低剂量静脉注射人免疫球蛋白治疗不明原因反复流产的效果及对可溶性人白细胞抗原G的影响

目的评估低剂量静脉注射人免疫球蛋白(IVIG)治疗不明原因反复流产(URSA)的效果及对外周血可溶性人白细胞抗原G(sHLA-G)的影响。方法将60例URSA患者分为试验组和对照组两组,每组30例。试验组在妊娠前静脉给予IVIG0.2g/kg;确定妊娠后给予同等剂量IVIG,每4周1次,至妊娠20周。对照组给予传统中药或孕激素治疗。观察两组的活产率和有效率(超过以往妊娠4周及以上为有效)。于治疗前和妊娠6～8周随机留取试验组和对照组静脉血各15份,同期健康育龄期未孕及早孕6～8周妇女的静脉血标本各20份。采用酶联免疫吸附法检测血清sHLA-G、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)和白细胞介素-10(IL-10)水平。结果试验组应用IVIG后的妊娠率为93.3%(28/30)。试验组的活产率和有效率分别为85.7%(24/28)和92.9%(26/28),明显高于对照组的56.7%(17/30)(P=0.021)和63.3%(19/30)(P=0.011)。试验组应用IVIG后有1例(3.3%)患者发生轻微恶心,减慢IVIG输入速度后反应消失。对照组和试验组患者孕前血清sHLA-G水平分别为(61.37±35.57)和(62.70±37.24)U/ml,明显低于健康育龄期妇女的(88.49±25.37)U/ml(P<0.05)。妊娠后试验组患者的血清sHLA-G和IL-10水平分别为(34.19±14.21)U/ml和(11.71±2.75)pg/ml,明显高于对照组的(23.71±12.83)U/ml(P=0.043)和(8.71±3.01)pg/ml(P=0.008)。结论孕前后应用低剂量IVIG治疗URSA安全有效,其可能是通过上调患者体内sHLA-G和IL-10水平来改善胚胎发育。

滋肾育胎丸对抗心磷脂抗体阳性复发性流产患者可溶性人白细胞抗原G、抗子宫内膜抗体水平的影响

目的:探讨滋肾育胎丸对抗心磷脂抗体(ACA)阳性复发性流产患者可溶性人白细胞抗原G(sHLA-G)、抗子宫内膜抗体(Em Ab)水平的影响。方法:选取2017年8月至2020年10月河北省人民医院收治的ACA阳性复发性流产患者102例,按照分层抽样法分为对照组和滋肾育胎丸组,每组51例。对照组患者采用常规治疗,滋肾育胎丸组患者采用滋肾育胎丸治疗。采用酶联免疫吸附试验法检测两组患者肿瘤坏死因子相关蛋白12(CTRP12)、sHLA-G、抗缪勒管激素(AMH)、前列腺素E2(PGE2)、环氧化酶2(COX-2)、β人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)水平和抗精子抗体(As Ab)、EmAb及ACA表达水平,采用全自动生化分析仪测定孕酮(P)、黄体生成激素(LH)及睾酮(T)水平,观察两组患者的临床疗效。结果:与对照组相比,滋肾育胎丸组患者治疗后的CTRP12、sHLA-G水平明显升高,AMH水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,滋肾育胎丸组患者治疗后的P水平明显升高,T、LH水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,滋肾育胎丸组患者治疗后的PGE2、COX-2及β-HCG水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,滋肾育胎丸组患者治疗后的EmAb、ACA及As Ab阳性率明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。滋肾育胎丸组患者的治疗总有效率为94.12%(48/51),与对照组的78.43%(40/51)相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:滋肾育胎丸治疗ACA阳性复发性流产患者,可有效提高患者s HLAG水平,降低EmAb阳性率,改善患者性激素水平,效果显著。

