酿酒酵母孢子“微胶囊”表面展示乙醛脱氢酶以及检测乙醛的应用

乙醛是对人体有毒的化合物,乙醛脱氢酶(acetaldehyde dehydrogenase,ALDH)能将乙醛氧化为无毒的乙酸,同时将NAD(P)+转化为NAD(P)H。目前检测乙醛的方法繁琐且耗时费力,该研究采用酿酒酵母孢子“微胶囊”表面展示热带假丝酵母(Candida tropicalis)LBBE-W1来源的乙醛脱氢酶,建立一种新颖快速检测乙醛的方法。首先,基于蛋白质免疫印迹与荧光结果证实ALDH能够在孢子中表达且定位在孢子壁上。然后,测定了孢子表面展示ALDH与游离ALDH的酶学性质。结果显示,孢子表面展示ALDH和游离酶的最适温度与pH值分别为40℃和9.0;与游离酶相比,孢子表面展示ALDH具有更高的活性,以及更佳的温度与pH稳定性。此外,孢子表面展示ALDH对十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)、蛋白酶K具有更强的耐受性;孢子表面展示ALDH与游离乙醛脱氢酶的最适底物都是乙醛,并且孢子表面展示ALDH具有良好的重复使用性能。最后,将孢子表面展示ALDH作为生物传感器检测乙醛,结果表明在0~500μmol/L的乙醛浓度范围内具有良好的线性关系,其R2值为0.9992。该研究成功构建一种新颖的生物传感器,为乙醛的检测提供一种新的方法。

气相色谱-串联质谱法测定到手香中四聚乙醛残留量

建立气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)法检测到手香中四聚乙醛的残留量。到手香样品粉碎后采用1%乙酸水溶液+乙腈(体积比10∶15)提取,经HLB SPE固相萃取小柱净化,DB-5MS色谱柱分离,外标法定量。结果表明,在质量浓度0.01~1.00 mg/L,方法线性关系良好,相关系数为0.9997。在质量分数0.006~0.060 mg/kg,方法平均回收率为88.13%~93.35%,相对标准偏差(RSD)为0.81%~2.19%(n=6)。四聚乙醛检出限为0.002 mg/kg,定量限为0.006 mg/kg。此方法简便快捷、灵敏度高、稳定性好,适用于到手香中四聚乙醛残留量的检测。

乙醛与溴水反应的创新实验设计

人教版高中化学选择性必修3《有机化学基础》第三章第三节“醛酮”中有乙醛与新制氢氧化铜及银氨溶液的反应实验,学生在学习乙醛的还原性时,会对乙醛使溴水褪色的原因产生困惑,如搞不清是发生什么类型的反应。为此,基于已有文献实验方案进行创新设计,借助pH数字传感器设计探究乙醛与溴水反应的创新实验,解答学生的疑问。

臭氧化法制备N-Boc-(甲氨基)乙醛

以N-甲基烯丙胺和二碳酸二叔丁酯为原料,在乙醇中缩合得到N-Boc-甲基烯丙胺,再以乙酸乙酯为溶剂经臭氧臭氧化,用NaHSO_(3)还原分解,经萃取、蒸馏,制备N-Boc-(甲氨基)乙醛。采用L16(45)正交实验确定了最优臭氧化温度为5~10℃、反应时间为3 h、臭氧流量为0.04 m^(3)/h,粗产物用乙醚萃取,获得目标产物收率78.7%,纯度99.2%(HPLC),并用IR、^(1)H NMR、^(13)C NMR和MS表征了产物的结构。

表没食子儿茶素没食子酸酯与L-茶氨酸对乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶活性的体外协同作用

目的探究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)与L-茶氨酸对乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase,ADH)和乙醛脱氢酶(acetaldehyde dehydrogenase,ALDH)活性的体外协同作用。方法设置不同浓度及组分,以0μg/mL实验组为对照,先后进行单因素实验和最优组合验证实验,通过对ADH、ALDH活性的检测,确认EGCG、L-茶氨酸不同剂量的解酒效果并探究其最佳配比。结果单因素实验中,样品质量浓度为200、300μg/mL实验组相较于0μg/mL浓度组,随着EGCG和L-茶氨酸的添加,ADH和ALDH活性显著高于空白组(P<0.05);最优组合验证实验中,11组不同配比组合物对ADH和ALDH活性均具有促进作用,且协同组比单因素组激活效果要更好。其中,当配比组合物为7:3时,ADH、ALDH的活性最高。结论EGCG、L-茶氨酸解酒组合物最佳配比为7:3时ADH与ALDH活性最高,研究结果为EGCG、L-茶氨酸组合物用于抗醉酒药物研发提供科学依据。

