批量法研究牛γ-球蛋白在尼龙亲和膜上的等温吸附行为

以尼龙膜为基质，Ｌ－色氨酸（Ｔｒｐ）为配基，合成了一种新的亲和介质用以吸附牛γ－球蛋白（ＢＧＧ）。用批量法系统考察了温度、离子强度和ｐＨ对亲和等温吸附的影响。研究结果表明，ＢＧＧ与氨基酸之间的亲和相互作用力主要是静电力和疏水相互作用力。在最适条件下吸附遵循Ｌａｎｇｍｕｉｒ型吸附，并且亲和吸附量最大而非特异性吸附最小。偏离该条件则会发生蛋白质在膜上的堆积，蛋白质构型变化及蛋白质与配基间的空间取向的变化，从而使吸附不再遵循Ｌａｎｇｍｕｉｒ型吸附。

新型亲和膜色谱用于去除胆红素的研究

以纤维素膜为亲和基质 ,接枝后分别以聚赖氨酸和季铵盐为配基 ,制备了两种亲和膜介质 ,用于去除磷酸缓冲液 (pH 7 4)及人血白蛋白 (HSA)溶液中的胆红素。实验结果表明 ,该方法对磷酸缓冲液中胆红素的去除率能达到 70 %以上 ;对HSA溶液中的胆红素 ,其去除率稍低 ,但在较低浓度的HSA溶液中 ,也能获得高于 5 0 %的去除率。并对亲和膜与胆红素间的亲和作用进行了研究 ,考察了温度、流速、HSA浓度及胆红素初始浓度等相关条件对去除效果的影响。结果表明 ,在较高的温度条件下 ,去除效果较佳 ;在较高的初始浓度情况下 ,胆红素的吸附速率较大。

蛋白A高效亲和膜色谱法测定人血浆中免疫球蛋白G的含量

研究了蛋白Ａ高效亲和膜色谱对水溶液及人血浆中人免疫球蛋白Ｇ（ＨＩｇＧ）的特异性吸附和定量测定。方法具有较高的精确度和较好的重复性：ＨＩｇＧ标样５次重复进样的相对标准偏差为１．５％，人血浆样品３次重复进样的相对标准偏差为３．６％；所测得的定量标定曲线的线性相关系数达到０．９９９３；不含己二胺间隔臂的亲和介质的非特异性吸附极低，基本检测不出来。快速实验中，一次分析可在０．５ｍｉｎ内完成。实验表明，利用所建立的方法对人血浆中的ＨＩｇＧ进行定量测定可以得到较为满意的结果。

亲和膜配基的结构和密度对胆红素吸附的影响

体内存在过量的胆红素会引起神经系统疾病,严重时危及生命,常用循环吸附法去除,但是多数胆红素与白蛋白形成复合物,难于拆分,导致血清胆红素的吸附去除率降低。以醋酸纤维素/聚乙烯基亚胺共混亲和膜(CA/PEI膜)为基质,通过戊二醛活化,引入间隔臂,固载具有一定特异性吸附的5种有机胺和8种氨基酸配基,强化血清胆红素的去除效果。研究结果表明,虽然改性膜的伯胺基含量仅为CA/PEI膜的1/3,但是因间隔臂的引入和配基特异性的增强,4种改性膜的胆红素吸附量提高了100%以上,并且提高了胆红素相对于蛋白的吸附选择性。增加胺基和疏水结构有利于胆红素的吸附;羧基不利于胆红素吸附;胆红素吸附还受到配基密度和空间位阻等诸多因素的影响。苯环等空间位阻较大的配基,不利于实际胆红素的吸附,且无法通过提高配基密度而提高其改性膜的胆红素吸附量,而含直链胺配基的己二胺(3-HMD)改性膜的胆红素吸附量随配基密度的提高而提高。

