甘蓝型油菜高亚麻酸CMS的快速选育方法及效果研究

为了加速甘蓝型油菜高亚麻酸杂交育种进程。以高亚麻酸油菜种质为试验材料,采用快速选育方法进行油菜高亚麻酸CMS及保持系的选育。结果表明:选育周期从5~6年缩短为4年,亚麻酸含量由11.85%提升至16.96%,含油量由45.0%提升至48.8%,单株亚麻酸产出量由0.98 g提升至1.53 g。与原CMS(陕6A)相比,“YM-1A”的含油量、单株产量、亚麻酸含量、异交结实系数、单株亚麻酸产量分别提高8.45%、4.49%、59.43%、12.8%、80.65%;而自交结实系数降低56.86%。因不育性、农艺、品质等性状显著提高,YM-1A在甘蓝型油菜高亚麻酸杂交育种中具有较高的利用价值。

γ-亚麻酸通过下调氧化应激反应抑制NLRP3介导的焦亡并改善脑梗塞小鼠认知障碍

目的:探究γ-亚麻酸(GLA)对脑梗塞小鼠认知障碍的影响及机制。方法:选取18只雄性小鼠,分为对照组6只、模型组6只和GLA组6只,对模型组以及GLA组以大脑中动脉闭塞术进行脑栓塞小鼠认知障碍模型制作,对照组进行假手术,即手术过程相同但不插入线栓。对照组和模型组每日以1mg/kg生理盐水灌胃,GLA组每日以1mg/kg GLA灌胃14d。以Morris水迷宫评估小鼠的认知障碍情况。处死小鼠并取小鼠大脑组织,以HE染色观察小鼠脑梗死面积,以TUNEL染色观察小鼠神经元凋亡情况,以Western Blot实验检测小鼠海马体中P22、P47、NLRP3、IL-1β、GSDMD以及Caspase-1蛋白表达水平。结果:模型组小鼠的逃逸潜伏期短于GLA组以及对照组,GLA组则短于对照组,模型组的穿越环次数最多,GLA组次之,对照组最少;模型组大脑梗死面积以及神经元凋亡数目最多,GLA组次之,对照组大脑无梗死且无神经元凋亡;模型组P22、P47、NLRP3、IL-1β、GSDMD以及Caspase-1蛋白表达高于GLA组和对照组,GLA组的蛋白表达水平则高于对照组。结论:GLA通过下调氧化应激反应抑制NLRP3介导的焦亡并改善脑梗塞导致的小鼠认知障碍。

γ-亚麻酸对糖尿病小鼠记忆衰退的影响及机制

目的 探究γ-亚麻酸(GLA)对糖尿病小鼠记忆衰退的影响及机制。方法 选取16只8周龄野生型小鼠,雌雄各半,分成GLA组及对照组,对所有小鼠使用1 g/kg D-果糖加10%饮用水饮食(持续40 d)诱导糖尿病小鼠记忆衰退模型。对照组小鼠给予每日1 mg/kg生理盐水灌胃,GLA组小鼠给予每日1 mg/kg GLA灌胃。干预7 d后,以Morris水迷宫评估小鼠的学习和记忆障碍情况,处死小鼠取大脑皮层及海马组织,以HE染色检查二者病理改变,以透射电镜观察小鼠海马神经元超微结构变化,以Western Blot实验检测小鼠海马组织中GRP78、GRP94、NOX2和NOX4蛋白表达水平。结果 GLA组小鼠的逃逸潜伏期短于对照组,穿越环次数高于对照组(P<0.05)。GLA组小鼠大脑皮层和海马组织病理变化以及海马神经元超微结构损伤程度均较对照组轻。GLA组小鼠海马组织GRP78、GRP94、NOX2和NOX4蛋白表达水平低于对照组(P<0.05)。结论 GLA能通过抑制海马神经元内质网应激反应,进而改善糖尿病小鼠记忆衰退。

