二氢叶酸还原酶抑制剂溴莫普林的合成

:以 3 ,5 -二羟基苯甲酸为起始原料 ,合成了二氢叶酸还原酶抑制剂溴莫普林。

二氢叶酸还原酶抑制剂定量构效关系(QSAR)研究

对 2 ,4-二氨基 - 5 -甲基 - 6- (取代苯胺基 )甲基吡啶 [2 ,3-d]并嘧啶类二氢叶酸还原酶抑制剂进行了定量构效关系的量子化学研究 ,证明了偶极矩 ,LUMO能级和HOMO

二氢叶酸还原酶抑制剂的量子化学研究——吡啶并嘧啶类衍生物的定量构效关系

利用量子化学方法,将二氢叶酸还原酶抑制剂--吡啶并嘧啶类衍生物的电子结构进行了计算分析和线性的拟合.结果表明化合物的5位取代基的体积,最低空轨道的能级,分子偶极矩,能级差有着显著的相关性.回归分析得到了相关性好的相关模型(R=0.93).

机器学习方法用于二氢叶酸还原酶抑制剂的活性预测

分别采用支持向量学习机、人工神经网络、调节性逻辑回归和K-最临近等机器学习方法对761个二氢叶酸还原酶抑制剂建立了其活性分类预测模型.采用组成描述符和拓扑描述符表征抑制剂的分子结构及物理化学性质,使用Kennard-Stone方法进行训练集的设计,并用Metropolis Monte Carlo模拟退火方法作变量选择.结果表明,支持向量学习机优于其它机器学习方法,所得到的最优模型具有较好的预测结果,其预测正确率为91.62%.说明通过合适的训练集设计及变量选择,支持向量学习机方法可以很好地用于二氢叶酸还原酶抑制剂的活性分类预测.

新型二氢叶酸还原酶抑制剂iclaprim对金黄色葡萄球菌的体外抗菌活性

目的研究新型二氢叶酸还原酶抑制剂iclaprim对金黄色葡萄球菌(金葡菌)的体外抗菌活性及其与磺胺类药物的协同作用。方法收集2016年1月—2018年12月上海交通大学附属第一人民医院分离的非重复金葡菌498株,采用头孢西丁纸片扩散法检测细菌对甲氧西林耐药性,肉汤微量稀释法检测iclaprim、iclaprim-磺胺甲噁唑、甲氧苄啶、磺胺甲噁唑和甲氧苄啶-磺胺甲噁唑的最低抑菌浓度(MIC),比较其抗菌活性的差异。结果金葡菌对iclaprim的不敏感率较低(7.0%),并与甲氧苄啶、磺胺甲噁唑和甲氧苄啶-磺胺甲噁唑的耐药率差异无统计学意义(P>0.05)。iclaprim对全部金葡菌、MRSA和MSSA的MIC50分别为0.25、0.25、0.12 mg/L,MIC90分别为0.5、0.5、0.25 mg/L。根据MIC50、MIC90,iclaprim对相应菌株的抗菌活性是甲氧苄啶的8~32倍,是磺胺甲噁唑的256~512倍,但与甲氧苄啶-磺胺甲噁唑差别不大。对于甲氧苄啶、甲氧苄啶-磺胺甲噁唑和磺胺甲噁唑耐药菌株,iclaprim也显示出较弱的抗菌活性(MIC90≥16 mg/L)。磺胺甲噁唑与iclaprim具有协同作用,其可使iclaprim的MIC50、MIC90值(0.015、0.03 mg/L)降低4个稀释梯度。结论iclaprim对金葡菌(包括MRSA)有较强的体外抗菌活性,并与磺胺类药物具有协同效应,具有潜在的临床应用前景。

二氢叶酸还原酶抑制剂的高效毛细管电泳法筛选模型的建立与应用

建立了一种采用毛细管电泳法(CE)测定二氢叶酸还原酶(DHFR)反应动力学参数的新方法。以含0.002%Brij-35的50mmol/L的硼砂缓冲溶液(pH9.18)作为电泳介质,检测波长280nm,于19min内实现了体系中各组分的基线分离。根据酶反应过程中反应物和反应产物的浓度变化计算有关反应动力学参数。将已知的氨甲喋呤、甲氧苄胺嘧啶和叶酸3种抑制剂作用于所建立的二氢叶酸还原酶体系,测得抑制剂的半数抑制浓度与文献值相接近,证明本体系可用于二氢叶酸还原酶抑制剂(DHFRI)的筛选。

二氢叶酸还原酶抑制剂的量子化学研究——吡啶并嘧啶类衍生物的结构的衍化与反应机理的推测

利用量子化学方法,将二氢叶酸还原酶抑制剂——吡啶并嘧啶类衍生物的电子结构进行了计算分析和线性的拟合.从最低空轨道的分布可知反应的活性位点主要集中在吡啶并嘧啶环上.由此可推测这类化合物主要依靠5位取代基与酶的某一空穴部分镶嵌在一起,或利用吡啶并嘧啶环与酶结构中平面部分的紧密地结合来阻碍二氢叶酸还原为四氢叶酸.

