乳酸片球菌对初生肉仔鸡盲肠菌群结构的影响

【目的】为探究乳酸片球菌对初生肉仔鸡盲肠菌群结构的影响。【方法】从1日龄开始在饲料中添加乳酸片球菌对肉仔鸡进行饲喂,在第21天和第42天,取肉仔鸡盲肠内容物,通过对盲肠肠道微生物16S rDNA基因V3+V4区高通量测序,检测饲喂乳酸片球菌后对初生肉仔鸡盲肠菌群结构的变化。【结果】各组42 d时的Chao1指数、Ace指数、Shannon指数和Simpson指数均高于21 d时其指数,21 d时各试验组的OTU数目、Chao1指数、Ace指数、Shannon指数和Simpson指数均高于对照组;通过PCoA分析和NMDS分析发现,各组在21 d时散在分布聚类,42 d时各中部明显聚类;试验组与对照组相比降低了变形菌门的相对丰度,提高了厚壁菌门、拟杆菌属、巨细胞菌属、另枝杆菌的相对丰度;通过LEfSe分析显示21 d和42 d时各组存在差异微生物,可见不同试验组肉仔鸡肠道微生物在结构和组成上相对稳定但存在差异。【结论】饲喂乳酸片球菌可以提高初生肉仔鸡盲肠菌群的丰度和多样性,在一定程度上促进有益菌群数量的增加。

乳酸片球菌J1产胞外多糖发酵条件优化

乳酸菌(Lactic acid bacteria,LAB)能够合成具有多种功能特性的胞外多糖(Exopolysaccharides,EPS),其通常具有改善乳制品的风味,抗癌、抗氧化和益生特性等功能。然而LAB EPS的产量较低,限制了EPS的工业化生产应用。为了提高EPS的产量,促进其商品化发展,优化菌株产EPS的发酵条件至关重要。本研究利用单因素试验的方法优化乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)J1发酵产EPS的最佳条件。研究表明:菌株在70 g/L蔗糖、14 g/L牛肉膏、3.5 g/L柠檬酸铵、4 g/L无水乙酸钠、4.00%接种量、培养温度35℃、pH 5.5和160 r/min摇床转速条件下,EPS产量最高,为(72.66±0.02)g/L。本研究通过单因素实验显著提高了P.acidilactici J1的EPS产量,是优化前的4.76倍,为乳酸菌EPS的工业化大规模生产奠定了坚实的理论基础。

乳酸片球菌CCFM6432通过缓解大脑炎症改善小鼠抑郁行为

乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)是一类高产乳酸的益生菌,该文旨在探究乳酸片球菌CCFM6432对小鼠抑郁症状的缓解作用及其作用机制。该研究通过为期4周的慢性不可预知温和刺激建立抑郁小鼠模型,并给予小鼠益生菌(乳酸片球菌CCFM6432和对照菌株FXJKS25M4)干预治疗。肠道菌群和代谢物分析结果显示,相比于模型组和对照组,CCFM6432干预后能显著调节肠道代谢物乳酸、鸟嘌呤和腺嘌呤等的含量,降低肠道致病菌的丰度,并提高了短链脂肪酸合成菌属毛螺菌科(Lachnospiraceae)的丰度,有助于恢复肠道屏障损伤,逆转血清中脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)异常升高。此外,CCFM6432还能下调脑部TLR4/NF-kB信号通路的受体蛋白和促炎因子的异常表达,从而抑制海马中小胶质细胞的过度活化。该研究揭示了CCFM6432通过调节特定肠道代谢物来抑制肠道致病菌的生长,从而缓解神经炎症导致的抑郁症状,并为抑郁症治疗方法以及肠-脑轴信号通路探索提供新的见解。

