角膜修复材料有效性评价动物模型的建立和验证

背景:角膜修复材料可修复角膜损伤,这种产品在进入临床试验之前需要评估其有效性,但现阶段尚缺乏标准化的有效性评估方法。目的:建立并验证兔角膜真菌感染模型和角膜移植实验方法。方法:取新西兰大白兔12只,建立左眼角膜真菌感染模型(实验组),右眼作为正常对照。模型建立2周后,左眼进行脱细胞猪角膜基质移植,移植后定期进行裂隙灯显微镜、角膜厚度、眼压、共聚焦显微镜及光学相干断层成像等检测,评估角膜修复材料透明度、上皮愈合程度、水肿程度、角膜新生血管程度、角膜修复材料融解程度;移植后3,6,12个月,进行角膜病理组织观察。结果与结论:①实验组移植后1个月时角膜厚度明显增高,移植3-6个月时角膜厚度开始稳定,1年时趋于稳定,趋向于正常眼;②实验组眼压始终接近于正常眼;③光学相干断层成像显示,移植后7 d,角膜修复材料与植床贴合良好;移植后6个月上皮覆盖完整,移植区植片厚度较为均一;移植后1年恢复情况趋于正常眼;④共聚焦显微镜显示,移植后1个月时,移植区材料均匀;移植后6个月时,移植区有少量细胞迁入;移植后1年时,上皮细胞密度增大,移植区有迁入细胞,但少于正常眼;⑤移植后1年,角膜修复材料几近完全透明,可认为此角膜修复材料治疗感染性角膜溃疡有效;未发生排斥反应,表明该角膜修复材料的治愈性良好;⑥移植后3个月,大量基质细胞迁移至角膜角膜替代物中,移植区域胶原纤维排列整齐、致密,无明显瘢痕及降解现象;移植后6个月时,移植区域已基本恢复至正常角膜状态;移植后1年,移植区域已恢复至正常角膜状态,生物相容性很好;⑦结果表明,实验建立的兔角膜真菌感染模型和角膜移植实验方法可作为评价此类角膜材料有效性的动物模型和方法。

遗传修饰致癌性动物模型与药物临床前安全性评价

潜在致癌性评价是药物临床前安全性评价的重要内容。传统的大、小鼠致癌性评价方法有周期长、费用高、结果不够准确可靠等局限性;而基于遗传修饰的致癌性动物模型建立的评价方法能大大缩短时间、节省费用,结果可信度高。本文简述了国际上基于遗传修饰动物模型评价新体系的建立过程,我国在该领域的研究现状、存在的差距及对策。

卒中治疗药物或治疗方法临床前评价的动物模型

卒中是由各种血管性因素（包括出血和缺血）引起的急性脑功能障碍。卒中具有高发生率、高死亡率、高致残率等特点,给社会和家庭带来沉重负担。然而,大量临床前动物模型上有效的治疗药物,在临床试验中均未得到阳性结果。虽然原因是复杂的,但动物模型制备的技术成熟度、模型的标准化、多样性、与临床的相关性、评价指标的选择、实验条件的控制,以及未遵循多中心随机双盲原则等,都可能导致临床前与临床试验结果的不一致。

人源化动物模型在肿瘤免疫治疗药物临床前研究中的应用

近年来,肿瘤免疫调控机制逐渐清晰,随着嵌合抗原受体T细胞免疫疗法获美国FDA批准上市,揭开了肿瘤免疫治疗的新篇章。在肿瘤免疫治疗药物临床前评价过程中,传统的免疫缺陷动物模型存在较多的限制和缺陷,无法模拟人体内肿瘤微环境,也无法针对免疫治疗药物的作用机制反映出药物的靶点毒性。近年来,由于基因编辑技术及干细胞培养技术的不断进步,实验动物的人源化技术取得了巨大的进步。本文总结了目前可用于肿瘤免疫治疗药物研究的3种人源化动物模型(重建人免疫系统动物模型、重建人免疫系统+人源肿瘤组织异种移植动物模型和基因修饰的人源化动物模型)的特点和应用范围,希望为研究者在肿瘤免疫治疗药物临床前开发过程中选择合适的动物模型提供参考。

