人内源性逆转录病毒-H长末端重复关联蛋白2在人食管胃交界腺癌组织中的表达

目的探索新型免疫检查点人内源性逆转录病毒-H长末端重复关联蛋白2(HHLA2)在人食管胃交界腺癌组织中的表达及其临床意义。方法选取2016年3月至2018年6月安阳市肿瘤医院收治的食管胃交界腺癌患者126例作为研究对象,采用免疫组化染色检测食管胃交界腺癌和癌旁正常组织中HHLA2表达,随访终点为患者死亡。采用COX回归风险模型进行多因素生存分析,采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线。结果HHLA2在食管胃交界腺癌组织中阳性表达率为68.9%(78/126),高于癌旁正常组织的21.1%(27/126)(χ^(2)=42.465,P<0.001)。多因素COX分析显示,TNM分期、HHLA2表达是患者总生存期的独立预后因素(HR=4.217,P<0.001;HR=2.467,P=0.003)。高表达HHLA2和低表达HHLA2的食管胃交界腺癌患者5 a生存率分别为24.4%和56.3%(χ^(2)=21.140,P<0.001)。结论HHLA2在食管胃交界腺癌组织中表达升高,且与患者总生存期存在相关性;高表达HHLA2和TNM分期进展是导致患者总生存期缩短的独立危险因素。

肺腺癌患者癌组织人内源性逆转录病毒-H长末端重复关联蛋白2、淋巴细胞活化基因3、整合连接激酶表达情况及与临床病理特点的关系

目的 探究肺腺癌(LUAD)患者癌组织人内源性逆转录病毒-H长末端重复关联蛋白2(HHLA2)、淋巴细胞活化基因3(LAG-3)、整合连接激酶(ILK)表达情况及与临床病理特点的关系。方法 检测106例LUAD患者癌组织及癌旁组织HHLA2、LAG-3、ILK表达情况,根据3项指标在癌组织中的表达情况将所有患者分别分为HHLA2高表达组(85例)和HHLA2低表达组(21例)、LAG-3高表达组(65例)和LAG-3低表达组(41例)、ILK高表达组(78例)和ILK低表达组(28例)。收集所有患者一般资料、临床病理资料及3年生存率并进行组间比较。结果 LUAD患者癌组织中HHLA2、LAG-3、ILK高表达患者比例均高于同指标低表达患者比例,癌旁组织中上述3项指标低表达患者比例均高于同指标高表达患者比例。HHLA2高表达组年龄≥60岁、淋巴结转移患者比例均高于HHLA2低表达组;LAG-3高表达组TNMⅢ、Ⅳ期、淋巴结转移、远处转移患者比例均高于LAG-3低表达组;ILK高表达组组织低分化、TNMⅢ、Ⅳ期、淋巴结转移、远处转移患者比例均高于ILK低表达组(P<0.05)。HHLA2低表达组、LAG-3低表达组及ILK低表达组3年生存率均高于同指标高表达组(P<0.05)。结论 HHLA2、LAG-3、ILK在LUAD患者癌组织中大部分呈高表达,且与临床病理特点、预后存在一定关系。