荧光光度法二氢叶酸还原酶抑制剂筛选模型的建立和应用

本文应用二氢叶酸(DHFA)和辅酶Ⅱ(NADPH)的荧光性质,建立了二氢叶酸还原酶(DHFR)活力测定的反应体系,并对酸度等反应条件进行了优化。在该体系中,用双倒数作图法分别测定了二氢叶酸还原酶对二氢叶酸和辅酶Ⅱ的表观米氏常数。将所建立的体系应用于氨甲喋呤,甲氧苄氨嘧啶等已知抑制剂的抑制率的测定,结果满意。

二氢叶酸还原酶抑制剂的研究进展

二氢叶酸还原酶(DHFR)抑制剂的作用是选择性地与 DHFR 结合,抑制其催化还原活性,使叶酸代谢受阻,继而干扰 DNA 和蛋白质的合成,导致细胞死亡。所以,DHFR 抑制剂有抗癌、抗菌和抗疟活性。在叶酸代谢中,DHFR 有重要的生物作用,因此,它成为设计选择性抑制剂的中心靶标。从叶酸代谢入手,寻找脂溶性较强的DHFR 抑制剂的研究已展开,本文对各类 DHFR 抑制剂的研究进展作一简要综述。

新型二氢叶酸还原酶抑制剂的合成及生物活性测试

以氯乙腈和2-噻吩甲醛为原料,通过接合经缩合、环合、还原、硝化等步骤合成的两个关键中间体1c和2d,设计合成了两个新型二氢叶酸还原酶抑制剂的衍生物3c和4b,其结构经1H NMR、13C NMR和MS方法验证.采用噻唑蓝法对目标化合物进行了抗肿瘤活性测试,结果表明3c对筛选的5种肿瘤细胞株的抑制活性均比阳性对照药洛美曲索、甲氨蝶呤和培美曲塞强,4b对Hep-G2的抑制活性比阳性对照药洛美曲索、甲氨蝶呤和培美曲塞强,而且3c和4b对正常细胞株——人脐带内皮血管平滑肌细胞的抑制活性明显比甲氨蝶呤和培美曲塞弱.

毛细管电泳测定鸡肝二氢叶酸还原酶活力及其抑制剂的抑制率

本文采用毛细管电泳法对亲和层析提取的鸡肝二氢叶酸还原酶(DHFR)的反应体系进行了研究,根据体系中反应物还原辅酶Ⅱ(NADPH)和反应产物氧化型辅酶Ⅱ(NADP)的浓度变化,测得鸡肝二氢叶酸还原酶的米氏常数Km=1.35×10-5mol/L。将该体系用于鸡肝二氢叶酸还原酶抑制剂(DHFRIs)抑制率的测定,测得氨甲喋呤的半数抑制浓度(Ic50)为7.46×10-8mol/L。

二氢叶酸还原酶抑制剂在肿瘤治疗中的研究进展

二氢叶酸还原酶(dihydrofolate reductase,DHFR)是合成DNA的必需前体物胸腺嘧啶脱氧核苷(d TMP)的关键酶,在细胞增殖中起重要作用,是肿瘤治疗的重要靶点。抑制DHFR能够抑制d TMP的生物合成,进而抑制肿瘤细胞的生长或增殖,在临床上显示抗肿瘤的作用。近年来,该类药物的神经毒性极大限制了其临床广泛应用。基于此,本文对DHFR抑制剂药物在肿瘤治疗中的应用进行综述,并介绍药物相应的神经毒副作用(药物剂量限制性不良反应),探讨DHFR抑制剂药物在肿瘤治疗中的发展现状及为临床合理用药减少神经毒性反应提供指导。

鸡肝二氢叶酸还原酶的亲和层析提取及其抑制剂抑制活性的测定

利用氨甲喋呤-氨基己基-琼脂糖凝胶(Methotrexate-Aminohexyl-Sepharose,MTX-AH-Sepharose)亲和层析法,从鸡肝中得到了具有一定纯度(比活力为22.67 units/mg)的二氢叶酸还原酶(Dihydrofolate reductase,DHFR),通过紫外光度法测定了氨甲喋呤(Methotrexate,MTX)和表没食子儿茶素没食子酸酯((-)-Epigallocatechin gallate,EGCG)对纯化所得的DHFR的抑制效果.