人白细胞抗原G在耐药子宫内膜癌中的表达及作用研究

目的探讨人白细胞抗原G(human leukocyte antigen G,HLA-G)在耐药子宫内膜癌组织中的表达及作用。方法收集2014年12月至2018年12月于温州医科大学附属第一医院就诊的子宫内膜癌初治60例患者,按照化疗效果,将患者分成肿瘤组和耐药组,各30例;选取同时期子宫内膜正常的女性30例作为对照组。另将子宫内膜癌细胞分为无处理组(不做特殊处理)、紫杉醇组(培养基中加入10μmol/L紫杉醇)和HLA-G组(培养基中加入10μmol/L紫杉醇的同时,加入10ng/ml的HLA-G),分析HLA-G在子宫内膜癌细胞凋亡和增殖中的作用。采用免疫组化检测子宫内膜组织中Ki-67和HLA-G的表达,聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测耐药基因(MDR1)的表达,噻唑蓝比色法检测细胞增殖水平,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果肿瘤组和耐药组的Ki-67均高于对照组,差异有显著性(P<0.05),但肿瘤组和耐药组差异无显著性(P>0.05);子宫内膜组织内HLA-G表达与耐药基因MDR1水平呈正相关(r=0.690,P=0.013)。HLA-G能够促进子宫内膜癌细胞内MDR1表达,并能够减弱紫杉醇对子宫内膜癌细胞增殖的抑制作用和子宫内膜癌细胞凋亡的诱导作用。结论HLA-G在耐药子宫内膜癌组织中高表达,并能够抑制紫杉醇杀伤子宫内膜癌细胞。

人白细胞抗原G基因多态性与非小细胞肺癌易感性的相关性研究

目的:探讨人白细胞抗原G(HLA-G)基因变异体和血清可溶性HLA-G(s HLA-G)水平与非小细胞肺癌(NSCLC)易感性的关系。方法:2012年1月至2015年1月间,180例NSCLC患者和180例健康受试者参与本项研究。通过免疫法检测血清s HLA-G水平,使用直接DNA测序技术检测HLA-G等位基因。结果:HLA-G 010101和HLA-G 010401杂合子基因型与NSCLC(χ~2=3.268,P=0.025和χ~2=2.563,P=0.036)发病和NSCLC晚期(χ~2=3.672,P=0.015和χ~2=3.257,P=0.028)风险的增加显著相关。HLA-G 0105N和HLA-G 0106杂合子基因型与NSCLC发病(χ~2=2.565,P=0.041和χ~2=3.569,P=0.017)和NSCLCⅣ期(χ~2=3.503,P=0.018和χ~2=2.586,P=0.036)风险的降低显著相关。NSCLC和晚期患者血清s HLA-G水平均高于健康人群。血清s HLA-G浓度高于32 U/ml的患者的生存期较短。结论:HLA-G基因变异体是NSCLC的独立风险因素,且NSCLC患者血清s HLA-G水平可能成为NSCLC诊断和预后的生物标志物。

可溶性人白细胞抗原G的研究进展

人类白细胞抗原G(HLA-G)为新发现的一类非经典人类白细胞I类抗原,有膜结合型和可溶型两种,主要在母胎界面的绒毛外滋养层细胞上表达,是母体对同种半异体抗原的胎儿免疫应答中的重要耐受分子,其通过与NK细胞以及T细胞的作用而发挥免疫耐受的作用。对HLA-G分子的免疫调节作用的研究已从母胎免疫耐受领域扩展到肿瘤免疫、抗感染免疫和器官移植免疫等领域。就可溶性sHLA-G的研究现况综述。

可溶性人白细胞抗原G在肺结核患者中的表达及临床意义

目的观察初治涂阳肺结核患者血清可溶性人白细胞抗原G(s HLA-G)水平变化,并探讨其临床意义。方法该院60例首诊涂阳肺结核患者,根据病变累及范围分为广泛组21例与不广泛组39例。检测血清s HLA-G、T淋巴细胞亚群(CD_4^+、CD_8^+、CD_4^+/CD_8^+)水平,对比两组水平变化。结果治疗后两组血清s HLA-G、CD_8^+水平明显下降,CD_4^+和CD_4^+/CD_8^+水平明显上升,广泛组血清s HLA-G、CD_8^+水平明显高于不广泛组,CD_4^+和CD_4^+/CD_8^+水平低于不广泛组。结论血清s HLA-G可能对CD_4^+、CD_8^+、CD_4^+/CD_8^+等T淋巴细胞亚群具有调节作用,需进一步探究其作用机制。

