照组,两组数据对比可知,差异有统计学意义(P<0.05)。结论淋巴细胞免疫治疗在不明原因反复流产中具有积极的作用,可以提高妊娠成功率,值得推广应用。

HLA-G非编码区单核苷酸多态性与不明原因反复流产的相关性

目的研究人类白细胞抗原G(HLA-G)非编码区5′URR基因单核苷酸多态性和3′UTR 14 bp基因插入/缺失单核苷酸多态性与不明原因反复性流产相关性。方法病例组为不明原因反复性流产史患者(流产次数≥2)112例和有正常妊娠史无流产史的妇女(对照组)112例,留取EDTA-K2抗凝全血提取DNA。采用PCR技术扩增HLA-G 3′UTR 14 bp和HLA-G5′URR基因,3′UTR 14 bp扩增产物通过凝胶电泳分型,直接计数法比较2组间基因型频率、等位基因频率分布。HLA-G 5′URR基因PCR产物送公司测序,在线SHEsis软件比较2组间基因型频率、等位基因频率分布。结果 HLA-G 3′UTR 14 bp插入/缺失多态性基因型频率和等位基因频率在2组间差异无统计学意义(P>0.05),HLA-G 5′URR等位基因-725G在2组间差异有统计学意义(P<0.05)。HLA-G 5′URR-725GG基因型频率在2组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HLA-G 5′URR-725G等位基因和HLA-G 5′URR-725GG基因型可能是不明原因反复流产易感性基因,而HLA-G 5′URR-725C等位基因可能是不明原因反复流产保护性基因。

不明原因反复流产患者外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞的变化

目的探讨原因不明反复流产(URSA)患者外周血中T淋巴细胞亚群和NK细胞的变化。方法选取2014年3月~2016年3月辽宁省计划生育科研院附属医院门诊确诊为不明原因流产患者50例作为观察组,并选取同期就诊的30例健康早孕妇女作为对照组。采用流式细胞仪检测两组妇女的外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞水平。结果观察组外周血中CD4^+和CD4^+/CD8^+比率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而两组CD3^+和CD8^+比率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组外周血中NK细胞比率也明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 URSA患者外周血中CD4^+、CD4^+/CD8^+和NK细胞比率的升高,打破了正常的妊娠免疫微环境而引发流产。

丙种球蛋白被动免疫治疗原因不明性反复自然流产研究

目的:探讨静脉点滴丙种球蛋白治疗原因不明性反复自然流产(URSA)的疗效及治疗前后机体封闭抗体、T细胞亚群、胞内Th1/Th2细胞因子及外周血NK细胞含量的变化,以期初步阐明其治疗机理。方法:URSA患者治疗前均检测封闭抗体,对于封闭抗体阴性的患者给予每2周静脉点滴10g国产丙种球蛋白,连续4次治疗后再次检测封闭抗体。怀孕后改为每3周同剂量加强免疫一次,至怀孕26～30周。应用FACSCalibur流式细胞仪分析25例患者治疗前后外周血T淋巴细胞亚群、胞内Th1/Th2细胞因子及NK细胞的变化,并选择20例正常妊娠并选择人工流产者作为对照组。结果:25例URSA经4次被动免疫治疗后有19例封闭抗体转阳性。21例能正常怀孕并成功分娩,4例流产,成功率84%。治疗后CD3+T细胞百分比略升高但无显著性差异;CD8+T细胞百分比有明显升高;而CD4+T细胞百分比明显下降;CD4+/CD8+比率也明显下降。胞内Th2型细胞因子IL-10含量显著性升高;胞内Th1型细胞因子IFN-γ和外周血NK细胞含量明显下降。结论:静脉点滴丙种球蛋白治疗URSA具有较好疗效。治疗后机体免疫保护作用明显增强,可能是丙种球蛋白促进妊娠发展的原因之一。

不明原因反复性流产患者血清中sPD-1和sPD-L1与相关细胞因子的水平变化

目的探讨可溶性程序性死亡分子1(sPD-1)及其配体可溶性程序性死亡分子L1(sPD-L1)、相关细胞因子TGF-β、IL-10在不明原因反复性流产中的作用和相关性。方法收集不明原因反复性流产组、正常妊娠组和健康对照组血清,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测sPD-1、sPD-L1的表达水平;流式液相多重蛋白定量技术(CBA)检测相关细胞因子TGF-β、IL-10水平变化。分析sPD-1/sPD-L1与TGF-β、IL-10相关性及其不明原因反复性流产的作用。结果在不明原因反复性流产组的血清中,sPD-1的表达水平明显高于正常妊娠组(P<0.01),sPD-L1在不明原因反复性流产组中的表达略高于正常妊娠组(P<0.01),且sPD-1/sPD-L1的比值在不明原因反复性流产组中明显升高。TGF-β、IL-10水平在不明原因反复性流产组中降低(P<0.01),而且sPD-1/sPD-L1的变化与TGF-β、IL-10呈负相关。结论不明原因反复性流产组中sPD-1的水平明显增多,Treg细胞相关细胞因子减少,可能不利于妊娠,易引发流产。

