茯苓多糖对2型糖尿病大鼠丝裂原激活的蛋白激酶通路及胰岛素抵抗的影响

目的探究茯苓多糖(PAC)对2型糖尿病(T2DM)大鼠丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)通路及胰岛素抵抗(IR)的影响。方法2019年3—10月,采用高脂高糖喂养联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立T2DM大鼠模型,采用随机数字表法分为模型(T2DM)组、二甲双胍(MET)组(0.65 g·kg^(−1)·d^(−1))和PAC低(PAC-L,0.05 g·kg^(−1)·d^(−1))、中(PAC-M,0.10 g·kg^(−1)·d^(−1))、高剂量(PAC-H,0.20 g·kg^(−1)·d^(−1))组,每组12只。另取12只正常非T2DM大鼠为正常组(NC组),干预8周后测定空腹血糖、空腹血清胰岛素(FINS)、三酰甘油及肝组织均浆丙二醛、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,采用蛋白质印迹法检测肝脏组织磷酸化p38丝裂原激活的蛋白激酶(p-p38MAPK)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)蛋白表达水平。结果与NC组比较,T2DM组大鼠血清空腹血糖、FINS、三酰甘油含量、胰岛素抵抗指数(HOMA-IRI)(62.56±5.11比5.81±1.05)、肝脏组织丙二醛含量、p-p38MAPK(1.35±0.08比0.16±0.03)和p-JNK(1.29±0.08比0.17±0.02)蛋白水平均显著升高(P<0.05),胰岛素敏感指数(ISI)[(0.86±0.05)×10^(−3)比(7.69±0.14)×10^(−3)]、肝脏组织GSH-Px、SOD活性均显著降低(P<0.05);与T2DM组比较,PAC-L组、PAC-M组、PAC-H组大鼠血清空腹血糖、FINS、三酰甘油含量、HOMA-IRI(49.47±4.56、31.14±3.03、26.59±2.16比62.56±5.11)、肝脏组织丙二醛含量、p-p38MAPK(1.04±0.06、0.89±0.03、0.39±0.02比1.35±0.08)和p-JNK(0.85±0.02、0.72±0.05、0.31±0.01比1.29±0.08)蛋白水平均显著降低(P<0.05),ISI[(1.51±0.11)×10^(−3)、(2.14±0.12)×10^(−3)、(3.73±0.15)×10^(−3)比(0.86±0.05)×10^(−3)]、肝脏组织GSH-Px、SOD活性均显著升高(P<0.05),呈剂量依赖性(P<0.05)。PAC-H组均优于MET组(P<0.05)。结论PAC可改善T2DM大鼠胰岛素抵抗,该作用可能与其抑制MAPK通路减轻氧化应激有关。

丝裂原激活的蛋白激酶在脑缺血预适应中的作用:ERK、JNK和p38作用的比较

目的初步探讨丝裂原激活的蛋白激酶(MAPKs)3条主要信号通路在大鼠脑缺血预适应中(IPC)的作用。方法将大鼠随机分为正常对照(control)、假手术(SH)、缺血预适应/缺血耐受(IT)3组,每组6只。应用SDS-PAGE、Westernblot等实验方法,借助GelDoc和VersaDoc凝胶成像系统,半定量检测大鼠大脑躯体感觉皮层ERK、JNK、p38磷酸化水平和蛋白表达量的变化。结果IT组大鼠躯体感觉皮层内ERK1和JNK46KD的磷酸化水平增高(P<0.05)。结论大鼠躯体感觉皮层内MAPKs信号通路中ERK1和JNK46KD激活可能参与了脑缺血预适应的形成,但也不能排除p38在其中的作用。