壶腹癌组织中HHLA2、Ezrin、Bcl-2的表达特点

目的探讨壶腹癌组织中人内源性逆转录病毒H长末端重复缔合蛋白2抗体(HHLA2)、埃滋蛋白(Ezrin)、人B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)的表达特点。方法选取壶腹癌患者52例。从胰十二指肠切除术后的标本中取适量的壶腹癌组织和距离肿瘤病灶约2 cm处的癌旁组织,免疫组化法检测组织标本中HHLA2、Ezrin、Bcl-2表达情况。收集患者的人口学特征及肿瘤分化程度、肿瘤大小、肿瘤病理分期、淋巴结转移、十二指肠浸润、胰腺浸润;出院后对患者进行3 a随访,记录生存情况。结果壶腹癌组织中HHLA2、Ezrin、Bcl-2蛋白表达阳性率明显高于癌旁组织(P<0.01)。HHLA2阳性率在不同分化程度、肿瘤病理分期、淋巴结转移、十二指肠浸润、胰腺浸润情况的壶腹癌患者中比较差异具有统计学意义(P<0.05);HHLA2阳性率在不同性别、年龄、肿瘤大小的壶腹癌患者中比较差异无统计学意义(P>0.05)。Ezrin、Bcl-2阳性率在不同淋巴结转移、十二指肠浸润、胰腺浸润的壶腹癌患者中比较差异具有统计学意义(P<0.01);Ezrin、Bcl-2阳性率在不同性别、年龄、分化程度、肿瘤大小、肿瘤病理分期的壶腹癌患者中比较差异无统计学意义(P>0.05)。52例壶腹癌患者3 a生存率为71.15%(37/52)。HHLA2、Ezrin、Bcl-2阳性的壶腹癌患者3 a生存率明显低于HHLA2、Ezrin、Bcl-2阴性的胃癌患者(log-rank χ^(2)分别为13.528、16.705、12.911,均P<0.01)。ROC曲线分析显示,HHLA2、Ezrin、Bcl-2在预测壶腹癌患者生存情况中具有较高的应用价值(P<0.05),其中,各指标联合检测对壶腹癌患者生存情况的预测价值最高(AUC=0.950,95%CI:0.895~0.983,P<0.001)。结论壶腹癌组织中HHLA2、Ezrin、Bcl-2高表达,且与病理参数和生存情况相关,联合检测对患者生存情况具有较高的预测价值。

人内源性逆转录病毒-H长末端重复关联蛋白2在肺癌组织的表达及其临床意义

目的观察人内源性逆转录病毒-H长末端重复关联蛋白2（HHLA2）在肺癌组织的表达，并分析其表达水平与患者临床病理特征及预后的关系。方法采用组织芯片技术和免疫组织化学染色法分别检测94例肺腺癌、75例肺鳞癌组织以及相应癌旁正常组织中HHLA2的表达，采用Wilcoxon秩和检验比较肺癌及癌旁正常组织HHLA2表达水平的差异，X^2检验分析肺癌组织HHLA2表达水平与患者临床病理特征的关系，Kaplan-Meier生存分析法分析HHLA2表达水平与患者预后的关系，拟合Cox模型评价不同指标与患者预后的关系。结果肺癌组织HHLA2的表达显著高于癌旁正常组织（肺腺癌：U=296.5，P=0.001；肺鳞癌：U=22.5，P=0.001）。有淋巴结转移的患者HHLA2高表达比例高于无淋巴结转移患者（肺腺癌：P=0.002；肺鳞癌：P=0.046）；年龄≥60岁的肺腺癌患者HHLA2高表达比例高于年龄〈60岁的患者（P=0.023）；HHLA2染色强度与肺癌患者其他临床病理特征无明显相关。Kaplan-Merier生存分析显示，HHLA2高表达患者总生存期（OS）较HHLA2低表达患者显著缩短[肺腺癌：风险比（HR）=1.875，95％可信区间（C1）：1.099～3.196，P=0.021；肺鳞癌：HR=5.568，95％CI：2.024-15.320，P=0.001），多因素Cox模型显示，淋巴结转移（HR=1.766，95％CI：1.018-3.064，P=0.043）和HHLA2高表达（HR=1.827，95％CI：1.061～3.146，P=0.030）为肺腺癌患者独立预后因素；而年龄≥60岁（HR=3.344，95％CI：1.123-9.963，P=0.030）和HHLA2高表达（HR=3.617，95％CI：1.340～9.761，P=0.011）为肺鳞癌患者独立预后因素。结论HHLA2在肺癌组织高表达，提示其在肺癌发生发展过程中发挥重要作用，可作为肺癌患者预后评估的重要因素，其分子机制亟待深入探讨。

