仙茅多糖对巨噬细胞分泌几种活性因子的影响

目的:观察仙茅多糖对体外培养的巨噬细胞分泌几种活性因子的影响,以期探索仙茅多糖活化巨噬细胞的部分机制。方法:将仙茅多糖体外与RAW264.7巨噬细胞共同培养36h,ELISA法检测细胞培养上清中TNF-α、IL-1的含量,Griess比色法检测培养上清中NO的含量。结果:与空白对照组比较,仙茅多糖高、中剂量组TNF-α、IL-1和NO等活性因子的水平明显升高(P<0.05或P<0.01),且与阳性对照组的调节趋势相似。结论:仙茅多糖刺激巨噬细胞分泌TNF-α、IL-1和NO等活性因子可能是其活化巨噬细胞的重要机制。

仙茅多糖对小鼠免疫功能影响的实验研究

目的研究仙茅多糖对免疫功能的影响。方法正常小鼠给予仙茅多糖30d,称重,处死,取其脾和胸腺,用滤纸吸干表面血污,称重,记录数据,分别测定脾指数、胸腺指数、24h足跖增厚及血清溶血素来评价仙茅多糖对小鼠的免疫功能的影响。结果仙茅多糖能提高正常小鼠的脾指数级胸腺指数,增厚足跖厚度,增加血清血溶素。结论仙茅多糖具有增强免疫功能的作用。

仙茅多糖COPb-1和COPf-1的分离纯化及结构研究

目的 :精制并分离仙茅水溶性多糖 ,并研究其结构 ;方法 :将所提仙茅水溶性多糖粗品经水溶醇沉后 ,进一步以DEAE纤维素分离纯化 ,对分离到的主要组分应用HPLC、IR等方法进行结构分析 ;结果 :从仙茅水溶性多糖提取物中分离到两个纯度较高的多糖COPb - 1,COPf- 1。其中COPb - 1分子量 :2 .6× 10 6,组成单糖有葡萄糖、果糖及木糖 ,红外光谱数据显示为呋喃型糖 ;COPf- 1分子量为 2 .2× 10 6,组成单糖有水苏糖、葡萄糖和半乳糖等 ,红外光谱数据显示为吡喃型糖。结论 :从仙茅中分离到两种多糖 ,其中COPb - 1为呋喃型糖 ,COPf- 1为吡喃型糖。

仙茅多糖对小鼠巨噬细胞吞噬活性的影响

目的:探讨仙茅多糖对小鼠巨噬细胞吞噬活性的影响。方法:采用不同浓度的仙茅多糖(500,250,125,62.5,31.25μg/mL)分别处理小鼠腹腔原代巨噬细胞和小鼠巨噬细胞株RAW264.7细胞,36 h后加入荧光标记的大肠杆菌,室温避光孵育1.5 h,荧光显微镜下观察不同剂量的仙茅多糖对两类细胞吞噬大肠杆菌活性的影响。结论:仙茅多糖呈剂量依赖性增强小鼠巨噬细胞的吞噬功能。

仙茅多糖对离体蛙心生理功能的影响

为了研究仙茅(Curculigo orchioides Gaertn)多糖的药理作用,应用斯氏蛙心灌流法研究了仙茅粗多糖对离体蛙心功能的影响.结果表明,5μg/m L的仙茅粗多糖溶液对青蛙心脏无明显影响,浓度增加到10μg/m L时,心肌收缩幅度开始缓慢增大,二者呈现显著的量效关系;浓度继续增加到500μg/m L时,心率开始出现加快的现象,加至1000μg/m L时,心率随之加快到正常值的1.58倍;振幅稳定后,用任氏液冲洗,出现明显的心机能衰竭现象;推测仙茅粗多糖的作用类似于肾上腺素.结论:适当浓度的仙茅粗多糖可加强青蛙心脏收缩功能.

仙茅多糖对环磷酰胺所致免疫低下小鼠免疫功能的影响

目的:探讨仙茅多糖(COP)对免疫低下小鼠免疫功能的调节作用。方法:从72只昆明种小鼠中随机留取12只作为正常对照组,剩余60只采用环磷酰胺腹腔注射建立免疫低下模型,并随机分为模型对照组,COP高、中、低剂量组和阳性对照组,每组12只。COP高、中、低剂量组分别给予400、200、100mg·kg-1·d-1浓度的COP溶液灌胃,阳性对照组给予200mg·kg-1·d-1浓度的香菇多糖溶液灌胃,正常对照组和模型对照组给予等体积0.9%氯化钠溶液灌胃,每日灌胃1次,共灌胃处理10d。给药结束后观察小鼠免疫器官指数,流式细胞术检测血细胞中T细胞亚群,观察NK细胞杀伤能力和小鼠脾脏T、B细胞转化能力,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测小鼠血清中(TNF-α)含量。结果:与正常对照组比较,模型对照组小鼠的胸腺和脾脏指数下降、脾淋巴细胞转化能力显著降低(P<0.05),仙茅多糖高、中剂量组和阳性对照组均可显著提高模型小鼠的脾脏和胸腺指数和脾淋巴细胞转化能力;模型对照组小鼠外周血中CD4+T亚群数量和CD4+T/CD8+T比值较正常对照组显著下降(P<0.05),经COP治疗后CD4+T亚群数量和CD4+T/CD8+T比值均能得到有效恢复,尤以中剂量组效果最佳(P<0.05);COP可以显著提高免疫低下模型小鼠血清中的TNF-α含量(P<0.05)。结论:COP能明显改善环磷酰胺所致免疫低下小鼠的免疫功能。