EGF诱导人RPE细胞表达整合素α_5过程中丝裂原激活的蛋白激酶的作用

目的探讨表皮生长因子(EGF)诱导人视网膜色素上皮(RPE)细胞表达整合素α5过程中丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)的作用。方法将人RPE细胞分为对照组、EGF组和PD98059组,RT-PCR及流式细胞术观察各组整合素α5mRNA和蛋白的表达;Western blot法检测各组人RPE细胞中MAPK的磷酸化水平。结果对照组的整合素α5mRNA/β-actin mRNA像素值的比值为0.93±0.06,PD98059组为1.06±0.07,EGF组为1.97±0.09,EGF组与其他2组相比,差异有统计学意义(P<0.01);流式细胞术检测显示,24 h后整合素α5的荧光强度分别为1.94±0.22、4.56±0.25、2.39±0.14,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测显示,30 min后EGF组细胞外信号调节激酶(ERK)1/2的磷酸化激活水平最高,PD98059组抑制ERK1/2的磷酸化激活,对照组ERK1/2的磷酸化激活作用很弱。结论ERK1/2的磷酸化激活参与EGF诱导人RPE表达整合素α5的过程。EGF激活ERK1/2通路刺激人RPE细胞整合素α5mRNA的表达。

丝裂原激活的蛋白激酶信号转导通路与肝纤维化

多种信号分子通过丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号转导通路(包括ERK、JNK、P38和BMK1),对肝星状细胞(HSC)的活化、增殖、凋亡、细胞周期产生影响,由此在多个环节干预肝纤维化的形成和逆转过程。

多途径丝裂原激活的蛋白激酶介导一氧化氮引起的肝癌细胞凋亡

目的 研究非离子型的diazeniumdiolate类一氧化氮供体引起肝癌细胞凋亡的分子机制。方法 利用免疫印迹、免疫沉淀、凝胶阻滞实验研究一氧化氮供体处理Hep3B肝癌细胞后,丝裂原激活的蛋白激酶、AP-1的激活以及和Hep3B肝癌细胞凋亡的关系。结果 一氧化氮可引起细胞外信号调节蛋白激酶、c-jun N末端激酶和p38激酶的激活,特别是细胞外信号调节的蛋白激酶的持续激活,其中细胞外信号调节的蛋白激酶和c-jun N末端激酶的特异的阻断剂U0126和JNK抑制剂Ⅱ可阻断AP-1的激活和Hep3B细胞的凋亡,而p38激酶的阻断剂SB203580不能阻断AP-1的激活和Hep3B肝癌细胞的凋亡。结论 一氧化氮通过激活细胞外信号调节蛋白激酶、c-jun N末端激酶,进而激活AP-1而引起Hep3B肝癌细胞的凋亡。

丹参酚酸B对大鼠肝星状细胞中丝裂原激活的蛋白激酶通路的抑制作用

目的 探讨丹参酚酸B(SA-B)对活化的大鼠肝星状细胞(HSC)中丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号传导通路的抑制作用。 方法 分离大鼠HSC,于无包被塑料培养皿中原代培养7 d,继以10-6mol/L浓度的SA-B孵育,再加10 ng/ml的转化生长因子-β1(TGF-β1)刺激。以蛋白印迹法观察SA-B对TGF-β1刺激的HSC内细胞外调节的蛋白激酶(ERK)表达及其磷酸化和对HSC表面TGF-β1Ⅰ型受体(TβRⅠ)、Ⅱ型受体(TβpRⅡ)表达的影响,观察由此改变致HSC合成Ⅰ型胶原蛋白的变化。ELISA法测定HSC培养液中Ⅰ型胶原的含量;酶谱法观察基质金属蛋白酶2、9、13(MMP-2、MMP-9、MMP-13)的活性。 结果10-6mol/L浓度的SA-B可抑制原代正常培养9 d的HSC及TGF-β1刺激的HSC中ERK1/2的磷酸化,对TβRⅠ和TβRⅡ的表达无影响。SA-B可抑制原代正常培养的HSC合成Ⅰ型胶原,抑制TGF-β1刺激的HSC Ⅰ型胶原的合成及分泌。SA-B对HSC培养液中MMP-2和MMP-13的活性无明显作用,对MMP-9活性则有明显的促进作用。 结论 SA-B抑制了正常原代培养已活化的HSC和经TGF-β1刺激的HSC内ERK信号传导通路,这一抑制作用与HSC的TGF-β1受体表达无关。SA-B通过抑制TGF-β1的信号传导,减少了HSC对Ⅰ型胶原的合成与分泌,此种细胞功能的改变可能与基质金属蛋白酶的降解作用无关。

