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人胎盘间充质干细胞治疗小鼠变应性鼻炎的有效性研究
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作者 韩笑 孙庆斌 +6 位作者 杨玉娟 连培文 姚尧 杨欣 于国华 张宇 宋西成 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 CSCD 2023年第5期311-315,共5页
目的探讨人胎盘间充质干细胞(human placenta derived mesenchymal stem cells,HP-MSCs)对变应性鼻炎(AR)小鼠的治疗效果。方法将32只BALB/c小鼠随机平均分为4组(表示为:致敏/激发/治疗):对照组(PBS/PBS/PBS),对照+HP-MSCs组(PBS/PBS/HP... 目的探讨人胎盘间充质干细胞(human placenta derived mesenchymal stem cells,HP-MSCs)对变应性鼻炎(AR)小鼠的治疗效果。方法将32只BALB/c小鼠随机平均分为4组(表示为:致敏/激发/治疗):对照组(PBS/PBS/PBS),对照+HP-MSCs组(PBS/PBS/HP-MSCs),AR+PBS组(OVA/OVA/PBS),AR+HP-MSCs组(OVA/OVA/HP-MSCs)。建立卵清蛋白(OVA)联合氢氧化铝诱导的小鼠AR模型,在造模的第20天尾静脉注射0.2 ml PBS或HP-MSCs。评估各组小鼠AR鼻部症状变化;血涂片瑞氏染色观察外周血中嗜酸性粒细胞比例;酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定外周血Ig E、Ig G1水平及鼻黏膜白细胞介素4(IL-4)、IL-5、IL-13水平。结果AR+HP-MSCs治疗组AR组小鼠AR行为症状学评分显著减轻(6.25±0.89vs.3.38±0.74,P<0.001);外周血嗜酸性粒细胞比例明显降低[(1.63±1.03)%vs.(4.13±2.57)%,P<0.05];外周血Ig E、Ig G1水平明显降低[(36.89±2.34)ng/ml vs.(57.23±2.81)ng/ml,(21.35±0.80)ng/ml vs.(27.23±0.55)ng/ml,P均<0.05];鼻黏膜IL-4、IL-5、IL-13水平降低[(229.64±12.23)pg/mlvs.(364.17±18.81)pg/ml;(48.70±3.87)pg/mlvs.(68.36±6.88)pg/ml;(41.27±2.48)pg/ml vs.(60.60±4.75)pg/ml,P均<0.05]。结论静脉注射HP-MSCs可以有效治疗小鼠AR,为进一步治疗人AR提供新思路与理论基础。 展开更多
关键词 鼻炎 过敏 干细胞 免疫调节 人胎盘间充质干细胞
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超声评分法联合血浆人胎盘催乳素水平检测对前置胎盘合并胎盘植入的诊断价值 被引量:3
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作者 时明芳 常书娟 张聪祎 《中国医药导报》 CAS 2023年第9期97-100,共4页
目的探讨超声评分法联合血浆人胎盘催乳素(hPL)水平对前置胎盘合并胎盘植入的诊断价值。方法选取2019年9月至2021年10月河北省衡水市第二人民医院收治的128例前置胎盘患者为研究对象。依据病理结果将其分为植入组和未植入组。比较两组... 目的探讨超声评分法联合血浆人胎盘催乳素(hPL)水平对前置胎盘合并胎盘植入的诊断价值。方法选取2019年9月至2021年10月河北省衡水市第二人民医院收治的128例前置胎盘患者为研究对象。依据病理结果将其分为植入组和未植入组。比较两组患者的临床资料、超声评分、血浆hPL mRNA水平。绘制受试者操作特征曲线以曲线下面积(AUC)评价超声评分法、血浆hPL mRNA水平及两者联合检测对前置胎盘合并胎盘植入的诊断效能。结果128例前置胎盘患者合并胎盘植入68例。植入组超声评分、血浆hPL mRNA水平高于未植入组(P<0.05)。植入组胎盘组织厚度≥3 cm占比、胎盘后低回声带缺失占比、子宫肌层最薄处厚度<1 mm占比、膀胱面粗糙占比、胎盘基底部血流增多占比、宫颈及周边有血流信号占比高于未植入组(P<0.05)。超声评分、血浆hPL mRNA水平为前置胎盘患者胎盘植入发生的影响因素(OR>1,P<0.05)。超声评分法联合血浆hPL mRNA诊断前置胎盘合并胎盘植入的AUC高于超声评分法、血浆hPL单独检测(P<0.05)。结论超声评分法联合血浆hPL mRNA水平对前置胎盘合并胎盘植入的诊断效能较高。 展开更多
关键词 超声评分 人胎盘催乳素 前置胎盘 胎盘植入 诊断
