骨肉瘤组织中主要组织相容性复合物Ⅰ类链相关A蛋白和基质金属蛋白酶-9的关系

目的:探讨骨肉瘤组织中主要组织相容性复合物Ⅰ类链相关A(MICA)蛋白和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的关系。方法:用免疫组化检测66例骨肉瘤组织中MICA和MMP-9蛋白的表达情况。结果:MICA和MMP-9蛋白在骨肉瘤组织的表达率分别为51.5%和54.5%,两者在骨肉瘤组织的表达呈正相关(r=0.414,P<0.01)。结论:MICA广泛表达于骨肉瘤组织,其与MMP-9表达可能由相同信号通路调控。

二肽基肽酶3(DPP3)通过下调主要组织相容性复合体Ⅰ类链相关基因B(MICB)的表达抑制胃癌细胞的免疫逃逸

目的探究二肽基肽酶3(DPP3)通过调控主要组织相容性复合体Ⅰ类链相关基因B(MICB)的表达对胃癌细胞免疫逃逸的影响。方法敲低MKN-45人胃癌细胞DPP3、过表达MGC-803人胃癌细胞DPP3,观察细胞增殖、迁移能力变化及对自然杀伤(NK)细胞杀伤的反应性;采用全转录组测序筛得MICB基因,在过表达DPP3细胞中敲低MICB验证细胞行为变化。在C57小鼠验证敲除DPP3细胞的体内成瘤能力及组织中CD56+细胞浸润情况。结果敲除DPP3促进胃癌细胞增殖、迁移,降低MICB表达,对NK细胞杀伤效应不敏感;小鼠成瘤能力升高且组织中CD56^(+)细胞浸润降低。过表达DPP3的胃癌细胞则呈现相反结果。敲减MICB后能逆转DPP3高表达引起的细胞表型变化。结论DPP3通过下调MICB表达抑制胃癌细胞的免疫逃逸功能。

肾移植受者术前主要组织相容性复合物Ⅰ类链相关基因A抗体对移植后早期急性排斥反应的影响

目的探讨肾移植受者术前主要组织相容性复合物Ⅰ类链相关基因A（MICA）抗体对肾移植术后早期急性排斥反应和移植肾功能恢复的影响。方法检测2009年~2010年本院197例未使用免疫抑制剂的肾移植受者术前MICA抗体及其特异性,随访其后接受尸体肾移植手术的139例受者的术后早期急性排斥反应（AR）和移植肾功能。结果 197例肾移植受者术前MICA抗体阳性45例（22.84%）。MICA抗体特异性分析发现有11种抗体,其中出现频率最高的是抗MICA019（占65.7%）,出现频率最低的是抗MICA015（占8.6%）和抗MICA017（占8.6%）,高、低频率抗体间的差异具有显著性（χ2=24.48,P〈0.01）。45例阳性受者中单一特异性抗体18例（占51.4%）,多种特异性抗体17例（占48.6%）。197例受者中139例在术后有39例发生早期AR（占28.1%）;其中,45例术前MICA抗体阳性受者中38例接受移植后有14例发生早期AR（占36.8%）;152例术前MICA抗体阴性受者中有101例接受移植后有25例发生了早期AR（占24.8%）。结论中国人群中最常见的MICA抗体中为抗MICA019,推测MICA019为中国人群中较常见基因是其表现出临床上高频率抗体的原因。