右美托咪定对内毒素诱导的急性肺损伤大鼠p38丝裂原激活的蛋白激酶的活化及炎症反应的影响

目的探讨右美托咪定（dexmedetomidine，Dex）对内毒素（1ipopolysaccharides，LPS）诱导的急性肺损伤（acutelunginjury，Au）大鼠肺部P38丝裂原活化蛋白激酶（p38mitogen-activatedproteinkinase，p38MAPK）和炎症反应的影响。方法健康成年雄性SD大鼠采用完全随机分组法分为5组，每组10只：生理盐水组（C组），LPS组，0．2μg·kg^-1·h^-1Dex处理组（Dex0．2组），1μg·kg^-1·h^-1Dex处理组（Dexl组），5μg·kg^-1·h^-1Dex处理组（Dex5组）。各Dex处理组在给予LPS（腹腔注射LPS8ms／kg）诱导ALI之前输注Dex负荷剂量1μg·kg^-1·h^-1 10min，然后持续按各处理组相应剂量输注Dex至各时间点。C组与LPS组输注等体积的生理盐水（1ml·kg^-1·h^-1）至各时间点。收集肺泡灌洗液（bronchoalveolarlavagefluid，BALF），动脉血和肺组织标本，进行动脉血气分析，测量肺组织湿，干重比，观察肺病理学改变，检测支气管BALF中肿瘤坏死因子-a（turnoutnecrosisfactor-a，TNF啾）和白介素（interleukin，IL）．10的浓度，利用Westernblot检测各组大鼠肺组织中p38MAPK和磷酸化水平。结果在注射了LPS后，各组大鼠的动脉氧分压均明显降低（61．3±1．2）VS（131．7±4．7）（P〈0．05）；C组大鼠肺部未见明显的病理改变，LPS组、Dex0．2组和Dexl组大鼠肺部有明显的病理改变，而Dex5组大鼠肺部病理改变较LPS组明显减轻；肺组织湿／干重比LPS组明显的高于C组（5．4±0．3）VS（3．6±0.3）（P〈0．05），Dex5组明显低于LPS组（4．4±0．4）VS（5．4±0．3）（P〈0．05）；磷酸化的p38MAPK、支气管BALF中TNF-α和IL-10水平，LPS组、DexO．2组和Dexl组明显高于c组（P〈0．05），Dex5组明显低于LPS组（P〈0．05）。结论Dex能够减轻LPS造成的大鼠ALI，其机制可能部分与阻断P38MAPK的活化及肺部炎症有关。