松材线虫乙醛脱氢酶家族生物信息学分析

为探究乙醛脱氢酶(ALDH)在松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)发育过程中的功能,通过对松材线虫基因组分析获得24个乙醛脱氢酶家族成员,随后根据生物信息学及基因表达模式进行理化性质、蛋白结构及松材线虫生长发育过程中表达水平分析。结果表明:乙醛脱氢酶基因在松材线虫的6条染色体上均有分布。拓扑分析显示,大部分乙醛脱氢酶基因位于细胞内,基因结构分析显示,乙醛脱氢酶基因由4~11个外显子组成。外显子-内含子结构在进化上保持高度保守规律,这种保守性与氨基酸序列多态性相符合,并且在每一个外显子上,都存在特定的密码子偏好性。基因表达模式分析发现,Bx-aldhs广泛参与松材线虫发育阶段。不同发育阶段的基因表达数据显示,Bx-aldh13和Bx-aldh14主要参与松材线虫卵发育;Bx-aldh9、Bx-aldh11、Bx-aldh16和Bx-aldh21主要与线虫抵御并适应不良生存环境有关。

乙醛不能使溴的四氯化碳溶液退色吗

综合分析近期文献中有关乙醛能否使溴的四氯化碳溶液退色的研究与表述。通过实验验证了乙醛能使溴的四氯化碳溶液退色,打破了高中教学中对于这部分知识的原有认知。通过验证反应过程中产生的气体,以及改用甲醛进行对比实验,确认了乙醛与溴之间反应的基团,并进一步探讨了其反应机理。从实验和理论两个方面证实乙醛可以使溴的四氯化碳溶液退色。

同时测定水中乙醛、丙烯醛、丙烯腈的方法研究

分别建立了直接进样-气相色谱法与吹扫捕集-气相色谱/质谱法同时测定水中乙醛、丙烯醛、丙烯腈的方法。比较了两种方法测定水中3种化合物的方法性能和适用性,考察了4种不同保存条件对3种化合物测定的影响。结果表明,直接进样-气相色谱法测定3种化合物的校准曲线相关系数均大于0.997,检出限为0.02~0.05 mg/L,加标回收率为96.7%~112%,相对标准偏差为1.8%~6.1%;吹扫捕集-气相色谱/质谱法测定3种化合物的校准曲线相关系数均大于0.999,检出限均为0.5μg/L,加标回收率为95.6%~107%,相对标准偏差为1.2%~3.3%。不同保存条件实验结果显示,用盐酸调节水样pH≤2时的保存条件为最优,乙醛、丙烯醛、丙烯腈保存7 d浓度变化率分别为8.1%、7.3%、7.2%。在此保存条件下,两种方法测定地表水样品加标回收率为88.7%~110%,相对标准偏差为0.41%~5.85%;地下水样品加标回收率为86.3%~110%,相对标准偏差为0.70%~5.65%。直接进样-气相色谱法对仪器配置要求低,测定所需的样品量较少,但该方法的检出限比吹扫捕集-气相色谱/质谱法高出两个数量级。吹扫捕集-气相色谱/质谱法灵敏度更高,检出限更低,定性定量准确可靠,可满足地表水及地下水中痕量乙醛、丙烯醛、丙烯腈的监测需求。

顶空-气相色谱法与吹扫捕集-气相色谱法测定水中乙醛、丙烯醛、丙烯腈和吡啶的研究

建立了顶空-气相色谱法和吹扫捕集-气相色谱法测定水中乙醛、丙烯醛、丙烯腈、吡啶的方法。通过色谱条件、顶空条件和吹扫条件的参数优化,采用氢火焰离子化检测器,外标法定量。结果表明,顶空-气相色谱法和吹扫捕集-气相色谱法均能完全分离乙醛、丙烯醛、丙烯腈、吡啶,两种方法都有良好的线性关系,相关系数均大于0.999。顶空-气相色谱法的检出限为0.01~0.03mg/L,回收率为82.0%~113%,精密度为2.8%~7.1%。吹扫捕集-气相色谱法的检出限为0.002~0.008mg/L,回收率为87.8%~106%,精密度为2.3%~6.6%。在实际样品检测过程中,可根据实验室的配置及样品的实际特性来选择合适的分析方法。

气相色谱法测定水中三氯乙醛、吡啶和环氧氯丙烷

本文采用顶空气相色谱法(ECD)测定三氯乙醛、顶空气相色谱法(FID)测定吡啶、吹扫气相色谱法(ECD)测定环氧氯丙烷,该方案预处理时间短、灵敏度高、对环境友好,准确可靠,实用性强,通过仪器配置的交互使用,快速分析三个独立指标,进一步提高环境监测分析工作效率。