肾癌患者血清中可溶性人类主要组织相容性复合体Ⅰ类链相关基因A蛋白的表达和临床意义

目的探讨血清中可溶性人类主要组织相容性复合体Ⅰ类链相关基因A蛋白(sMICA)检测对肾癌患者的临床诊断价值。方法应用酶联免疫吸附试验测定40例肾癌患者(肾癌组)手术前后和40名健康者(对照组)的血清sMICA水平,并对血清sMICA水平与临床特征的关系进行分析。结果肾癌组术前的血清sMICA水平为(366.15±27.89)pg/mL,显著高于对照组的(214.03±22.15)pg/mL(P<0.01)。肾癌组术后的血清sMICA水平为(229.18±45.54)pg/mL,显著低于术前水平(P<0.01),与对照组的差异无统计学意义(P>0.05)。肿瘤TNM分期中Ⅲ期和Ⅳ期肾癌患者的血清sMICA水平为(443.79±27.21)pg/mL,显著高于Ⅰ期和Ⅱ期患者的(310.68±40.93)pg/mL(P<0.05),而男性与女性患者间、<65岁与≥65岁患者间血清sMlCA水平的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论血清sMICA水平可作为肾癌的一个辅助诊断指标,且其与肾癌患者的免疫功能状态和临床分期有一定的关系。

主要组织相容性复合体-Ⅰ类分子链相关蛋白A-自然杀伤细胞2族成员D通路及其在头颈部鳞状细胞癌中的研究进展

主要组织相容性复合体-Ⅰ类分子链相关蛋白A(MICA)作为自然杀伤细胞2族成员D(NKG2D)的配体,与其特异性结合,活化以自然杀伤细胞为主的免疫效应细胞,发挥免疫监视作用。本文就近5年来有关MICA-NKG2D通路的表达、调控及其在头颈部鳞状细胞癌中的研究进展作一综述。

妇科恶性肿瘤患者血清Ⅰ类MHC链相关蛋白A测定及意义

目的探讨Ⅰ类MHC链相关蛋白(MICA)在妇科恶性肿瘤中的表达,并分析其与临床病理参数的关系及临床应用价值。方法用ELISA法对58名确诊妇科恶性肿瘤患者和98名体检健康者进行血清可溶性MICA(sMICA)浓度检测,分析其表达水平与肿瘤病理参数间关系。用ROC曲线对sMICA结果进行分析与评价。结果妇科恶性肿瘤患者血清中sMICA水平为0.79(0.52,1.28)ng/mL,对照组为为0.32(0.18,0.47)ng/mL,两者具有显著性差异(U=-0.673,P<0.01)。除FIGO分期Ⅲ～Ⅳ期组患者血清sMICA水平与Ⅰ～Ⅱ期组相比有统计学差异(U=1.98,P≤0.05)外,疾病类型、肿瘤浸润程度、肿瘤分化程度及组织类型各组间无显著性差异(P>0.05)。临界值为0.302 ng/mL时,对妇科恶性肿瘤诊断的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.816,敏感性为0.847,特异性为0.718。结论血清中sMICA表达水平与妇科恶性肿瘤的发生密切相关,以sMICA 0.302 ng/mL为临界值,有助于妇科恶性肿瘤的诊断。

