养殖模式对中华鳖氨基酸价值的影响

为了研究养殖模式对中华鳖营养的影响,评估了池塘单作、藕鳖共作和稻鳖鱼共作3种养殖模式下,中华鳖肌肉和鳖裙中氨基酸及胶原蛋白含量。结果表明:3种养殖模式下,相同部位中氨基酸总量(TAA),必需氨基酸含量(EAA)均无显著差异。池塘单作模式下,肌肉的蛋白质营养价值最高,味道最为鲜美。

中华鳖养殖过程中浮游生物群落结构的演变

为研究中华鳖养殖过程中,池塘浮游生物群落结构的演变。在放养前、养殖中期和养殖后期3个阶段采集水样,进行理化、浮游生物检测与分析。结果表明:养殖后期NH4+-N达2.38 mg/L,显著性高于养殖前和养殖中期。共检出浮游植物5门62种,种类组成以绿藻门、蓝藻门为主;浮游动物4类39种,以原生动物、轮虫为主。浮游植物生物丰度和生物量以绿藻为主,浮游动物以桡足类为主。养殖中期浮游植物、浮游动物平均丰度达到最高值,分别为4762600、1634 ind/L;养殖后期浮游植物、浮游动物生物量达到最高,分别为18.09、10.106 mg/L。养殖中期的浮游植物多样性指数(H)和均匀度指数(J)平均值分别为0.1779、0.0604,显著性低于养殖前;养殖中后期,纤维新月藻为绝对优势藻;中华鳖养殖前后浮游动物多样性指数(H)差异不显著。研究表明,中华鳖养殖过程中,池塘浮游植物群落结构变化较大,而浮游动物变化较小;养殖水体表现出先变差再逐渐变好的趋势,养殖中期水体稳定性差,需要进行积极调水。

中华鳖源按蚊伊丽莎白菌的分离鉴定及药敏特性研究

研究对从江西省抚州市南丰县某中华鳖养殖基地患病中华鳖(Trionyx sinensis)组织中分离培养得到的一株按蚊伊丽莎白菌(Elizabethkingia anophelis)疑似菌株进行鉴定和药敏特性研究。在无菌环境中解剖患病中华鳖得到肝脏、脾脏组织,匀浆后接种在LB培养基上,分离得到优势菌株EJX2021。对该菌株进行形态学观察、16S RNA基因序列测定和生理生化鉴定以鉴定菌株种类;进行人工回归感染、组织病理学观察、毒力因子分析和抗生素药物敏感性试验研究其致病能力和药物敏感性特征。从患病中华鳖中分离出一株优势菌株EJX2021,结合其表型特征、16S RNA基因序列测定和生理生化鉴定,确定其为按蚊伊丽莎白菌。在人工回归感染后,该菌株对中华鳖15d的LD50为1.62×10^(8)CFU/mL,95%置信区间为(0.78—3.37)×10^(8)CFU/mL;组织病理学观察肠道、肺脏、脾脏、肝脏等组织出现不同程度病变。毒力因子分析显示该菌株包含246个潜在毒力基因。药物敏感性试验显示该菌株为多重耐药菌株,对多西环素、米诺环素、卡那霉素、哌拉西林、恩诺沙星、氟苯尼考敏感,对头孢曲松、头孢哌酮中度敏感,对新霉素等15种抗生素具有耐药性。研究证明了按蚊伊丽莎白菌是能够导致中华鳖病害的一种病原菌,为该细菌导致中华鳖病害的检测、鉴别和防治提供科学依据。