植物淀粉对乳酸片球菌微胶囊冻干保护及储存性能的影响

【目的】研究马铃薯淀粉和玉米淀粉对冷冻干燥过程中微胶囊乳酸片球菌活性的保护作用和对乳酸片球菌耐酸耐胆盐性、储藏稳定性的影响,为抗性淀粉的开发利用及益生菌保护技术开拓思路和提供理论依据。【方法】选用3.0%海藻酸钠、0.8%壳聚糖制备3组微胶囊:对照组、试验1组(T1)和试验2组(T2)。对照组以2%甘油作为冻干保护剂,T1组以2%甘油和10%马铃薯淀粉作为冻干保护剂,T2组以2%甘油和10%玉米淀粉作为冻干保护剂。分别对微胶囊的外貌形态、机械强度、包埋率、载菌量、体外人工胃肠道耐受性及储藏性能进行评价。【结果】(1)T1和T2组微胶囊包埋率均显著高于对照组(P<0.05)。(2)T1和T2组微胶囊冻干保护率达到70%以上,均显著高于对照组(P<0.05),其中T2组冻干保护率较高,为77.66%。(3)T1与T2组微胶囊的粒径、机械强度、载菌量均显著高于对照组(P<0.05)。(4)体外人工胃肠液耐受性试验结果显示,T1和T2组微胶囊在含胃蛋白酶的模拟胃液中的存活率均高于对照组,2 h时差异显著(P<0.05);在模拟肠液中,3组乳酸片球菌微胶囊均在10 min后开始迅速释放,1 h时,基本崩解完全;T1与T2组乳酸片球菌微胶囊在胆盐环境下较稳定,4 h时乳酸片球菌存活率显著高于对照组(P<0.05);(5)3组微胶囊25℃储藏8周后,T1和T2组微胶囊乳酸片球菌存活率显著高于对照组(P<0.05),其中T2组微胶囊乳酸片球菌存活率较高,为52.29%;-20℃储存8周后,T1和T2组微胶囊乳酸片球菌存活率均高于对照组,但差异不显著(P>0.05)。【结论】通过微囊化技术和添加植物淀粉作为保护剂的措施可提高乳酸片球菌微胶囊冻干保护率及储藏性能,其中玉米淀粉对乳酸片球菌微胶囊冻干保护及储存性能更好。本研究结果可为开发海藻酸钠、壳聚糖为壁材的乳酸片球菌微胶囊研究提供参考。

乳酸片球菌对肥育猪生长性能及肠道抗氧化能力、形态结构和菌群的影响

本试验旨在研究乳酸片球菌对肥育猪生长性能及肠道抗氧化能力、形态结构和菌群的影响。选取48头体重为(62.46±1.20)kg的"杜×长×大"肥育猪,将其随机分为2组,每组4个重复,每个重复6头猪(公母各占1/2)。对照组饲喂基础饲粮,试验组饲喂基础饲粮中添加0.1 g/kg乳酸片球菌制剂(1.0×10^(10)CFU/g)的试验饲粮。试验期56 d。结果表明,与对照组相比:1)饲粮添加乳酸片球菌对肥育猪平均日采食量、平均日增重、料重比无显著影响(P>0.05)。2)饲粮添加乳酸片球菌显著提高了肥育猪十二指肠谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、空肠总抗氧化能力(T-AOC)和总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性以及回肠过氧化氢酶(CAT)活性(P<0.05)。3)饲粮添加乳酸片球菌显著降低了肥育猪十二指肠隐窝深度(P<0.05),显著提高了黏膜厚度(P<0.05)、肠壁厚度(P<0.05)以及绒毛高度/隐窝深度(P<0.05);显著降低了空肠隐窝深度(P<0.05),显著增加了绒毛高度/隐窝深度(P<0.05);显著增加了回肠绒毛高度(P<0.05)。4)饲粮添加乳酸片球菌显著增加了肥育猪空肠乳酸菌数量、定植抗力(P<0.05),显著降低了大肠杆菌数量(P<0.05)。由此可见,饲粮添加0.1 g/kg乳酸片球菌(1.0×10^(10)CFU/g)能改善肥育猪肠道菌群和肠道形态结构,增强肠道抗氧化能力,进而促进肥育猪的肠道健康。

