马尾松种子超低温保存前后转录组测序分析

本研究利用Illumina HiSeq^(TM)6000平台对超低温保存前后的马尾松种子进行转录组测序分析,共获得51.79 Gb的过滤数据,冻存前后共鉴定到2 122个差异表达基因,其中823个上调,1 299个下调。GO富集分析表明,163个差异表达基因被显著富集到33个GO条目中;KEGG富集分析表明,169个差异表达基因显著富集到79条代谢通路。根据KO和KEGG结果,从富集到植物激素信号转导通路、植物MAPK信号通路、淀粉和蔗糖代谢通路、转录因子通路上的基因中,筛选出19个差异表达基因。

自体颅骨深低温保存方案的探索性研究

目的 探索自体颅骨冷冻保存方案,包括保存温度、保存时间、保存方法以及管理流程。方法 回顾性分析2016年1月—2021年12月于宁夏医科大学总医院神经外科行去骨瓣减压术+自体颅骨回植术的325例患者的临床资料,并结合相关文献进行复习。依据探索性保存方案使用之前和使用之后,将2016—2018年的数据分为旧管理组,2019—2021年的数据分为新管理组,进行两组数据自体颅骨回植效果的评价研究。结果 自体颅骨冷冻保存平均时间122.9 d。行回植术后平均住院时间为12.3 d,经过新保存方案和管理流程应用之后,颅内感染率由3.4%降低到1.7%。结论 -80℃深低温保存自体颅骨效果良好,可有效减少颅内感染发生率。

三维塑形钛网与深低温保存自体颅骨在早期颅骨修补中的应用效果分析

目的:分析在早期颅骨修补中运用三维塑形钛网和深低温保存自体颅骨的临床效果。方法:选择2022年 1月至2023年1月到粤北人民医院行颅骨修补术的患者80例,按照术式不同将其分为对照组、试验组,分别接受常规三维塑形钛网修补、深低温保存的自体颅骨修补,比较其恢复效果和并发症。结果:在手术情况记录方面,对比对照组与试验组,后者的住院时间、手术操作总时长更短(P<0.05);试验组感染、颅内出血、积液、伤口不愈合坏死等并发症发生率更低(7.50% VS 30.0%)(P<0.05);在Karnofsky功能状态评分方面,对比对照组与试验组,二者在颅骨修补术前、术后3个月、6个月以及1年Karnofsky功能评分结果对比,差异无统计学意义(P>0.05);在术后外观修复满意度对比方面,对照组总满意度达到80.00%,试验组总满意度达到97.50%,试验组的术后修复满意度结果更加理想,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在早期颅骨修补中,运用深低温保存自体颅骨修补术,能够使病患早日出院,减少术后并发症,提高病患的术后外观修复满意度。

熟地黄多糖对猪精液低温保存效果的影响

本试验旨在探讨熟地黄多糖(RGP)对巴克夏黑猪精液低温保存效果的影响。试验分为对照组和RGP试验组,试验组分别添加0.025、0.1、0.2、0.3、0.4 mg/mL RGP,将精液置于低温(4℃)环境下保存6 d,分别于保存第1、3、5天检测猪精子的活率、活力、质膜完整性、线粒体活性,第2、6天时检测猪精液的抗氧化指标,最终根据保存效果筛选出适宜的RGP添加浓度。结果显示:与对照组相比,RGP组猪精液的活率提高(P<0.05);0.2 mg/mL RGP组精子活率、活力、质膜完整性、线粒体活性,抗氧化酶超氧物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性均高于对照组,丙二醛(MDA)含量低于对照组(P<0.05);0.3、0.4 mg/mL RGP组精子活力、质膜完整性、线粒体活性以及SOD活性、MDA含量均高于对照组(P<0.05),但0.3、0.4 mg/mL RGP组间无显著性差异。由此可见,在猪精液低温保存中添加RGP均可改善精液品质,RGP添加量为0.2 mg/mL时较为适宜。