高效液相色谱-串联质谱法同时测定小白菜中甲氨基阿维菌素和四聚乙醛的残留量

采用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)建立同时检测甲氨基阿维菌素和四聚乙醛在小白菜中的残留分析方法。样品经乙腈溶液提取,NaCl盐析,无水MgSO_(4)、PSA净化后,采用正离子扫描(电喷雾离子源),MRM(多反应监测)模式下,外标法定量。结果表明,在0.002~0.5μg/mL范围内甲氨基阿维菌素和四聚乙醛质量浓度与其响应值之间呈现出良好的线性关系(R2>0.99)。当添加浓度为0.02~20 mg/kg时,甲氨基阿维菌素和四聚乙醛在小白菜中的平均回收率为81%~101%,相对标准偏差为0.5%~2.9%,符合残留分析的基本要求,说明该方法适用于甲氨基阿维菌素和四聚乙醛在小白菜等环境介质中的残留检测。

乙醛脱氢酶2调控巨噬细胞M2型极化促进创面愈合

目的验证乙醛脱氢酶2(aldehyde dehydrogenase 2,ALDH2)在创面愈合中的作用并探讨其分子机制。方法构建小鼠全层皮肤切除模型,随机分为对照组和Alda-1(ALDH2激动剂)组,观察创面愈合情况并检测创面组织ALDH2活性。采用Masson染色观察创面胶原纤维含量,免疫组化染色检测ALDH2和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)水平,免疫荧光染色检测Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)表达和F4/80^(+)、iNOS^(+)、CD206^(+)细胞数。体外实验采用白介素4(interleukin-4,IL-4)诱导RAW264.7细胞M2型极化,分别用Alda-1和ALDH2抑制剂CVT-10216处理细胞。流式细胞仪检测F4/80^(+)CD206^(+)细胞比例,酶联免疫分析测定细胞上清中促炎因子和抗炎因子水平,Western印迹法检测AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达。结果与对照组相比,Alda-1组小鼠创面愈合率显著提高,创面的Col-Ⅰ、Col-Ⅲ及α-SMA表达增多;F4/80^(+)细胞差异无统计学意义,i NOS^(+)细胞显著减少,CD206^(+)细胞显著增多。体外实验结果显示,与IL-4组相比,IL-4^(+)Alda-1组F4/80^(+)CD206^(+)细胞比例、抗炎因子和p-AKT、p-m TOR蛋白表达显著升高,促炎因子表达降低;IL-4^(+)CVT-10216组F4/80^(+)CD206^(+)细胞比例、抗炎因子和p-AKT、p-mTOR蛋白表达显著降低,促炎因子表达升高。结论ALDH2通过AKT/mTOR通路诱导巨噬细胞M2型极化,促进小鼠创面愈合。

乙醛脱氢酶2在高糖诱导神经元损伤中的作用

目的 论证乙醛脱氢酶2(ALDH2)在高糖诱导神经元损伤中的作用.方法 采用体外高糖培养的HT-22神经元细胞模型,利用ALDH2的激动剂Alda-1,探索ALDH2对体外高糖培养神经元的作用.首先探索了ALDH2在不同浓度和不同处理时间的表达规律,然后利用Alda-1处理高糖培养的HT-22神经元细胞,通过TUNEL、Hoechst-PI染色、检测LDH表达评价神经元损伤情况.最后检测ROS、MDA、SOD、GSH-Px、IL-1β和IL-18,评价氧化应激和神经炎症情况.结果 高糖可以抑制ALDH2表达,且呈浓度和时间依赖性.上调ALDH2可抑制神经元凋亡,Alda-1可以减少Hoechst+/PI+细胞数量及程序性坏死标志物RIP和MLKL的表达(P<0.05).Alda-1可以抑制神经元氧化应激和神经炎症.结论 ALDH2可通过抑制程序性死亡、氧化应激和神经炎症发挥神经元保护作用.

