三种1,4-二氢吡啶类药物的双水相手性萃取拆分研究

建立了一种以乙醇/硫酸铵作为双水相体系拆分三种1,4-二氢吡啶类手性对映体的方法。采用单因素实验分别考察了手性识别剂的种类、识别剂的浓度、待分离组分的浓度、pH值等几个方面的影响,确定了最佳分离条件:体系pH值为3,ME-β-CD浓度为0.3 mmol/L,L-酒石酸辛酯浓度为0.4 mmol/L,三种1,4-二氢吡啶类药物浓度均为0.4 mmol/L。以0.1%三乙胺正己烷-0.1%三乙胺乙醇(90:10)为流动相分离三种1,4-二氢吡啶类药物对映体,并考察了三种药物对映体的检出限、线性范围、回收率等。结果表明,三种药物对映体的检出限在0.020~0.035 mg/L之间,相关系数均不低于0.999,方法的线性关系良好,回收率为92.2%~105.3%,相对标准偏差为0.53%~1.87%。该方法准确、简便,可满足三种药物及其制剂的拆分及含量测定。

酵母铬和二氢吡啶对热应激围产期奶牛生理生化指标及HSP70 mRNA表达量的影响

为确定酵母铬和二氢吡啶是否能缓解围产期奶牛热应激,将24头体质量和胎次相近的围产期荷斯坦奶牛随机分为3组,饲养于环境温湿指数(THI)高于68的热应激条件下,对照组饲喂基础日粮,酵母铬组和二氢吡啶组饲喂基础日粮的同时饲喂8 g/(头·d)铬含量为1‰的酵母铬和3 g/(头·d)的二氢吡啶,试验周期为40 d,观测酵母铬和二氢吡啶对围产期奶牛热应激反应的影响。结果显示:①酵母铬组和二氢吡啶组奶牛与对照组奶牛在呼吸频率上无显著差异(P>0.05)。②各组奶牛血清中血糖和胆固醇含量在产前第7天与产后第3天均无显著差异。二氢吡啶组奶牛产前第7天血清中甘油三酯含量显著降低(P<0.05)。③与对照组比较,酵母铬组和二氢吡啶组产前、产后血清中Na^(+)、K^(+)、Cl^(−)的浓度均无显著差异(P>0.05),各组在产前、产后血清中碱性磷酸酶和肌酸激酶的含量也均未出现显著变化(P>0.05)。④酵母铬组、二氢吡啶组与对照组奶牛血清中热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)基因mRNA表达量没有明显差异(P>0.05)。以上结果表明,热应激条件下,在围产期奶牛日粮中添加8 g/(头·d)铬含量为1‰的酵母铬和3 g/(头·d)二氢吡啶对血液生化指标和HSP70 mRNA表达量均无显著影响,说明日粮中添加8 g/(头·d)铬含量为1‰的酵母铬和3 g/(头·d)二氢吡啶对缓解围产期荷斯坦奶牛热应激无明显效果。

UPLC-MS/MS法测定降血压类保健食品中13种二氢吡啶类钙拮抗剂

建立了超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时检测降血压类保健食品中非法添加13种二氢吡啶类钙拮抗剂的方法。片剂、功能茶样品用甲醇-水(4∶1)溶液超声提取,口服液样品用甲醇超声提取,采用Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm)分离,以2 mmol/L甲酸铵-0.1%甲酸水溶液和乙腈为流动相梯度洗脱,采用电喷雾离子源(ESI)正离子模式,多反应监测(MRM)模式进行检测。结果显示,13种分析物在对应质量浓度范围内线性关系良好,相关系数均不低于0.998 0,平均回收率为85.1%~119%,日内相对标准偏差(RSD)为0.37%~5.6%,日间RSD为1.6%~13%。各组分在片剂、功能茶、口服液3种基质中的检出限分别为0.1~2μg/kg、0.1~5μg/kg、0.1~1.7μg/L。采用该法对46个市售样品进行检测,有2个阳性样品分别检出硝苯地平(178.1μg/kg)与马尼地平(260.2μg/kg)。该方法操作简单、灵敏度高、精密度好,适用于保健食品中非法添加二氢吡啶类钙拮抗剂的筛查与定量分析。

钙通道阻滞剂1,4-二氢吡啶类药物的绿色合成

心脏及心脑血管疾病是发达国家人群的第一死因,也是中国人死亡的首位原因.L-型钙通道是目前临床上主要使用选择性钙通道阻滞剂1,4-二氢吡啶类药物.文章研究了在非均相催化剂离子交换树脂Amberlyst 15的催化以及无溶剂条件下,高效的合成了钙通道阻滞剂1,4-二氢吡啶类药物.该反应体系具有原料便宜、反应时间短、操作及后处理简单、催化剂可回收利用、反应可放大等优良特点.