6种富含α-亚麻酸食用油脂的主要组成成分及消化特征研究进展

α-亚麻酸(ALA)是人体必需脂肪酸,在维持人体正常生理活动中具有多重作用。旨在确定ALA在食用油脂中的物质基础与其功能的构效关系,实现精准的膳食脂质营养,对6种富含ALA食用油脂的总脂肪酸组成、甘油三酯中脂肪酸的位置分布情况、甘油三酯分子构成、脂质伴随物和消化特性等研究内容进行了总结和分析。6种富含ALA食用油脂主要脂肪酸组成为棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、ALA,其中:紫苏籽油、亚麻籽油和牡丹籽油的ALA含量较高;不同富含ALA食用油脂甘油三酯中脂肪酸的位置分布存在显著差异,蚕蛹油的ALA主要分布在sn-2位,牡丹籽油和火麻仁油的ALA主要分布在sn-1,3位;不同富含ALA食用油脂甘油三酯的分子结构类型存在显著差异;富含ALA食用油脂的脂质伴随物主要为维生素E和甾醇,其中沙棘籽油的维生素E和甾醇含量均高于其余5种食用油脂;富含ALA食用油脂的消化程度和消化速率均低于非富含ALA食用油脂。

富含α-亚麻酸的中长链脂肪酸结构脂的酶法合成与理化性质分析

旨在为富含多不饱和脂肪酸(PUFA)的中长链脂肪酸甘油三酯(MLCT)产品的应用提供参考,采用脂肪酶Lipozyme TL IM催化精炼桑蚕蛹油(SPO)与三辛酸甘油酯(TRI)进行酯交换反应合成富含α-亚麻酸(ALA)的MLCT(ALA-MLCT),考察了反应时间对ALA-MLCT合成的影响,并对合成的ALA-MLCT的甘油三酯组成、质量指标、氧化稳定性、乳液性能和体外消化特性进行了分析。结果表明:Lipozyme TL IM催化效率高,反应10 h TRI的转化率达到98%以上,反应12 h合成的产物ALA-MLCT中含有ALA的MLCT含量可以达到40.41%,且主要为LnCaCa (10.95%)、PLnCa (7.69%)和OLnCa (6.21%),其质量指标符合中长链脂肪酸食用油标准征求意见稿2022中的一级食用油标准;与SPO和酯交换反应底物物理混合物(SPO与TRI质量比1∶4,SPO+TRI)相比,产物ALA-MLCT氧化稳定性显著提高,其乳液粒径较小且分布均匀,具有更好的物理稳定性;体外模拟消化实验表明,与SPO+TRI相比,ALA-MLCT更快达到消化平衡,但最终二者消化率均可以达到90%以上。综上,合成的ALA-MLCT结构脂有助于提高ALA的生物可及性,有望作为功能性食用油脂。

γ-亚麻酸的富集及其生理功效研究进展

γ-亚麻酸(GLA)是含有三个双键的多不饱和脂肪酸,因其具有多种生物学活性而备受关注。GLA目前主要的植物来源为琉璃苣、月见草和黑加仑等,微生物来源大多为藻类和真菌。现有的GLA分离纯化技术各有优缺点,单一的富集方法无法满足高纯度GLA的要求,采用不同方法综合使用、结合现代化分离提取技术是未来制备GLA的方法。同时,多项研究表明,GLA在机体的物质代谢和生理调控上发挥着十分重要的作用,对血脂、抗血栓性心血管疾病、癌症和糖尿病等慢性疾病具有很好的预防效果,但具体的作用机理仍需进一步研究。综上所述,GLA是一种对人体有益的脂肪酸,但其人体内的代谢途径和生理功效仍然需要进一步挖掘,从而为GLA作为功能性保健食品的开发提供理论支撑。