原花青素对吐鲁番黑羊精液低温保存效果的影响

为研究原花青素(PC)对吐鲁番黑羊精液低温保存效果的影响,本实验采用假阴道法采集5只2岁成年吐鲁番黑羊公羊精液,在精液基础稀释液中添加不同浓度(0、10、20、30、40μg/mL)的PC进行低温保存,每隔24 h检测精子活率、活力、曲线速率(VCL)、直线速率(VSL)、畸形率、质膜完整率等指标,在保存24、72、120 h时检测总抗氧化能力(T-AOC)活性和过氧化氢酶(CAT)活性。结果表明:各PC添加组的精子活率、活力、VCL、VSL、质膜完整率、T-AOC和CAT活性均高于对照组(P<0.05),畸形率低于对照组(P<0.05),其中20μg/mL PC添加组的精子质量高于其他各组(P<0.05)。综上所述,在基础稀释液中添加PC可以显著提高精液品质,且PC添加浓度为20μg/mL时对吐鲁番黑羊精液低温保存效果最佳。

大豆卵磷脂对绵羊精液低温保存效果的影响

为了研究大豆卵磷脂对绵羊精液低温保存效果的影响,在杜泊绵羊精液稀释液中分别添加0(对照)、1.875、3.750、7.500、15.000 g/L大豆卵磷脂,在4℃条件下进行低温保存,每隔12 h观察一次精子活率,统计精子有效存活时间和总存活时间,检测第48小时精子的畸形率和顶体完整率。结果表明,1.875 g/L组的精子有效存活时间、总存活时间显著高于对照组和其余各试验组(P<0.05);1.875 g/L组的精子顶体完整率显著高于15.000 g/L组(P<0.05),畸形率显著低于15.000 g/L组(P<0.05)。说明在稀释液中添加1.875 g/L的大豆卵磷脂可以延长精子的存活时间,提高绵羊精液低温保存的质量。

南方红豆杉悬浮细胞超低温保存体系的建立

【目的】紫杉醇具有广谱抗癌作用,但其在红豆杉中含量极低,已无法满足日益增长的临床需求。目前,红豆杉悬浮细胞培养技术被认为是解决紫杉醇稀缺的有效途径之一,然而细胞经过连续不断传代后容易发生遗传性变异,导致细胞生长状态不佳,合成紫杉醇的能力下降。研究提出一个优化的超低温保存南方红豆杉悬浮细胞的方法以解决这一难题。【方法】以南方红豆杉悬浮细胞为材料,采用单因素试验,研究预培养温度、预培养时间、预处理剂、脱水时间、冷冻保护剂及解冻温度对细胞存活的影响,并在此基础上以细胞存活率为优化目标对超低温保存条件进行响应面优化。【结果】根据单因素试验筛选出3个显著影响因素,分别为蔗糖浓度、脱水时间、解冻温度;通过响应面优化获得细胞最佳保存条件为:南方红豆杉悬浮细胞首先在B5培养基中预培养12 d,预培养温度为5℃,然后室温下用6.6%蔗糖预处理30 min,去除预处理剂,加入20%乙二醇+35%甘油+10%DMSO+10%山梨醇作为冷冻保护剂,在0℃条件下脱水处理31 min,0℃冰浴30 min,-20℃放置2 h,最后放入-80℃冰箱中保存14 d。冷冻后的悬浮细胞在41℃水浴60 s迅速解冻,接着用含1.2 mol/L蔗糖的B5培养基洗涤去除保护剂,最后在B5培养基上对悬浮细胞进行恢复性培养。经过上述冻存处理的南方红豆杉悬浮细胞存活率可达68.19%。【结论】建立了南方红豆杉悬浮细胞的超低温保存体系,并对其进行了优化,取得了一定的冻存效果,这为南方红豆杉及其他药用植物细胞的长期维持提供了技术参考。

