人参锈腐病生防细菌的分离筛选与鉴定

从吉林和辽宁两省不同人参种植区土壤中分离出836株细菌,从中筛选出10株对人参锈腐病菌(Cylindrocarpon destructans)具有明显抑制作用的拮抗菌株。选择抑菌效果最好的菌株BS015(抑菌圈直径22.8mm),对人参几种常见病原菌进行抑菌谱试验。结果表明:菌株BS015对人参根腐病菌(Fusarium solani)、人参菌核病菌(Sclerotinia schinseng)、人参黑斑病菌(Alternaria panax)均有较好的抑菌效果,对人参立枯病菌(Rhizoc-tonia solani)抑制效果不明显。通过对其形态特征、生理生化及16S rDNA序列分析研究,菌株BS015为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。

人参锈腐病拮抗生防菌的筛选与鉴定

从人参根际土壤中筛选到具有拮抗人参锈腐病菌(Cylindrocarpon destructans)生物活性的生防菌3株,其中菌株BS015和菌株HN01为细菌,抑菌圈直径分别为22.8mm和21.9mm。菌株Tri41为木霉菌,抑菌率达76.6%。对人参几种常见病原菌进行了抑菌试验,结果表明:对人参根腐病菌(Fusarium solani)、人参立枯病菌(Rhizoctonia solani)、人参黑斑病菌(Alternaria panax)、人参菌核病菌(Sclerotinia schinseng)均有一定的抑菌效果。结合16S rDNA分子鉴定和形态鉴定对3株菌株进行了鉴定,结果表明:菌株BS015为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),菌株HN01为多粘芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa),菌株Tri41为哈茨木霉(Trichdema harzianum)。

人参锈腐病拮抗细菌BS015最适发酵条件研究

通过单因子试验和正交试验方法对人参锈腐病拮抗细菌BS015摇床发酵条件和培养基配方进行了研究。结果表明:最适发酵条件为装液量20%,接菌量5%,pH7,温度28～30℃;发酵最适培养基配方为葡萄糖18 g/L、L-谷氨酸钠12 g/L、牛肉浸膏5 g/L、磷酸氢二钾4 g/L、硫酸镁1 mg/L、氯化钠3 g/L、硫酸锰5 mg/L。

6株木霉菌对人参锈腐病的防治效果

本文研究了哈茨木霉Trichoderma harzianum T1、深绿木霉T.atroviride T3、康氏木霉T.koningii T4和3株绿色木霉T.viride T2、T5和T6对人参锈腐病的室内拮抗作用和田间防治效果。对峙培养结果显示,6个木霉菌株对人参锈腐菌Cylindrocarpon destructans均具有较好的抑制作用,其中T1抑制效果最好,菌落生长抑制率为73.02%。田间试验结果显示,施用木霉菌后人参锈腐病的病情指数显著降低(P<0.01),其中T1对人参锈腐病的防效最好,达到44.08%。施用木霉菌后人参产量与对照相比有所增加,但未达到显著水平(P=0.39)。

人参锈腐病拮抗放线菌的鉴定及发酵条件

从人参田土壤中筛选到1株对人参锈腐病菌(Cylindrocarpon destructans)有较强拮抗作用的菌株1a-3,通过形态特征、培养特性、生理生化特性、细胞壁组分分析和16S rDNA同源性序列分析,确定该菌株为链霉菌属灰产色链霉菌(Streptomyces griseochromogenes)。经单因子和各因子正交试验,确定的最适发酵培养基配方为,葡萄糖1 g/L、玉米粉3 g/L、大豆粉2 g/L、酵母粉0.3 g/L、KH2PO40.1 g/L、CaCO30.3 g/L、NaCl 0.1 g/L;最适培养条件为起始pH值7.0、28℃摇瓶培养60 h。

东北地区人参锈腐病菌的分子鉴定

人参锈腐病一直是人参生产中的重要病害之一,严重影响人参产业的持续健康发展。为明确东北人参主产区人参锈腐病的病原菌种类,从辽宁、吉林和黑龙江省人参主产区罹病植株上共分离纯化获得菌株45株,采用rDNA-ITS序列分析方法鉴定了东北人参主产区人参锈腐病致病菌,在PDA培养基上观察病原菌菌落及分生孢子形态特征,通过针刺离体接种法测定不同种间的致病力差异。结果表明:在45个菌株中,28个菌株为毁灭柱孢(Cylindrocarpon destructans),rDNA-ITS序列与GenBank中的C.destructans相似性达99%,菌落呈浅褐色,质地毡状,分生孢子圆柱型,直立,基部稍窄;3个菌株为毁灭柱孢毁灭变种(Cylindrocarpon destructans var.destructans),rDNA-ITS序列与GenBank中的C.destructans var.destructans相似性达99%,菌落呈深褐色,质地绒毛状,分生孢子棍棒型,稍弯曲,基部钝圆;14个菌株为强壮土赤壳(Ilyonectria robusta),rDNA-ITS序列与GenBank中的I.robusta相似性达99%,菌落呈棕灰色,质地毛絮状,分生孢子长椭圆形,稍弯曲,两端钝圆。生长11d后的菌落直径为(4.21±0.16)^(7.78±0.25)cm,其中生长速度最快的病原菌为强壮土赤壳(I.robusta),其次为毁灭柱孢(C.destructans),毁灭柱孢毁灭变种(C.destructans var.destructans)生长速度最慢。致病力测定结果表明,不同种间致病力差异显著,毁灭柱孢毁灭变种(C.destructans var.destructans)致病力最强,其次为毁灭柱孢(C.destructans),强壮土赤壳(I.robusta)相对较弱。