α-亚麻酸通过调节Th17减轻鲍曼不动杆菌感染小鼠的肺部炎症

目的探究α-亚麻酸(ALA)在鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,AB)小鼠肺炎中的作用机制。方法12只BALB/c小鼠随机分成野生组和肺炎组,分别利用靶向代谢组学技术和转录组学技术分析野生组和肺炎组小鼠的血清和肺组织中差异代谢物和差异基因。另取18只BALB/c小鼠随机分为空白组(vehicle组)、A.baumannii感染组(A.baumannii组)和实验组(A.baumannii+ALA组)。空白组和A.baumannii感染组给予普通饮食28 d,实验组给予定制饲料(含5%ALA)喂养28 d,第28天时A.baumannii感染组和实验组给予鲍曼不动杆菌悬液滴鼻,空白组给予PBS缓冲液滴鼻。24h后取小鼠肺组织,采用苏木精-伊红(HE)染色法观察肺组织病理学变化、酶联免疫吸附(ELISA)法测定肺组织炎症因子;流式细胞术和免疫荧光技术检测肺组织辅助性T细胞17(Th17)比例。体外评估ALA对于Th17细胞的影响时,设立ALA组(添加100μmol/L ALA)和对照组(添加相同体积PBS)并用流式细胞术分析Th17细胞比例。结果代谢组学显示,肺炎组小鼠血清的ALA水平显著低于野生组[(3.19+0.76)μg/mL比(10.32+1.75)μg/mL,P<0.0001]。转录组学显示,肺炎组小鼠的肺组织IL-17信号通路中有32个差异基因,其中包括28个上调基因和4个下调基因。在添加ALA的小鼠实验组中,实验组肺组织病理感染严重程度相比于A.baumannii感染组明显减轻,肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素(IL)-1β、IL-17A水平和Th17细胞比例相比于A.baumannii感染组有明显降低(均P<0.05),IL-6和IL-10水平相对于A.baumannii感染组明显升高(均P<0.05)。在体外分化实验中,ALA组Th17细胞比例明显低于对照组(P<0.05)。结论AB肺炎小鼠血清ALA水平低下,补充ALA后通过抑制Th17分化,对鲍曼不动杆菌所致肺炎具有保护作用,提示膳食补充ALA对鲍曼不动杆菌感染的控制具有一定益处。

脂质体亚麻酸LipoLLA对幽门螺杆菌的体外抑菌作用研究

目的本研究旨在探索脂质体亚麻酸(LipoLLA)对幽门螺杆菌(HP)的抑菌作用,为LipoLLA治疗幽门螺杆菌感染的临床应用提供理论依据。方法本研究收集了50例幽门螺杆菌菌株,通过微量肉汤稀释法检测LipoLLA和阿莫西林(AMX)、甲硝唑(MTZ)、左氧氟沙星(LVFX)、克拉霉素(CAM)4种抗生素单独使用或联合使用对幽门螺杆菌的最低抑制浓度(MIC)。通过抑菌曲线评估LipoLLA在不同浓度、时间和pH值条件下的抑菌活性。检测LipoLLA处理后培养基上清液中的天冬氨酸转氨酶(AST)、葡萄糖(GLU)和三磷酸腺苷(ATP)水平,以探究其抑菌作用机制。结果LipoLLA的MIC范围为3.750~15.000μg/mL,并与4种抗生素(AMX、MTZ、LVFX和CAM)联合使用时呈现协同抑菌效果。LipoLLA的抑菌效果受浓度、时间和pH值的影响。LipoLLA处理后幽门螺杆菌外膜屏障被破坏,培养基中AST、GLU和ATP水平的上升。结论LipoLLA通过破坏幽门螺杆菌外膜屏障杀灭细菌,具有较好的抑菌作用,并且能与传统抗生素联合使用,提高对幽门螺杆菌的抑菌效果。

日粮添加α-亚麻酸对育肥猪肌肉脂肪酸组成与肠道菌群的影响

[目的]本试验旨在研究日粮添加α-亚麻酸对育肥猪肌肉脂肪酸组成与肠道菌群的影响。[方法]选取36头120日龄杜×长×大三元猪进行分栏喂养,根据体重相近原则随机分为2组,每组3个重复,每重复6头,分别为对照组(CON)和添加α-亚麻酸组(ALA)。CON组饲喂基础日粮,ALA组饲喂含5 g·kg^(-1) α-亚麻酸的基础日粮。饲喂至162日龄时在每个重复中随机选取6头猪屠宰并采样分析。[结果]相较于CON组,ALA组猪平均终末重、日增重、日采食量及料重比均未见显著差异,但料重比降低7.7%,ALA组猪背最长肌肉色、滴水损失无显著变化。在血液生化指标中,ALA组总胆固醇和游离脂肪酸含量相较于CON组显著降低(P<0.05)。对背最长肌脂肪酸组成分析结果显示,与CON组相比,ALA组中饱和脂肪酸(saturated fatty acid, SFA)含量和n-6多不饱和脂肪酸(omega-6 polyunsaturated fatty acid, PUFA)/n-3 PUFA的比值显著降低(P<0.05),C18:3n-3(ALA)、C20:5n-3(DPA)含量显著升高(P<0.05),n-3 PUFA总含量也显著升高(P<0.05)。与CON组相比,ALA组结肠内容物中瘤胃球菌科、毛螺菌科、韦荣氏菌科、丁酸球菌科的丰度均显著增加(P<0.05),而氨基酸球菌科、产粪甾醇真细菌、脱硫弧菌、消化链球菌科、坦纳菌科、梭状芽胞杆菌科和克里斯滕森菌科的丰度均显著降低(P<0.05)。[结论]日粮添加5 g·kg^(-1) α-亚麻酸改善了育肥猪肌肉脂肪酸组成,降低了肌肉中饱和脂肪酸(SFA)含量,提高了n-3 PUFA含量并降低了n-6 PUFA/n-3 PUFA的比值,显著促进了育肥猪肠道中瘤胃球菌科、毛螺菌科、韦荣氏菌科等常见的短链脂肪酸(SCFA)产生菌的增殖。