中华鳖5个养殖群体肌肉营养成分分析与评价

【目的】分析和评价国内中华鳖(Pelodiscus sinensis)主要养殖群体的肌肉营养品质,为中华鳖品质性状遗传改良及相关配合饲料的研发提供依据。【方法】测定东莞、高要、萧山、郓城和余姚5个群体的肌肉常规营养成分、氨基酸和脂肪酸含量,并进行营养评价。【结果】(1)各群体之间粗蛋白、粗脂肪、水分和灰分存在显著差异(P<0.05)。其中,萧山群体的粗蛋白质量分数最高,水分质量分数最低,东莞群体的粗脂肪质量分数最高,粗蛋白质量分数最低,高要群体的粗灰分质量分数最高,粗脂肪质量分数最低,而郓城和余姚群体的常规营养成分质量分数相对居中;(2)以鲜质量计,检出必需氨基酸总质量分数为8.65%(东莞)~10.21%(萧山),非必需氨基酸总质量分数为8.61%(东莞)~10.73%(萧山)。各群体的氨基酸评分为0.62~1.68,化学评分为0.42~1.29,必需氨基酸指数为77.72~83.98,苯丙氨酸+酪氨酸为第一限制性氨基酸;(3)5个群体均检出10种脂肪酸。以鲜质量计,脂肪酸总质量分数为348.41 mg/100 g(高要)~708.55 mg/100 g(东莞),饱和脂肪酸总质量分数为133.69 mg/100 g(高要)~212.58 mg/100 g(东莞),单不饱和脂肪酸总质量分数为86.02 mg/100 g(高要)~246.25 mg/100 g(东莞),多不饱和脂肪酸总质量分数为128.70 mg/100 g(高要)~249.73 mg/100 g(东莞)。【结论】中华鳖肌肉具有高蛋白(19.63%~21.42%)、低脂肪(0.37%~0.95%)的营养特点,可作为优质食物蛋白来源。不同养殖群体中华鳖的肌肉营养组成基本一致,但含量和营养价值存在差异,其中,萧山群体表现出较为突出的高蛋白、低脂肪营养特性,而东莞群体脂肪和脂肪酸质量分数较高,可能具有更好的风味和口感。

中华鳖粉胶原蛋白不同提取方式的比较与理化表征

为减少水产品资源流失,提高鳖类产品附加值,该文以中华鳖粉为原料,分别采用柠檬酸、胃蛋白酶、酸性蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶等方法提取酸溶性胶原和酶溶性胶原,探究鳖源胶原蛋白原料的应用价值。使用氨基酸自动分析仪、扫描电子显微镜、SDS-PAGE凝胶电泳、傅里叶红外光谱仪、气相-质谱联用仪、差式量热扫描仪对胶原蛋白的氨基酸、二级结构、挥发性物质、热稳定性等理化指标进行测定。结果表明,5种胶原蛋白均具有I型胶原特征,且纯度较高,但不同方法间提取效率存在差异。其中,胃蛋白酶溶性胶原蛋白具有较高的提取率与热稳定性,具有亚氨基酸含量高、蛋白交联程度好、气味物质少等优势,在食品与医药领域具有较好的应用前景,为后续鳖源胶原的提取与应用提供了理论基础。

Sox8基因过表达诱导中华鳖ZW性腺的雄性分化

为了研究Sox8基因在中华鳖性别分化中的功能,研究利用慢病毒介导的过表达载体,在性别分化前的雌性中华鳖中过表达Sox8。通过组织学分析和生殖细胞标记蛋白VASA的免疫荧光染色发现在Sox8过表达后,50%的ZW性腺髓质区发育出睾丸特有的、含有生殖细胞的性索结构;qRT-PCR和免疫荧光结果显示雌性特异性基因Foxl2和Cyp19a1表达量显著降低,而调控睾丸发育的Dmrt1、Sox9和Amh基因表达上调。实验结果表明Sox8的过表达诱导ZW胚胎性腺往雄性方向分化,揭示了Sox8在中华鳖睾丸分化过程中的作用。

微塑料对中华鳖稚鳖形态、行为和生理特征的影响研究

微塑料是指直径小于5 mm的塑料碎片,较难降解,对生态系统具有潜在的危害.目前,关于微塑料对淡水水生生物的毒理效应研究大多集中于浮游动物、鱼类、甲壳类和双壳类等.本研究在实验室条件下评估中华鳖(Pelodiscus sinensis)在胚胎发育期间,向孵化基质中添加不同浓度微塑料对中华鳖稚鳖的形态、行为、生理特征及生长的影响.结果表明,喂食不同浓度(0.1 mg/L、1 mg/L、10 mg/L)的微塑料,对中华鳖稚鳖14 d龄、1月龄、3月龄和6月龄的形态指标(背甲和体重)和行为表现无显著影响.通过比较摄入不同浓度微塑料14 d的中华鳖稚鳖的肠道菌群组成,发现变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidota)和厚壁菌门(Firmicutes)是构成肠道菌群的核心菌群,多样性未发生显著变化,而摄入0.1 mg/L微塑料的中华鳖稚鳖肠道菌群的丰度显著降低.此外,摄入不同浓度的微塑料还会改变某些条件致病菌以及消化有关的菌群富集,如拟杆菌属(Bacteroides)、气单胞菌属(Aeromonas)、管道杆菌属(Cloacibacterium)等.本研究为评估微塑料对淡水爬行动物的毒性效应及微塑料对其潜在的生态毒理风险提供科学理论参考.