利用土壤拮抗性微生物防治人参锈腐病

从人参根围土壤中分离到２５０多株土壤微生物。通过土壤微生物－人参锈腐菌平板对峙培养，筛选出抑菌效果好的７个菌株。室内参根生测表明，施用拮抗菌Ｂｃ００９、Ｂｃ０１１、Ｂｃ０２２，２４小时后再接种人参锈腐菌，比施用拮抗菌后马上接种人参锈腐菌的防治效果好，达６２．４％ ～８０．０％ 。田间小区防效试验的结果表明，３个芽孢杆菌菌株处理参根防效明显高于化学药剂，其防治效果达到６４．７％ ～７３．９％ 。

人参锈腐病拮抗放线菌筛选、形态及培养特征研究

从吉林省集安市和通化市采集的土样中分离到249个放线菌菌株。拮抗试验表明：有13个菌株对人参锈腐病菌表现出不同程度的抑制作用。其中菌株1a效果最好，抑菌带大于16 mm，抑菌率为75.8%，1014-5，1013-2，5a和313-3效果较好，抑菌带为9-16 mm，抑菌率分别为61.9%，56.6%，54.1%和53.8%。依据形态特征鉴定，这5个菌株属于链霉菌属，其中菌株1a和313-3为金色类群，1013-2为粉红孢类群，1014-5为绿色类群，5a为球孢类群。

人参锈腐病菌拮抗菌的筛选及其耐药性测定

以人参锈腐病菌为靶标菌,从79株木霉菌株中筛选出3株拮抗效果较好的菌株ECT-01、WW Z 22-11和2-67,3株木霉菌对人参锈腐病菌抑制率分别达到77.24%、76.08%、74.06%。通过对其拮抗机理的初步研究发现,3株木霉菌主要通过重寄生作用寄生于人参锈腐菌菌丝上,吸取养分,最终使人参锈腐菌菌丝断裂死亡。耐药性试验表明3株木霉菌对多菌灵极敏感,ECT-01对百菌清和恶霉灵的耐药性均高于其他2株木霉菌。

长白山区人参锈腐病发生危害调查及杀菌剂田间药效试验

就长白山区人参锈腐病发生危害进行调查,并选用新型杀菌剂对人参锈腐病菌的毒力及田间防效进行了测试,以期为生产上安全高效防治该病提供理论依据。采用菌丝生长速率法测定11种杀菌剂对人参锈腐病菌的毒力,并进行田间防效试验。室内毒力测定结果表明10%世高水分散粒剂、18.7%凯特水分散粒剂和60%百泰水分散粒剂对人参锈腐病菌毒力最强,其EC50值分别为1.19、20.56、27.77 mg/L。田间试验结果表明10%世高WG、18.7%凯特水分散粒剂和60%百泰水分散粒剂对人参锈腐病防效达50%以上。人参锈腐病发病盛期为6月上旬至7月下旬,10%世高水分散粒剂、18.7%凯特水分散粒剂和60%百泰水分散粒剂是目前防治人参锈腐病的有效药剂。

人参锈腐病拮抗细菌HN01发酵条件优化

通过单因素试验和正交试验,对人参锈腐病拮抗细菌HN01进行摇床发酵条件和培养基配方研究。结果表明:该菌最适发酵条件为温度30℃,初始pH值7.0,250mL三角瓶装液50mL,接菌量10%,摇床转速150r.min-1,发酵时间36h。最佳产菌培养基组分为葡萄糖15.0g.L-1,牛肉膏8g.L-1,NaCl 5g.L-1,(NH4)2SO41mg.L-1,K2HPO44g.L-1。抑菌培养基组分为葡萄糖10g.L-1,牛肉膏8g.L-1,NaCl3g.L-1,(NH4)2SO4 2mg.L-1,K2HPO4 4g.