活性氧簇/p38丝裂原活化蛋白激酶级联反应对大鼠肾结石形成的影响及机制

目的探讨活性氧簇(ROS)/p38 MAPK级联反应对大鼠肾结石(KS)形成的影响及机制。方法50只SD大鼠随机分为对照组(正常喂养)、N-乙酰半胱氨酸(NAC)组(腹腔注射200 mg/kg NAC)、KS组(构建草酸钙KS模型)、KS+NAC组(构建草酸钙KS模型后腹腔注射200 mg/kg NAC)、KS+NAC+衣霉素(TM)组(构建草酸钙KS模型后腹腔注射200 mg/kg NAC与1 mg/kg TM),每组10只。给药结束4周后,测量大鼠24 h尿量与尿草酸(Ox),全自动生化仪检测血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)水平,HE染色和Von Kossa染色观察肾组织病理学变化及晶体沉积情况,TUNEL染色检测肾组织细胞凋亡,试剂盒测定肾组织超氧化物歧化酶(SOD)活性与丙二醛(MDA)含量,二氢乙锭(DHE)荧光探针检测肾组织ROS水平,免疫组织化学染色检测肾组织微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)与葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的表达,Western blotting测定肾组织p-p38 MAPK/p38 MAPK与LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、GRP78和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)水平。结果与KS组比较,KS+NAC组Ox、血清BUN、Cr、UA水平降低(P<0.05),肾小管扩张程度减轻,草酸钙结晶减少,TUNEL阳性细胞率减少(P<0.05),SOD活性升高,MDA含量减少(P<0.05),ROS水平降低(P<0.05),LC3B与GRP78阳性染色水平降低(P<0.05),p-p38 MAPK/p38 MAPK、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、GRP78及CHOP蛋白相对表达量均下调(P<0.05);与KS+NAC组比较,KS+NAC+TM组Ox、血清BUN、Cr、UA水平升高(P<0.05),肾小管扩张明显、草酸钙结晶增多,TUNEL阳性细胞率增加(P<0.05),SOD活性降低而MDA含量增加(P<0.05),ROS水平升高(P<0.05),LC3B与GRP78阳性染色水平升高(P<0.05),同时,p-p38 MAPK/p38 MAPK、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、GRP78、CHOP蛋白相对表达量均上调(P<0.05)。结论ROS/p38 MAPK级联反应参与大鼠KS形成,其作用与其激活内质网应激介导的自噬途径有关。

地塞米松对内毒素性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞丝裂原激活的蛋白激酶磷酸酶-1表达的影响

目的探讨地塞米松（dexamethason，DEX）对急性肺损伤（acute lung injury，AH）大鼠肺泡巨噬细胞（alveolar macrophage，AM）中丝裂原激活的蛋白激酶磷酸酶-1（mitogen-activated protein kinase phosphatase-1，MKP-1）的影响，以及AM中MKP-1表达在内毒素性肺损伤中的可能作用。方法大鼠尾静脉注射内毒素建立急性肺损伤模型。Westernblot法检测肺巨噬细胞的p38MAPK，磷酸化p38MAPK，MKP-1含量变化；ELISA法检测细胞培养上滴液中TNF-α，IL-6的含量改变。结果脂多糖可使细胞培养上滴液中，TNF—α和IL-6的表达增加（P〈0．05），DEX可以部分逆转上述作用（P〈0．05）。且可诱导内毒素肺损伤模型AM中MKP-1表达增加（P〈0．05）。结论脂多糖促进TWF-α和IL-6的表达，可能是急性肺损伤肺内炎症损害的启动和促进因素；DEX可能通过抑制TNF-α和IL-6的表达并且增加AM中MKP-1的含量，进而抑制p38MAPK，发挥抗炎作用。

细胞外信号调节激酶/丝裂原激活的蛋白激酶细胞信号转导通路与类风湿关节炎研究现状

在细胞生命活动的过程中,不同的细胞相互问通信协调,将外界的信号传递至效也细胞胞内,启动特定的生理功能.传递信号的通路种类繁多,有其各自功能,也互相交义影响,而细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinaaes,ERK）通路就是将细胞外信号传递至细胞内的信号通路之一.

丝裂原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶2在心血管系统中的作用

心血管疾病的发生发展与慢性炎症有关。p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)介导的信号通路在心血管细胞炎症、增殖、分化、迁移和代谢中起着重要作用。抑制p38MAPK可有效抑制炎症介质的表达,由于p38抑制剂在安全性方面不可接受,故研究其下游底物是很有必要的。丝裂原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶2(MK2)是p38MAPK重要的下游底物且参与了心血管疾病的发生发展。因此抑制MK2的活性在心血管疾病的治疗及预防中具有重大的临床意义。文章主要对MK2的结构功能和在心血管疾病中的作用展开综述。