中华鳖趋化因子CXCL10的分子特征及其对细菌感染的响应

为研究趋化因子基因cxcl10的表达特征及其对外源病原微生物的响应,实验以中华鳖为对象,利用生物信息学分析CXCL10蛋白的分子特征及系统进化,通过荧光定量PCR(qPCR)技术检测该基因在健康中华鳖各组织中的表达分布及其在革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌和革兰氏阴性菌嗜水气单胞菌胁迫下mRNA的表达规律。结果显示,该蛋白分子质量为10.89 ku,等电点为9.62,存在信号肽和磷酸化位点,单链包含1个N端的loop区、1个α螺旋和3个反向平行β折叠;该基因在健康中华鳖的肝脏和心脏中表达量最高,在血细胞中表达量最低;两种细菌的刺激能促使中华鳖组织器官中cxcl10及炎症相关因子基因tnf-ɑ和il-1βmRNA表达量的显著上调。研究表明,cxcl10可能在中华鳖机体抗菌免疫过程中发挥重要作用。本实验可为中华鳖病害防治提供理论基础。

孵化湿度对胚胎期中华鳖裙边外部形态和胶原沉积的影响

为探究孵化湿度对中华鳖营养品质的影响,采集5龄中华鳖所产的同批次受精卵[(3.05±0.05)g],在相对湿度65%和85%下于实验室全裸孵化箱中进行无接触式孵化,分别取18、20、22、24、26期胚胎各20枚,迅速解剖出裙边组织,用于荧光定量PCR分析测定胶原蛋白含量,并用天狼星红染色法进行组织学分析,研究2种孵化湿度对胚胎期中华鳖外部形态和胶原物质积累的影响。试验结果显示:随着胚胎发育,背甲指数(背甲质量/体质量)、裙边指数(裙边质量/体质量)、背甲比值(背甲长/体长)和裙边比值(体长/裙边宽)等性状总体上呈增加趋势。相对湿度85%下孵育的中华鳖胚胎在大多数发育阶段的外部形态特征性指标显著优于相对湿度65%(P<0.05)。相对湿度85%下孵育的裙边组织呈现强橙黄色或亮红色偏振光,随着胚胎发育,裙边组织Ⅰ型胶原蛋白面积的占比不断增加,极显著高于相对湿度65%下的此数值(P<0.01)。发育至第22期,相对湿度85%下孵育的裙边组织Ⅰ型胶原蛋白基因mRNA表达水平迅速增加,推测潮湿环境可能有利于胚胎期中华鳖发育过程中胶原蛋白的沉积和相关优良性状的形成。试验结果可为中华鳖生产实践中改善孵化湿度调控裙边性状发育提供基础数据。

中华鳖IGF2和IGF2R基因克隆及其功能研究

【目的】探索胰岛素样生长因子2基因(IGF2)和胰岛素样生长因子2受体基因(IGF2R)在中华鳖生长过程中发挥的作用,为揭示IGFs系统在中华鳖异速生长及两性生长差异中的作用机制打下基础。【方法】采用RACE克隆中华鳖IGF2和IGF2R基因c DNA序列,利用BioEdit、ExPASy、TMHMM Server v2.0、SignalP及SMART等在线软件进行生物信息学分析,并通过实时荧光定量PCR分析IGF2和IGF2R基因在雌雄中华鳖不同组织、不同表型及不同性类固醇激素处理下的表达变化。【结果】中华鳖IGF2基因cDNA序列全长1180 bp,共编码222个氨基酸残基;IGF2蛋白相对分子量为24.84 kD,理论等电点(pI)为9.00,属于跨膜蛋白,含有1个IIGF结构域。中华鳖IGF2R基因cDNA序列全长8765bp,共编码2443个氨基酸残基;IGF2R蛋白相对分子量为271.92kD,pI为5.64,属于跨膜蛋白,含有14个重复的CIMR结构域和1个FN2结构域。基于IGF2和IGF2R氨基酸序列相似性构建的系统发育进化树均显示,中华鳖与龟鳖类的亲缘关系最近,与鱼类和两栖动物的亲缘关系相对较远。IGF2和IGF2R基因在中华鳖体内具有广泛的组织表达谱,IGF2基因在精巢中的相对表达量显著高于卵巢(P<0.05,下同),IGF2R基因则恰好相反。IGF2基因在成年中华鳖生长快个体肝脏中的相对表达量显著高于生长慢个体,IGF2R基因的表达模式则相反。在雌二醇(E2)处理下,除雌性中华鳖肝脏中的IGF2R基因相对表达量在注射6 h时显著升高外,IGF2和IGF2R基因在雌雄个体肝脏中的相对表达量整体上呈下降趋势;MT处理对雄性个体肝脏中IGF2基因的表达无显著影响(P>0.05),但在注射48 h后显著提高雌性个体肝脏中的IGF2基因相对表达量,且显著下调雌性中华鳖肝脏中的IGF2R基因相对表达量。【结论】IGF2和IGF2R基因参与调控中华鳖性腺的发育及成熟,且IGF2R可能通过内化降解IGF2而对中华鳖的生长起负调控作用。此外,IGF2和IGF2R基因会通过下调表达量来响应外源激素的刺激,进而实现对中华鳖生长的调控。

