醋制降低甘遂对人正常肝细胞LO2毒性研究

目的:比较甘遂醋制前后对人正常肝细胞LO2的毒性差异,初步探讨甘遂醋制减毒机制。方法:以人正常肝细胞LO2细胞为研究对象,采用MTT法检测甘遂醋制前后对LO2细胞活性的影响,采用倒置显微镜观察细胞形态;并测定细胞培养上清液和裂解上清液中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、Na+-K+-ATP酶,Ca2+-Mg2+-ATP酶等酶的活力和谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的含量。结果:与阴性对照组比较,生甘遂可明显降低LO2细胞的活性(P<0.01)与形态,并显著提高LO2细胞培养上清液中ALT,AST,LDH活力(P<0.01)、显著降低SOD活力和GSH含量(P<0.01),显著增加MDA含量(P<0.01),显著降低LO2细胞裂解上清液中Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活力(P<0.01);醋制后,与生甘遂各剂量组比较,醋甘遂可显著降低生甘遂对LO2细胞的增殖抑制作用(P<0.01)和形态变差的趋势,可显著降低LO2细胞培养上清液中ALT,AST,LDH活力(P<0.01)、显著增加SOD活力和GSH含量(P<0.01)、显著降低MDA含量(P<0.01)、显著提高LO2细胞裂解上清液中Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活力(P<0.01),且呈一定的剂量相关性。结论:醋制可降低甘遂肝毒性,其可能机制为通过降低甘遂对肝细胞膜通透性的影响及减轻氧化损伤而实现。

千金子制霜前后提取物在体外对人正常肝细胞LO2的毒性作用研究

目的比较千金子制霜前后提取物对LO2细胞毒性的影响并探究千金子制霜减毒的作用机制。方法将人肝LO2细胞分为7组:千金子生品低、中、高3个剂量组、千金子霜品低、中、高3个剂量组和阴性对照组。将细胞培养48 h后,分别予以100,200,400μg·mL^(-1)的千金子生品、千金子霜品供试品溶液和等体积的无血清细胞培养液,各组设置3个复孔。分别用PI染色法和Annexin V-FITC/PI双重染法来检测细胞周期和凋亡情况,试剂盒法检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和Na^(+)-K^(+)-ATP酶的活力。结果阴性对照组、千金子生品低、高2个剂量组、千金子霜品低、高2个剂量组的细胞G2/M期比例依次为(22.47±2.29)%,(13.63±0.88)%,(6.12±0.83)%,(18.03±0.73)%和(9.88±0.75)%^;这5组总凋亡率依次为(3.87±0.12)%,(9.93±0.05)%,(12.80±0.28)%,(6.90±0.08)%和(9.73±0.09)%。阴性对照组、千金子生品低、中、高3个剂量组、千金子霜品低、中、高3个剂量组的LDH活力依次为(21.66±1.78),(257.77±13.09),(452.44±10.80),(798.65±8.72),(145.16±5.65),(238.10±4.85)和(495.56±5.16) mU·mL^(-1);这7组的SOD活力依次为(17.03±0.41),(8.28±0.35),(6.01±0.37),(2.89±0.27),(12.87±0.21),(10.58±0.24)和(7.71±0.44) U·mg^(-1);这7组的Na^(+)-K^(+)-ATP酶活力依次为(15.84±0.54),(8.47±0.66),(7.00±0.13),(3.64±0.17),(12.88±0.40),(10.79±0.22)和(8.45±0.13) U·mg^(-1)。上述指标,千金子生品低、中、高3个剂量组与阴性对照组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01)^(+)千金子霜品3个剂量组与千金子生品3个剂量组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论千金子制霜后可能通过减轻细胞氧化损伤,降低细胞膜通透性,改善肝细胞功能损伤,减少细胞凋亡来降低体外肝毒性。