人类主要组织相容性复合物Ⅰ类相关链A在肾肿瘤中的表达及临床意义

目的 探讨肾肿瘤患者人类主要组织相容性复合物Ⅰ类相关链A（major histocompatibility complex class-Ⅰ related chain A,MICA）的表达及临床意义. 方法 选取2013年3-7月收治的60例肾肿瘤患者作为研究组,男37例,女23例.年龄34 ～ 76岁,平均46岁.肾透明细胞癌48例,肾血管平滑肌脂肪瘤12例.病理分期：T1期20例,T2期14例,T3期10例,T4期4例.淋巴结转移11例,其他器官转移4例.20例健康体检者为对照组,男10例,女10例.年龄24～50岁,平均31岁.利用ELISA法测定两组血清中分泌型MICA（soluble MICA,sMICA）分子的水平.分析sMICA分子含量与肾肿瘤的性质、肾癌分期、淋巴结及器官转移的关系.免疫组化染色法测定15例肾癌及癌旁组织标本的MICA分子表达情况.实时定量PCR法测定9例肾癌和3例癌旁组织标本的MICA-mRNA表达情况. 结果 48例肾癌、12例肾血管平滑肌脂肪瘤、20例对照组的血清sMICA水平分别为（348.5±32.5）、（289.3±30.4）、（168.4±43.2） pg/ml,研究组与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）,肾癌组与肾血管平滑肌脂肪瘤组比较差异有统计学意义（P＜0.05）.肾肿瘤T1、T2、T3、T4期的sMICA水平分别为（304.3±27.4）、（308.4±26.8）、（368.3±33.4）、（378.4±43.4） pg/ml,T1、T2期间比较差异无统计学意义（P＞0.05）,其余各分期间比较差异有统计学意义（P＜0.05）.伴有淋巴结转移组与无淋巴结转移组的sMICA水平分别为（326.2±32.4）、（319.4±32.5） pg/ml,差异无统计学意义（P＞0.05）.伴有其他器官转移组与无其他器官转移组的sMICA水平分别为（373.4±45.4）、（346.4±31.5） pg/ml,差异有统计学意义（P＜0.05）.免疫组化染色法证实MICA分子在癌组织的细胞表面高表达,而在癌旁细胞表面不表达.实时定量PCR法检测MICA-mRNA在癌组织的表达量（2.03）明显高于癌旁组织（0.77）,差异有统计学意义（P＜0.05）. 结论 MICA在肾肿瘤中高度表达,其表达高低与肾肿瘤的性质、肾癌分期及转移有关.

维吾尔族和汉族子宫颈癌患者病变组织主要组织相容性复合物Ⅰ类分子抗原呈递相关蛋白的表达

宫颈癌是妇科常见的恶性肿瘤之一，在新疆维吾尔族妇女宫颈癌发病率高，属于宫颈癌高发区之一，其发病率及病死率明显高于生活在同一环境的其他民族。主要组织相容性复合物（major histoeompatibility complex，MHC）是介导抗病毒T淋巴细胞免疫的关键分子，呈递细胞内产生的内源性抗原（如病毒感染细胞、肿瘤细胞的抗原）与MHC-Ⅰ类分子结合后最终呈递至细胞表面供T淋巴细胞识别，其组装和负载过程中需要一系列的相关蛋白参与，

内皮细胞表面主要组织相容性复合-Ⅰ类相关链A分子介导的NK细胞对其细胞毒作用的实验研究

目的观察内皮细胞表面主要组织相容性复合体-Ⅰ类相关链A（MICA）分子在NK细胞对其杀伤过程中的作用，并探讨其可能的机制。方法用10ng／ml MICA重组抗原对实验组人脐静脉内皮细胞（HUVEC）进行诱导培养48h，对照组加入等量磷酸盐缓冲液（PBS）。用流式细胞仪（FCM）检测内皮细胞表面MICA分子的表达情况。使用免疫磁珠方法及CD56阳性分选试剂盒分选NK细胞，并将NK细胞与诱导培养后的HUVEC共同培养10h。用荧光素进行染色，在荧光显微镜下观察死亡和存活HUVEC细胞数量，计算NK细胞对内皮细胞杀伤效率，用ELISA法测定细胞上清中的干扰素-γ（IFN-γ）和穿孔素水平。结果实验组HUVEC细胞表面MICA分子表达率为（32±5．6）％，对照组为（6．0±2．4）％。NK细胞对实验组HUVEC细胞的杀伤效率为（35．5±6．4）％，显著高于对照组的杀伤效率（12．6±3．2）％，（P=0．0087）；实验组HUVEC细胞上清IFN-γ和穿孔素水平显著高于对照组，两组差异均有统计学意义（P=0．0025，P=0．0078）。结论内皮细胞表面的MICA分子表达增加能够提高NK细胞对内皮细胞的杀伤效率；IFN-γ和穿孔素可能是发挥细胞毒作用的活性物质。

