高效液相色谱-串联四极杆质谱法测定人参组培不定根中11种皂苷成分

建立高效液相色谱-串联四极杆质谱(HPLC-MS/MS)法定量分析人参组培不定根中11种皂苷成分。样品经粉碎研磨,以70%甲醇水溶液为溶剂进行超声提取,离心过滤后测定。采用C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),用水和乙腈进行梯度洗脱,流量为0.3 mL/min,柱温为35℃。质谱采用电喷雾电离源,负离子扫描,多反应监测模式进行检测。11种皂苷的质量浓度在0.1~10μg/mL(Rb1为0.2~10μg/mL)范围内和响应强度线性相关,相关系数均大于0.995,各皂苷的定量限为0.001~0.010 g/kg,加标回收率为90.43%~97.82%,相对标准偏差为1.93%~6.33%(n=6)。该方法操作简单,分析时间短,灵敏度高,准确可靠,适用于人参组培不定根中多种皂苷类成分的同时测定。

人参组培不定根蛋白对小鼠的抗疲劳作用及其机制

目的:探讨人参组培不定根蛋白(GARP)对小鼠的抗疲劳作用,阐明其作用机制,为开发利用人参组培不定根资源提供实验依据。方法:40只昆明种清洁级小鼠采用负重游泳实验建立疲劳动物模型,随机分为对照组,低、中和高剂量(0.25、0.50和1.00 g·kg^(-1))GARP组,每组10只。通过力竭游泳实验记录各组小鼠游泳时间,游泳实验后处死小鼠,采用分光光度法检测各组小鼠血清中血乳酸(BLA)和血尿素氮(BUN)水平,采用分光光度法检测各组小鼠肝组织中谷胱甘肽(GSH)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性和肝糖原水平,采用分光光度法检测各组小鼠肌肉组织中肌糖原水平。小鼠成肌细胞(C2C12细胞)分为对照组和不同剂量(5、10和20 mg·L^(-1))GARP组,采用分光光度法检测各组细胞中GSH水平、SOD活性和糖原水平,苯酚硫酸法检测各组细胞葡萄糖摄取能力,Western blotting法检测各组细胞中腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)的磷酸化水平[磷酸化AMPK(p-AMPK)/AMPK比值]和葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)蛋白表达水平。结果:与对照组比较,中和高剂量GARP组小鼠游泳时间明显延长(P<0.05或P<0.01),血清中BLA和BUN水平明显降低(P<0.05或P<0.01);不同剂量GARP组小鼠肝组织中GSH水平和SOD活性明显升高(P<0.05或P<0.01),肝糖原和肌糖原水平均明显升高(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,不同剂量GARP组细胞中GSH水平、SOD活性和糖原水平明显升高(P<0.05或P<0.01),细胞的葡萄糖摄取能力明显增强(P<0.05或P<0.01),p-AMPK/AMPK比值和GLUT4蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01)。结论:GARP具有抗疲劳作用,其机制可能是通过激活AMPK/GLUT4信号通路促进糖摄取实现的。

人参组培不定根遗传毒性及亚慢性毒性研究

目的探讨人参组培不定根的遗传毒性及对大鼠生长、生理生化的亚慢性毒性效应。方法采用急性经口毒性试验、细菌回复突变试验、哺乳动物红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验和亚慢性毒性试验进行毒理学研究。结果人参组培不定根LD50>10 g/kg·bw;细菌回复突变、哺乳动物红细胞微核和精子畸形3项遗传毒性试验结果阴性,未观察到致突变性;亚慢性毒性试验结果表明,在人参组培不定根1.25、2.50和5.00 g/kg·bw剂量组中,个别剂量组大鼠的周进食量、血液生化、血常规指标与超纯水对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),其余各剂量组大鼠的体重、总进食量、总食物利用率、各脏器的生长发育及组织病理学等指标均未观察到有统计学意义的不良改变(P>0.05)。结论经3项遗传毒性及对大鼠生长、生理生化的毒性效应研究,未观察到人参组培不定根有明显的毒性。