温度对中华鳖幼鳖生长和血液学参数的影响研究

开展了温度对中华鳖幼鳖生长和血液学参数影响试验。将中华鳖幼鳖设置2个试验组,分别为A组(28℃)和B组(34℃),于2组温度下养殖1,3和10 d,分别测量其体质量、背甲长和背甲宽、各型白细胞百分比及血浆杀菌能力等指标。结果表明,B组幼鳖养殖第3天时,背甲长指标显著下降,但A组无显著变化。A组和B组嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞和单核细胞的百分比,均不随养殖天数而变化;A组嗜异性粒细胞的百分比、嗜异性粒细胞与淋巴细胞的比值,均与淋巴细胞的百分比的变化呈相反趋势,血浆杀菌能力及B组上述指标,均不随养殖天数而变化;只在第3天,A组嗜酸性粒细胞的百分比显著高于B组,但淋巴细胞的百分比却显著低于B组。指出,高温会抑制幼鳖免疫系统的不同组分发生适应性改变,不利于其存活。

中华鳖卵黄蛋白原基因克隆与表达及外源E2的影响

为探究中华鳖(Pelodiscus sinensis)卵黄蛋白原Vtg基因的生物学信息与表达及其作为生理与毒理研究标志物的可行性,本实验克隆获得VtgAB1、VtgAB2、VtgAB3(GenBank登录号OK287927、OK287929、OK287928)基因序列,其cDNA长分别为5055、5537、5306 bp,分别编码了1684、1760、1725个氨基酸。三种亚型Vtg蛋白均由脂蛋白N-末端(Vitellogenin_N)、1943DUF、1944DUF、PV、D型血管血友病因子(VWD)5个保守结构域构成,为完整型Vtg。同源性分析发现皆与龟鳖目具有更近的亲缘关系,同时在3种亚型中VtgAB2与VtgAB3更相似。荧光定量PCR显示,3种亚型Vtg只在雌性肝脏中强烈表达。在60日龄、2龄、4龄雌性个体肝脏中,Vtg表达量随年龄呈上升趋势,VtgAB1、VtgAB2为主要表达亚型。原位杂交结果显示,3种亚型Vtg在卵原细胞内未发现杂交信号;在生长期卵母细胞胞质和滤泡细胞中发现杂交信号;成熟期卵母细胞胞质中未发现杂交信号,在滤泡细胞和周围的网状组织中发现杂交信号。信号在初级卵母细胞的细胞质中分布较为均匀且表达最强,随着卵母细胞的发育信号聚集在核周区且信号逐渐减弱。以雄性中华鳖为对象,注射雌激素E2,3种亚型Vtg表达量表现出明显的时间和剂量相关性。研究结果表明,在中华鳖卵黄积累过程中Vtg发挥重要作用,首次证实其Vtg存在内源性合成,并发现其可以作为雌激素暴露的生物标志物。

中华鳖诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因的表达分析

一氧化氮(NO)参与生物体内多种重要的生理病理活动,可增强机体的免疫功能,而诱导型一氧化氮合酶(iNOS)是一氧化氮合成过程中的关键限速酶。为了探明iNOS在中华鳖(Pelodiscus sinensis)先天免疫中的作用,研究了iNOS基因在中华鳖组织的分布及外源刺激物对其基因和蛋白表达的影响。荧光定量PCR结果显示,iNOS基因在中华鳖的心脏、肝脏、肾脏、脾脏、肌肉、小肠和大肠中均有表达,其中在大肠中表达量最高,其次是小肠、肾脏和脾脏。在受脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)刺激后,肝、脾、肾、肌肉和小肠iNOS mRNA的表达显著升高。免疫组化实验结果显示LPS刺激后12 h、24 h iNOS蛋白在小肠、脾脏表达水平显著高于生理盐水对照组。研究结果表明iNOS可能参与了中华鳖的机体免疫反应。