亚麻酸微生物合成研究进展

亚麻酸是一种人体健康必需的功能性多不饱和脂肪酸,在医药和食品等多个行业中有着广泛的应用。微生物发酵法合成亚麻酸相较于传统动植物提取亚麻酸具有生产周期短、不受环境影响、生产效率稳定等显著优势。提高微生物法合成亚麻酸效率的关键在于两个方面:一是开发高产菌株,二是优化发酵策略。系统性地总结了亚麻酸合成的微生物来源,并深入探讨了亚麻酸微生物合成途径、合成路径关键酶的特性和功能、促进亚麻酸合成的基因工程策略和生产菌株的发酵优化方法等方面的研究进展,还分析了利用合成生物学技术改善微生物生产亚麻酸的潜力与挑战,通过设计和构建新的亚麻酸合成生物系统,为微生物生产亚麻酸提供新的可能性,以期为将来更好地利用微生物生产亚麻酸提供理论参考。

亚麻酸甘油酯异构体形成动力学及不同酰化位置对热致异构体差异比较

研究亚麻酸甘油三酯在加热时反式亚麻酸形成的动力学的差异以及亚麻酸在甘油酯不同酰化位置对热致异构反式产物种类影响。采用GC-FID分析亚麻酸反式异构体,发现亚麻酸甘油三酯中有7种反式异构体生成,亚麻籽油有6种反式异构体生成,该反应为零级反应。对比亚麻酸甘油三酯和亚麻籽油的动力学参数:在亚麻酸甘油三酯和亚麻籽油中,C18:3-9t,12c,15c、C18:3-9c,12t,15c和C18:3-9c,12c,15t形成的活化能分别为79.39、106.49、82.33 kJ/mol和86.04、115.84、102.85 kJ/mol;C18:3-9t,12c,15t和C18:3-9t,12t,15c分别为180.57、233.55 kJ/mol和164.36、165.38 kJ/mol;C18:3-9t,12t,15t分别为211.79 kJ/mol和140.30 kJ/mol。对比monolinolenin、dilinolenin、1,3-dilinolenin的异构体种类含量可知,Sn-1和2位比Sn-1和3位更稳定;Sn-1位比Sn-1和3位还有Sn-1和2位更稳定。因此,亚麻酸甘油三酯基本比亚麻籽油跨越的能垒高;对于酰化位置,Sn-1和2位比Sn-1和3位更稳定,Sn-1位比Sn-1和3位还有Sn-1和2位更稳定。

HPLC法同时测定苦杏仁中亚麻酸、亚油酸和油酸含量

目的建立HPLC法同时测定苦杏仁中亚麻酸、亚油酸和油酸含量。方法采用色谱柱Agilent TC-C_(18)(4.6mm×250mm,5μl),以乙腈-0.1%磷酸水溶液作为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0mL/min,柱温为25℃,检测波长为203nm。结果亚麻酸、亚油酸和油酸各自浓度范围内线性关系良好,相关系数r≥0.9996;亚麻酸、亚油酸和油酸的平均加样回收率分别为98.77%,99.26%,98.96%,RSD值分别为1.75%,1.20%,1.74%。结论该方法准确、可靠、操作简便,为进一步完善苦杏仁的质量标准提供依据。

共轭亚麻酸的生理功能及制备方法研究进展

旨在为共轭亚麻酸(CLNA)在功能食品、保健品和药品等领域的应用提供科学的理论参考,综述了CLNA的生理功能和制备方法。CLNA具有抗癌、调节脂质代谢、抗炎、抗氧化、抗糖尿病等多种生理功能,在预防和治疗许多常见疾病中具有较大的研究潜力,特别是糖尿病、肥胖症以及乳腺癌、结肠癌等常见癌症。物理提取法制备CLNA时提取率较低,不适用于工业上大规模生产,化学合成法制备CLNA因需要底物和催化剂,后续纯化步骤烦琐,生物合成法和基因工程法可得到较高含量的CLNA,具有良好的发展前景。