气相色谱-质谱法测定饲料中的二氢吡啶

本文建立一种气相色谱-质谱法(GC-MS)测定饲料产品中二氢砒啶含量的方法。采用避光的环境,在饲料样品中添加保护剂降低二氢砒啶的光化学反应,采用乙腈提取待测物,经浓缩和固相微萃取净化,采用BSTFA进行衍生,衍生物通过GCMS气化分离以及选择离子监测(SIM)模式进行检测。对二氢吡啶衍生物的电子轰击(EI)质谱碎片进行解析,特征碎片离子(m/z)206、178、251、151、150、195为定性离子,206为定量离子。该分析方法中二氢吡啶在3~150 mg/kg范围内呈良好线性关系,样品分析精密度RSD<3%,样品中二氢吡啶的检出限0.3 mg/kg。结果表明,这项方法灵敏、稳定、可靠,有效避免了饲料中二氢吡啶在处理过程中的降解,并有效排除了主要杂质的干扰,适用于饲料产品中二氢吡啶的定量分析与确证。

二氢吡啶类钙离子拮抗药物手性分析及其立体选择性药动学研究进展

手性药物与安全有效用药的关系密切,大多数二氢吡啶类药物具有手性碳原子,以消旋体入药,进入体内后产生立体选择性处置特征,可能影响用药的安全有效。该研究围绕该类药物手性拆分及药动学特点,综述了近年来该类药物的手性高效液相色谱法(HPLC)和手性毛细管电泳法(CE)方法选择规律及体内分析应用;列举并比较了该类药物间的立体选择性药动学研究情况,发现该类药物部分具有明显的立体选择性差异,体内药效和毒性也随之不同。

保健食品中非法添加物二氢吡啶类化合物诱导的肝细胞毒性与作用机制研究

目的探究尼莫地平所致肝细胞毒性及分子机制并研究保健食品中非法添加物二氢吡啶类化合物对自噬通路的影响。方法以不同浓度(0、3、10、30、100μmol/L)的尼莫地平作用于人肝癌细胞HepG224 h,测定肝损伤指标谷丙转氨酶(alanine amino transferase,ALT)和谷草转氨酶(aspartate amino transferase,AST)活力,并利用Western blot检测细胞中丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)、氧化应激通路、凋亡蛋白、自噬相关通路蛋白的表达;以不同浓度(0、3、10、30、100μmol/L)的氯维地平、硝苯地平、尼群地平、西尼地平、阿雷地平及马尼地平作用HepG2细胞24 h,利用Western blot检测细胞中自噬相关通路蛋白的表达。结果100μmol/L的尼莫地平可上调ALT和AST活力、激活MAPK通路蛋白的表达、抑制核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)及下游解毒蛋白血红素加氧酶1(heme oxygenase-1,HO-1)的表达、增加微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)Ⅱ/LC3Ⅰ、降低选择性自噬接头蛋白(sequestosome 1,SQSTM1)表达;氯维地平在3μmol/L时引起细胞自噬,其他6种二氢吡啶类化合物均在100μmol/L时使细胞发生自噬。结论尼莫地平所致的肝细胞毒性机制中自噬的发生可能是由MAPK通路介导的,其中细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)通路促进HepG2细胞自噬的作用相对最强。此外,其他6种二氢吡啶类化合物氯维地平、硝苯地平、尼群地平、西尼地平、阿雷地平及马尼地平均可引起自噬。

1,4-二氢吡啶衍生物的QSAR模型构建及制备

采用Hyperchem 8.0软件,通过分子动力学MM+和半经验AM1算法,优化并计算得到30种1,4-二氢吡啶衍生物的17种量子化学参数。运用Statistica 8.0软件中的主成分分析法,结合线性回归分析法,筛选出3个最佳参数与1,4-二氢吡啶衍生物的抗结核活性关联,构建定量构效关系(QSAR)模型。所建多元线性回归方程的相关系数R2为0.75,留一法交叉检验系数q2为0.72,活性实验值与预测值相关性较好。采用该模型设计并制备得到1种具有良好水溶性和潜在抗结核活性的N3,N5-二(对磺酸钾基)苯基-2,6-二甲基-3,5-二甲酰氨基-1,4-二氢吡啶(TM),用1H NMR、IR、MS和元素分析表征结构,并考察了紫外和荧光性能。良好的稳定性和预测能力使该QSAR模型有望用于结核病候选药物的筛选。

