人参皂甙Rg3抑制卵巢癌SKOV3细胞生长的机制研究

目的探讨人参皂甙Rg3抑制卵巢癌细胞生长可能存在的分子机制。方法采用细胞克隆实验检测人参皂甙Rg3对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的抑制效果;四氮唑蓝(MTT)比色法、流式凋亡、划痕实验、Transwell实验分别检测人参皂甙Rg3对SKOV3细胞凋亡、侵袭、迁移的影响;qRT-PCR法和Western blot法分别检测Rg3不同浓度作用下卵巢癌细胞中Zeste基因增强子同源物2(EZH2)基因和蛋白的表达。结果人参皂甙Rg3对SKOV3细胞增殖抑制率升高(P<0.05),凋亡率显著上升(P<0.01),侵袭、迁移能力均显著下降(P<0.01),SKOV3细胞中EZH2的基因和蛋白随着Rg3浓度的增加表达量呈现明显的下降(P<0.01)。结论人参皂甙Rg3可能通过抑制EZH2的表达,促进卵巢癌细胞的凋亡,抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭以及迁移的能力,为卵巢癌的临床治疗提供新思路。

三七叶甙制备抗癌活性成分20(R)-人参皂甙-Rh_2和人参皂甙Rg_3

20（R）-ginsenoside-Rh2,ginsenoside-Rg3 and 20（S）-ginsenoside Rg3 were prepared by the hydrolysis of leaf saponins of Panax notoginseng（Burk.）F.H.Chen with solution of 50% acetic acid and then column chromatography on silica gel.Their structures were characterized by spectroscopic analysis,chemical degradation and comparison with authentic samples.

人参皂甙-α-鼠李糖苷酶分离提纯及其酶性质

主要研究微生物sp.G9产皂甙鼠李糖苷酶的分离提纯及其酶性质。该酶能够水解人参皂甙Re的C 6位末端上的一个α 鼠李糖基,从而制备人参皂甙Rg1。该酶蛋白的分子量约为54kDa,且酶反应的最佳温度是40℃,最适pH值是5。

红参组方的注射剂中人参皂甙Rg_1、Re、Rb_1的含量测定

目的:测定不同的含红参组方的注射剂中人参皂甙Rg1、Re和Rb1的含量。方法:采用反相高效液相色谱法。结果:人参皂苷Rg1、Re和Rb1在4～400μg.ml-1、4～400μg.ml-1和8～800μg.ml-1峰面积与其浓度具有良好的线性关系。平均加样回收率分别为97.10%～108.91%(人参皂甙Rg1),94.78%～103.00%(人参皂甙Re)和102.71%～106.83%(人参皂甙Rb1)。结论:该方法简便、快速、准确,可同时测定含红参组方注射剂中人参皂甙Rg1、Re、Rb1的含量。

人参皂甙-Rg_(3)、-Rb_(3)抗病毒作用的研究

目的 观察人参皂甙 - Rg3、- Rb3抗病毒的活性。方法 在 FL细胞中扩增病毒 ,进行 TCID5 0 滴定 ,采用细胞病变抑制效应 (CPE)的测定法观察药物的抗病毒作用。结果 0 .1 2 5～ 4.0μg/ ml浓度的人参皂甙 - Rg3因浓度不同可以以不同方式抑制 HSV- 1和 Polio V致 CPE发生 ;1 56.2～ 2 50μg/ ml浓度的人参皂甙 - Rb3因浓度不同可以不同方式抑制 HSV- 1和 VSV致 CPE发生。结论 人参皂甙 - Rg3具有抗 HSV- 1和 Poli 活性 ,人参皂甙 - Rb3具有抗 HSV- 1和

人参皂甙Rb1对体外软骨细胞Ⅱ型胶原mRNA表达的影响

目的:探讨兔体外软骨细胞不同代系间Ⅱ型胶原mRNA表达的差异以及人参皂甙Rb1对第2代软骨细胞Ⅱ型胶原表达的影响。方法:在成功分离培养软骨细胞后,以细胞爬片法检测原代及第2、4代软骨细胞Ⅱ型胶原mRNA表达的差异。以浓度为0·01μmol·L-1,0·1μmol·L-1,1μmol·L-1,10μmol·L-1,100μmol·L-1的Rb1作用于贴壁3d后的第2代病理软骨细胞,观察各浓度组软骨细胞Ⅱ型胶原mRNA表达情况。结果:原代、第2代、第4代软骨细胞Ⅱ型胶原mRNA表达的强度依次下降,适宜浓度的Rb1可增强第2代软骨细胞Ⅱ型胶原的表达,维持软骨细胞的正常表型。结论:兔软骨细胞不同代系间Ⅱ型胶原mRNA的表达存在一定差异,人参皂甙Rb1可能有利于第2代软骨细胞Ⅱ型胶原的表达。