共轭亚麻酸油凝胶稳定非水相泡沫的研究

采用从桐油中提取的较高熔点的共轭亚麻酸(CLN)粗产品,与低熔点的橄榄油在高温下混合再快速降温的方法,诱导体系形成含有结晶颗粒的油凝胶,经搅打后制备非水相泡沫。结果表明,泡沫溢出量随着油凝胶浓度的增加而增加,15%CLN粗产品形成的油凝胶最大发泡率为77%,室温下稳定时间超过92 h,并且具有较好的温度敏感性。光学显微镜和偏光显微镜下观察到泡沫由体系中细小的结晶颗粒吸附在界面处稳定。

基于网络药理学和体外实验探究α-亚麻酸改善神经炎症作用及机制

目的:通过网络药理学联合体外实验探究α-亚麻酸(α-Linolenic acid,ALA)改善神经炎症的核心靶点和机制。方法:药理研究表明,ALA具有抗炎、抗氧化和神经保护等特性。通过PharmMapper和Swiss Target Prediction数据库获取ALA的作用靶点,使用GeneCards、TTD和OMIM数据库检索神经炎症的疾病靶点,通过韦恩图获得ALA和神经炎症的潜在靶点。应用STRING网站构建潜在靶点蛋白质互作网络(protein-protein interaction,PPI),使用Cytoscape 3.8.0软件筛选互作网络中的核心靶点。同时,将潜在靶点导入DAVID数据库,获取GO和KEGG数据同时对结果进行可视化。使用Autodock vina和Pymol软件将筛选出的核心靶点分别与ALA进行分子对接及结果可视化。构建神经炎症体外模型,CCK-8、SOD、MDA、细胞划痕等实验检测细胞生长状态、氧化应激、迁移和修复能力,ELISA和Western blot实验检测IL-6、iba1、COX-2(PTGS2)、i NOS蛋白的表达。结果:网络药理学筛选出ALA对于神经炎症潜在靶点46个,核心靶点IL-6、COX-2(PTGS2)等10个。GO共富集232个条目,KEGG共富集70条信号通路,分子对接显示ALA能与IL-6和COX-2两种蛋白结合。体外实验表明,神经炎症体外模型中,ALA能改善细胞活力,减轻细胞氧化应激水平,促进细胞迁移和运动修复。结论:ALA可能通过减轻氧化应激和抑制IL-6、COX-2蛋白表达改善神经炎症。

尿素包合法提纯亚麻籽油中α-亚麻酸工艺的优化研究

本文以亚麻籽油为原料油,α-亚麻酸为提取目标产物,采用单因素法研究了不同尿素溶液与脂肪酸体积比、包合温度、包合时间以及尿素-乙醇溶液浓度等对α-亚麻酸提取率的影响,优化了α-亚麻酸的提取工艺。实验结果表明,当脂肪酸与尿素溶液体积比为1∶45、尿素-乙醇溶液浓度为1mol·L^(-1)、包合温度为-15℃、包合时间为24h时,α-亚麻酸提取率可达81%。并通过液相色谱对提纯的α-亚麻酸进行表征,α-亚麻酸在12.5min出峰,符合α-亚麻酸的出峰位置。

α-亚麻酸对猪颗粒细胞胆固醇合成、类固醇激素合成和凋亡的影响

本试验旨在探究α-亚麻酸(ALA)对猪颗粒细胞(GCs)胆固醇合成、类固醇激素合成和凋亡的影响。试验收集150日龄健康母猪卵巢GCs,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)、实时荧光定量PCR(RT-PCR)、Western blot和流式细胞术探究ALA对猪GCs胆固醇合成、类固醇激素分泌及其凋亡的影响。结果表明:1)50μmol/L ALA处理极显著抑制了雌二醇(E_(2))的合成(P<0.01),但对孕酮(P_4)的合成没有显著影响(P>0.05);2)50μmol/L ALA处理显著下调了胆固醇侧链裂解酶(CYP11A1)和3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)的mRNA相对表达量(P<0.05),同时显著下调了CYP11A1和类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)的蛋白相对表达量(P<0.05);3)50μmol/L ALA处理显著下调了关键胆固醇合成基因3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR)、清道夫受体B类成员1 (SCARB1)和胆固醇调节元件结合蛋白2(SREBP2)的mRNA相对表达量(P<0.05);4)50μmol/L ALA处理显著增加了活细胞的数量(P<0.05),显著上调了B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)的mRNA相对表达量(P<0.05),并显著下调了B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)的蛋白相对表达量(P<0.05)。由此可见,ALA通过抑制胆固醇的合成来抑制类固醇激素的合成,并且抑制GCs的凋亡。