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人胎盘间充质干细胞降低肺泡上皮屏障通透性缓解小鼠急性肺损伤 被引量:1
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作者 喻文琴 吕玉珍 +2 位作者 胥海欢 韩佩佩 马晓薇 《宁夏医科大学学报》 2023年第2期117-123,共7页
目的探讨人胎盘间充质干细胞(hPMSCs)对急性肺损伤(ALI)小鼠肺泡上皮屏障通透性的影响。方法将24只雄性C57BL/6J小鼠随机分成对照组、ALI组、hPMSCs组,每组8只,气管滴注脂多糖(LPS)制备ALI模型,12 h后,hPMSCs组尾静脉注射hPMSCs,对照组... 目的探讨人胎盘间充质干细胞(hPMSCs)对急性肺损伤(ALI)小鼠肺泡上皮屏障通透性的影响。方法将24只雄性C57BL/6J小鼠随机分成对照组、ALI组、hPMSCs组,每组8只,气管滴注脂多糖(LPS)制备ALI模型,12 h后,hPMSCs组尾静脉注射hPMSCs,对照组尾静脉注射等量DMEM,24 h后处死小鼠,收集肺组织。苏木-伊红(HE)染色观察各组小鼠肺组织病理改变并评分,检测肺组织湿干重比(W/D),计算肺泡灌洗液(BALF)与血清中伊文思蓝的比值检测肺泡上皮屏障通透性,免疫组化、Western blot检测肺组织紧密连接蛋白occludin的表达。结果hPMSCs成脂及成软骨诱导分化培养后染色均呈阳性,其表面特异性抗原CD73高表达,未检测到造血标记物CD34的表达。与对照组相比,ALI组肺组织病理损伤严重,肺损伤评分、W/D值、肺泡上皮屏障通透性均增加(P均<0.01),免疫组化和Western blot显示occludin蛋白表达降低(P<0.001)。与ALI组相比,hPMSCs组肺组织病理损伤减轻,肺损伤评分、W/D值、肺泡上皮屏障通透性均降低(P均<0.05);免疫组化和Western blot结果显示occludin蛋白表达升高(P<0.01)。结论hPMSCs可能通过降低肺泡上皮屏障通透性减轻小鼠ALI。 展开更多
关键词 人胎盘间充质干细胞 急性肺损伤 肺泡上皮屏障
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NO水平下降通过氧化应激引起人胎盘滋养细胞凋亡 被引量:11
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作者 王艳华 张慧萍 +9 位作者 田珏 周龙霞 陈久凯 马文斌 孔繁琪 赵丽 刘现梅 韩学波 杨晓玲 姜怡邓 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1287-1292,共6页
目的探讨一氧化氮(NO)水平下降诱导人胎盘滋养细胞凋亡的可能机制。方法体外培养人胎盘滋养细胞株(HTR-8),分别加入10、100、500、1 000μmol·L-1L-NAME,并设置对照组(0μmol·L-1L-NAME),孵育48 h;四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测L... 目的探讨一氧化氮(NO)水平下降诱导人胎盘滋养细胞凋亡的可能机制。方法体外培养人胎盘滋养细胞株(HTR-8),分别加入10、100、500、1 000μmol·L-1L-NAME,并设置对照组(0μmol·L-1L-NAME),孵育48 h;四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测L-NAME对细胞存活率的影响;采用硝酸还原酶法测定细胞中NO的含量;利用透射电镜、流式细胞术和Annexin-V FITC染色检测L-NAME对HTR-8细胞凋亡的影响;Fe3+还原比色法检测总抗氧化能力(T-AOC)、黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性及硫代巴比妥酸比色法测定MDA含量。结果与对照组比较,100、500、1 000μmol·L-1L-NAME组细胞存活率及NO水平明显降低(P<0.05,P<0.01);Annexin-V FITC染色和流式分析均显示L-NAME能诱导细胞凋亡,并且呈剂量依赖性;NO水平与细胞凋亡数呈负相关(r=-0.5210);透射电镜结果显示:与对照组比较,实验组细胞核形态不规则,核膜固缩呈不规则状,染色质凝集或边集,线粒体肿胀或浓缩、嵴断裂或溶解,甚至消失,形成空泡,尤其在100μmol·L-1L-NAME组可见凋亡小体;同时,HTR-8细胞内T-AOC、SOD水平明显降低(P<0.05),MDA的含量明显升高(P<0.05);细胞凋亡数与T-AOC(r=-0.3212)、SOD(r=-0.2779)水平均呈负相关,与MDA(r=0.2807)含量呈正相关。结论氧化应激在NO水平降低引起的人胎盘滋养细胞凋亡中起重要作用。 展开更多