一锅法合成二氢吡啶工艺的优化研究

试验旨在优化一锅法合成二氢吡啶的过程。以乌洛托品、乙酰乙酸乙酯及乙酸铵水溶液为原料,乙醇为溶剂一锅法合成二氢吡啶,通过单因素试验对物料配比、溶剂配比、反应温度、反应时间等因素进行优化。结果显示,二氢吡啶合成的优选参数为n_(乌洛托品)∶n_(乙酰乙酸乙酯)∶n_(醋酸铵)=1∶7∶0.8进行投料,乌洛托品投料量∶溶剂量=1∶3.5~1∶4.5,混合溶剂中水与乙醇占比为V_(水)∶V_(乙醇)=20∶15~30∶15,60℃下反应1.5 h,二氢吡啶含量高达98%~103%,产物收率可达90%左右,母液可循环套用。研究表明,该工艺路线具有低污染、高生产安全性、产率高的优点,是合成二氢吡啶的一种环境友好的工艺路线。

二氢吡啶对雏鸡血清甲状腺素和皮质醇含量影响的研究

为探求二氢吡啶促雏鸡生长发育的机理 ,试验分两批进行。 ( 1)选用 2 8日龄海赛克斯父母代母雏 2 50只 ,随机分为 5组 ,日粮中添加不同浓度的二氢吡啶。饲养试验表明 :二氢吡啶可促进雏鸡的生长 ,且以 150mg/kg组促生长作用最佳 ,添加饲喂到 61d时 ,体重比对照组提高 7 68%(P <0 0 1) ,血清中T3含量在添加饲喂到 60d时比对照组提高 33 90 % (P <0 0 1) ,T4 含量呈下降趋势 ,皮质醇的分泌受到抑制 ,血清中含量呈下降趋势 ,添加饲喂到 60d时比对照组降低34 71% (P <0 0 1) ,154～ 160日龄平均产蛋率达 50 %以上时 ,较对照组提前一周。 ( 2 )选 7日龄90 4父母代母雏 5756只 ,随机分为两组 ,试验组添加二氢吡啶 ,浓度为 150mg/kg。结果表明 :添加饲喂到 30d时 ,体重及血清中T3 含量分别比对照组提高 9 91% (P <0 0 1)和 2 5 82 % (P <0 0 5) ,T4 含量较对照组降低 2 1 91% (P <0 0 5)。

二氢吡啶对尼罗罗非鱼生产性能及机体抗氧化性能的影响

二氢吡啶以 4个不同水平 (0、50、1 0 0、1 50mg kg)添加饲喂尼罗罗非鱼 64d ,探讨了二氢吡啶的适宜添加水平及其对机体抗氧化性能的影响。结果表明 ,添加二氢吡啶 (50、1 0 0、1 50mg kg)可使日增重分别提高 1 7.2 %(p <0 .0 5)、9.1 %、2 .5 % ,体重特定生长率提高 1 5 .5 %、9.3 %、5 .1 % ,饵料系数分别较对照组降低 1 2 .1 %、1 2 .7%、5 .9% ,但对试验鱼平均存活率无影响 ;二氢吡啶可显著降低试验组肝LPO含量 ,提高机体的抗氧化性能 ;试验组肝SOD活性呈上升趋势 ,未达显著水平 ;二氢吡啶可分别降低试验组肝脂肪 (绝干 )的含量 1 9.7% (p<0 .0 5)、1 8.6 % (p <0 .0 5)、2 4 .1 % (p <0 .0 1 ) ,对血清GOT和GPT的活性无影响。在试验剂量范围内 ,机体抗氧化性能随剂量的增加而增强 ,但生长速度并非如此 。

二氢吡啶对雏鸡免疫功能的影响

将 2 3日龄海赛克斯父母代母雏 3 3 0只随机分为 6组 ,分别饲喂含二氢吡啶 0、2 5、50、1 0 0、1 50、2 0 0mg/kg的日粮 ,试验期 65d。用微量法测定血清新城疫抗体水平 ,放射免疫法测定血清 T3、T4、皮质醇的质量浓度 ,并作血液涂片 ,检测 T淋巴细胞百分比。结果表明 ,二氢吡啶可提高机体的免疫功能 ,且以 1 50 mg/kg组效果最显著 ,其血清抗体水平显著升高 ( P<0 .0 1 ) ,T淋巴细胞百分比呈上升趋势。血清 T3的质量浓度于试验后 60 d极显著高于对照组 ( P<0 .0 1 ) ,皮质醇质量浓度显著低于对照组 ( P<0 .0 5)。结果提示 ,二氢吡啶对免疫功能的促进作用与血清

水溶液中4-芳基-1,4-二氢吡啶衍生物的一步合成法

以芳醛、乙酰乙酸乙酯 (或甲酯 )、醋酸铵为原料在氯化三乙基苄基铵 (TEBA)催化下在水中一步合成了 4 芳基 1,4 二氢吡啶衍生物 ,该方法具有产率高、污染少、环境友好等特点 .