乳酸片球菌发酵液中主要有机酸及其抑菌性研究

为研究乳酸片球菌发酵产生的有机酸与其抑菌活性之间的相关性,采用spot-on-lawn法及琼脂扩散法研究其抑菌活性,利用HPLC分析发酵液主要有机酸组分。结果表明:乳酸片球菌以葡萄糖作为发酵碳源时发酵能力最强,且主要抑菌物质为有机酸;乳酸、乙酸与总酸含量与抑菌活性存在正相关性(P<0.05)。乳酸片球菌发酵液有机酸组分与抑菌活性的研究为开发新型生物防腐剂的潜在菌株的筛选提供依据。

乳酸片球菌对生长猪生长性能、粪便菌群、血清生化和免疫指标的影响

本试验旨在研究乳酸片球菌对生长猪生长性能、粪便菌群、血清生化和免疫指标的影响。选取平均体重为(23.21±0.84) kg的"长×大"二元杂交生长猪140头,随机分为对照组和试验组,每组5个重复,每个重复14头。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中添加2.70×10^9CFU/kg乳酸片球菌冻干制剂。预试期为5 d,正试期为34 d。结果显示:与对照组相比,1)试验组生长猪的平均日增重提高了5.64%(P<0.05),料重比降低了4.62%(P<0.05);2)试验组生长猪粪便中乳酸菌数量显著提高(P<0.05),大肠杆菌和金黄色葡萄球菌数量显著降低(P<0.05);3)乳酸片球菌能够提高生长猪粪便菌群的物种丰富度,增加厚壁菌门及普雷沃菌属、巨球菌属和乳酸杆菌属的比例;4)试验组生长猪血清中总蛋白、球蛋白、免疫球蛋白G和免疫球蛋白A含量分别提高了13.45%(P<0.05)、14.91%(P<0.05)、20.91%(P<0.05)和44.00%(P<0.05),血清尿素氮、结合珠蛋白含量分别降低了19.46%(P<0.05)和38.71%(P<0.05)。结果表明,饲粮中添加乳酸片球菌(添加剂量为2.70×10^9CFU/kg)能够改善生长猪的肠道菌群组成,增强机体免疫功能,从而提高生长猪的生长性能。

从酸白菜中分离出一株产细菌素的乳酸片球菌

本试验从酸白菜中分离出一株有抑制单核细胞增多症李氏杆菌作用的菌株,经鉴定为乳酸片球菌,还对植物乳杆菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌等革兰氏阳性细菌有抗菌作用。该抗菌物质对蛋白水解酶敏感、对过氧化氢酶不敏感、耐热、在较宽的pH范围内保持活性。在排除是有机酸和过氧化氢后,初步认为该菌产生的抗菌物质为抗菌肽,即细菌素。

乳酸片球菌L-乳酸脱氢酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

与其它微生物相比,用大肠杆菌进行发酵生产乳酸有许多优势,但大肠杆菌没有L乳酸脱氢酶基因,不能利用糖发酵生产L乳酸.本文采用PCR技术,以乳酸片球菌(Pediococcusacidilactici)基因组DNA为模板,克隆得到L乳酸脱氢酶(Llactatedehydrogenase)基因,将该基因的ORF连接到表达质粒pET22b(+),获得重组质粒pETldhL.将pETldhL质粒转化大肠杆菌BL21株,实现了ldhL基因的表达;对含有ldhL基因的重组菌株进行表达研究,在30℃以IPTG诱导8h后,SDSPAGE分析可见明显特异性条带,酶活力达到6.49u/mL,是野生菌酶活力(2.82u/mL)的2.3倍.对重组表达的L乳酸脱氢酶生物学特性研究显示,它们的最适反应温度为27～30℃,最适反应pH为5.0～5.3.