食管癌组织中主要组织相容性复合体-I类分子链相关蛋白A／B表达及其临床意义

目的研究食管癌组织中主要组织相容性复合体-I类分子链相关蛋白A／B（MICA／B）基因蛋白的表达情况，探讨其与食管癌患者临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学染色方法检测40例食管癌和癌旁组织中MICA／B蛋白的表达情况，并分析其与食管癌患者临床病理特征的关系。结果MICA／B蛋白在细胞质和细胞膜中呈阳性表达，MICA／B蛋白在食管癌组织中的阳性表达率为75．0％（30／40），在癌旁组织中呈阴性，二者比较差异有统计学意义（P〈0．001）。MICA／B蛋白表达与食管癌组织学分级有关（P〈0．05），与食管癌患者的年龄、性别、分期、浸润深度和淋巴结转移无关（均P〉0．05）。结论MICA／B蛋白表达可能在食管癌的发生发展中起重要作用，并可作为诊断食管癌的分子标志物。

肺炎支原体肺炎患儿血清MICA、OPN水平及其与反复呼吸道感染的相关性研究

目的探究肺炎支原体肺炎患儿血清主要组织相容性复合物Ⅰ链相关基因A(MICA)、骨桥蛋白(OPN)水平及其与反复呼吸道感染的相关性。方法选取该院2019年3月至2021年3月收治的肺炎支原体肺炎患儿106例作为研究组,另选取同期于该院进行体检的健康儿童106例作为对照组,根据肺炎支原体肺炎患儿是否发生反复呼吸道感染分为反复呼吸道感染发生组和反复呼吸道感染未发生组;使用全自动微生物鉴定系统和纸片扩散试纸进行病原菌检测以及耐药性试验;血清MICA、OPN水平检测采用酶联免疫吸附试验;采用多因素Logistic回归分析影响肺炎支原体肺炎反复呼吸道感染发生的危险因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清MICA、OPN单独及联合检测对肺炎支原体肺炎患儿发生反复呼吸道感染的预测价值。结果106例肺炎支原体肺炎患儿共分离出116株菌株,其中革兰阴性菌77株(66.38%),包括流感嗜血杆菌29株(25.00%),肺炎克雷伯菌17株(14.66%),鲍曼不动杆菌14株(12.07%),铜绿假单胞菌8株(6.90%),阴沟肠杆菌6株(5.17%),其他菌3株(2.59%);革兰阳性菌39株(33.62%),包括金黄色葡萄球菌16株(13.79%),表皮葡萄球菌10株(8.62%),肠球菌6株(5.17%),溶血葡萄球菌5株(4.31%),其他菌2株(1.72%)。流感嗜血杆菌耐药率较高的为头孢哌酮,占75.86%,肺炎克雷伯菌耐药率较高的为氨苄西林,占88.24%。16株金黄色葡萄球菌中,对红霉素耐药12株(75.00%),对环丙沙星耐药8株(50.00%),对四环素耐药6株(37.50%),对苯唑西林耐药4株(25.00%),对克林霉素耐药2株(12.50%),未发现对万古霉素和利奈唑胺耐药的金黄色葡萄球菌。研究组血清MICA、OPN水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。46例患儿发生反复呼吸道感染,60例患儿未发生反复呼吸道感染。反复呼吸道感染发生组使用药物不当比例,血清MICA、OPN水平均明显高于反复呼吸道感染未发生组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,MICA水平升高(95%CI:1.782~3.949)、OPN水平升高(95%CI:1.989~5.012)均为肺炎支原体肺炎发生反复呼吸道感染的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清MICA预测肺炎支原体肺炎反复呼吸道感染的曲线下面积(AUC)为0.899(95%CI:0.836~0.962),截断值为153.702 pg/mL,灵敏度为76.51%,特异度为87.24%。血清OPN预测肺炎支原体肺炎反复呼吸道感染的AUC为0.898(95%CI:0.835~0.960),截断值为101.231 pg/mL,灵敏度为78.29%,特异度为84.41%。二者联合检测预测肺炎支原体肺炎反复呼吸道感染的AUC为0.954(95%CI:0.918~0.989),灵敏度为88.35%,特异度为80.24%。二者联合检测预测肺炎支原体肺炎患儿发生反复呼吸道感染的AUC优于血清MICA、OPN各自单独预测的AUC(Z_(联合vs.MICA)=2.624、Z_(联合vs.OPN)=2.735,P<0.05)。结论肺炎支原体肺炎患儿血清MICA、OPN水平明显升高,二者与反复呼吸道感染密切相关。