关键词 一氧化氮 N-硝基-L-精氨酸甲酯 人胎盘滋养细胞 凋亡 氧化应激 妊娠期高血压疾病
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人胎盘源贴壁细胞支持脐血CD34^+细胞体外扩增 被引量:8
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作者 张毅 何津 +4 位作者 江小霞 刘刚 刘元林 唐佩弦 毛宁 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第6期560-564,共5页
从胎盘中分离培养人胎盘源贴壁细胞 (humanplacentaderivedadherentcells,hPDAC) ,研究其对脐血CD34+细胞体外扩增作用。以酶消化法自人胎盘组织中分离培养hPDAC ,并以流式细胞术对其进行鉴定。进一步 ,采用免疫磁珠法分离人脐血CD34+细... 从胎盘中分离培养人胎盘源贴壁细胞 (humanplacentaderivedadherentcells,hPDAC) ,研究其对脐血CD34+细胞体外扩增作用。以酶消化法自人胎盘组织中分离培养hPDAC ,并以流式细胞术对其进行鉴定。进一步 ,采用免疫磁珠法分离人脐血CD34+细胞 ,建立以hPDAC为滋养层的CD34+细胞体外扩增培养体系 ,并与无滋养层的液体培养体系相比 ,观察不同培养体系对有核细胞总数、CFC及CD34+细胞百分率的影响。结果表明 ,人胎盘组织中可分离培养出hPDAC ,并证实其为混合性细胞群体 ,主要含有间充质细胞。以hPDAC为滋养层的共培养体系较无滋养层液体培养体系对有核细胞总数、CFC及CD34+细胞均具有明显的扩增效应 ,其中以SCF +IL 3+IL 6 +FL +hPDAC组扩增效果最强 ,分别扩增了 ( 12 6 .0± 6 .7)倍 ,( 4 9.8± 1.7)倍和 ( 8.3± 1.6 5 )倍。上述结果提示 ,hPDAC具有体外支持造血作用 ,并提供了一与脐血CD34+细胞体外扩增相适应的新滋养层。 展开更多
关键词 人胎盘源贴壁细胞 脐血 CD34^+细胞 hPDAC 生物学 细胞因子 抗体
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透射电镜及激光共聚焦技术观察体外丙型肝炎病毒感染的人胎盘滋养层细胞 被引量:17
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作者 程勇前 聂青和 +3 位作者 周永兴 黄晓峰 罗红 杨华光 《世界华人消化杂志》 CAS 2003年第2期151-156,共6页
目的:探讨体外分离培养的人体胎盘滋养层细胞感染丙型肝炎病毒(HCV)的可能性,以及滋养层细胞感染HCV后的超微结构改变.方法:采用胰蛋白酶消化法及Percoll密度梯度分离法分离培养人胎盘组织中滋养层细胞后,以HCVRNA阳性血清对滋养层细胞... 目的:探讨体外分离培养的人体胎盘滋养层细胞感染丙型肝炎病毒(HCV)的可能性,以及滋养层细胞感染HCV后的超微结构改变.方法:采用胰蛋白酶消化法及Percoll密度梯度分离法分离培养人胎盘组织中滋养层细胞后,以HCVRNA阳性血清对滋养层细胞进行体外感染试验,应用RT-PCR法定性及定量检测感染后细胞培养上清中HCVRNA,透射电镜观察HCV感染后滋养层细胞的超微结构改变,并用激光共聚焦技术观察免疫荧光染色后HCVNS5在滋养层细胞中的定位.结果:HCV感染后的细胞培养上清中可间断检测到HCVRNA,而对照组始终未检出;激光共聚焦观察显示HCVNS5主要定位于细胞核周;HCV感染后滋养层细胞超微结构发生了明显改变,主要表现为溶酶体大量增生,粗面内质网增生,脂滴减少,出现空泡状结构,并可观察到病毒样颗粒.结论:HCV可以感染滋养层细胞,并导致滋养层细胞的超微结构发生类似黄病毒科病毒感染后的改变. 展开更多
关键词 透射电镜 激光共聚焦技术 体外 丙型肝炎病毒感染 人胎盘滋养层细胞
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干扰素-γ对人胎盘胎儿来源间充质干细胞免疫调节功能的影响 被引量:8
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作者 朱永朝 马海滨 +3 位作者 刘婷 王立斌 李玉奎 魏军 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1058-1061,共4页