应用微波辐射技术一步合成4-芳基-1,4-二氢吡啶衍生物

以芳醛、乙酰乙酸乙酯、醋酸铵为原料在无溶剂条件下应用微波技术合成了 4 芳基 2 ,6 二甲基 3 5 二乙氧羰基 1,4 二氢吡啶 ,该反应在 2～ 5min内完成 ,产率 73%～ 99% .

二氢吡啶对育成鸡生长发育的影响

将275只52日龄海赛克斯父母代育成鸡随机分为5组,分别饲喂含二氢吡啶0、50、100、150、200mg/kg的日粮,测定体重增长情况,放射免疫法测定血清中T3和皮质醇的质量浓度,并记录开产情况。结果表明:在50～150mg/kg水平内,随二氢吡啶添加量的增加,体重和血清中T3水平呈上升趋势,皮质醇水平呈下降趋势,以150mg/kg(Ⅳ组)水平效果显著,添加二氢吡啶37d后,其体重和血清中T3的浓度均极显著高于对照组(P<0 01),皮质醇浓度显著低于对照组(P<0 05),但以200mg/kg(Ⅴ组)水平添加,表现对生长及T3的分泌产生抑制效果。以150mg/kg水平长期添加,在154～160日龄产蛋率达50%,较对照组提前1周。

二氢吡啶类钙拮抗剂长期使用增加死亡危险的可能性及有关机制

钙拮抗剂已被广泛地用于治疗心绞痛和高血压等心血管疾病。但它的严重药物不良反应，在近１０年的大规模临床试验中，也逐渐被人们所认识，尤其是短效双氢吡啶类钙拮抗剂。长效制剂无此药物不良反应。本文就目前钙拮抗剂大剂量长期使用增加死亡率，致心肌缺血，诱发出血，血压过低，负性肌力作用和诱发心律失常等，及钙拮抗剂对缺血心肌的保护作用进行讨论，认为它不具有细胞保护作用，而是通过改变血流动力学，对缺血心肌的改善起一定作用；还认为其药物不良反应与剂量呈正相关。

1,4-二氢吡啶衍生物与DNA相互作用的电化学与圆二色谱研究

用电化学和圆二色谱(CD)技术研究了5个1,4-二氢吡啶(1,4-DHP)衍生物与小牛胸腺DNA(CT-DNA)的相互作用.结果表明,1,4-DHP衍生物与CT-DNA相互作用是通过嵌入的方式进行的,相互作用的强弱与1,4-DHP衍生物的立体结构有关.1,4-DHP衍生物4-取代基空间位阻越小,嵌入到CT-DNA的程度越大.相反,空间位阻较大的1,4-DHP衍生物嵌入CT-DNA程度较小.非平面结构的1,4-DHP衍生物使CT-DNA双螺旋链结构松散程度增大.

二氢吡啶对热应激奶牛产奶量以及奶牛体温、呼吸频率的影响

选用24头荷斯坦奶牛,随机分为4组,全混和日粮饲喂,自由采食,分别饲喂含0,100,150,200mg/kg的二氢呲啶日粮20d,研究二氢吡啶对泌乳奶牛产奶量及体温、呼吸频率的影响。结果表明:含二氢吡啶日粮可以使奶牛产奶量提高17.5%～28.3%,延缓奶牛产奶后期产奶量下降,但差异不显著(P>0.05)。与对照组相比,含二氢吡啶日粮对奶牛的体温、呼吸影响不显著(P>0.05),但添加二氢吡啶日粮有降低奶牛呼吸频率的趋势。

盐酸半胱胺和二氢吡啶对奥利亚罗非鱼生长及相关激素水平、血液生化指标的影响

挑选大小相近的奥利亚罗非鱼270尾,随机分为3组,即对照组(基础日粮)、盐酸半胱胺(CHS)组(基础日粮+150 mg.kg-1CHS)、二氢吡啶(D il)组(基础日粮+100 mg.kg-1D il),试验期为32 d,分别于试验开始第1、15和32天测定体重、激素水平和生理生化指标的变化。结果表明,与对照组相比,CHS组、D il组雄鱼日增重分别提高40.3%、18.1%(P<0.05),特定生长率提高32.8%、16.7%(P<0.05),血中GH水平提高33.0%、11.6%,T3水平提高28.5%、40.4%,睾酮水平提高35.3%、28.7%;雌鱼日增重分别提高15.5%、25.7%,特定生长率提高8.7%、16.7%,GH水平提高34.4%、10.9%,T3水平提高28.1%、46.5%,睾酮水平提高35.3%、28.7%。CHS组和D il组雌、雄鱼脲氮水平明显下降(P<0.05);血清及肝脏抗氧化能力显著增强(P<0.05)。结果提示:CHS和D il均可促进奥利亚罗非鱼的生长,CHS对雄鱼促生长作用较强,D il对雌、雄鱼的促生长作用相似。