黏膜相关恒定T细胞体外扩增的技术及其抗肿瘤特性的研究

黏膜相关恒定T(mucosal-associated invariant T cell,MAIT)细胞是参与抗菌免疫的重要效应细胞。在肿瘤的免疫治疗方面,MAIT细胞在机体抗肿瘤和免疫监视中发挥着重要作用,它不仅能直接杀伤肿瘤细胞,还能激活其他免疫效应细胞间接发挥抗肿瘤效应,因此它拥有着广阔的应用和发展前景。然而这些细胞的稀缺性和低效率的扩增阻碍了对其详细的分析和应用。研究MAIT细胞活化扩增方法,以期为临床治疗提供更多更高效的效应细胞,也为临床上应用MAIT细胞治疗肿瘤打下基础。该文就MAIT细胞体外扩增研究进展及其在抗肿瘤免疫治疗中的机制、作用与应用潜力予以综述。

北方汉族MICA基因遗传多态性及与HLA-B连锁不平衡研究

目的 了解MICA等位基因在中国北方汉族的分布及与HLA-B基因型的连锁关系。方法 用直接测序法对北方汉族224个标本的HLA-B和MICA基因的2—6外显子进行测序。用Arlequin软件统计分析2个位点间的连锁关系。结果 发现18个MICA的等位基因,其中MICA~*002(16.07%),MICA~*008(23.21%)和MICA~*010(21.65%)最为常见。MICA~*010-HLA-B~*46∶01,MICA~*045-HLA-B~*13∶01,MICA~*049-HLA-B~*51∶01有明显的连锁关系。结论 北方汉族人群呈现特异MICA等位基因库,MICA与HLA-B具有连锁关系。

miR-17-5p通过靶向抑制MICB表达降低肝癌细胞对NK细胞杀伤的敏感性

目的:探讨miR-17-5p在HCC细胞系HepG2细胞对NK细胞介导的细胞毒性敏感性中的调控作用。方法:使用含野生型MICB基因3'UTR序列、突变型MICB基因3'UTR序列、miR-17-5p mimic序列、miR-17-5p-NC序列、anti-miR-17-5p序列的质粒载体分别或共转染HCC细胞系HepG2,使用丙戊酸钠处理转染或未转染细胞。应用荧光素酶活性测定检测miR-17-5p对MICB的调控作用。应用实时荧光定量PCR检测细胞或组织中miR-17-5p及MICB mRNA表达情况,利用蛋白免疫印迹法检测MICB蛋白表达情况。对比转染质粒后各组细胞中miR-17-5p和MICB mRNA及蛋白的表达情况,分析Target Scan预测和荧光素酶活性测定结果、miR-17-5p与MICB蛋白在HCC组织中的表达及与临床病理特征的关系、miR-17-5p与MICB蛋白在HCC组织中表达的相关性,并对比各组MICB蛋白表达和NK细胞介导的细胞毒性、丙戊酸钠各组NK细胞毒性。结果:①与miR-17-5p-NC组相比,miR-17-5p-mimic组HepG2细胞中miR-17-5p表达水平较高,MICB mRNA和蛋白表达水平均较低(P <0. 05);与anti-miR-17-5p-NC组相比,anti-miR-17-5p组HepG2细胞中miR-17-5p表达水平均较低,MICB mRNA和蛋白表达水平均较高(P <0. 05);与miR-17-5p-NC+MICB 3'UTR-Wt组相比,miR-17-5p-mimic+MICB 3'-UTR-Wt组荧光素酶活性较低(P <0. 05)。miR-17-5p-NC+MICB 3'UTR-Mut组与miR-17-mimic+MICB 3'-UTR-Mut组的荧光素酶活性差异无统计学意义(P> 0. 05)。②与对应癌旁非肿瘤组织相比,miR-17-5p在HCC组织中的表达水平较高,而MICB蛋白表达水平较低(P <0. 05)。miR-17-5p和MICB蛋白的表达与肿瘤直径、远处转移、TNM分期、分化程度等临床病理特征有关(P <0. 05)。在HCC肿瘤组织中miR-17-5p与MICB蛋白表达水平呈明显负相关(P <0. 05)。③与miR-17-5p-NC组相比,miR-17-5p-mimic组NK细胞毒性、MICB蛋白表达水平均较低(P <0. 05);与miR-17-5p-mimic+MICB 3'UTR-Mut组相比,miR-17-5p-mimic+MICB-3'UTR-Wt共转染组中NK细胞毒性和MICB蛋白表达水平均较高(P <0. 05);与anti-miR-17-5p-NC组相比,anti-miR-17-5p组NK细胞毒性和MIBC蛋白表达均较高(P <0. 05)。④与丙戊酸钠+miR-17-5p-NC组相比,丙戊酸钠+miR-17-5p-mimic组细胞中MICB表达水平较低(P <0. 05)。在不同效靶比时,与Ctrl组相比,丙戊酸钠组NK细胞毒性较高(P <0. 05)。与丙戊酸钠+miR-17-5p-NC组相比,丙戊酸钠+miR-17-5p-mimic组NK细胞毒性较低(P <0. 05)。结论:miR-17-5p通过靶向MICB降低Hep G2细胞对NK细胞介导的细胞毒性敏感性,从而抑制NK细胞对肝癌细胞的毒性。