免疫检查点HHLA2在子宫内膜癌中的表达及临床意义

目的:探索免疫检查点人内源性逆转录病毒-H长末端重复关联蛋白2(HHLA2)在子宫内膜癌中的表达及临床意义。方法:回顾性收集192例子宫内膜癌患者的组织标本及临床病理资料,利用Sanger测序检测POLE突变,免疫组化染色检测错配修复蛋白及p53蛋白表达。将子宫内膜癌划分为POLE突变型、错配修复缺陷型(MMRd)、p53突变型及无特定分子特征(NSMP)型,免疫组化染色检测HHLA2蛋白表达,利用卡方检验分析HHLA2蛋白与临床病理特征及分子分型的关系。采用Kaplan-Meier法和Cox比例风险回归模型分析影响子宫内膜癌患者预后的相关因素。结果:HHLA2蛋白在子宫内膜癌中的阳性表达率为69.8%(134/192)。子宫内膜样癌、中-高分化肿瘤、I期、浅肌层浸润、无淋巴脉管间隙浸润及分子分型为NSMP型的肿瘤中HHLA2蛋白表达率较高。整个研究队列及分子分型为NSMP型的亚组患者中,HHLA2蛋白表达阳性患者的无疾病复发生存率高于HHLA2蛋白表达阴性患者(P<0.05)。多因素生存分析显示,分子分型是子宫内膜癌患者的预后因素(P<0.05)。结论:HHLA2是NSMP型子宫内膜癌的预后因素和潜在治疗靶点。

胃癌组织Rap1GAP、HHLA2表达变化及其与患者临床病理特征和预后的关系

目的观察胃癌组织Rap1 GTP酶激活蛋白(Rap1GAP)、人内源性逆转录病毒-H长末端重复关联蛋白2(HHLA2)mRNA表达变化,并探讨其表达与患者临床病理特征和预后的关系。方法选择胃癌患者97例,取手术切除的胃癌组织及其配对的癌旁正常组织,采用RT-qPCR法检测Rap1GAP、HHLA2 mRNA表达。比较胃癌组织与癌旁正常组织Rap1GAP、HHLA2 mRNA表达差异,分析二者表达与胃癌患者临床病理特征的关系。以Rap1GAP、HHLA2 mRNA表达的中位数为截断值,将患者分为Rap1GAP、HHLA2 mRNA高表达者与低表达者,比较不同Rap1GAP、HHLA2 mRNA表达者5年生存率差异。采用Cox风险比例回归模型分析影响胃癌患者预后的危险因素。结果胃癌组织Rap1GAP mRNA相对表达量低于癌旁正常组织,HHLA2 mRNA相对表达量高于癌旁正常组织(P均<0.05)。Rap1GAP、HHLA2A mRNA表达与肿瘤浸润深度、TNM分期和淋巴结转移有关(P均<0.05),与性别、年龄、肿瘤直径、组织分化程度无关(P均>0.05)。Rap1GAP mRNA低表达者5年生存率低于Rap1GAP mRNA高表达者,HHLA2 mRNA高表达者5年生存率低于HHLA2 mRNA低表达者(P均<0.05)。Cox风险比例回归分析显示,有淋巴结转移、Rap1GAP mRNA低表达、HHLA2 mRNA高表达是胃癌患者预后不良的危险因素(P均<0.05)。结论胃癌组织Rap1GAP低表达、HHLA2高表达,二者异常表达与胃癌恶性生物学行为和患者预后不良有关。Rap1GAP、HHLA2有可能成为胃癌预后评估的生物标志物和潜在的治疗靶点。