p38丝裂原激活的蛋白激酶信号通路在肺缺血-再灌注损伤中的作用

肺缺血重新灌注后，由肺缺血引起的肺损伤不但没有减轻，反而有加重的现象称为肺缺血．再灌注损伤。肺缺血一再灌注损伤可在多种情况下发生：心肺转流、肺栓塞、肺切除、肺移植等，尤其在肺移植中，肺缺血．再灌注损伤可导致肺动脉高压、肺水肿及呼吸衰竭，严重影响患者的术后恢复甚至危及患者生命。近年从不同角度对肺缺血-再灌注损伤的机制做了大量研究，其中对丝裂原激活的蛋白激酶（mitogen activated protein kinase，MAPK）信号通路方面的研究成为热点之一。p38MAPK是近年发现的一类新的MAPK信号通路，它不仅在炎性反应、应激反应中具有重要的作用，还参与细胞的多种生理过程。现就p38 MAPK信号通路及其在肺缺血-再灌注损伤中的作用综述如下。

亚硒酸钠对大鼠肾小球系膜细胞表达p38丝裂原活化蛋白激酶和过氧化物酶体增殖物激活受体γ的影响

目的:观察亚硒酸钠对大鼠肾小球系膜细胞系HBZY-1表达p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated proteinkinase,p38MAPK)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)的影响,从而研究p38MAPK和PPARγ在糖尿病肾病形成中的作用及硒在防治糖尿病肾病中的作用机制。方法:在以下3种条件下培养细胞系:(1)分别以一定浓度高葡萄糖、高胰岛素、过氧化氢和AGEs刺激细胞系HBZY-1一定时间;(2)先给予p38MAPK特异性抑制剂SB203580或亚硒酸钠预处理细胞后,再分别以高葡萄糖、高胰岛素、过氧化氢和糖基化终产物4种因素孵育细胞系HBZY-1;(3)以不加任何刺激培养细胞系作为对照。RT-PCR法观察各种情况下细胞系HBZY-1 PPARγmRNA的表达,Western印迹法观察磷酸化p38MAPK的表达。结果:4种刺激因素均可作为独立因素激活p38MAPK,使其磷酸化表达量增加,PPARγ表达量显著减少;SB203580能显著增加细胞系HBZY-1 PPARγ表达;亚硒酸钠能明显抑制细胞系HBZY-1p38MAPK磷酸化表达,而显著增加细胞系HBZY-1 PPARγ表达(P<0.01)。结论:在大鼠肾小球系膜细胞,p38MAPK对PPARγ具有拮抗作用,亚硒酸钠明显增加细胞系HBZY-1 PPARγ表达,并具有类似PPARγ激动剂的作用。

吡格列酮对脂多糖引起的大鼠海马有丝分裂原激活蛋白激酶p38信号传导通路的影响

吡格列酮（pioglitazone，Pio）能抑制脂多糖诱导的原代培养的星形胶质细胞炎症因子的释放，对抗谷氨酸诱导的神经细胞损伤，也有研究显示Pio通过抑制p38MAPK信号传导通路抑制LPS诱导的小胶质细胞炎症反应。但关于Pio对大鼠脑内炎症反应的抑制作用是否与p38MAPK信号传导通路有关目前尚未见报道，本研究通过大鼠脑室内注射LPS建立炎症反应动物模型，应用Western blot方法研究Pio对LPS引起的p38MAPK信号传导通路的影响。

牡荆素调节环磷酸腺苷激活的交换蛋白1/钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ信号对大鼠心肌梗死后心肌肥大与纤维化的作用