miR-17-5p靶向MICB减弱NK细胞对肝癌细胞的毒性作用

目的:探讨miR-17-5p在肝细胞癌(HCC)HepG2细胞对NK细胞介导的细胞毒性敏感性中的调控作用。方法:使用含野生型MICB基因3'UTR序列、突变型MICB基因3'UTR序列、miR-17-5p mimic序列、miR-17-5p-NC序列、anti-miR-17-5p序列的质粒载体分别或共转染HCC HepG2细胞,使用丙戊酸钠处理转染或未转染细胞。应用荧光素酶活性测定检测miR-17-5p对MICB的调控作用。应用实时荧光定量PCR或蛋白免疫印迹检测细胞或组织中miR-17-5p及MICB mRNA和蛋白表达情况。结果:(1)与miR-17-5p-NC组相比,miR-17-5p-mimic组HepG2细胞中miR-17-5p表达水平显著升高,MICB mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0. 05);与anti-miR-17-5p-NC组相比,anti-miR-17-5p组HepG2细胞中miR-17-5p表达水平均显著降低,MICB mRNA和蛋白表达水平均显著增加(P<0. 05)。与miR-17-5p-NC+MICB 3'UTR-Wt组相比,miR-17-5p-mimic+MICB 3'-UTR-Wt组荧光素酶活性显著降低(P<0. 05)。miR-17-5p-NC+MICB 3'UTR-Mut组与miR-17-mimic+MICB 3'-UTR-Mut组的荧光素酶活性差异无统计学意义(P>0. 05)。(2)与对应癌旁非肿瘤组织相比,miR-17-5p在HCC组织中的表达水平显著增加,而MICB蛋白表达水平显著降低(P<0. 05)。miR-17-5p和MICB蛋白的表达与肿瘤直径、远处转移、TNM分期、分化程度等临床病理特征有关(P<0. 05)。在HCC肿瘤组织中miR-17-5p与MICB蛋白表达水平呈明显负相关(P<0. 05)。(3)与miR-17-5p-NC组相比,miR-17-5p-mimic组MICB蛋白表达水平均显著降低(P<0. 05)。与miR-17-5p-mimic+MICB 3'UTR-Mut组相比,miR-17-5p-mimic+MICB-3'UTR-Wt共转染组中NK细胞毒性和MICB蛋白表达水平均显著增加(P均<0. 05)。与antimiR-17-5p-NC组相比,anti-miR-17组NK细胞毒性和MICB蛋白表达水平均显著增加(P均<0. 05)。(4)与丙戊酸钠+miR-17-5p-NC组相比,丙戊酸钠+miR-17-5p-mimic组细胞中MICB表达水平显著降低(P<0. 05)。在不同效靶比时,与Ctrl组相比,丙戊酸钠组NK细胞毒性显著增加(P<0. 05)。与丙戊酸钠+miR-17-5p-NC组相比,丙戊酸钠+miR-17-5p-mimic组NK细胞毒性显著降低(P<0. 05)。结论:miR-17-5p通过靶向MICB降低HepG2细胞对NK细胞介导的细胞毒性敏感性,从而抑制NK细胞对肝癌细胞的毒性。