目的:从人胎盘组织中分离胎儿来源间充质干细胞(MSCs),并探讨干扰素-γ(IFN-γ)对人胎盘胎儿来源间充质干细胞(hfPMSCs)免疫调节功能的影响。方法:采用酶消化法分离人胎盘胎儿侧MSCs,通过流式细胞仪检测细胞表面分子CD73、CD90、CD105、... 目的:从人胎盘组织中分离胎儿来源间充质干细胞(MSCs),并探讨干扰素-γ(IFN-γ)对人胎盘胎儿来源间充质干细胞(hfPMSCs)免疫调节功能的影响。方法:采用酶消化法分离人胎盘胎儿侧MSCs,通过流式细胞仪检测细胞表面分子CD73、CD90、CD105、CD14、CD34、CD45和HLA-DR,并利用D2S1399、D10S2325、D18S535和GATA198B05四个STR基因座对细胞属性进行鉴定分析;10 ng/mL IFN-γ诱导处理后,利用定量PCR(q-PCR)和ELISA分别测定对照组hfPM-SCs和IFN-γ处理后hfPMSCs IL-6、IL-8、IL-10和HGF基因及蛋白表达水平。结果:所分离细胞表达CD73、CD90和CD105,不表达CD14、CD34、CD45和HLA-DR,并分别具有来自亲本双方上述四个STR位点的等位基因。IFN-γ处理后,hfPMSCs IL-6 mRNA的表达水平显著提高(P<0.05),而IL-10和HGF的表达水平被下调(P<0.05)。ELISA结果表明IL-6蛋白表达水平显著升高,IL-8、IL-10和肝细胞生长因子的表达量降低(P<0.05)。结论:本研究成功的从人胎盘组织中分离和培养出hfPMSCs,且IFN-γ对其免疫抑制功能具有负调控效应。 展开更多
关键词 人胎盘胎儿来源间充质干细胞 干扰素-Γ 免疫调节
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人胎盘与骨髓源性间充质干细胞体外培养及生物学特性对比 被引量:8
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作者 穆晓红 徐林 +2 位作者 赵子义 李小平 陈江 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第19期3708-3712,共5页
背景:组织工程修复大块组织缺损需要高浓度、大量的细胞接种,骨髓间充质干细胞是种子细胞的主要来源,但存在数量上的局限性及长期传代后细胞功能老化的问题。目的:体外分离培养、扩增人胎盘源性间充质干细胞与人骨髓间充质干细胞,并对... 背景:组织工程修复大块组织缺损需要高浓度、大量的细胞接种,骨髓间充质干细胞是种子细胞的主要来源,但存在数量上的局限性及长期传代后细胞功能老化的问题。目的:体外分离培养、扩增人胎盘源性间充质干细胞与人骨髓间充质干细胞,并对其生物学性状进行比较。设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2008-09/2009-02在东直门医院实验室完成。材料:胎盘由解放军空军总医院妇产科提供,骨髓来源于健康成人献髓者。方法:采用密度梯度离心法从胎盘中分离、纯化和传代培养人胎盘源性间充质干细胞;骨髓肝素抗凝后,采用密度梯度离心法分离、纯化和传代培养人骨髓基质干细胞。主要观察指标:用倒置相差显微镜观察两种细胞形态及细胞生长情况,流式细胞仪分析检测第5代细胞表面标志的表达,VonKossa染色及油红O染色检测分化能力。结果:镜下两种细胞均为贴壁生长,形态为均一成纤维细胞样,传5代后细胞的增殖能力随传代次数的增加而有所下降,体外培养10代后细胞生长速度减慢,但人胎盘源性间充质干细胞扩增倍数较人骨髓基质干细胞平均高出两三个数量级。两种细胞具有均一的细胞表型,均表达CD29,CD44,CD166,不表达CD34,CD45,HLA-DR。两种细胞都具有成骨、成脂分化潜能,但人胎盘源性间充质干细胞分化潜能更强。结论:人胎盘源性间充质干细胞与人骨髓基质干细胞具有相似的生物学特性,且前者具有更强的增殖能力。 展开更多
关键词 组织工程 人胎盘间充质干细胞 人骨髓间充质干细胞 生物学特性
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人胎盘滋养层细胞超微结构的动态研究 被引量:6
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作者 张瑞祥 陈文秀 +4 位作者 刘胜 赵淑敏 卢金秀 张淑英 王德修 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第2期147-150,共4页
国外对胎盘滋养层细胞的超微结构,已有一些研究。国内仅见研究胎盘病变对照组中地零星报道。将胎盘滋养层细胞超微结构分作胚眙早期和足月期,并认为两者区别不大。虽然国外有人注意到胎盘滋养细胞的成熟和老化现象,但观察材料仅限于8~1... 国外对胎盘滋养层细胞的超微结构,已有一些研究。国内仅见研究胎盘病变对照组中地零星报道。将胎盘滋养层细胞超微结构分作胚眙早期和足月期,并认为两者区别不大。虽然国外有人注意到胎盘滋养细胞的成熟和老化现象,但观察材料仅限于8~12周,缺少妊娠全程地研究。本文对妊娠周期中胎盘滋养层细胞,作了较系统地动态观察。发现了滋养层细胞动态发展中的亚型、融合形态及动态变化的形态特征,报道如下。 展开更多