人参茎叶中人参皂甙含量检测前处理工艺优化及方法学考察

目的:优化人参茎叶中人参皂甙含量检测前处理的最佳工艺,确定人参茎叶原料中的人参皂甙含量检测方法并进行方法学考察。方法:采用正交实验优化人参茎叶中人参皂甙含量检测前处理工艺,采用高效液相色谱法测定人参总皂甙含量,并通过线性关系、精密度试验、重复性试验、稳定性试验、加样回收试验考察此方法的科学性与可行性。结果:原料前处理的最佳工艺为氧化镁加入量0.10 g,过40目筛,在50℃条件下超声提取1.5 h;方法精密度、重复性、稳定性良好,平均加样回收率为99.4%。结论:本文确立了人参茎叶原料的最优前处理方法,为人参皂甙含量的检测提供参考。

人参皂甙Rb_1和Rg_1对幼小鼠性腺和副性腺的影响

幼年小鼠皮下注射人参皂甙Ｒｂ１６ｍｇ／ｋｇ、Ｒｇ１２５和５０ｍｇ／ｋｇ连续１４天，结果Ｒｂ１能能使正常雌性小鼠子宫及雄性小鼠精囊明显增重，Ｒｇ１也可使正常雄性小鼠精囊明显增重，但却不能阻止去势小鼠副性腺的萎缩。提示人参皂甙本身无性激素样作用。

人参皂甙Rg1和Rb1对骨髓粒-巨噬系祖细胞增殖的作用

用体外造血祖细胞集落形成技术 ,观察人参皂甙Rg1和Rb1对正常人粒 巨噬系祖细胞(CFU GM )的刺激增殖作用。实验结果表明 :Rg1浓度为 2 .5 ,5 ,10和 5 0 μg ml时CFU GM集落产率均显著高于对照组 (P <0 .0 1) ,提高率分别为 (39.8± 3.6 ) % ,(70 .6± 6 .8) % ,(6 3.0± 6 .4 ) %和 (6 0 .8± 5 .9) %。Rb1浓度为 0 .5 ,2 .5 ,5 ,10和 5 0 μg ml时CFU GM集落产率均明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,提高率分别为 (2 4 .5± 2 .3) % ,(45 .6± 4 .7) % ,(5 4.6± 6 .1) % ,(6 5 .1± 6 .3) %和(5 8.3± 5 .7) %。高浓度 (5 0 μg ml)不显示抑制作用。上述结果说明 ,Rg1和Rb1对CFU GM具有明显的刺激增殖作用 。

人参皂甙Rg_1,Re对β-淀粉样蛋白诱导原代培养海马及皮质神经元损伤的保护作用

目的 :研究人参皂甙 Rg1 ,Re对β-淀粉样蛋白 (β- AP)诱导原代培养海马及皮质神经元损伤的影响。方法 :测定神经元细胞培养上清中的乳酸脱氢酶 ( L DH)释放度来检测细胞的受损程度。 结果 :经终浓度为 0 .4μmol/ L 的 β- AP诱导损伤 12h,神经元细胞培养上清中的 L DH释放度明显升高 ;人参皂甙 Rg1 ,Re在 10 ,2 0 μmol/ L 浓度时均能使 L DH的释放度显著减少。 结论 :两种人参皂甙在一定剂量范围内能对抗 β- AP诱导的神经元损伤 。

补充人参皂甙Re和Rb1对中等强度运动训练大鼠骨骼肌超微结构的影响

目的:探讨补充人参皂甙Re和Rb1对中等强度训练大鼠骨骼肌超微结构的影响。方法:将40只SD大鼠分为对照组、模型组、人参皂甙Re组和Rb1组,每组10只。人参皂甙Re组和Rb1组分别灌服人参皂甙Re和Rb1,模型组灌服等量生理盐水,除对照组外,其余三组进行中等强度的跑台训练。连续训练两周后取材,在电镜下对比观察四组大鼠骨骼肌纤维、肌细胞线粒体和细胞核等超微结构。结果:与对照组相比,三个运动组均出现不同程度的肌纤维损伤表现,但补充人参皂甙Re组和Rb1组骨骼肌肌纤维超微结构损伤程度较轻,尤以Rb1组效果显著。结论:补充人参皂甙Re和Rb1均能抑制中等强度训练所致大鼠骨骼肌纤维的损伤,而人参皂甙Rb1抗损伤的效果更好。