MICA多态性与白血病易感性的关联研究

目的采用直接测序法对主要组织相容性复合物Ⅰ类链相关A基因(major histocompatibility complex classichain-related A,MICA)进行分型,了解MICA等位基因在正常人群、急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)、急性髓性白血病(acute myeloid leukemia,AML)、骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)患者中分布的差异。方法选取2016年北京市红十字血液中心167份白血病患者DNA样本(病例组)和224份正常人样本(正常对照组),对MICA基因2~6外显子进行测序分型,并判读结果。分析MICA等位基因频率,跨膜区GCT重复次数,MICA-129Met/Val在正常对照组和病例组间的差异。结果发现19个MICA等位基因,与正常对照组比较,大多数MICA等位基因在各组间频率的差异无统计学意义。但MDS组的MICA*010:01频率明显低于正常对照组(P<0.01),而MDS组的MICA*019:01频率明显高于正常对照组、ALL组和AML组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论MICA*010:01和MICA*019:01的分布在MDS患者和正常人群间不同,提示这两个等位基因可能与MDS的易感性相关。

MICA抗体与移植肾慢性失功的研究

目的 探讨肾移植术后患者抗主要组织相容性复合物I类相关链A基因（MICA）抗体与移植肾慢性失功的关系.方法 选择了1986年～2005年间在北京友谊医院接受肾移植的38例患者,男性32例,女性6例,年龄24～68岁,血肌酐和尿素氮水平高于正常值.采用MICA抗体流式筛查技术,于2009年7月检测MICA抗体和PRA抗体,38例肾移植患者PRA抗体均为阴性,而后观察一年后的肾功能变化.结果 38例肾移植术后群体反应性抗体阴性但血肌酐和尿素氮高于正常值的患者中有9例MICA抗体阳性,阳性率达23.68%.9例MICA抗体阳性患者均呈现MICA抗体多特异性.29例MICA抗体阴性患者,经过一年的治疗,7例患者肾功能基本恢复,2例患者恢复透析,20例患者肾功能基本未变.MICA抗体阳性的9例患者中有4例患者恢复透析,其MICA抗体均为强阳性;另5例患者肾功能基本未变,其MICA抗体4例为弱阳性,1例为阳性.MICA抗体阳性和MICA抗体阴性患者之间恢复透析的患者间差异有统计学意义（χ2=4.73,P〈0.025）.结论 高滴度MICA抗体是引起移植肾慢性失功的重要因素之一.

多发性骨髓瘤患者可溶性MICA和NK细胞NKG2D受体的检测

目的检测多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者血清可溶性主要组织相容性复合物Ⅰ类相关链A(soluble MICA,sMICA)和天然杀伤(NK)细胞表面NKG2D(natural-killer group 2,member D)受体表达的关系。方法 ELISA法检测38例MM患者和40例健康人对照的血清sMICA含量,流式细胞术检测外周血NK细胞表面NKG2D受体的表达。结果 MM患者血清sMICA为(458±207)pg/ml显著高于健康对照组(135±82)pg/ml(t=9.133,P<0.01);Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期MM患者血清sMICA(x-±s,pg/ml)分别为258±126、489±191和585±163,Ⅱ期和Ⅲ期均高于Ⅰ期患者(t分别为3.377和5.172,P均<0.01)。回归分析显示MM患者血清sMICA含量与外周血NK细胞表面NKG2D受体水平呈负相关(r=-0.749,P<0.01)。结论 MM患者血清sMICA含量变化与该病的发生及疾病活动性有一定关联。