关键词 人胎盘 滋养层细胞 超微结构
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人胎盘组织液对自然衰老大鼠海马区细胞凋亡和氧化应激的影响 被引量:5
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作者 刘师兵 徐冶 +4 位作者 于洋 李松岩 张国昊 陈彤 高磊 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期282-284,共3页
目的探讨人胎盘组织液对自然衰老大鼠大脑海马区凋亡相关蛋白及氧化应激水平的影响及人胎盘组织液的抗衰老作用。方法将雄性SD大鼠平均分为四组,每日分别腹腔注射生理盐水和低、中、高剂量的人胎盘组织液,连续注射24 w。应用HE染色、脂... 目的探讨人胎盘组织液对自然衰老大鼠大脑海马区凋亡相关蛋白及氧化应激水平的影响及人胎盘组织液的抗衰老作用。方法将雄性SD大鼠平均分为四组,每日分别腹腔注射生理盐水和低、中、高剂量的人胎盘组织液,连续注射24 w。应用HE染色、脂褐素染色、免疫组化技术检测脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,观察人胎盘组织液对Bcl-2、Bax蛋白表达量以及Bcl-2/Bax比例的变化,以及对衰老大鼠大脑细胞氧化自由基损伤的影响。结果模型组大鼠大脑海马区Bax蛋白及脂褐素表达量明显高于用药组,Bcl-2蛋白表达量明显降低;模型组SOD值低于用药组,MDA值高于用药组。结论人胎盘组织液能通过提高组织抗氧化能力和减少细胞凋亡从而延缓衰老。 展开更多
关键词 人胎盘提取液 海马神经元 BCL-2 BAX
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表达PD-L1/PD-L2的人胎盘间充质干细胞对外周血T细胞分泌IL-17的拮抗作用 被引量:5
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作者 王国艳 王斐斐 +2 位作者 李恒 张丽霞 栾希英 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期132-136,共5页
目的探讨程序性死亡因子配体1(PD-L1)和PD-L2在人胎盘源性间充质干细胞(hPMSCs)上表达对外周血T细胞分泌IL-17的影响。方法应用酶消化法分离人胎盘间充质干细胞(hPMSCs),并进行表型及分化鉴定;RT-PCR、激光扫描共聚焦显微镜技术(LSCM)... 目的探讨程序性死亡因子配体1(PD-L1)和PD-L2在人胎盘源性间充质干细胞(hPMSCs)上表达对外周血T细胞分泌IL-17的影响。方法应用酶消化法分离人胎盘间充质干细胞(hPMSCs),并进行表型及分化鉴定;RT-PCR、激光扫描共聚焦显微镜技术(LSCM)及流式细胞术(FCM)检测hPMSCs上PD-L1及PD-L2的表达;应用化学合成的PD-L1 siRNA、PD-L2 siR-NA沉默hPMSCs上PD-L1及PD-L2表达;密度梯度离心法分离纯化人外周血T细胞;细胞胞内因子染色法分析沉默PD-L1或PD-L2后hPMSCs对PMA活化的T细胞分泌IL-17的影响。结果除PD-L1外,hPMSCs高表达PD-L2;siRNA能够有效阻断PD-L1和PD-L2在hPMSCs上的表达;胞内染色结果显示,hPMSCs能够上调T细胞IL-17的分泌,阻断PD-L1或PD-L2后,T细胞IL-17的分泌被进一步上调,且PD-L1和PD-L2具有叠加作用。结论 PD-L1和PD-L2在hPMSCs上表达,可拮抗hPMSCs刺激外周血T细胞分泌IL-17的作用。 展开更多
关键词 人胎盘源性间充质干细胞 PD-L1 PD-L2 T细胞 IL-17
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妊娠高血压综合征患者血清人胎盘催乳素测定与胎盘病理检查分析 被引量:4
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作者 崔世红 封全灵 +2 位作者 杨炜敏 张曦 刘爱清 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2002年第6期833-835,共3页