关于酯化水温度对乙醛装置分离效果的研究

为了降低聚酯酯化反应和缩聚反应酯化水的化学需氧量(COD),节约处理废水成本,建立了乙醛回收装置,回收酯化水中的乙醛和乙二醇。试验发现,酯化水温度的变化对乙醛装置分离效果影响较为明显,通过调整温度,提高了乙醛和乙二醇回收量,每年可多回收50 t乙醛和90 t乙二醇。

有机相中乙醛对脂肪酶催化酯交换反应的影响研究

以戊二醛活化后的聚脲多孔材料为载体固定荧光假单胞菌脂肪酶,将得到的固定酶用于催化(R,S)-1-苯乙醇和乙酸乙烯酯酯交换反应,反应过程中副产物乙醛对脂肪酶的催化活性和立体选择性会产生抑制作用。考察了乙醛存在下乙醛浓度、反应溶剂、反应温度对酶催化能力的影响。结果表明,乙醛存在下脂肪酶的催化活性和选择性受到明显抑制。当乙醛浓度为0.025 mol/L时,以正己烷为溶剂,40℃下利用固定酶催化(R,S)-1-苯乙醇与乙酸乙烯酯的酯交换反应,此时酶的催化活性和选择性受到的抑制最小。重复使用5次后,体系转化率由第一次49.3%下降至19.4%,对映体选择率下降至26%,表明乙醛的存在加速了酶活性的损失。

气相色谱法测定水中三氯乙醛的方法研究

三氯乙醛国标方法中现行有效的顶空-气相色谱间接测定法前处理时间为2.5 h,分析效率低,不适合大批量分析样品。使用自动顶空进样器,对平衡温度、平衡时间进行优化,建立了适合本实验分析三氯乙醛的方法。样品仅需在80℃的温度下平衡15 min即可进入气相色谱分析,大大缩短了前处理时间。方法线性范围为5~50μg/L,相关系数R≥0.9996,加标样品的相对标准偏差为1.86%~3.14%,平均回收率为95.5%~109%。该方法具有前处理时间短、灵敏度高等特点,解决了样品前处理时间长的问题。

吹扫捕集-气相色谱法和顶空-气相色谱法测定水中乙醛、丙烯醛和丙烯腈的比较

建立了吹扫捕集-气相色谱法和顶空-气相色谱法测定水中乙醛、丙烯醛和丙烯腈的分析方法。本文分别对两种方法的谱图、分离度、线性范围、方法检出限、精密度和加标回收率等进行了比较。吹扫捕集-气相色谱法的精密度范围为2.3%~4.5%;加标回收率范围为90.1%~109.0%。顶空-气相色谱法的精密度范围为1.4%~3.8%;加标回收率范围为90.6%~106.2%。两种方法均能完全分离各目标化合物,具有良好的线性,相关系数均大于0.999,吹扫捕集-气相色谱法的检出限更低于顶空-气相色谱法。结果表明,两种方法均能准确测定水中乙醛、丙烯醛和丙烯腈,吹扫捕集-气相色谱法更适合低浓度地表水和地下水的分析,顶空气相色谱法更适合高浓度、基体复杂废水的分析。

便携式顶空-气相色谱/质谱现场测定水环境中的三氯乙醛方法研究

调研文献发现,还未有使用便携式顶空-气相色谱/质谱联用仪进行现场测定水环境中的三氯乙醛。本文利用正交实验得到了样品前处理的最优条件,建立了适合现场应急、例行监测的分析测试方法。本方法检出为0.03μg/L,线性范围0.1~10.0μg/L,线性相关系数为0.9995,0.20μg/L、1.00μg/L、5.00μg/L空白加标样品平均回收率为97.9%~102.4%。总结了分析测试中的技术难点及解决措施,该方法具有分析时间短、线性范围宽、检出限低的特点,可作为现场应急、常规的测试分析方法。

“五线活动导学”课堂教学模式的应用研究——以“乙醛”教学为例

“五线活动导学”课堂教学模式是指由教师创设特定的情境,通过活动促使学生主动参与问题的分析和解决,在探索和体验中形成学科核心素养的教学模式。文章以人教版高中化学选择性必修3中的“乙醛”教学为例,对“五线活动导学”课堂教学模式进行应用研究和效果测评,以期为培养学生的化学学科核心素养提供有效途径。

乙醛酸化学镀铜在孔金属化中的问题与对策

甲醛是化学镀铜中最为常见的还原剂,可是由于其强烈的挥发性和致癌性已经在印制电路板行业中越来越不受欢迎,而乙醛酸具有低毒、难挥发等优点越来越受到重视。然而以乙醛酸为还原剂制备的化学镀铜液,却有反应温度高、分解速度快和沉淀多等问题。针对上述问题,本文通过添加加速剂降低了乙醛酸化学镀铜反应温度;添加保护剂降低乙醛酸分解速度;另将常用的pH值调节剂从NaOH改成KOH从而减少了沉淀数量。最后,文章通过电阻率测试和扫描电镜等方式全面表征了铜层质量,证明以乙醛酸为还原剂的化学镀铜体系所制备铜层完全达到了印制电路板行业标准。