结肠直肠癌患者围手术期NK细胞活化性受体NKG2D与其配体MICA/B的表达

目的观察结肠直肠癌(CRC)患者手术前后自然杀伤细胞(NK细胞)活化性受体NKG2D与其配体MICA/B的表达,探讨NKG2D-MIC系统与肿瘤逃避免疫监视的关系。方法流式细胞术检测45例CRC患者和35例健康体检者(对照组)外周血NK细胞活化性受体NKG2D的表达,组织MICA/B的表达;ELISA检测血清MICA(sMICA)的浓度。结果 CRC组术前NKG2D、MICA/B的表达均降低,sMICA浓度增高,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。术后NKG2D的表达无显著增高,sMICA浓度无显著降低,与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 CRC患者血清高水平的sMICA,抑制了NKG2D-MIC介导的抗肿瘤免疫,导致CRC患者NK细胞抗肿瘤免疫低下。NKG2D低表达,sMICA高浓度的情况术后短期内不能迅速逆转。

miR-10b介导NKG2D调节脑胶质瘤细胞免疫效应的实验研究

目的:观察微小核糖核酸-10b(miR-10b)对脑胶质瘤细胞免疫效应的调节作用并探讨其作用机制。方法:取人脑胶质瘤细胞U251进行培养和传代,获得处于对数生长期的细胞。按照1.0×105个/ml浓度制备细胞悬液,并设置对照组、过表达组、低表达组、空白组,每组6个复孔。对照组、过表达组、低表达组分别采用脂质体转染法转染阴性对照、miR-10b模拟物、miR-10b抑制剂,空白组予以等量无菌生理盐水。分离和培养1例健康志愿者外周血自然杀伤(NK)细胞。MTT法检测不同效靶比时NK细胞的杀伤活性;流式细胞仪检测各组NK细胞表面NK细胞激活受体(NKG2D)表达,并检测各组人脑胶质瘤细胞U251表面主要组织相容性复合物Ⅰ链相关基因A(MICA)、UL16结合蛋白2(ULBP2)、UL16结合蛋白3(ULBP3)表达。结果:对照组、过表达组、低表达组转染效率分别为(93.55±2.05)%、(95.67±3.14)%、(94.18±3.26)%;与对照组和空白组相比,过表达组miR-10b表达升高,低表达组miR-10b表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05),且对照组和空白组miR-10b表达差异无统计学意义(P>0.05);与对照组和空白组相比,过表达组NK细胞不同效靶比杀伤活性均降低、NKG2D表达降低,低表达组NK细胞不同效靶比杀伤活性均增高、NKG2D表达增高,差异均有统计学意义(P<0.05),各组NK细胞杀伤活性均随效靶比增加而增高,差异均有统计学意义(P<0.05),且对照组与空白组相比,相同效靶比NK细胞杀伤活性、NKG2D表达差异均无统计学意义(P>0.05);与对照组和空白组相比,过表达组人脑胶质瘤细胞U251表面MICA、ULBP2、ULBP3表达均降低,低表达组人脑胶质瘤细胞U251表面MICA、ULBP2、ULBP3表达均增高,差异均有统计学意义(P<0.05),且对照组与空白组人脑胶质瘤细胞U251表面MICA、ULBP2、ULBP3表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:抑制miR-10b表达能够增加NK细胞表面NKG2D和人脑胶质瘤细胞U251表面MICA、ULBP2、ULBP3表达,增强NK细胞对人脑胶质瘤细胞U251的杀伤活性。