人白细胞抗原G与子宫内膜癌关系的研究进展

人白细胞抗原G(HLA-G)是非经典型主要组织相容性复合体(MHC)Ⅰ类分子,其选择性表达于绒毛外滋养细胞,通过受体介导与母体免疫细胞相互作用,发挥免疫调节效应,对母胎间免疫耐受起重要作用。研究发现,HLA-G亦表达于生理状态下月经期的子宫内膜,并且多种器官肿瘤细胞及周围间质中有HLA-G表达。子宫内膜癌(EC)是子宫内膜上皮来源的女性生殖道恶性肿瘤。本文就HLA-G与EC的相关研究进行综述,以期为EC诊断和治疗提供参考。

人白细胞抗原G3在稳定转染细胞细胞膜上的表达

人白细胞抗原G(HLA G)是一种在母婴耐受中起主要作用的非经典的HLA Ⅰ类分子 .其中HLA G3结构简单 ,仅具有α1结构域、穿膜区及胞浆区 ,其是否在细胞表面表达尚存在争议 .为了建立HLA G3稳定转染细胞株并确定其在细胞内的定位 ,采用RT PCR法从 9周人胎盘组织中获得了HLA G3的cDNA ,并构建到真核表达载体pcDNA3中 ,将所获得的真核表达质粒pcDNA G3转染至HLA Ⅰ (- )细胞株K5 6 2 ,经G4 18筛选后获得稳定转染的细胞株K5 6 2 G3.利用RT PCR、Western印迹检测方法证明在K5 6 2 G3细胞株中 ,HLA G3在mRNA水平和蛋白水平上均有表达 .进一步利用免疫荧光标记技术 ,证明HLA G3能够在转染细胞细胞膜上表达 .结果表明 ,稳定转染细胞株中HLA

孕早期孕妇血清可溶性人白细胞抗原G、抑制素A水平在预测先兆流产中的价值分析

目的探究孕早期孕妇血清可溶性人白细胞抗原G(sHLA-G)、抑制素A水平在预测先兆流产中的应用价值。方法采用回顾性研究方案,对象选取为2017年3月至2020年11月之间的114例保胎治疗的先兆流产患者,其中流产51例设为流产组,其余63例继续妊娠的患者则分为妊娠组,对比两组患者在孕6~10周的血清sHLA-G、抑制素A水平情况。结果在孕6周到孕10周期间,两组患者的血清sHLA-G水平均呈现下降趋势,流产组患者的血清抑制素A水平也呈现下降趋势,而不同于妊娠组患者的血清抑制素A却呈现上升趋势,各组数据均有统计学意义(P<0.05);在孕6-10周期间组间对比结果显示,流产组在孕6~9周的血清sHLA-G水平均显著低于妊娠组(P<0.05),流产组在孕6-9周血清抑制素A水平均显著低于妊娠组(P<0.05)。结论先兆流产患者的血清sHLA-G、抑制素A水平动态变化情况在一定程度上反映了患者的先兆流产结局,应当作为孕早期的相关指标检测并进行临床干预。