运动性疲劳大鼠中枢神经递质改变及人参皂甙Rb1和Re抗疲劳的实验研究

目的:观察人参皂甙Rb1和人参皂甙Re对运动性疲劳大鼠中枢神经递质DA、5-HT、Ach和GABA含量的影响,探讨其抗运动性疲劳的机制。方法:将40只雄性SD大鼠,随机均分为人参皂甙Rb1组、人参皂甙Re组、模型组和空白组,分别灌胃给药,取下丘脑组织制备标本,检测神经递质DA、5-HT、Ach和GABA的含量。结果:人参皂甙Rb1和人参皂甙Re均能有效提高DA和Ach的含量(P<0.05-P<0.01),降低下丘脑GABA和5-HT的含量(P<0.01)。与人参皂甙Re比较,人参皂甙Rb1在降低GABA和5-HT含量、提高DA含量方面效果更优(P<0.05),但在提高Ach含量方面效果相对较差(P<0.05)。结论:人参皂甙Rb1和人参皂甙Re均可通过不同靶点具有不同程度的改善运动性疲劳状态下中枢神经递质紊乱的情况,达到抗运动性疲劳的效果。

人参皂甙Rb1和Rg1对小鼠睾丸支持细胞增殖的影响

观察人参皂甙Rb1(ginsenoside Rb1,GRb1)和Rg1(ginsenoside Rg1,GRg1)对体外培养的小鼠睾丸支持细胞(sertoli cell)增殖的影响,探讨二者的药理作用机制.取原代培养传代一次第3天的支持细胞,加入不同浓度的GRb1和GRg1,利用MTT比色分析法和BrdU增殖细胞标记法,检测不同浓度GRb1和GRg1对体外培养支持细胞增殖的影响.结果显示,20 mg/L GRb1对支持细胞增殖有明显促进作用,而不同浓度的GRg1对支持细胞的增殖无明显影响.GRb1能维持小鼠支持细胞的存活,并在适当浓度范围内可以明显促进支持细胞的增殖,而GRg1对支持细胞的增殖无明显影响.

人参皂甙Rg1和Rb1抗运动性中枢疲劳的实验研究

目的:观察人参皂甙Rg1和Rb1对运动性疲劳大鼠中枢神经递质5-羟色胺(5-HT)、γ氨基丁酸(GABA)、多巴胺(DA)和乙酰胆碱(Ach)含量的影响,探讨人参皂甙Rg1和Rb1对中枢神经系统的保护机制。方法:40只雄性SD大鼠随机均分为人参皂甙Rg1组(50 mg/kg)、Rb1组(50 mg/kg)、模型组(0.1ml/kgN.S.)和空白组(0.1ml/kgN.S.),给药组和模型组大鼠在灌胃1 h后进行中等运动强度的水平跑台运动,速度为15 m/min,坡度0°,跑台20 min,间歇40 min,在跑台20 min,每天1次,连续14天。末次运动后即刻处死大鼠,迅速取下丘脑,色谱法测5-HT、GABA、DA和Ach含量。结果:人参皂甙Rg1和Rb1均能有效降低下丘脑5-HT和GABA的含量,提高DA和Ach的含量。和人参皂甙Rg1比较,人参皂甙Rb1在降低5-HT和GAGB含量、提高DA含量方面效果更优,但在提高Ach含量方面效果相对较差。结论:人参皂甙Rg1和Rb1均能改善运动性疲劳状态下中枢神经递质紊乱的情况,从而对中枢神经系统产生保护作用,达到抗中枢疲劳的效应,但人参皂甙Rb1的效果相对更优。

人参皂甙Rg3抑制肿瘤新生血管形成的研究

目的 :探讨人参皂甙 Rg3抗肿瘤生长的作用机制。方法 :利用鸡胚绒毛尿囊膜 (CAM)观察 Rg3作用后肿瘤新生血管的生长情况 ,并采用 L ewis肺癌模型进一步探讨 Rg3在体内对肿瘤生长及肿瘤新生血管形成的影响。结果 :Rg3浓度为 0 .1和 0 .5 mm ol/L时 ,CAM血管生长抑制指数分别达 (6 2 .4± 9.3) %和 (4 5 .6± 5 .7) % ,与对照组相比差异非常显著 (P<0 .0 1)。对 L ewis肺癌荷瘤小鼠分别以 5、10、2 0 mg/kg的剂量隔日灌胃一次给予 Rg3,连续 10次 ,2 0 d后观察到 3组的肿瘤瘤质量分别为 (1.77± 0 .2 1)、(1.5 8± 0 .17)及 (1.2 2± 0 .2 9) g,与对照组比较有显著性差异 (P <0 .0 1) ,生长抑制率分别为 2 3.0 4%、31.30 %和 47.10 % ,同时观察到 Rg3组的新生血管数也明显减少。 结论 :人参皂甙 Rg3可明显抑制 L ewis肺癌的生长 。