目的探讨牡荆素调控环磷酸腺苷激活的交换蛋白1(Epac1)/钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)信号通路抑制大鼠心肌梗死(MI)后心肌细胞肥大与纤维化的作用。方法24只SD大鼠随机分为:假手术组、MI组、牡荆素组。大鼠进行心脏左前降支结扎建立MI模型,假手术组只穿线不结扎。检测大鼠心功能变化;苏木精-伊红(HE)染色观察心脏病理学变化,天狼星红染色观察心脏纤维化,电镜观察心肌线粒体损伤情况;Western Blot检测Epac1、CaMKⅡ等蛋白变化。结果(1)大鼠MI 4周后,与假手术组比较MI组大鼠左心室短轴缩短率(LVFS)和左心室射血分数(LVEF)均降低(P<0.01),左心室收缩末期内径(LVIDs)、左心室舒张末期内径(LVIDd)和舒张末期左心室后壁厚度(LVPWd)、收缩末期左心室后壁厚度(LVPWs)增加(P<0.01),牡荆素组大鼠心脏LVIDs、LVIDd、LVPWs和LVPWd较MI组降低,LVFS和LVEF均升高,差异有统计学意义(P<0.05);(2)牡荆素可降低大鼠心脏重量指数(P<0.01),并减小MI组大鼠心肌细胞横截面积,同时减轻大鼠左心室壁心肌纤维化程度(P<0.01),牡荆素组大鼠心肌胞浆内线粒体肿胀较MI组减轻,线粒体形态较完整,空泡形成较少;(3)Western Blot结果显示牡荆素抑制大鼠MI后Epac1激活(P<0.01),抑制其下游CaMKⅡ激活与细胞外调节激酶的磷酸化(P<0.01),同时可抑制B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)上调(P<0.05),上调Bcl-2(P<0.01),抑制凋亡蛋白裂解半胱天冬酶3(Cleaved-Caspase 3)的活化(P<0.05)。结论牡荆素可通过抑制Epac1/CaMKⅡ通路,改善大鼠MI后心脏功能,抑制心肌肥大和纤维化。

氟西汀对抑郁症大鼠行为学表现及丝裂原活化蛋白激酶-p38信号通路的影响

目的探讨氟西汀对抑郁症大鼠行为学表现及海马内丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)、磷酸化p38(p-p38)和p38表达的影响,为抑郁症的分子病理学机制提供线索。方法 40只雄性Sprague Dawley大鼠随机分为正常组、抑郁症组、生理盐水组和氟西汀组,每组10只。抑郁症组、生理盐水组和氟西汀组大鼠给予8周慢性不可预见性刺激(CUMS)制备抑郁症模型,第5~8周生理盐水组和氟西汀组大鼠分别给予生理盐水和氟西汀灌胃。正常组大鼠不给予任何干预措施。分别于造模前、造模后及干预后评估4组大鼠的行为学变化;最后1次行为学评估后,取大鼠海马组织,采用Western blot法检测海马组织中MKP-1、p-p38和p38蛋白表达,并计算p-p38与p38蛋白表达的比值(p-p38/p38)。结果造模前4组大鼠行为学指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与造模前比较,造模后抑郁症组、生理盐水组和氟西汀组大鼠蔗糖偏好指数降低(P<0.05),旷场实验水平运动距离和直立次数减少(P<0.05),强迫游泳不动时间增加(P<0.05)。造模后抑郁症组、生理盐水组和氟西汀组大鼠行为学指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与正常组比较,造模后抑郁症组、生理盐水组和氟西汀组大鼠蔗糖偏好指数降低(P<0.05),旷场实验水平运动距离和直立次数减少(P<0.05),强迫游泳不动时间增加(P<0.05)。与抑郁症组和生理盐水组比较,干预后氟西汀组大鼠蔗糖偏好指数升高(P<0.05),旷场实验水平运动距离和直立次数增加(P<0.05),强迫游泳不动时间缩短(P<0.05)。抑郁症组和生理盐水组大鼠海马组织中MKP-1表达显著高于正常组(P<0.05),氟西汀组大鼠海马组织中MKP-1表达显著低于抑郁症组和生理盐水组(P<0.05),抑郁症组与生理盐水组大鼠海马组织中MKP-1表达比较差异无统计学意义(P>0.05),氟西汀组与正常组大鼠海马组织中MKP-1表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。4组大鼠海马组织中p-p38、p38蛋白表达及p-p38/p38比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论MKP-1可能与抑郁症的发病机制有关,MKP-1在抑郁症的发病机制中可能不是通过p38信号通路起作用。氟西汀可能通过下调MKP-1表达而发挥治疗抑郁症的作用。

p38丝裂原素激活的蛋白激酶在调节低氧诱导人内皮细胞分泌血管内皮生长因子过程中的作用(英文)