还原型谷胱甘肽对西门塔尔牛精液低温保存效果的影响

本实验旨在探究还原型谷胱甘肽(GSH)对西门塔尔牛精液低温保存(0℃)的影响。在精液稀释液中分别添加0(对照组)、1、2、4、6 mmol/L的GSH,在0℃条件下保存24、72、120、168、216 h时检测精子活力、顶体完整率和质膜完整性等指标;保存72 h和168 h时检测精子的丙二醛(MDA)水平、三磷酸腺苷(ATP)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活性。结果表明:在精液低温保存72 h时,4 mmol/L GSH添加组的精子活力、顶体完整率、质膜完整性、CAT活性、ATP含量和GSH-Px活性高于对照组(P<0.05);在精液低温保存168 h时,4 mmol/L GSH添加组的精子活力、顶体完整率、质膜完整性、CAT活性、ATP含量和GSH-Px活性高于对照组与其他GSH添加组(P<0.05),MDA水平低于其他组(P<0.05)。因此,在本实验条件下,在精液稀释液中添加4 mmol/L GSH可以有效提高精液品质和精子的抗氧化能力,延长精子的保存时间。

改良超低温保存箱制备新鲜冰冻血浆的质量分析

目的 观察分析使用改良后的超低温保存箱,对制备新鲜冰冻血浆(FFP)的质量影响。方法 选取2023年7—11月采集的400 mL的合格全血标本80例(去除O型),实验分为4组,每组标本20例。A组:使用传统低温冰箱速冻1 h后,放入-30℃冷库储存;B组:使用平板速冻机速冻1 h后,放入-30℃冷库储存;C组:使用改良超低温保存箱速冻1 h后,放入-30℃冷库储存;D组:使用新改良超低温保存箱速冻1 h并储存12 h后,放入-30℃冷库储存。检测4组标本凝血因子FⅧ和纤维蛋白原(Fg)的含量。结果 B、C、D 3组的FⅧ含量均显著高于A组,有统计学差异(P<0.05),B、C、D 3组之间FⅧ含量差异无统计学意义(P>0.05),4组之间的Fg含量差异均没有统计学意义(P>0.05)。结论 新改良的超低温保存箱在制备FFP的质量上优于低温冰箱的传统制备工艺,与平板速冻机制备效果差异无统计学意义,但改良式的超低温保存箱兼顾储存功能,可以使FFP的制备流程更加灵活,可以提高成分制备工作的效率。

两种母乳低温保存方式在低出生体质量早产儿喂养中的应用

目的:比较冷藏的新鲜母乳和冷冻母乳对低出生体质量早产儿(low birth weight infant,LBWI)喂养的影响。方法:以286例LBWI为研究对象,按家属意愿分为观察组142例,予冷藏的新鲜母乳(0~4℃,保存24 h)喂养;对照组144例,予冷冻母乳(-20~-18℃,保存3~6个月)喂养。患儿入院后即开始干预,喂养1周后,比较两组喂养不耐受的发生率、经口喂养率、全经口喂养开始时间、肠道菌群的变化,及新生儿坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis of newborn,NEC)、院内感染等发生率。结果:观察组第8天经口喂养率高于对照组(P=0.002),喂养不耐受的发生率低于对照组(P<0.001),肠道菌群的建立优于对照组(P=0.041);观察组出院前全经口喂养开始时间较对照组提前(P<0.001),喂养不耐受和院内感染的发生率均低于对照组(P=0.041,P=0.046)。而两组新生儿坏死性小肠结肠炎、胆汁淤积症和支气管肺发育不良的发生率差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论:与冷冻母乳相比,冷藏的新鲜母乳能提高LBWI经口喂养率,使全经口喂养开始时间提前,降低喂养不耐受和院内感染的发生率,优化肠道菌群的建立。本研究结果在一定程度上验证了新鲜母乳冷藏对LBWI干预的有效性和可行性。