聚酰胺亲和膜用于去除内毒素的研究 Ⅰ亲和膜的制备和特征

以尼龙６６膜为基质，用环氧氯丙烷、戊二醛、二溴丙烷、羰基二咪唑试剂对用盐酸水解后的尼龙６６膜进行活化，共价键合上乙二胺、己二胺等不同长度的间隔臂和组氨酸、粘多菌素Ｂ等亲和配基，配基含量达３０μｍｏｌ／ｇ以上。亲和膜装入专门设计制造的膜分离器中，能有效地去除水溶液中的内毒素，去除率一般在９０％以上。该膜对内毒素的亲和容量为０２ｍｇ／ｇ，表观脱附常数为３０４×１０－８ｍｏｌ／Ｌ，亲和膜可用碱、脱氧胆酸钠、盐、无热原水进行洗涤再生。

金属螯合亲和膜吸附分离与纯化溶菌酶的研究(Ⅰ)──低温氧等离子体改性条件对亲和膜结构与吸附性能的影响

用低温氧等离子体方法对聚丙烯微孔膜表面进行改性 .扫描电镜、红外光谱和光电子能谱综合分析结果表明 ,膜表面上产生了—OH、—COOH和 C O等极性基团 ,这些基团可被活化和偶联制亲和膜 .所制备的 Cu2 +离子金属螯合亲和膜用于对溶菌酶的吸附 ,在 2 0 min和 68W的最佳条件下 ,制成的亲和膜对溶菌酶的吸附量为 8μg/ cm2 .

聚偏氟乙烯中空纤维亲和膜分离γ-球蛋白的研究(Ⅰ)——聚偏氟乙烯中空纤维亲和膜的制备及其吸附性能

对聚偏氟乙烯(PVDF)中空纤维膜进行表面亲水化处理,再经活化、偶联制得了带有苯丙氨酸(Phe)的PVDF中空纤维亲和膜.制备过程中以光电子能谱(XPS)及红外光谱分析膜表面基团的变化,经亲水化处理及活化偶联后,膜表面的O和N含量分别从5.6％和0.6％增加到16.5％和3.0％,而F含量由38.3％降低为23.0％,将该亲和膜用于室温下血浆中γ-球蛋白的分离实验,在pH=7.4,离子强度I=0.18的缓冲液体系及进料质量浓度为1.0mg/mL条件下,该亲和膜对γ-球蛋白的吸附量可达到5.85mg/g膜;与市售γ-球蛋白相比,血浆中提取纯度可达83.9％。

金属螯合亲和膜吸附分离与纯化溶菌酶的研究(Ⅱ)──不同金属螯合亲和膜对溶菌酶的吸附性能

采用低温氧或氨等离子体法改性聚丙烯微孔膜 ,基于等离子体改性膜的活化、偶联及螯合过程的机理 ,制备了 Fe3+,Ni2 +,Cu2 +和 Zn2 +等金属离子螯合亲和膜 ,并用于溶菌酶的吸 -脱附实验 .实验结果表明 ,Ni2 +和 Cu2 +离子螯合亲和膜对溶菌酶具有较高的吸附量 ,螯合过程中采用氯化物盐溶液制得的膜对溶菌酶吸附量比采用硫酸盐溶液制得的膜的吸附量高 .两种膜的重复吸-脱附性能相近 ,而 Fe3+螯合亲和膜基本上不能用于重复吸 -脱附实验 .采用补充金属螯合离子 ,能部分恢复亲和膜对溶菌酶的吸附量 ,是实现亲和膜重复使用的有效方法 .