目的 :探讨妊娠高血压综合征 (妊高征 )患者血清人胎盘催乳素 (HPL)水平的变化与胎盘病理的关系。方法 :选择重度妊娠高血压综合征患者 33例为妊高征组 ,正常晚期妊娠妇女 5 2例为对照组。采用放射免疫学方法检测血清中HPL值 ,于光学显... 目的 :探讨妊娠高血压综合征 (妊高征 )患者血清人胎盘催乳素 (HPL)水平的变化与胎盘病理的关系。方法 :选择重度妊娠高血压综合征患者 33例为妊高征组 ,正常晚期妊娠妇女 5 2例为对照组。采用放射免疫学方法检测血清中HPL值 ,于光学显微镜下 ,观察每例胎盘标本HE染色切片。结果 :妊高征组血清HPL值与对照组比较差异无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ;胎盘病理结果显示 :妊高征组终未游离绒毛总数与对照组比较差异无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ,含有的合体滋养细胞结节 ,细胞滋养细胞增生 ,纤维素样坏死和血管合体细胞膜的终未游离绒毛数与对照组比较差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。结论 :妊高征患者合体细胞结节增多 ,胎盘纤维素样坏死增多 ,血管合体细胞膜减少 ,但滋养细胞增殖 ,HPL下降不明显。 展开更多
关键词 妊娠高血压综合征 血清 人胎盘催乳素 测定 胎盘 病理
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五氯酚对人胎盘碱性磷酸酶抑制的研究 被引量:6
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作者 耿芳宋 王秀丽 +1 位作者 童家明 刘洪明 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第4期397-401,共5页
监测人胎盘碱性磷酸酶在不同浓度五氯酚溶液中活力与荧光光谱的变化 ;测定五氯酚对其抑制的类型及pH对其抑制的影响 .结果显示 :低浓度的五氯酚 (<1 0mmol/L)使酶活力及其荧光强度迅速下降 ,发射峰位明显红移 ;继续提高五氯酚浓度 ,... 监测人胎盘碱性磷酸酶在不同浓度五氯酚溶液中活力与荧光光谱的变化 ;测定五氯酚对其抑制的类型及pH对其抑制的影响 .结果显示 :低浓度的五氯酚 (<1 0mmol/L)使酶活力及其荧光强度迅速下降 ,发射峰位明显红移 ;继续提高五氯酚浓度 ,其活力与荧光强度逐渐下降 ,发射峰位仍在红移 ;五氯酚浓度为 5 0mmol/L时 ,荧光淬灭 ,但酶仍保留 5 1 4%的活力 ;五氯酚浓度高达 10 0mmol/L时 ,酶剩余活力为 30 0 % .进一步实验表明五氯酚使L 色氨酸的荧光强度降低 ,并伴有发射峰位的红移 ,当五氯酚浓度为 5 0mmol/L时 ,L 色氨酸的荧光淬灭 .五氯酚是人胎盘碱性磷酸酶的反竞争性抑制剂 ,其抑制常数 (Ki)为 3 86mmol/L .其抑制也受溶液 pH影响 ,pH <7 5时 ,对酶无抑制 ;pH为 7 5~ 10 5时 ,随 pH的增加 ,抑制作用逐渐增强 .提示五氯酚能够进入酶分子内部使其荧光淬灭 ,并抑制了酶活力 ;表明酶活力抑制与五氯酚的解离状态有关 . 展开更多
关键词 五氯酚 人胎盘碱性磷酸酶 抑制作用
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人胎盘滋养层细胞雌激素α,β受体免疫细胞化学研究 被引量:5
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作者 孙岚 吕葆真 +1 位作者 黄威权 陈亚琼 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期236-239,共4页
目的:探讨雌激素-α,β型受体(estrogen recoptor α,β)在人胎盘滋养层细胞的表达和定位。方法:采用细胞培养结合免疫细胞化学ABC法。结果:人胎盘及培养的人胎盘绒毛合体、细胞滋养层细胞均呈雌激素α,β受体免疫反应性,雌激素受体... 目的:探讨雌激素-α,β型受体(estrogen recoptor α,β)在人胎盘滋养层细胞的表达和定位。方法:采用细胞培养结合免疫细胞化学ABC法。结果:人胎盘及培养的人胎盘绒毛合体、细胞滋养层细胞均呈雌激素α,β受体免疫反应性,雌激素受体免疫反应阳性物质定位于胞核内,细胞质为阴性。结论:人胎盘滋养层细胞存在雌激素α,β受体,这为研究雌激素对人胎盘滋养层细胞的功能调控提供了形态学依据。 展开更多
关键词 人胎盘滋养层细胞 雌激素Α 雌激素受体Β 免疫细胞化学 研究 绒毛
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人胎盘绒毛膜滋养层细胞的培养(英文) 被引量:6
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作者 王雪萍 徐德忠 +3 位作者 李远贵 闫永平 张景霞 黄坚 《第四军医大学学报》 北大核心 2002年第22期2023-2026,共4页