HHLA2及其受体TMIGD2在卵巢癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨人类内源性逆转录病毒-H长末端重复序列结合蛋白2(HHLA2)和其受体穿膜和免疫球蛋白结构域2(TMIGD2在卵巢癌组织中的表达,分析其与卵巢癌患者临床病理特征及预后的关系。方法:通过免疫组织化学方法在包含154点/154例卵巢癌组织的芯片中分别检测HHLA2和其受体TMIGD2的表达,分析其表达水平与患者临床病理特征的关联性及其对预后的影响。结果:HHLA2的表达与卵巢癌病理分型有关(P<0.05)。Kaplan-Merier生存分析表明,在Ⅰ型卵巢癌中,HHLA2和TMIGD2高表达患者OS较短(P<0.05,P<0.01)。单因素Cox比例风险模型显示,卵巢癌Ⅱ型、FIGO分期Ⅲ和Ⅳ期、存在淋巴转移及远处转移者预后更差。多因素Cox风险模型分析显示,TMIGD2高表达、FIGO分期Ⅲ和Ⅳ期、存在淋巴转移、淋巴转移阳性可能是导致卵巢癌患者预后较差的独立影响因素,且HHLA2与TMIGD2表达呈正相关(r=0.603,P<0.01)。结论:HHLA2及其受体TMIGD2在卵巢癌组织中高表达且与患者的预后相关联,有望成为卵巢癌患者的预后预测指标。

HHLA2/TMIGD2在实体肿瘤中的研究进展

以程序性死亡因子1(PD-1)及其配体1(PD-L1)为代表的B7/CD28家族在肿瘤免疫治疗中显示出极大的应用潜力,但仍有很多PD-L1检测阴性患者无法从中受益。作为B7家族成员,人内源性逆转录病毒-H长末端重复关联蛋白2 (HHLA2)分子结构与PD-L1等其他B7家族成员有一定的同源性和相似性,对T细胞有共刺激和共抑制作用,在多数实体肿瘤中呈高表达,且在某些实体肿瘤中表达比PD-L1更广泛;其通过与受体穿膜和免疫球蛋白结构域2(TMIGD2)结合可促进肿瘤免疫逃逸,导致肿瘤的进展和转移。基于此,HHLA2/TMIGD2有望成为肿瘤免疫治疗新的通路和靶点之一。本文就HHLA2及其受体TMIGD2的分子结构、生物学功能及其在实体肿瘤中作用的研究进展作一综述。

非小细胞肺癌组织中HHLA2表达变化及其意义

目的观察非小细胞肺癌(NSCLC)组织中人内源性逆转录病毒-H-长末端重复关联蛋白2(HHLA2)的表达变化,并探讨其意义。方法 NSCLC组织60例份(肿瘤组),癌旁组织(至少距肿瘤边缘5 cm以上)30例份(癌旁组),采用免疫组化En Vision法检测两组HHLA2,分析HHLA2表达与NSCLC临床病理参数的关系。结果肿瘤组及癌旁组HHLA2阳性率分别为81.67%、13.33%,两组比较,P<0.05。HHLA2表达与NSCLC患者性别、年龄、吸烟情况、病理类型、临床分期、淋巴结转移均无相关性(P均>0.05)。结论 NSCLC组织中HHLA2表达升高,其表达与NSCLC临床病理参数均无相关性;HHLA2可能成为NSCLC免疫检查及治疗的新靶点。

HHLA2在肝细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨人内源性逆转录病毒-H长末端重复关联蛋白2(human endogenous retrovirus subfamily H long terminal repeat associating protein 2,HHLA2)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达及其与HCC患者临床病理特征和预后的关系。方法:基于TCGA数据库分析人HCC组织中HHLA2 mRNA表达与B7家族基因的相关性,用组织芯片技术、免疫组织化学染色法分别检测90例HCC组织及其癌旁组织中HHLA2的表达。用Wilcoxon秩和检验比较HCC组织及癌旁组织中HHLA2表达水平的差异,用χ2检验分析HCC组织中HHLA2表达水平与患者临床病理特征的关系,用Kaplan-Meier法分析HHLA2表达水平与患者总生存期(OS)的关系,拟合Cox模型评价不同指标的预后价值。结果:HCC组织中HHLA2 mRNA表达水平与B7家族CD274、C10orf54、PDCD1LG2、ICOSLG和CD276相关;HCC组织中HHLA2的表达水平与肿瘤大小显著相关(χ2=4.531,P<0.05);HHLA2低表达的HCC患者OS较HHLA2高表达患者显著延长(HR=1.878,95%CI:1.066~3.309,P<0.05);多因素风险比例模型显示,肿瘤大小(HR=2.493,95%CI:1.310~4.742,P<0.01)可作为HCC患者预后评估的独立危险因素。结论:HHLA2表达与HCC患者预后显著相关,是HCC免疫治疗的潜在新靶点。