大孔纤维素亲和膜在生化制剂纯化中的应用

目的：采用膜亲和色谱这一新型纯化分离手段，结合膜分离过程的高速度和亲和吸附的高灵敏度进行水系溶液中内毒素的吸附去除工作，以求建立一种方便实用的内毒素去除方法。方法：选取优质滤纸为原料，交联后制成纤维素膜，分别用静态和动态两种方法制备出含有组氨酸和粘多菌素的亲和膜。结果：以组氨酸为配基的亲和膜，其吸附效果可使滤液中的内毒素水平低至０５ＥＵ·ｍｌ－１以下，可满足一般医药卫生方面的要求；以粘多菌素Ｂ为配基的亲和膜，其吸附能力好于组氨酸亲和膜，对自来水和药物中天然内毒素的去除率在９５％以上。结论：亲和膜堆对内毒素的去除效果与文献报道的柱亲和色谱法相当。但在成本、效率。

亲和膜色谱技术研究进展

对一种崭新的生物大分子分离技术——亲和膜色谱技术做了全面的评述,介绍了亲和膜色谱分离的过程,评价了亲和膜基质材料活化、改性方法,给出了配基、间隔臂的选择原则,概括了亲和膜色谱理论研究的进展,并对亲和膜色谱技术进行了展望.

纤维素亲和膜用于内毒素的去除

报道了用于内毒素去除的３种新型纤维素亲和膜的制备及应用，并对它们的性能进行了比较。结果表明，这３种亲和膜均能有效去除盐溶液中的内毒素，去除率在９０％以上。对人血清白蛋白溶液，季铵盐和壳聚糖亲和膜对内毒素的去除率较高，仍然在９０％以上，金属螯合物亲和膜的去除效果不如前两种，去除率仅为８３．３％。实验选择不同的亲和膜，考察了它们对内毒素的吸附容量、样品处理量以及再生效果，结果表明吸附量在 ２．４×１０６ＥＵ／ｇ以上，样品处理量较大，适合用于小批量医药制剂的生产过程；再生效果较好，可重复使用。

聚丙烯膜接枝改性亲和膜的制备与表征

采用预辐射接枝法在聚丙烯基膜(PP)上接枝甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA),再将配基辛巴蓝(CBD)固载于GMA聚合链上制备了一种亲和膜。考察了预辐射剂量、接枝单体浓度、反应时间和温度、Mohr’s盐浓度对GMA聚合接枝的影响,获得了较佳的条件:GMA浓度20%(v/v),反应温度70℃,反应时间3h,Mohr’s盐浓度0.01%(wt),CBD溶液浓度25mg·mL-1。用红外光谱(FTIR)和扫描电镜(SEM)分析和观察了该亲和膜的表面形貌特征;在37℃和60mg·L-1的胆红素溶液中对该亲和膜进行静态吸附平衡实验,结果表明,经2.5h吸附达到平衡,其吸附容量可达50mg·g-1。

亲和膜用于去除医药及人血清白蛋白溶液中的内毒素(英文)

以纤维素膜为基质材料 ,制备了 3种用于去除内毒素的亲和膜 ,分别为壳聚糖亲和膜 (KFCC5 17) ,疏水阳离子亲和膜 (KFCG316 )和金属螯合物亲和膜 (KFCG40 2 )。研究了亲和膜对内毒素的吸附容量及在内毒素去除方面的应用 ,结果表明这 3种亲和膜都可以用于多种溶液中内毒素的去除。考察了离子强度、pH值以及流速对去除效果的影响 ,并分析了原因。KFCC5 17,KFCG316 ,KFCG40 2都可用于人血清白蛋白溶液中内毒素的去除 ,KFCC5 17还可用于医药制剂如氢化可的松、葛根素、盐酸丁卡因和右旋糖苷 40葡萄糖注射液中内毒素的去除 ,在所选择的条件下 ,内毒素的去除效率高于 80 % ,有用物质的回收率为 95 %以上。

高效亲和膜色谱快速分析及小量制备蛋白质

以甲基丙烯酸缩水甘油酯纤维素复合膜为基质，分别以蛋白Ａ（ＰｒｏｔｅｉｎＡ）、人免疫球蛋白Ｇ（ＨＩｇＧ）、三嗪染料（ＣｉｂａｃｒｏｎｂｌｕｅＦ３ＧＡ）、亚胺二乙酸铜离子为配基，用不同方法制备了适合于分析及小量制备的高效亲和膜色谱介质，并对高效亲和柱的基本性能及其应用于各种相应蛋白的定量测定情况进行了考察。利用这种方法可以针对不同的目标蛋白及所存在的环境采用不同的配基，对各种蛋白的定量测定及小量制备可达到较为满意的结果。