目的 建立纯度较高的适于试验研究的人绒毛膜滋养层细胞 .方法 胰蛋白酶 - DNase联合消化法培养人绒毛膜滋养层细胞 ,间接免疫染色进行细胞鉴定 ,透射电镜观察细胞内部结构 .结果 倒置显微镜下 ,可见细胞呈不规则多角形 ,核大卵圆形 ... 目的 建立纯度较高的适于试验研究的人绒毛膜滋养层细胞 .方法 胰蛋白酶 - DNase联合消化法培养人绒毛膜滋养层细胞 ,间接免疫染色进行细胞鉴定 ,透射电镜观察细胞内部结构 .结果 倒置显微镜下 ,可见细胞呈不规则多角形 ,核大卵圆形 ,胞质透明 ,呈片状铺展生长 .角蛋白染色阳性率超过 95 % ,未检测到波型蛋白阳性细胞 ,表明不含污染细胞 .透射电镜观察示所获细胞有典型滋养层细胞结构 .结论 该法简便易行 。 展开更多
关键词 滋养层细胞 细胞培养 透射电镜 人胎盘绒毛膜
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早孕妇女血清β-绒毛膜促性腺激素、人胎盘生乳素与多胎关系 被引量:4
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作者 桂文武 孟江萍 +3 位作者 幸贵邦 胡敏 李恬 王炼炼 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期892-895,共4页
目的:通过对早孕多胎妇女血清中β-绒毛膜促性腺激素(Beta-human chorionic gonadotropin,β-HCG)、人胎盘生乳素(Human placental lactogen,HPL)的测定,探讨其与多胎的关系。方法:动态监测门诊18例早孕多胎(包括2胎和3胎)妇女血清β-HC... 目的:通过对早孕多胎妇女血清中β-绒毛膜促性腺激素(Beta-human chorionic gonadotropin,β-HCG)、人胎盘生乳素(Human placental lactogen,HPL)的测定,探讨其与多胎的关系。方法:动态监测门诊18例早孕多胎(包括2胎和3胎)妇女血清β-HCG、HPL的变化,随机选取同期本院门诊正常单胎早孕妇女35例作为对照,从孕5周开始,每2周检查1次血清β-HCG、HPL水平,至孕11周,观察相同孕周2组之间β-HCG、HPL的变化。结果:孕5~9周,多胎组血清β-HCG明显高于单胎组,差异有统计学意义(P<0.05);孕11周时,多胎组和单胎血清β-HCG差异无统计学意义(P>0.05);孕5周时,多胎组和单胎组HPL值差异无统计学意义(P>0.05)。孕7~11周,多胎组血HPL明显高于单胎组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:早孕时如β-HCG明显增高,结合HPL升高,应警惕多胎妊娠。 展开更多
关键词 早孕 Β-绒毛膜促性腺激素 人胎盘生乳素 多胎妊娠
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IFN-γ诱导的自噬抑制人胎盘胎儿侧来源间充质干细胞增殖 被引量:5
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作者 朱永朝 李芳 +4 位作者 韩飞 梁雪云 刘晓明 李玉奎 魏军 《基础医学与临床》 CSCD 2016年第3期295-300,共6页
目的探讨IFN-γ诱导无血清培养人胎盘胎儿侧来源MSCs自噬的发生,并分析自噬对细胞增殖的影响。方法用酶消化法和无血清培养体系分离培养人胎盘胎儿侧来源MSCs,利用流式细胞仪和分化培养体系鉴定细胞属性;用质量浓度50μg/L的IFN-γ处理... 目的探讨IFN-γ诱导无血清培养人胎盘胎儿侧来源MSCs自噬的发生,并分析自噬对细胞增殖的影响。方法用酶消化法和无血清培养体系分离培养人胎盘胎儿侧来源MSCs,利用流式细胞仪和分化培养体系鉴定细胞属性;用质量浓度50μg/L的IFN-γ处理人胎盘胎儿侧来源MSCs,以未处理细胞作为对照组,3-Ma处理为自噬抑制组;分别提取总蛋白,Western blot检测自噬标志基因LC3Ⅰ/Ⅱ的表达;mRFP-GFP-LC3腺病毒感染细胞,观察细胞内点状聚集的情况;MTT法检测IFN-γ对细胞增殖的影响。结果所分离细胞呈CD73、CD90和CD105阳性细胞,不表达CD14、CD34和CD45,具有向脂肪和成骨细胞分化的能力;IFN-γ可提高LC3Ⅱ的表达量(P<0.05),荧光共聚焦显微境观察到IFN-γ处理细胞中的点状聚集显著增加;3-Ma可解除IFN-γ对MSCs增殖能力的抑制(P<0.05)。结论 IFN-γ诱导的自噬负调控人胎盘胎儿侧来源MSCs的增殖能力。 展开更多
关键词 人胎盘 间充质干细胞 干扰素 自噬 增殖
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人胎盘间充质干细胞的超微结构及其吞噬功能 被引量:4
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作者 沙文琼 折瑞莲 +1 位作者 王自能 柯茹 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第14期2230-2235,共6页