亚麻酸对乳蛋白理化性质与免疫球蛋白G/E结合能力的影响

目的探索亚麻酸对乳蛋白理化性质与免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)G/E(IgG/IgE)结合能力的影响。方法以α-乳白蛋白和β-乳球蛋白为实验材料,通过非还原性十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)、扫描电镜、粒径以及Zeta电位、间接竞争酶联免疫吸附试验法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)评价亚麻酸对乳蛋白理化性质以及IgG/IgE结合能力的影响。结果亚麻酸能够增强乳蛋白的IgG/IgE结合能力,并且通过扫描电镜、粒径以及Zeta电位结果发现,亚麻酸的加入导致α-乳白蛋白和β-乳球蛋白的颗粒变大,粒径变大,并且稳定性更强,说明亚麻酸诱导乳蛋白发生了分子间的聚合,形成高聚物。结论亚麻酸可诱导α-乳白蛋白和β-乳球蛋白形成聚合物,并能促进IgG/IgE结合能力增强。

牡丹籽油及其主要成分α-亚麻酸在雄性动物生育能力中的作用

牡丹籽油富含多种不饱和脂肪酸,其中α-亚麻酸(α-linolenic acid,ALA)含量占比高达42%以上,ALA隶属于n-3多不饱和脂肪酸(n-3 PUFAs)家族,文献报道其对雄性动物的精子生成、精液质量、精液品质、生育力等有明显的促进作用,该文对牡丹籽油及其主要成分ALA对雄性动物的生育能力的影响进行综述,为牡丹籽油的保健功能开发提供新的思路。

α-亚麻酸对水牛卵巢颗粒细胞体外培养的影响

【目的】研究α-亚麻酸(ALA)对水牛卵巢颗粒细胞体外培养过程中细胞活力、细胞凋亡、细胞周期相关基因表达及激素分泌功能的影响。【方法】为了筛选体外培养水牛卵巢颗粒细胞ALA最适浓度,在96孔板中加入起始细胞数量为1×104/mL的水牛卵巢颗粒细胞,细胞贴壁12 h后更换含0(对照组)、10、50、100、200μmol/L ALA的培养液,在相同条件下处理24 h,用CCK-8进行细胞活力检测,筛选出最适处理浓度,并用于后续试验。后续试验分为对照组(0μmol/L)和处理组(50μmol/L)两组,用实时荧光定量PCR检测颗粒细胞中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白1(p21)和增殖细胞核抗原(PCNA)基因的相对表达量,用免疫荧光对颗粒细胞中细胞凋亡相关蛋白Caspase-3和细胞周期相关蛋白p21进行荧光检测和定量分析,用ELISA法检测培养液中水牛颗粒细胞分泌的雌二醇(E 2)和孕酮(P 4)含量。【结果】与对照组相比,水牛卵巢颗粒细胞经ALA处理24 h后,在10~50μmol/L范围内随着ALA浓度升高水牛卵巢颗粒细胞的细胞活力随之升高,处理浓度为50μmol/L时细胞活力相比对照组极显著提高(P<0.01),随着浓度继续增加,水牛卵巢颗粒细胞活力下降,200μmol/L时细胞活力极显著低于对照组(P<0.01),因此后续试验选用ALA的浓度为50μmol/L。与对照组相比,50μmol/L ALA处理后颗粒细胞中抗凋亡基因Bcl-2和增殖细胞核抗原基因PCNA相对表达量均无显著差异(P>0.05),但促凋亡基因Caspase-3和细胞周期基因p 21在mRNA和蛋白水平上的表达量均极显著降低(P<0.01),E 2和P 4水平显著或极显著增高(P<0.05;P<0.01)。【结论】培养液中添加50μmol/L ALA能够提升水牛卵巢颗粒细胞增殖活力、抗凋亡能力及激素分泌能力,本研究为调控水牛卵泡发育提供理论参考。