结直肠癌组织HHLA2、TMIGD2表达及其临床病理意义

目的探讨结直肠癌组织中人内源性逆转录病毒-H长末端重复关联蛋白2(HHLA2)、跨膜和免疫球蛋白结构域2(TMIGD2)表达及其与患者临床病理特征及预后的关系。方法选取2016年10月至2017年10月于北京老年医院住院治疗的168例结直肠癌患者(结直肠癌组);选取结直肠癌患者相应癌旁正常组织作为对照组。采用免疫组织化学法检测患者组织中HHLA2、TMIGD2的表达水平,根据二者阳性表达情况将患者分为HHLA2阳性表达组、HHLA2阴性表达组、TMIGD2阳性表达组、TMIGD2阴性表达组;卡方检验分析HHLA2、TMIGD2表达水平与临床病理特征的关系;Kaplan-Meier法分析结直肠癌患者HHLA2、TMIGD2表达水平与预后的关系;多因素Cox回归分析影响结直肠癌预后的因素。结果结直肠癌组HHLA2、TMIGD2阳性表达率高于对照组(P<0.05)。HHLA2、TMIGD2阳性表达组与阴性表达组肿瘤直径、肿瘤浸润程度、淋巴结转移、Duke分期、肿瘤分化程度比较,差异有统计学意义(P<0.05)。HHLA2阴性表达结直肠癌患者3年生存率(84.48%)高于HHLA2阳性表达患者(61.82%)(χ^(2)=9.227,P<0.05);TMIGD2阴性表达结直肠癌患者3年生存率(80.56%)高于TMIGD2阳性表达患者(61.46%)(χ^(2)=7.097,P<0.05)。HHLA2、TMIGD2、Duke分期是影响结直肠癌死亡的独立危险因素(P<0.05)。结论HHLA2、TMIGD2高表达与结直肠癌患者肿瘤直径、肿瘤浸润程度、淋巴结转移、Duke分期、肿瘤分化程度及预后均存在相关性,有可能成为预测远期预后的分子标志物。

免疫检查点B7-H3、TMIGD2、HHLA2在卵巢癌中表达及临床意义

目的探讨免疫检查点B7-H3、跨膜和免疫球蛋白结构域2(TMIGD2)、人内源性逆转录病毒-H长末端重复关联蛋白2(HHLA2)在卵巢癌中的表达及临床意义。方法选取84例卵巢癌患者为研究对象,检测患者治疗前后血清B7-H3水平,以及癌组织B7-H3、TMIGD2、HHLA2蛋白表达情况。采用logistic回归分析组织B7-H3、TMIGD2、HHLA2蛋白表达与卵巢癌不同病理特征的关系。结果卵巢癌患者治疗后血清B7-H3水平低于治疗前(P<0.05);不同FIGO分期、肿瘤大小及是否出现淋巴结转移、腹腔积液的卵巢癌患者血清B7-H3水平比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。卵巢癌组织B7-H3、TMIGD2、HHLA2蛋白阳性表达分别为67例(79.8%)、55例(65.5%)、56例(66.7%)。不同FIGO分期、是否存在腹腔积液的卵巢癌患者癌组织B7-H3表达比较,差异具有统计学意义(P<0.05);不同FIGO分期、肿瘤大小及是否存在淋巴结转移、腹腔积液卵巢癌患者组织TMIGD2、HHLA2表达比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论免疫检查点B7-H3、TMIGD2、HHLA2的表达与卵巢癌患者病情进展相关,可作为卵巢癌治疗及预测的新靶点。