2株放线菌对人参锈腐病的生物防治效果

[目的]探讨放线菌对人参锈腐病的生物防治效果。[方法]通过室内拮抗试验,研究了从人参根际分离出来的2株放线菌对人参锈腐菌(Cylindrocarpon destructans)的拮抗作用;通过田间生防试验,测定了2株放线菌对人参锈腐病的防效及对人参产量和植株生长的影响。[结果]2株放线菌对人参锈腐菌均有较强的抑制作用。施用放线菌后人参锈腐病的病情指数显著降低(P<0.01),防治效果分别达41.94%和44.28%。施用放线菌后人参的产量与对照相比有所增加,但未达到显著水平;放线菌对参根成活率、株高和茎粗影响不显著。[结论]为人参锈腐病的生物防治研究提供了理论依据。

氯化苦液剂防治人参锈腐病田间药效试验

2005～2006年在栽培过的人参重茬床地,土壤注入氯化苦液剂25～35 kg/667 m2,2年试验结果对人参锈腐病防治效果达54.78%～70.07%,防治效果明显优于50%多菌灵可湿性粉剂42.30%的效果。

人参锈腐病菌毁灭柱孢菌酶促降解人参皂苷研究

皂苷被认为是植物抵抗病原真菌侵袭的防御物质,具有抗真菌活性。许多成功侵染植物的真菌通过产生皂苷解毒酶水解皂苷糖链上的糖残基,解除皂苷的毒性。本文研究了人参锈腐病菌毁灭柱孢菌Cylindrocarpon destructans和非人参病原菌构巢曲霉菌Aspergillus nidulans降解人参皂苷的能力。结果显示,毁灭柱孢菌能够产生胞外糖苷酶,水解二醇型人参皂苷Rb1、Rb2、Rc和Rd的C-3位和C-20位末端单糖,产生四种主要产物:绞股蓝皂苷XVII(G-XVII)、C-O、Mb和人参皂苷F2,而构巢曲霉菌只能将人参皂苷Rb1降解为Rd,不能降解其它的人参皂苷。这些结果说明,人参皂苷降解酶在毁灭柱孢菌的致病过程中可能发挥了重要作用。

参地施用有机粪肥对人参锈腐病和参根质量的作用

参地施用有机粪肥作基肥 ,对人参锈腐病的控制效果为 5 1%～ 6 1%;参根增产幅度为 2 0 %～ 74 4%,人参根总皂甙、还原糖、总糖和粗淀粉的含量均比对照增加 ,总氨基酸的含量比对照下降 ,而

人参锈腐病发生情况和病原研究

人参是我国传统的名贵药材,锈腐病是影响林下参栽培和连作的重要因子。该项研究调查了辽宁省抚顺市新宾满族自治县国营三道关林场不同参龄和林型的林下参锈腐病的发病情况,并对人参锈腐病病原菌进行了分离、鉴定。研究结果显示:在不同参龄、林型和坡位的林下参样地内均有锈腐病的发生,引起锈腐病的病原菌是毁灭柱孢菌(Cylindrocarpon destructans)。

外源信号物质诱导人参抗人参锈腐病的作用研究

探讨外源水杨酸（SA）茉莉酸甲酯（MeJA）诱导人参抗锈腐病的效果,以期通过施入外源物质来提高人参植株的抗性。测定了0~800mg.L-1不同浓度SA和MeJA溶液对人参锈腐病菌的影响,利用筛选的浓度（200 mg.L-1）处理二年生人参移栽苗,接种人参锈腐菌,调查人参锈腐病的发病率和病害严重度。结果表明,浓度为200 mg.L-1的SA和MeJA溶液对人参锈腐病菌无直接毒害作用,而经SA和MeJA处理的人参植株锈腐病发病率和病害严重度显著降低,SA的诱抗效果优于MeJA。

人参锈腐病斑的扫描电镜观察

采用半薄切片,应用扫描电镜观察了人参锈腐病菌的侵染状况,从人参病斑分离出的病原菌经鉴定属于柱孢菌属(CYlindrocarpon)。

人参锈腐病生防用解淀粉芽孢杆菌Y-S-Y12菌株发酵条件的优化

研究了解淀粉芽孢杆菌Y-S-Y12菌株液体最佳发酵条件,旨在为提高其活性次级代谢产物的产量提供技术支持。通过不同培养条件、营养条件、单因素试验和均匀设计试验,对该菌株的最适发酵条件进行了优化,结果发现,Y-S-Y12菌株的最佳发酵时间为3d,最佳发酵温度为28~33℃,最佳转速为150r/min,最佳装液量为125mL（培养容器的容量为250mL）,最佳初始pH值为6,供试培养基中Y-S-Y12菌株在NA培养基中的发酵效果最佳。Y-S-Y12菌株最优配方为1.20g葡萄糖、3.10g酵母粉、2.00g磷酸氢二钾、24.86g牛肉膏。

多菌灵50%可湿性粉剂防治人参锈腐病田间药效试验

多菌灵50%可湿性粉剂防治人参锈腐病在2012年进行了田间试验。试验表明:多菌灵50%可湿性粉剂对人参锈腐病有很好的防治效果,以有效成分1.25~5g/m2土壤处理的情况下对人参生长无不良影响,施药后的防治效果在70.54%~82.04%之间。