人参皂甙Rg3抑制肿瘤新生血管形成机制研究

目的 人参皂甙 Rg3抑制肿瘤新生血管的机制。方法 采用鸡胚 CAM和小鼠 Lewis肺癌模型及免疫组化方法探讨 Rg3抑制新生血管形成的机制。结果 Rg3浓度为 0 .1 m M、0 .5 m M时 ,抑制鸡胚 CAM的血管指数 (BI)分别达到 6 2 .4%、45 .6 %。而给予小鼠 Rg3灌胃剂量分别为 5、1 0、2 0 mg/kg/隔日 ,连续 2 0天后 ,观察到 3组的抑瘤率分别为 2 3.0 4%、31 .30 %、47.1 0 % ,同时观察到 Rg3组的新生血管数也明显减少。免疫组化证实 Rg3可明显抑制肿瘤组织内 b FGF的表达。结论 Rg3可明显抑制 Lewis肺癌的生长并抑制了肿瘤新生血管形成。

酶法转化二醇型人参皂甙Rd及制备稀有人参皂甙C-K

利用蜗牛酶酶法对二醇型人参皂甙Rd进行转化,并制备稀有人参皂甙C-K.采用薄层色谱和高效液相色谱法,对转化产物及酶反应相关影响因素进行检测.结果发现:在酶量为166.7μkat.g-1,pH值为5.0,温度为40℃的恒温水浴9h的条件下,酶解人参皂甙Rd可得稀有人参皂甙C-K.在此基础上,研究得到酶反应的最适条件范围:酶量为500.1～833.5μkat.g-1,pH值为3～5,温度为40～50℃,反应时间为6～24h.

超高效液相色谱/飞行时间质谱用于人参皂甙Rg3作用后大鼠尿液代谢物指纹图谱分析及标记物的鉴定

超高效液相色谱技术(UPLC)采用1.7μm的色谱柱填料,有更好的分离效率、峰容量以及灵敏度;高分辨的时间飞行质谱(TO F-M S)能够测定化合物准确的分子质量并具有M S/M S功能。两者的联用适合于复杂体系的分离分析和未知物的结构鉴定。因此建立了一种基于UPLC/TO F-M S测定人参皂甙Rg3给药后大鼠尿液代谢物变化的方法,对其中2种发生显著变化的代谢物分别通过准确的质量测定得到其元素组成,通过M S/M S技术得到其结构信息,并通过检索数据库最终分别鉴定为4,8-二羟喹啉甲酸和4-羟基-2-喹啉酸。

人参皂甙Rg_1对小鼠力竭游泳后恢复期骨骼肌自由基代谢的影响

目的 :研究人参皂甙Rg1对急性力竭游泳后恢复期小鼠骨骼肌自由基代谢的影响。方法 :以小鼠为实验动物 ,测定 2 4h后第二次力竭游泳时间和不同恢复时间小鼠骨骼肌MDA含量、SOD、GPX及CAT的活性。结果 :(1 )人参皂甙Rg1给药组小鼠第二次力竭游泳时间较对照组明显延长 ;(2 )急性力竭游泳后恢复期人参皂甙Rg1给药组小鼠骨骼肌MDA含量的降低及SOD活性的升高与对照组比较均有显著性差异。结论 :人参皂甙Rg1能促进力竭游泳后小鼠体能的恢复 ,其机制可能与其能增强抗氧化酶的活性 ,加速自由基的清除 。

黄芪、人参皂甙对肺癌浸润淋巴细胞体外抗肿瘤作用的影响

为了进一步提高肿瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ）过继免疫治疗恶性肿瘤的效果，应用３Ｈ－ＴｄＲ释放法，观察了黄芪、人参皂甙对肺癌浸润淋巴细胞体外抗肿瘤作用的影响。结果表明，黄芪与人参皂甙均能显著增强ＴＩＬ细胞的体外杀伤活性，二者合用对ＴＩＬ细胞具有协同正向调节作用，是较为理想的替代细胞因子、辅助ＴＩＬ细胞过继免疫治疗恶性肿瘤的天然免疫调节剂。