原因不明反复自然流产患者外周血TLR2、TLR4表达及CD4^+CD25^+Treg细胞的变化

目的探讨原因不明反复自然流产(URSA)患者外周血TLR2、TLR4的表达及CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞变化的关系。方法用实时荧光定量PCR及流式细胞术检测35例URSA患者、24例妊娠孕妇外周血单个核细胞(PBMC)中TLR2、TLR4mRNA及其蛋白质的表达;流式细胞术检测CD4+CD25+Treg细胞的比例,并分析表达TLR2、TLR4蛋白与CD4+CD25+Treg细胞的相关性。结果 URSA组PBMC中TLR2、TLR4 mRNA分别为0.52±0.04、3.26±1.37;表达TLR2、TLR4蛋白的PBMC比例分别为(32.36±4.18)%、(41.29±3.67)%;与妊娠对照组相比,URSA组外周血TLR4 mRNA及表达TLR4蛋白的PBMC比例差异显著(t分别为19.84和21.85,P均<0.05);URSA组CD4+CD25+Treg细胞的比例为(2.75±0.62)%,显著低于妊娠对照组的(5.17±0.65)%,差异有统计学意义(t=48.40,P<0.01);URSA患者表达TLR4蛋白的PBMC与CD4+CD25+Treg细胞的比例降低呈显著相关(r=0.724,P<0.05)。结论 URSA患者外周血中低表达的CD4+CD25+Treg细胞、高表达的TLR4可能参与了URSA的发生。

不明原因反复自然流产患者免疫治疗前后外周血CD4^+CD25^+CD127^(low)T细胞百分率的分析

目的探讨不明原因反复自然流产(URSA)患者外周血调节性T细胞(Treg)中CD4^+CD25^+CD127^(low)T细胞的表达情况及经配偶淋巴细胞免疫治疗后的妊娠结局改变,判断其作为流产指标的可能性。方法用流式细胞术检测73例URSA患者治疗前、76例正常早孕者(正常早孕组)及69名正常未孕体检者(正常未孕组)外周血中CD4^+CD25^+CD127^(low)T细胞百分率,分析经配偶淋巴细胞免疫方法治疗2~3个疗程后的51例URSA患者外周血CD4^+CD25^+CD127^(low)T细胞百分率的变化情况。结果 URSA组治疗前外周血CD4^+CD25^+CD127^(low)T细胞百分率(2.73%±0.56%)明显低于正常未孕组(2.93%±0.60%)和正常早孕组(4.36%±1.07%)(P<0.05)。51例URSA患者治疗后外周血CD4^+CD25^+CD127^(low)T细胞百分率(3.72%±1.15%)明显高于治疗前(P<0.05),其中42例患者治疗后妊娠结局较好,有9例失败。结论 URSA患者外周血CD4^+CD25^+CD127^(low)T细胞表达明显降低,其有可能作为判断URSA的指标之一。体外配偶淋巴细胞免疫治疗与妊娠结局改善有关。

免疫治疗不明原因反复自然流产患者群体反应抗体、TGF-β和nTreg表达变化的研究

目的:探讨不明原因反复自然流产(URSA)患者经免疫治疗后其血清群体反应抗体(PRA)、转化生长因子β(TGF-β)和外周血单个核细胞(PBMC)中转录调节因子3(FOXP3)阳性的天然调节性T细胞(n Treg,CD4+CD25+FOXP3+)表达的变化及临床意义。方法:应用酶联免疫及流式分析方法,分别检测正常妊娠组及URSA患者免疫治疗后未孕组和妊娠组血清PRA、TGF-β含量及外周血单个核细胞n Treg表达率。结果:RSA患者经免疫治疗后未孕组血清PRA、TGF-β中位数较免疫治疗后妊娠组中位数降低(27.5%、107.7 pg/L vs 68.75%、189.9 pg/L,P<0.01);未孕组n Treg表达率中位数也较妊娠组低(5.05%vs 8.05%,P<0.01)。结论:URSA患者经免疫治疗后其血清PRA的产生及TGF-β含量增加和n Treg的诱导性升高是RSA患者经免疫治疗后成功妊娠的重要因素,PRA、TGF-β及n Treg的检测对RSA患者的免疫治疗方案的确定和疗效判断有重要的临床意义。