青海高原地区胎儿生长受限患者胎盘组织人类白细胞相关抗原G表达的研究

目的：探讨青海高原地区胎儿生长受限（FGR）患者人类白细胞相关抗原G（HLA-G）mRNA及蛋白的表达及临床意义。方法：收集2015年1~12月在青海大学附属医院产科分娩的20例FGR患者（FGR组）和20例正常妊娠妇女（正常妊娠组）的胎盘组织,采用实时荧光定量PCR及Western blot分析检测HLA-G mRNA及蛋白在两组胎盘组织中的表达差异。结果：FGR组胎盘组织中HLA-G mRNA表达水平（0.449±0.116）,明显低于正常妊娠组（0.963±0.226）,差异有统计学意义（P=0.000）。FGR组胎盘组织HLA-G蛋白表达灰度值（0.375±0.101）,亦明显低于正常妊娠组（0.797±0.177）,差异有统计学意义（P=0.002）。结论：青海高原地区FGR患者胎盘组织HLA-G mRNA及蛋白表达水平均明显降低,HLA-G的表达量降低在FGR的发生发展过程中可能起着重要的作用。

青海地区子痫前期患者血清可溶性人类白细胞相关抗原G检测及预诊指标的建立

目的总结青海地区子痫前期患者血清可溶性人类白细胞相关抗原G的特征,寻找子痫前期的预诊指标。方法收集34例重度子痫前期患者、26例轻度子痫前期患者和30例正常足月妊娠妇女的产前血清样品,应用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测血清中可溶性HLA-G的表达水平并行相关分析。结果 (1)重度子痫前期与轻度子痫前期患者血清中sHLA-G浓度均低于正常足月妊娠组,差异有统计学意义(P<0.05),轻重度之间差异亦有统计学意义(P<0.05)。(2)利用sHLA-G的ROC曲线界定值为848.665 ng/L,可以将该值作为诊断子痫前期的初筛指标。结论子痫前期血清sHLA-G浓度可能与子痫前期发病及病情轻重程度相关,血清sHLA-G拟可作为子痫前期初筛预诊指标。

可溶性人白细胞抗原G与妊娠合并绒毛膜羊膜炎的临床相关性研究

目的探讨可溶性人白细胞抗原G(sHLA-G)与妊娠合并绒毛膜羊膜炎的关系。方法选取早产及胎膜早破孕产妇90例及正常足月分娩孕产妇40例,通过双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上述研究对象终止妊娠前外周血和羊水中sHLA-G的水平,同时对其产后胎膜行病理检查,判断有无绒毛膜羊膜炎。结果通过对产后胎膜组织进行病理检查共检测出绒毛膜羊膜炎患者54例(研究组),另外76例无绒毛膜羊膜炎患者作为对照组。研究组患者羊水中sHLA-G的水平均值为79.38±19.08U/ml,显著高于对照组(43.77±14.09U/ml),差异有统计学意义(P<0.001);而外周血中sHLA-G的水平研究组平均为45.98±10.05U/ml,亦显著高于无绒毛膜羊膜炎者(28.66±10.88U/ml),差异有统计学意义(P<0.001)。结论患者发生绒毛膜羊膜炎时,羊水和血清中sHLA-G水平均升高,这提示sHLA-G可能参与羊膜腔感染的宿主免疫反应调节,血清中sHLA-G水平可作为绒毛膜羊膜炎的辅助诊断指标。

血清可溶性人白细胞抗原G测定在诊断亚临床绒毛膜羊膜炎中的意义

目的探讨孕妇血清可溶性人白细胞抗原G(sHLA-G)测定在诊断妊娠合并亚临床绒毛膜羊膜炎中的意义。方法选取早产及胎膜早破孕产妇115例及正常足月分娩孕产妇40例,通过运用双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法检测上述研究对象血清中sHLA-G的水平,同时用散射比浊法测定其中C反应蛋白(CRP)含量,最后对所有产后胎膜进行病理检查,判断有无绒毛膜羊膜炎。结果①通过对产后胎膜组织进行病理检查,共检测出绒毛膜羊膜炎患者70例,作为研究组,另外85例无绒毛膜羊膜炎患者作为对照组;②研究组血清中sHLA-G的水平平均为(46.52±13.75)U/ml,显著高于对照组(28.48±10.76U/ml),差异有统计学意义(P<0.001);③研究组血清中CRP的水平平均为(13.39±12.48)mg/L,显著高于对照组(5.49±5.45mg/L),差异有统计学意义(P<0.001);④用ROC曲线分析:血清sHLA-G检测绒毛膜羊膜炎的最佳临界值为36.09U/ml,诊断敏感性77.1%,特异性75.3%,曲线下面积0.847,明显优于CRP(敏感性68.6%,特异性68.2%,曲线下面积0.739,最佳临界值为7.5mg/L)。结论发生绒毛膜羊膜炎时,母血中sHLA-G的水平升高,与CRP相比,有更高的敏感性和特异性,提示sHLA-G是诊断亚临床绒毛膜羊膜炎的较理想的血清学指标。