固定化金属螯合亲和膜纯化重组抗菌肽研究

用自行制备的固定化金属螯合亲和膜对N端含六个组氨酸标记的重组抗菌肽进行了分离纯化 ,并较好地解决了金属离子泄露问题 .实验表明 ,固定化金属螯合亲和膜性能优于传统琼脂糖凝胶介质 ,完全适用于分离纯化含有多组氨酸标记的重组蛋白质 .

固定化铜离子亲和膜色谱柱吸附血红蛋白的研究

将纤维素滤纸进行碱处理及环氧活化、偶联亚氨基二乙酸、固定化铜离子等处理,并将其装入自制的色谱柱管,制得固定化铜离子亲和膜色谱柱。该柱可用于吸附血红蛋白(hemoglobin,Hb),吸附率可达到90%以上。考察了上样量、pH值、温度、上样速度等因素对固定化铜离子亲和膜吸附Hb的影响。实验结果表明,固定化铜离子亲和膜色谱柱吸附血红蛋白的最佳条件为:室温下实验,缓冲体系的pH值控制在6～8,上样速度0.5～1.0mL/min,上样量为3.16～7.90mg/g。

固定金属离子亲和膜分离技术(Ⅰ)方法和原理

固定金属离子亲和膜是近几年发展起来的纯化生物分子的新技术，综述了３１ 篇文献，概述了固定金属离子亲和膜分离的基本原理，探讨了螯合剂的选择原则，研究了金属离子与蛋白质的作用机理．

新型亲和膜的制备及其吸附胆红素的性能研究

以尼龙膜为基膜,采用甲醛活化法偶联壳聚糖制备尼龙-壳聚糖复合膜;再用1,4-二羟基正丁烷双缩水甘油醚对其进行活化并固载聚赖氨酸作为配基,制备亲和膜。膜上壳聚糖和聚赖氨酸的含量分别为112.4和92.3mg/g尼龙膜。通过静态和动态实验测定了胆红素在膜上的吸附性能,结果表明,胆红素在膜上的吸附平衡符合Freundlich方程;在较高的温度、较低的离子强度下胆红素的去除效果较好;在动态操作条件下容易达到吸附平衡,并对结合胆红素具有较好的清除效果。

金属螯合亲和膜吸附分离与纯化溶菌酶的研究(Ⅲ)混合酶和蛋清(壳)中的溶菌酶提取及纯化新工艺

采用亚氨二乙酸 (IDA) -Cu2 + 亲和膜分离新工艺 ,分离纯化混合酶和蛋壳中的溶菌酶 ,实验结果表明 ,亲和膜对溶菌酶的选择吸附性能良好 ,对葡萄糖氧化酶基本不吸附 ;用亲和膜直接从蛋清 (壳 )中分离提纯溶菌酶 ,通过正交实验 ,找出了最佳操作条件 ,在此条件下提取的溶菌酶纯度大于 175 0

用新型尼龙亲和膜纯化人血浆蛋白

以微孔尼龙膜为基质 ,分别采用三氯三嗪和 1,4 丁二醇二甘油醚活化法制备了一系列亲和膜。首次使用平板亲和膜方法经一步操作即从人血浆中纯化得到高纯度的γ 球蛋白、纤溶酶原。电泳分析显示 ,纯化得到的人血浆γ 球蛋白 ,纯度在 83%以上 ;纯化得到的γ 球蛋白和纤溶酶原的纯度均高于市售同类产品 ;另外 ,初步探索了人血浆凝血酶的一步纯化法。该法纯化得到的凝血酶比活为 42 0NIH单位 /mg～ 42 5NIH单位