不明原因反复自然流产患者的抗生殖免疫抗体分析

目的通过对不明原因的反复自然流产患者进行抗心磷脂抗体和抗子宫内膜抗体的检测,分析不明原因反复自然流产与抗生殖免疫抗体的关系。方法 312例不明原因反复自然流产患者为流产组,100例健康孕妇为对照组,采用酶联免疫方法检测这两组的抗心磷脂抗体(ACAb)和抗子宫内膜抗体(EMAb)。结果流产组ACAb阳性率13.1%,EMAb阳性率11.5%;对照组ACAb阳性率4.0%,EMAb阳性率2.0%。流产组抗生殖免疫抗体阳性率均高于对照组(P<0.05)。结论不明原因反复自然流产患者体内存在生殖抗体是形成反复流产的原因之一。

补肾调冲法治疗早期不明原因反复自然流产90例临床观察

目的观察补肾调冲法中药治疗早期不明原因反复自然流产(unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)的临床疗效。方法将符合纳入标准的200例患者采取随机、平行对照的实验方法,分为2组;其中对照组(常规保胎组,n=100),实验组(常规保胎+中药组,n=100)。治疗中对照组有8例脱落,实验组有10例脱落。结果治疗后,对照组、实验组总有效率为70.65%、88.89%。2组总有效率对比差异有统计学意义(P<0.05)。且实验组与对照组相比,能提高URSA患者体内人绒毛促性腺激素(human chorionic gonadotropin,HCG)水平。结论补肾调冲法中药联合西药治疗对比单纯西药治疗能显著改善URSA患者先兆流产症状,对早期不明原因反复自然流产有较好的疗效。

不明原因反复自然流产与绒毛组织血管内皮生长因子、微血管密度的相关性

目的探讨不明原因反复自然流产(URSA)发生的可能机制,为临床治疗提供依据。方法随机选取URSA患者28例作为病例组,同期正常妊娠要求人工流产者20例作为对照组,运用免疫组织化学SP法检测两组绒毛组织中血管内皮生长因子(VEGF)表达、微血管密度(MVD)值。结果URSA组绒毛发育不良,VEGF表达强度、MVD值显著低于对照组;两组绒毛组织VEGF表达与MVD值均呈正相关。结论绒毛组织VEGF表达、MVD值降低及绒毛发育不良与URSA的发生存在相关性。

不明原因反复自然流产的免疫病因及治疗进展

复发性自然流产是一种常见的妊娠并发症,病因极其复杂,其中不明原因者约占40%～80%。近几年研究表明,不明原因反复自然流产主要与免疫因素有关。该文对近几年来不明原因反复自然流产的免疫病因及其治疗进展作以综述。

淋巴细胞免疫治疗不明原因反复流产115例妊娠结局分析

目的:探讨不明原因反复流产(URSA)患者采用淋巴细胞免疫治疗后妊娠结局。方法:将在该院生殖医学中心就诊临床确诊为URSA且自身抗体及封闭抗体阴性的115例患者采用丈夫或无关第三者外周血淋巴细胞皮内注射法进行孕前、孕后免疫治疗,观察并分析其妊娠结局。结果:采用淋巴细胞免疫治疗后的妊娠成功率高于常规的保胎治疗;封闭抗体转阳性者妊娠成功率也高于仍阴性者,存在统计学差异(P<0.01);年龄>35岁者妊娠成功率明显低于年龄<35岁者(P<0.01);孕前治疗3次以上和3次以下者妊娠成功率比较无统计学差异(P>0.05);但孕后治疗3次以上者较3次以下者有更高的妊娠成功率(P<0.01)。结论:对URSA患者采用淋巴细胞免疫治疗法治疗较常规黄体酮+地屈孕酮保胎治疗获得更高妊娠成功率;对于年龄>35岁者建议采取免疫治疗结合常规保胎治疗;免疫治疗3次后尽快指导妊娠,孕后至少治疗3次以上效果更理想。

主动免疫联合hCG治疗原因不明反复自发性流产的临床疗效评估

目的:评价主动免疫联合hCG治疗原因不明反复自发性流产的临床疗效,寻求最佳治疗方案。方法:将385例原发性原因不明反复自发性流产患者分为3组,A组166例,接受主动免疫联合hCG治疗;B组143例,单纯接受主动免疫治疗;C组76例,单纯接受hCG治疗;74例继发性原因不明反复自发性流产患者做为D组,接受主动免疫联合hCG治疗。结果:治疗后妊娠成功率A组为91.25%,B组为72.52%,C组为29.85%,D组为84.62%,A组、B组、C组两两比较差异有显著性(P<0.01);A组与D组比较差异无显著性(P>0.05)。结论:主动免疫联合hCG治疗原因不明反复自发性流产疗效最好,值得在临床中推广应用。