二氢叶酸还原酶抑制剂在肿瘤和细菌感染治疗中的研究进展

二氢叶酸还原酶(dihydrofolate reductase,DHFR)是治疗肿瘤、细菌感染和寄生虫感染的广为人知的关键靶点。DHFR在细胞DNA生物合成中发挥重要作用,其抑制剂通过抑制底物与DHFR结合,干扰一碳代谢,从而抑制细胞增殖。DHFR抑制剂的研究从20世纪40年代持续至今,已有多种DHFR抑制剂上市,主要用于抗肿瘤、抗菌、抗寄生虫和抗炎的治疗。本文以单靶点和双靶点为分类依据综述了近年来具有抗肿瘤或抗菌作用的DHFR抑制剂的研究进展,并展望了该领域研究所面临的机遇与挑战。

在牙周炎治疗中应用黄嘌呤氧化还原酶抑制剂的应用前景

牙周炎是临床上常见的一种慢性炎症性疾病,影响着全球数亿人口。目前临床上,对于牙周炎的治疗方法虽然在不断更新与改进,但由于该病发病机制复杂,治疗难度较大。牙周炎主要与嘌呤代谢有关,其中,黄嘌呤氧化还原酶(XOR)在牙周炎的发病机制中扮演着重要角色。本文通过文献回顾,发现XOR抑制剂具有抗氧化、抗炎和抗骨质疏松的效应,并且在治疗感染性、炎症性和溶骨性疾病的临床实践中已显示出效果。尽管目前缺乏直接证据表明XOR抑制剂能改善牙周微生态失衡,但它们能够调节肠道菌群失衡,并且有间接证据支持其对牙周微生态有益。因此,XOR抑制剂可能作为免疫调节剂,通过抑制炎症、氧化应激和抗破骨作用,对牙周炎的治疗发挥辅助作用。

毛细管电泳法研究中草药有效成分对二氢叶酸还原酶的抑制作用

利用已建立的二氢叶酸还原酶抑制剂的毛细管电泳法筛选模型,研究了10种中草药有效成分对二氢叶酸还原酶的抑制作用。经实验测定发现木樨草素、表儿茶素、紫杉醇和槲皮素对二氢叶酸还原酶(DHFR)有抑制作用,且抑制效果为木樨草素>紫杉醇>表儿茶素>槲皮素。通过对产物NADP(氧化型辅酶Ⅱ)峰面积的定量测定,计算了4种抑制剂的抑制率。

5—取代—2，4—二氨基嘧啶对大肠杆菌二氢叶酸还原酶抑制作用的定量构效关系的研究

根据生物电子等排原理用硫和亚氨基代替甲氧苄氨嘧啶（TMP）分子中苯环与二氨基嘧啶环间的次甲基，以研究苄基嘧啶分子中桥链部分在抑酶活性中所起的作用，应用Hansch方法研究了定量构效关系。在定量构效关系的基础上讨论了桥链部分在抑制大肠杆菌二氢叶酸还原酶中的作用。

乌腺金丝桃醇溶物对二氢叶酸还原酶抑制的最佳条件及抑菌效果

为了进一步研究乌腺金丝桃(Hypericum attenuatum)的药理活性机理,为开发利用长白山特色资源提供依据,探讨了乌腺金丝桃醇溶物对二氢叶酸还原酶(DHFR)抑制的最佳条件。通过建立DHFR酶反应体系,采用分光光度法测定酶活力,分别研究了乌腺金丝桃的根、茎、叶、花的醇溶物对二氢叶酸还原酶的抑制作用。结果表明:4种醇溶物对二氢叶酸还原酶有不同程度的抑制作用,其中花的醇溶物抑制作用最为明显,抑制率为30%,最佳作用温度为40℃,最佳作用pH为7.5,添加的最适二氢叶酸底物浓度为20μL 1×10^(-4) mol/L,最佳NADPH浓度为20μL 1×10^(-3) mol/L,最佳巯基乙醇浓度为50μL0.01mol/L,最佳酶用量为10μL。