背景:胎盘间充质干细胞组织来源丰富,与骨髓间充质干细胞有着类似的形态、表面标记物、潜在分化能力,是人体理想的间充质干细胞来源之一。目前对胎盘间充质干细胞超微结构和吞噬功能的研究较少,对其在胎盘组织中的生理功能也鲜有探讨。... 背景:胎盘间充质干细胞组织来源丰富,与骨髓间充质干细胞有着类似的形态、表面标记物、潜在分化能力,是人体理想的间充质干细胞来源之一。目前对胎盘间充质干细胞超微结构和吞噬功能的研究较少,对其在胎盘组织中的生理功能也鲜有探讨。目的:了解胎盘间充质干细胞的超微结构和吞噬功能。方法:分离培养5个正常娩出胎盘来源的胎盘间充质干细胞,经体外培养后在透射电子显微镜下观察细胞的超微结构;在培养上清中添加荧光微球,孵育3 h后用流式细胞仪检测细胞的吞噬能力。结果与结论:胎盘间充质干细胞在透射电镜下表现为细胞核比较大,核仁明显;核膜折叠、内陷显著,常染色质多,核浆比例正常。内质网系统发达,可见大量狭小或扩张的粗面内质网。胞浆内高尔基器、溶酶体常见;细胞表面微绒毛发达,偶可见细胞间连接。5个标本的胎盘间充质干细胞中均有部分细胞能吞噬荧光微球,最多有49.6%,最少有18.4%。上述胎盘间充质干细胞的超微结构特点提示细胞功能活跃,可合成和分泌大量蛋白质,并具有吞噬功能;而吞噬实验进一步验证胎盘间充质干细胞吞噬异物的能力,提示胎盘间充质干细胞在胎盘中可能起着维持微环境稳态、清除异物的功能。 展开更多
关键词 干细胞 培养 人胎盘间充质干细胞 超微结构 吞噬功能
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体外定向诱导人胎盘源间充质干细胞向内皮细胞分化 被引量:4
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作者 刘志辉 周延民 +2 位作者 王博蔚 朱镇 刘春丽 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期500-504,607,608,共7页
目的:探讨人胎盘源间充质干细胞(HPMSCS)在特定环境诱导下向内皮细胞分化的潜能,为其促进创伤愈合提供理论依据。方法:在患者知情同意的情况下,从足月分娩产妇娩出的胎盘组织中分离培养HPMSCS,通过倒置显微镜观察其生物学形态,利用流式... 目的:探讨人胎盘源间充质干细胞(HPMSCS)在特定环境诱导下向内皮细胞分化的潜能,为其促进创伤愈合提供理论依据。方法:在患者知情同意的情况下,从足月分娩产妇娩出的胎盘组织中分离培养HPMSCS,通过倒置显微镜观察其生物学形态,利用流式细胞术检测其表面标志,并通过成骨诱导鉴定及成脂肪诱导鉴定确定其多向分化潜能。对鉴定后的HPMSCS在体外通过内皮细胞诱导液使之向内皮细胞分化,并对诱导后细胞进行细胞化学荧光染色,检测内皮细胞特异性Ⅷ因子(vWF)的表达;采用流式细胞术检测诱导后细胞表面标志,观察是否具有内皮细胞表型。结果:HPMSCS在培养基中持续培养后,形态由成纤维细胞样转变为类似内皮细胞的铺路石样结构。成熟内皮细胞特异的表面标志vWF为阳性表达。流式细胞术检测结果显示:CD31及CD34均有表达。结论:本诱导方案能够诱导HPMSCS出现内皮细胞表型,提示HPMSCS在体外特定条件下具有定向分化为内皮细胞的潜能。 展开更多
关键词 人胎盘源间充质干细胞 内皮细胞 诱导分化
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冻干人胎盘因子的高效液相色谱法测定及生物质谱的应用 被引量:5
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作者 吴启庆 郭月凤 +2 位作者 刘云霞 陈学英 田宇 《中国药业》 CAS 2003年第3期48-49,共2页
建立反相高效液相色谱法检测了冻干人胎盘因子,并用生物质谱法测定其分子量范围。采用Kromasil-C_(18)柱,以0.05mol/LCH_3COONa-CH_3COOH(体积比100:0.5)为流动相,紫外检测器214nm波长处检测。结果表明:同一样品连续5次进样,各峰的保留... 建立反相高效液相色谱法检测了冻干人胎盘因子,并用生物质谱法测定其分子量范围。采用Kromasil-C_(18)柱,以0.05mol/LCH_3COONa-CH_3COOH(体积比100:0.5)为流动相,紫外检测器214nm波长处检测。结果表明:同一样品连续5次进样,各峰的保留时间和峰总面积的变异系数小于2.0%;分子量分布范围在10000以下且连续3批产品色谱图一致。该法快速灵敏、结果准确,可以作为冻于人胎盘因子质量控制的常规检验方法。 展开更多
关键词 冻干人胎盘因子 高效液相色谱法 测定 生物质谱法 分子量分布
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