仙茅多糖对小鼠免疫功能调节作用实验研究

仙茅多糖体外单独能刺激小鼠脾淋巴细胞增殖，而单独对小鼠胸腺细胞无作用，但在ＣｏｎＡ存在条件下对胸腺细胞增殖有协同作用，体外对尼龙毛柱分离小鼠脾Ｔ细胞富含部分有明显刺激增殖作用：体外能对抗由氢化可的松（ＨＣ）抑制ＣｏｎＡ诱导脾Ｔ细胞增殖，体内对ＨＣ诱导免疫受抑小鼠胸腺及脾脏重量降低，胸腺细胞及脾Ｔ、Ｂ细胞增殖降低有明显对抗作用。

仙茅多糖作为流感疫苗佐剂对小鼠巨噬细胞的免疫增强作用

目的:从体内外2个方面探讨仙茅多糖作为流感疫苗佐剂对巨噬细胞的抗原提呈能力和释放活性因子的影响。方法:在体外实验中,以小鼠巨噬细胞株RAW264.7为研究对象,用流式细胞仪检测不同浓度的仙茅多糖对细胞表面CD80、CD86和MHC-Ⅱ表达量的影响,用ELISA法检测细胞培养上清中TNF-α、IL-1、IL-6的水平;在体内实验中,以昆明种小鼠作为研究对象,仙茅多糖与流感疫苗同时注射对小鼠进行免疫,免疫3d后提取各组小鼠腹腔巨噬细胞,对其免疫效果进行评价。结果:在体外实验中,不同浓度的仙茅多糖刺激RAW264.7细胞后,细胞表面CD80、CD86和MHC-Ⅱ都有不同程度表达上调,同时使培养液中TNF-α、IL-1和IL-6含量上升,与阴性对照组比较,差异显著(P<0.05,P<0.01);在体内实验中,不同浓度的仙茅多糖可使腹腔巨噬细胞表面CD80、CD86和MHC-Ⅱ都有不同程度表达上调(P<0.05,P<0.01)。结论:仙茅多糖在体内外可以促进小鼠巨噬细胞的抗原提呈作用,能增强流感疫苗的免疫效应,有望成为具有潜在应用价值的流感疫苗佐剂。

仙茅多糖对RAW264.7细胞的促活化作用及对细胞表面Dectin-1受体表达的影响

目的探讨仙茅多糖对小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞的促活化作用及对细胞表面Dectin-1受体表达的影响。方法采用不同浓度的仙茅多糖(500,250,125,62.5,31.25μg/ml)处理细胞36h,MTT法测细胞活性,ELISA法测TNF-α分泌量,Griess法测NO的分泌量,qRT-PCR测细胞Dectin-1 mRNA的相对表达量。采用Dectin-1受体抑制剂昆布多糖(终浓度为50和100μmol/ml)对细胞预处理2h后,再用仙茅多糖刺激,qRT-PCR测细胞TNF-α和i NOS mRNA的相对表达量,流式细胞术检测细胞吞噬FITC标记的大肠杆菌的能力。结果 RAW264.7细胞受到仙茅多糖刺激后,Dectin-1 mRNA表达量较正常对照组显著增加(P<0.01或P<0.05),且在一定范围内存在量-效关系和时-效关系;与正常对照组相比,仙茅多糖对RAW264.7细胞的吞噬功能和分泌活性因子TNF-α和NO的能力有提升作用(P<0.01或P<0.05),这种作用可以被Dectin-1受体抑制剂昆布多糖阻断。结论仙茅多糖可以增强RAW264.7细胞的吞噬功能和分泌活性因子TNF-α和NO的能力,从而促进细胞活化,其机制可能与细胞表面Dectin-1受体有关。

中药仙茅不同有效成分对骨髓间质干细胞诱导作用的比较

目的比较中药仙茅中不同有效成份对骨髓间质干细胞诱导作用的差异。方法分别采用RT-PCR检测和倒置显微镜下观察的方法 ,对使用中药仙茅多糖和仙茅黄酮诱导刺激后的骨髓间质干细胞进行检测,观察仙茅不同有效成分对骨髓间质干细胞刺激后的变化。结果仙茅多糖和仙茅黄酮成分均能诱导骨髓间质干细胞向神经元细胞诱导分化。结论仙茅黄酮较仙茅多糖对骨髓间质干细胞向神经元细胞定向诱导分化的作用更强。