中华鳖肤霉病的预防与治疗

中华鳖疾病具有潜伏期长和易引发并发症、继发感染的特点。其发病诱因复杂多样,常受鳖体自身生理状态、环境条件和病原菌相互作用所致。在诸多常见疾病中,肤霉病尤为显著,主要由水霉和绵霉等真菌引起,这些真菌在15~20℃条件下繁殖迅速,尤其适应低温清澈的水体环境,因此秋末至早春为高发态势。此外,随着养殖规模扩大,水质恶化和饲养管理不善等问题逐渐凸显,可能导致鳖体遭受冻伤、擦伤或寄生虫寄生等各种损伤,从而增加发病风险,一旦发病,死亡率极高。

蚌埠市中华鳖主要细菌性疾病监测及耐药性分析

中华鳖,又名甲鱼、团鱼、鳖等,分布于我国大部分地区,尤以湖南、湖北、江西、安徽、江苏等省产量较高。随着养殖集约化程度越来越高,由细菌感染引起的疾病频发。为掌握蚌埠市甲鱼主要病原菌耐药性情况及变化规律,指导科学使用水产用抗菌药物。

天津地区中华鳖人工孵化技术

为了更好地适应市场需求,提高中华鳖孵化成功率,从而提高养殖效益,现将天津地区中华鳖人工孵化技术总结如下。一、养殖设施。1.亲鳖池基于天津地区的气候特点与养殖模式,选择符合国家生态养殖的环境条件,周边无污染源、背风向阳,灌溉便利且水源优质的位置修建亲鳖池。

中华鳖-翘嘴鲌共生模式技术研究与效益分析

中华鳖,又名水鱼、鳖、团鱼,肉质细嫩,味道鲜美,营养丰富。其药用价值也非常显著,根据陶弘景的《名医别录》记载,鳖性味甘,平,有滋阴补肾,清退虚热的功效。由于中华鳖具有较大的食用及药用价值,全国各地已广泛开展人工养殖。全国鳖类养殖总产量已超过33万t/年,主要养殖省份有浙江、湖北、安徽、江西、湖南、广东、江苏和广西等。中华鳖市场消费旺盛,已稳定成为老百姓心目中的高档优质水产品。

不同介质、温度对中华鳖胚胎发育与幼鳖形态特征及运动机能的影响

【目的】探究介质和温度对中华鳖胚胎发育、初生幼鳖形态特征及运动机能的影响,优化孵化环境参数,为人工繁育和种质资源保护工作提供理论依据与技术参考。【方法】通过正交试验设置了3组温度(28、30、32℃)和3种介质(蛭石、沙子、无介质),采用双因素方差分析温度和介质对中华鳖孵化率、孵化期、幼鳖质量、背甲长、背甲宽、背甲高和游泳速度的影响。【结果】随着温度的升高,孵化率显著升高(P<0.05),孵化期显著缩短(P<0.05);幼鳖质量、背甲长和游泳速度均显著提升(P<0.05)。孵化介质对孵化率、幼鳖质量、背甲长、背甲宽、背甲高和游泳速度均产生显著影响(P<0.05),且蛭石组的上述指标均显著高于其他组(P<0.05)。介质和温度的交互作用对幼鳖质量和游泳速度有显著影响(P<0.05)。【结论】温度为32℃、蛭石作为孵化介质时,中华鳖孵化率最高,孵化期最短,孵出的幼鳖个体相对较大,并表现出较强的运动机能。

中华鳖“阳光棚+外塘”三段式健康养殖技术应用研究

为切实保护和改善农村生态环境,巩固“五水共治”成效,推动渔业健康绿色高质量发展,浙江桐乡先立后破,建立中华鳖“阳光棚+外塘”三段式健康养殖试点,开展龟鳖类养殖业转型提质行动。笔者根据生产实践,总结中华鳖“阳光棚+外塘”三段式健康养殖技术,分析推广成效及生态经济效益,以期为相关从业者提供参考,助力中华鳖产业绿色高效转型。

中华鳖提纯复壮技术

一、亲鳖培育1.亲鳖来源从省级良种场四川乐活龙湖鳖业有限公司收集的良种鳖和本地人工选育的非近亲交配的性成熟鳖。选择外形完整、无伤残、无畸变,体色正常,皮肤光亮,裙边肥厚、有弹性,体重1.25~3kg,无病、体质健壮的作为亲鳖。雌鳖尾短,不能自然伸出裙边,体厚,后腿之间距离要宽;雄鳖尾长而粗壮,能自然伸出裙边,体要薄,后腿之间距离要窄。