产片球菌素的乳酸片球菌培养条件的优化

通过正交实验对从泡菜中分离出的一株乳酸片球菌进行发酵条件的研究,结果发现乳酸片球菌素的产量除了与菌株自身性质有关外,其他发酵条件对片球菌素的产量和活性也有影响,包括培养基组分、培养基pH、培养温度以及培养时间,实验确定了产片球菌素的最佳培养基成分、最佳培养pH、最佳培养温度和最佳培养时间。

乳酸片球菌的分离鉴定与益生功能的初步研究

为了获取作为微生态制剂的候选菌株。本研究从鸭的空肠内容物中分离到22株乳酸菌,并对菌株ZW001进行研究。通过形态、生理生化、16SrDNA序列分析及系统发育树构建,鉴定为Pediococcus acidilactic(i乳酸片球菌)。而且从耐酸、耐胆盐、耐高温及抑菌方面,研究其益生功能。结果表明:乳酸片球菌ZW001具有较好的抗逆性和抑菌特性。总之,菌株ZW001可以作为益生菌的候选菌株应用于饲料工业。

乳酸片球菌和戊糖片球菌混合发酵制备鸭肉香肠的工艺优化

[目的]优化出乳酸片球菌和戊糖片球菌混合发酵制备鸭肉香肠的工艺,并制定产品质量标准。[方法]首先研究影响乳酸片球菌和戊糖片球菌混合发酵制备鸭肉香肠的几个因素,包括菌种配比、接种量、发酵温度、发酵时间、烘烤温度和烘烤时间,并通过Box-Behnken试验设计与分析优化最佳工艺参数;然后在上述基础上制定产品质量标准。[结果]乳酸片球菌和戊糖片球菌混合发酵制备鸭肉香肠的最佳工艺条件为菌种配比3∶1,接种量8.87m L/kg,发酵温度35℃,发酵时间20.02h,烘烤温度70.7℃和烘烤时间5h;此时感官得分为94.0。[结论]乳酸片球菌和戊糖片球菌混合发酵可用于制备鸭肉香肠,该产品口味独特、营养丰富且风味良好。

新疆酸马奶中乳酸片球菌所产细菌素05-8的理化特性及分子量确定

首先对分离自新疆酸马奶中的乳酸片球菌所产细菌素05-8的理化特性进行研究,通过酶敏感性实验,确定乳酸片球菌05-8所产抑菌物质为细菌素,该细菌素在100℃90min和121℃10min具有较好的热稳定性,同时在pH值为2～8的范围内有抑菌活性。当细菌生长到稳定期时,达到最大产量1280AU,最佳收获期为13h。以单核细胞增生李斯特氏菌为指示菌,确定其对细菌的作用方式为杀死细菌,此外,还能抑制戊糖片球菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌La4、短乳杆菌AS1.12等革兰氏阳性菌。然后通过Tricine-SDS-PAGE活性抑菌实验测定此细菌素的分子量在14.4ku以下,初步确定细菌素05-8为Ⅱa类细菌素。

16S rRNA鉴定乳酸片球菌分离株

根据乳酸片球菌的16S rRNA基因序列,设计2条特异性引物,以PCR方法扩增从酸白菜中分离得到的具有抑制单核细胞增多症李氏杆菌作用的乳酸片球菌菌株的16S rRNA基因序列,经克隆和测序后,与以往发表的基因序列进行比较,同源性99%,从基因水平上进一步证明该菌株为乳酸片球菌。

乳酸片球菌PA003抑菌作用及体外耐受性的研究

本研究室从发酵酸白菜中分离的一株乳酸片球菌PA003可产生片球菌素，本研究从该茵的抑菌效果、耐高温、耐酸、耐胆盐、耐抗生素的效果等方面进行了研究。结果表明，PA003对单核细胞增多症李氏杆菌等有明显的抑制作用；50℃下可存活，80℃及以上耐热能力显著降低；在pH2．5、6h后活茵数从10。CFU／mL降低到10^6CFu／mL，在pH3．5和pH4．5条件下，4h后表现出增长的趋势；对胆盐浓度0．1％~0．4％表现为较好的耐受性，高于O．4％生长较差；对诺氟沙星、庆大霉素、四环素、青霉素、利福平有耐药性。以上结果表明乳酸片球菌PA003有作为人或动物益生茵的潜在应用前景。