HHLA2在不同分子亚型乳腺癌的表达及意义

目的探讨乳腺癌组织中人内源性逆转录病毒-H-长末端重复关联蛋白2(HHLA2)表达变化与临床病理特征之间的关系及意义。方法纳入101例手术切除的原发性乳腺癌患者的临床资料,采用免疫组织化学法检测肿瘤组织及癌旁组织中HHLA2的表达情况,分析其与临床病理特征的关系以及在不同分子亚型乳腺癌中的表达。结果肿瘤组织HHLA2表达率高于癌旁组织(39. 6%vs. 12. 9%,P=0. 000)。HHLA2表达与雌激素受体、孕激素受体相关(P=0. 000)。HHLA2表达与年龄、绝经、组织学分级、腋窝淋巴结转移、临床分期均无相关性(P> 0. 05)。不同分子亚型乳腺癌HHLA2的表达差异有统计学意义(P=0. 000)。结论 HHLA2可能成为乳腺癌新的免疫靶点。

HHLA2与PD-L1在结直肠癌组织中的表达及临床病理学意义

目的探讨人内源性逆转录病毒-H长末端重复关联蛋白2(human endogenous retrovirus subfamily H long terminal repeat associating protein 2,HHLA2)与程序性死亡受体配体-1(programmed death ligand-1,PD-L1)在结直肠癌组织中的表达及临床意义。方法收集2017年3月至2017年9月在联勤保障部队第九四〇医院确诊并经手术治疗的临床病理资料完整的120例结直肠腺癌。采用组织芯片技术和免疫组织化学染色检测这120例结直肠癌组织中HHLA2、PD-L1和TP53的表达,分析其与患者临床病理特征及预后的关系。结果结直肠癌组织中PD-L1表达在肿瘤原发部位方面比较,差异具有统计学意义(P<0.05);HHLA2表达在肿瘤分化程度方面比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。HHLA2强阳性患者无进展生存期(progression-free survival,PFS)短于其他患者,差异具有统计学意义(P<0.01)。多因素Cox回归分析显示,PD-L1表达是结直肠癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。肿瘤细胞中PD-L1表达分别与HHLA2表达(r=0.211,P<0.05)和TP53表达(r=0.232,P<0.05)呈正相关。结论HHLA2可能参与结直肠癌的发生和发展,高表达提示患者预后较差。PD-L1表达与HHLA和TP53表达呈正相关。

HHLA2过表达胃癌细胞株构建及细胞功能的初步研究

目的使用慢病毒载体构建稳定过表达人内源性逆转录病毒H-长末端重复关联蛋白2(HHLA2)的胃癌细胞系,探讨细胞发生的生物学功能改变。方法由目的基因以及Lipo2000转染试剂构建重组质粒,将该质粒转染293T细胞,浓缩其细胞上清液并测定浓度,再将浓缩液转染胃癌细胞株BGC-823和MGC80-3,利用流式细胞术分选并验证GFP+稳定过表达的细胞株。开展细胞功能实验(含迁移试验和增殖试验等)以分析过表达HHLA2胃癌细胞株的生物学功能。结果酶切及测序结果示,重组慢病毒载体成功构建。流式分选及验证示,HHLA2过表达胃癌稳转株。过表达HHLA2可使胃癌细胞株MGC80-3和BGC-823加快增殖,其24 h、48 h、72 h吸光度值均较对照细胞株升高(P<0.05)。过表达HHLA2可增强胃癌细胞株BGC-823的迁移能力,其24 h、48 h迁移率均较对照细胞株升高(P<0.05);MGC80-3细胞迁移距离未明显变长(P>0.05)。结论HHLA2过表达能够提高胃癌细胞的增殖和迁移能力。