血管内皮细胞中血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)的合成增加在促进血管新生的过程中起着非常重要的作用。然而低氧诱导VEGF分泌的细胞内信号转导机制还不是很清楚。人脐静脉内皮细胞系(ECV304)在低氧或常氧的状态下培养12-24h后分别用实时定量PCR和Westernblot的方法来检测VEGFmRNA的表达及ERK1/2和p38激酶的磷酸化水平。分泌到培养液中的VEGF蛋白用酶联免疫吸附(ELISA)的方法来检测。业已报道,ERK的抑制剂PD98059能够抑制低氧诱导的VEGF基因的表达,根据这个报道,我们发现在低氧情况下,ECV304细胞的ERK1/2磷酸化水平增高以及VEGF的合成增加等这些变化也能被PD98059所抑制。本次实验的新发现是p38激酶的激活在低氧诱导VEGF合成增加中的作用。p38激酶的抑制剂SB202190能抑制低氧诱导的VEGF合成增加。这些数据首次直接证实了p38激酶在低氧诱导人内皮细胞分泌VEGF增加过程中的作用。

大鼠脑内远位触液神经元p38丝裂原活化蛋白激酶的分布及在噪声应激时的表达

目的:观察脑内远位触液神经元内p-p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的分布及其在噪声应激时的表达。方法:用霍乱毒素亚单位B与辣根过氧化物酶复合物(CB-HRP)标记和免疫组织化学相结合的双重标记技术,观察SD大鼠脑实质内远位触液神经元中p-p38MAPK的分布。进一步制作噪声应激动物模型,观察噪声应激后该类神经元中p-p38MAPK的表达变化。结果:在脑干的特定部位恒定出现被CB-HRP标记的两组神经细胞簇,其他脑区未见CB-HRP标记神经细胞簇。不予应激刺激,该细胞簇内仅有个别神经元见有CB-HRP/p-p38MAPK;噪声应激刺激1d时,上述特定部位细胞簇的CB-HRP/p-p38MAPK双重标记神经元数目没有明显变化;噪音应激刺激5d时,CB-HRP/p-p38MAPK双重标记神经元数目较对照组显著增多(P<0.05);噪音应激刺激10d时CB-HRP/p-p38MAPK双重标记神经元数目较对照组显著增多(P<0.05);噪音应激刺激20d时,CB-HRP/p-p38MAPK双重标记神经元数目较对照组显著增多(P<0.01)。结论:在脑干特定部位恒定存在的两组被CB-HRP标记的细胞团为远位触液神经元,其中少数触液神经元有p-p38MAPK表达,且当给予动物噪声应激刺激时,p-p38MAPK免疫阳性神经元和CB-HRP/p-p38MAPK双重标记神经元数量显著增加,提示脑实质内的这种远位触液神经元中的p-p38MAPK可能参与了机体对噪声应激的信息传递或调控,其作用随应激天数增加而日趋增强。

支架蛋白对丝裂原活化蛋白激酶信号途径中震荡的抑制

通过一种两体支架蛋白参与的丝裂原活化蛋白激酶 (mitogen activatedproteinkinase,MAPK)信号转导模型 ,研究了支架蛋白参与的存在负反馈的MAPK信号转导途径 .支架蛋白(scaffoldprotein)既可以促进信号过程 ,也可以抑制信号的转导 .由系统中支架蛋白的浓度以及支架与信号分子的相互作用共同决定了增加支架浓度造成的不同结果 .不仅如此 ,系统中支架蛋白浓度的增加 ,还会抑制负反馈系统中出现的持续震荡 .