乳酸片球菌细菌素的活性及特性的研究

试验采用TGE(trypticaseglucoseyeastextract)肉汤培养基作为乳酸片球菌的培养基,培养条件为37℃过夜静止培养。利用改变pH的方法,即通过菌体对细菌素的吸附与解吸,对细菌素进行分离纯化。试验表明细菌素对植物乳杆菌,绿脓杆菌,单核细胞增多症李氏杆菌,沙门氏菌,枯草杆菌,金黄色葡萄球菌和大肠杆菌O157均有抑制作用。并且还具有耐热,耐盐的特性。

乳酸片球菌发酵猪肉干的条件优化研究

实验在不同发酵温度、初始pH值、时间条件下,用乳酸片球菌对猪肉进行发酵制成猪肉干。根据对猪肉干的感官评定、pH值和游离氨基酸总量的综合测定,发现适宜于该乳酸片球菌发酵猪肉干的最优条件为温度35℃、初始pH值5.5、时间48h。经乳酸片球菌发酵后,猪肉干的质地、色泽、风味明显改善,稳定性和安全性提高。结果表明:作为一种发酵剂,乳酸片球菌可以将猪肉发酵制成猪肉干以提高肉干的风味和质量,为工业生产提供了参考。

低聚糖对乳酸片球菌体外增殖和抑菌效果的影响

本试验以几种低聚糖(低聚木糖、低聚果糖、低聚半乳糖、壳寡糖、异麦芽糖和甘露寡糖)代替葡萄糖作为MRS培养基碳源,探讨低聚糖对乳酸片球菌增殖和抑菌效果的影响。结果表明,低聚果糖为2%(m/V)时,能明显促进乳酸片球菌生长,发酵后的菌体浓度可达到(3.08±0.54)×109cfu/m L;同时也能明显提高乳酸片球菌抑菌性,抑菌圈直径达到(14.21±0.30)mm。与葡萄糖相比,低聚果糖作为碳源能使乳酸片球菌迅速进入对数生长期,缩短了适应期。因此可将低聚果糖与乳酸片球菌配伍应用于畜禽生产中。

乳酸片球菌PA003发酵培养基及发酵条件的优化

为获得生产用乳酸片球菌廉价发酵培养基,采用单因素实验和正交实验的方法,对乳酸片球菌PA003的发酵培养基及发酵条件进行了优化。结果表明,最佳发酵培养基组成成分为:糖蜜2%、豆饼粉2%、玉米浸提液0.3%、磷酸氢二钾0.2%、乙酸钠0.5%、柠檬酸铵0.2%、硫酸镁0.058%、硫酸锰0.025%、吐温80 0.1%;最佳发酵条件为:接种量6%、pH6.5、温度37℃、培养时间14h、转速140r/min。采用上述培养基和培养条件进行培养,乳酸片球菌发酵液菌落总数为6.4×109CFU/mL,与采用MRS培养基培养时的菌落数相当,故显示出了良好的工业化应用前景。

乳酸片球菌素二级结构与抑菌活性的关系

通过圆二色光谱法对乳酸片球菌素的二级结构进行研究,发现乳酸片球菌素的α-螺旋含量约为6.8%,β-折叠含量约为20%,转角所占比例为20%。当乳酸片球菌素的α-螺旋含量增加,β-折叠、转角含量降低时,细菌素活性随之降低,在pH6.0的低盐溶液中,乳酸片球菌素的结构稳定,此时抑菌活性最高;在pH12.0或者高浓度的盐溶液中,乳酸片球菌素α-螺旋含量增加至58%,β-折叠结构消失,细菌素活性丧失。