CAR-T细胞治疗产品非临床研究动物模型的发展和应用概述

嵌合抗原受体T细胞(CAR-T,Chimeric Antigen Receptor T Cell)已成为近年来癌症免疫疗法领域的研究热点,由于其具有特异性高、选择性强等优点,在肿瘤治疗领域中具有巨大的潜力。同时,CAR-T疗法可能带来特殊毒性风险,包括细胞因子释放综合征、神经毒性、B细胞减少和靶向与脱靶毒性等。尽量在研发早期、在人体使用前获得CAR-T产品的有效性和安全性等非临床信息至关重要,选择合适的动物模型进行上述相关研究可以大大提高对临床结果的预测性。目前,已用于CAR-T产品研究和正处于探索阶段的动物模型主要包括同源小鼠模型、转基因小鼠、移植瘤小鼠模型、免疫系统重建人源化小鼠以及灵长类动物模型。但是,由于CAR-T细胞产品的个性化程度高,人和动物免疫系统特性存在差异,人源细胞在动物体内易受到免疫排斥等原因,人源产品在动物模型上的研究结果尚不能完全反映其在人体内的作用情况。因此,需要根据产品特点和研究目的,构建或者选择适当的动物模型,为CAR-T细胞治疗产品非临床研究提供有效的研究工具。

中药新药临床前有效性研究在临床试验方案设计中的作用

在新药临床前评价中，药效学评价是一个非常重要的环节，它对于支持中药新药进行临床研究，对于发现中药的药效作用特点，预测临床疗效及指导临床研究都是必不可少的。新药的临床有效性评价是确定新药最终能否上市的重要过程。临床研究成功的前提是科学、合理的方案设计，而其临床研究方案是临床试验的核心。目前中药新药临床方案设计中还不同程度地存在脱离临床前有效性实验结果等问题。作者就此进行探讨，以期对中药新药临床研究方案设计有一定的参考作用。

动物模型在抗结核新药药效学评价中的应用

在当前全球结核病防治形势依然严峻、传统抗结核药物对耐药结核病治疗作用有限的情况下,抗结核新药的发现成为迫切关注的问题.而动物模型对药效学的评价是新药研发的关键步骤,是抗结核新药临床应用的有力支持.作者主要从动物模型的种类、特点等方面介绍常见动物模型在新型抗结核药物药效学评价中的应用,进一步加深基础工作研究者对各种动物模型的了解,有利于选择及建立合适的动物模型以满足研究的需求.

人海绵状血管瘤动物模型的建立和治疗药物的筛选

目的建立人海绵状血管瘤的动物模型,并用于药物筛选。方法用荆豆凝集素包被的免疫磁珠分离和纯化人海绵状血管瘤内皮细胞(HCAEC)。将HCAEC(2.5×106个)与人肝癌细胞Bel-7402(5×105个)混合接种于裸鼠皮下,建立海绵状血管瘤的动物模型。通过绿色荧光蛋白示踪和组织学检查分析血管瘤中内皮细胞的来源和血管瘤的病理特征。另外,应用血管瘤内皮细胞和血管瘤动物模型筛选血管瘤的治疗药物。结果HCAEC与Bel-7402细胞共移植于裸鼠皮下后7～9d即可见接种局部形成血管瘤样结构。组织学检查显示血管瘤模型的组织学特征与人的海绵状血管瘤非常相似。细胞绿色荧光蛋白示踪显示绿色荧光蛋白存在于血管瘤的管壁,表明这些细胞来源于接种的HCAEC。药物筛选发现876-3,一种从中药中提取的单体,体外明显抑制HCAEC增殖,体内对血管瘤具有良好治疗作用。结论HCAEC与肝癌细胞共移植在裸鼠皮下可以形成人源化血管瘤动物模型,这种血管瘤动物模型可以用于治疗药物的筛选。

中药儿科用药临床前评价策略

随着人们对儿科用药特殊性的进一步了解,对儿科用药的评价也越来越重视。本文针对作为我国特色的中药儿科用药临床前有效性和安全性评价的设计原则、实验要素和特殊关注点进行综述,旨在促进中药儿科用药的临床前评价研究的规范性和科学性。

多中心、多物种临床前研究向临床研究的转化进展

随着医学研究进展，新的干预措施不断被引进临床，特别是与重症医学相关的治疗措施在近几十年里取得了显著进展。得益于过去20年临床试验经验与教训，提高了新药临床前研究转化为临床研究的比例。本文探讨实施动物实验和系统评价方法中存在的问题。探索把现代临床试验方法有效地应用于临床前研究的可行性，重点阐述了多中心、多物种临床前研究和临床研究的关联与差异，希望有益于减少基础研究向临床转化的风险。