可溶性人白细胞抗原G与胚胎着床相关性研究进展

提高体外受精-胚胎移植技术的临床妊娠率,获得高质量的胚胎是胚胎学家为之奋斗的目标。目前评价胚胎质量普遍应用的是形态学观察,尚不能满足准确预测胚胎发育潜能的需要。s HLA-G因其在母-胎界面的独特分布和母-胎免疫耐受中所发挥的重要作用而引起关注,但对于胚胎培养液中s HLA-G能否作为胚胎质量的评价参数,反映胚胎的种植潜能,目前尚无定论。本文综述了国内外近年来胚胎培养液中s HLA-G与胚胎发育以及IVF-ET临床妊娠率的关系研究,努力为临床优选胚胎提供一种有效的非侵入性检测途径,提高妊娠率。

胚胎培养液中可溶性人白细胞抗原G与胚胎发育的相关性研究

目的探讨胚胎培养液中可溶性人白细胞抗原G(sHLA-G)与胚胎发育以及IVF-ET结局的关系,为临床优选胚胎提供一种有效的非侵入性检测途径。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测第3日移植胚胎培养液中sHLA-G的表达,根据移植胚胎培养液中sHLA-G的表达分组比较体外受精-胚胎移植的结局。结果共收集胚胎培养液284份,sHLA-G阳性率为55.28%(157/284)。根据胚胎培养液sHLA-G的检出分组比较,sHLA-G++组和sHLA-G+-组的优质胚胎率均明显高于sHLA-G--组(P<0.05),sHLA-G++组和sHLA-G+-组的临床妊娠率均高于sHLA-G--组(P<0.05),sHLA-G++组与sHLA-G+-组间的优质胚胎率和临床妊娠率均无统计学差异(P>0.05)。结论 sHLA-G在早期胚胎培养液中有表达,能反映了胚胎良好的发育和种植潜能,预示着较好的IVF-ET结局,是一种优选移植胚胎的有效的非侵入性途径。

白细胞抗原G在结肠癌中的表达及意义

目的研究结肠癌切除标本中远癌组织、癌旁组织及癌组织白细胞抗原G(HLA-G)蛋白表达情况,探讨HLA-G在结肠癌发生、发展中的作用。方法应用免疫组化SP法,检测HLA-G蛋白在结肠癌远癌组织、癌旁组织及癌组织的表达情况。结果癌组织与癌旁组织、远癌组织比较具有统计学意义(P<0.01),癌旁组织与远癌组织比较具有统计学意义(P<0.01)。HLA-G与结肠癌血管侵犯、淋巴结转移及临床病理分期有关(P<0.01),而与性别、年龄、肿块大小、肿块部位、癌胚抗原(CEA)水平及组织学分级无关。结论 HLA-G在结肠癌中高表达。HLA-G在血管侵犯组、淋巴结转移组及临床分期较晚组表达显著升高,这些因素可能与结肠癌的侵袭和转移有关。

胎膜早破患者羊水中可溶性人白细胞抗原G水平与绒毛膜羊膜炎的关系

目的探讨孕妇羊水中可溶性人白细胞抗原G(sHLA-G)的水平与胎膜早破合并绒毛膜羊膜炎的关系。方法运用双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法测定89例胎膜早破孕产妇(包括足月胎膜早破60例和未足月胎膜早破29例)及40例正常足月分娩孕产妇羊水中sHLA-G的水平,同时用散射比浊法测定上述研究对象分娩前血清中CRP的含量,最后对所有产后胎膜进行病理检查,判断有无绒毛膜羊膜炎。结果①胎膜早破患者羊水中sHLA-G的水平和血清中CRP中水平均显著高于正常足月孕妇(P<0.05);②胎膜早破并发绒毛膜羊膜炎的患者羊水中sHLA-G的水平显著高于未发生绒毛膜羊膜炎者(P<0.05);③以羊水sHLA-G≥53.46U/ml作为绒毛膜羊膜炎的诊断阈值,其敏感性、特异性及ROC曲线下面积分别为88%、89.7%、0.89,明显优于血清C-反应蛋白指标(70.0%,69.2%,0.74,诊断阈值为3.5mg/L)。结论发生绒毛膜羊膜炎时,羊水中sHLA-G的水平升高,与血清CRP相比,其诊断价值更高,可作为胎膜早破合并绒毛膜羊膜炎的可靠的辅助诊断指标。

体外受精移植胚胎培养液中可溶性人白细胞抗原-G的研究

目的:检测体外受精移植(IVF-ET)胚胎,培养液中胚胎分泌的可溶性人白细胞抗原-G(sHLA-G)水平,探讨sHLA-G与IVF妊娠率的相关性。方法:收集2008年3-6月,唐都医院妇产科生殖中心进行试管婴儿的患者,体外单个培养胚胎的培养液,通过ELISA法检测培养液中sHLA-G的浓度。结果:在41例患者的84份胚胎培养液中,移植至少一个sHLA-G阳性胚胎的妊娠率69%,明显高于全部移植sHLA-G阴性的妊娠率18%(P<0.05)。结论:检测胚胎sHLA-G的表达水平,可以作为辅助形态学评估选择胚胎移植,预测IVF妊娠率。

分娩发动前后外周血和胎盘中人类白细胞抗原G1的变化及其意义

目的研究足月妊娠分娩发动前后外周血和胎盘局部人类白细胞抗原G1(HLA-G1)变化并探讨其在分娩发动中的作用。方法应用ELLISA方法检测孕晚期未临产组(剖宫产组)和临产组外周血中人类白细胞抗原G1(sHLA-G1)浓度,并通过RT-PCR法比较两组胎盘组织中HLA-G1mRNA水平。结果与未临产组相比,临产组血浆中sHLA-G1表达强度明显下降,差异有统计学意义(P<0.01),临产组胎盘局部中HLA-G1 mRNA数量也明显低于孕晚期未临产组(P<0.01)。结论分娩发动时胎盘合成和分泌HLA-G1减少导致局部和外周血中sHLA-G1下降,可能激活多种免疫细胞并调节免疫细胞分泌细胞因子,导致循环及胎盘局部各种炎性细胞因子释放增加,使母胎界面细胞因子分泌增加,从而参加了分娩。

HLA-G基因敲除人滋养层干细胞模型构建

目的构建人白细胞抗原G(HLA-G)基因敲除的人滋养层干细胞(TSC)模型,初步探究HLA-G对TSC向绒毛外滋养层细胞(EVT)分化的影响。方法利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除人TSC的HLA-G基因,将TSC向EVT细胞分化,采用免疫荧光染色及实时定量聚合酶链式反应(qPCR)方法观察HLA-G基因敲除对其标志基因表达的影响。结果经测序、免疫荧光染色及蛋白质印记法(WB)验证,成功获得了HLA-G基因完全敲除的人TSC细胞系。HLA-G^(-/-)-TSC可诱导分化为EVT样细胞,HLA-G^(-/-)-EVT的标志基因表达量与野生型相比无显著性差异(P>0.05)。结论本研究成功构建了稳定的HLA-G基因敲除人TSC模型,且HLA-G并不明显影响EVT的分化过程。