安石榴甙对湖羊精液低温保存效果的影响

为探究安石榴甙对湖羊精液低温保存效果的影响,本实验采集3只1~2岁健康成年湖羊精液,混匀后取5份等量精液,按1:9的比例加入不同安石榴甙浓度(0、5、15、30、45μmol/L安石榴甙)的稀释液,4℃保存7 d。检测精子的活率、活力、质膜完整率、顶体完整率、线粒体膜电位(MMP)、活性氧(ROS)含量、丙二醛(MDA)含量、过氧化氢酶(CAT)活性等指标。结果显示:保存4~7 d时,30μmol/L安石榴甙组湖羊精子活率、活力显著高于其他各组;保存2~7 d时,30μmol/L安石榴甙组湖羊精子质膜完整率、顶体完整率显著高于其他各组;保存1、3、5 d时,30μmol/L安石榴甙组湖羊精子的MMP显著高于其他各组;保存3、5 d时,30μmol/L安石榴甙组精子ROS含量显著低于其他各组;保存3、5 d时,30μmol/L安石榴甙组湖羊精液MDA含量显著低于其他各组;保存1、3、5 d时,30μmol/L安石榴甙组湖羊精液CAT活性显著高于其他各组。本研究结果表明,在稀释液中添加30μmol/L安石榴甙可以显著提高精液保存质量。

α-硫辛酸对湖羊精液低温保存效果的影响

α-硫辛酸(ALA)是一种高效的生物抗氧化剂,为探究4℃保存条件下在精液稀释液中添加ALA对湖羊精液品质的影响及可能的作用机理,本实验采集3只健康湖羊精液样本,在精液稀释液中分别添加0、0.025、0.05、0.1、0.5mmol/L的ALA,其中0mmol/L ALA组为对照组,检测精子活力、运动性能、结构完整性、活性氧(ROS)以及丙二醛(MDA)含量指标,确定最佳的添加浓度。结果表明:与对照组相比,外源添加适宜浓度的ALA能够显著提高精子活力、直线速率(VSL)、曲线速率(VCL)、路径速率(VAP)和质膜完整率等指标。随着ALA添加量的增加,精子活力、运动性能和质膜完整率呈现先上升后下降的趋势,当添加浓度为0.1 mmol/L ALA,效果最好。相对于其他添加浓度,0.1 mmol/L ALA处理组的ROS和MDA含量显著降低,减少精液低温保存过程中氧化应激带来的损伤,对精子具有较好的保护作用。本实验结果表明在湖羊低温保存精液稀释液中添加ALA通过降低氧化损伤来改善精液品质,其最适宜的添加浓度为0.1 mmol/L。

脯氨酸对山羊精液低温保存的影响

为提高精液对精子的抗氧化保护能力,延长精子在体外的存活时间,在低温保存(4℃)条件下,向山羊精液基础稀释液中添加浓度为0、0.5、1、2、4 mM的脯氨酸,经保存24 h、48 h后,检测各处理组的精子活力、顶体完整率、质膜完整率,及48 h各组线粒体活性、活性氧水平、丙二醛、脂质过氧化物含量、抗氧化酶活性等精子质量评定指标。结果表明,在精液中添加一定浓度的脯氨酸可提高精子抗氧化能力,且添加最适浓度为1 mM。在1 mM处理组中,精子48 h总活力71.3%,比对照组显著提高18.57%(P<0.01),顶体完整率提高12%,质膜完整率提高10.5%,线粒体活性提高23.15%,抗氧化酶活性均显著提高(P<0.05),活性氧水平、丙二醛、脂质过氧化物含量均显著降低(P<0.05),并且脯氨酸脱氢酶活性显著提高(P<0.05),凋亡相关蛋白(Caspase-3、Caspas-9、P53和BCL-2)表达量显著降低(P<0.05)。因此,在4℃液态保存的山羊精液中,添加脯氨酸能够提高保存后的精液品质。这为脯氨酸作为一种可以有效提高山羊精液品质的抗氧化剂提供了新的思路。

低温保存红细胞力学性能评估的介电泳方法研究

目的低温保存作为人体红细胞长期储存的技术方案,在临床医学和基础研究中具有巨大的应用潜力。但低温保存过程中的每一步,细胞都不可避免地遭受低温损伤。因此需评估回收的细胞是否保持正常的生理功能和完整的结构。但目前大多数指标是通过细胞群平均值而不是单个细胞来量化。本研究从单细胞角度,用红细胞的力学性能评估低温保存后细胞状态。方法采用微流控、无标记、同步和无损的介电泳方法研究了多种保护剂低温保存人体红细胞对黏弹性的影响。由高速相机获取细胞图像,通过形态学图像分割技术快速提取细胞形变信息。结果用二甲基亚砜低温保存的红细胞的黏弹性优于甘油,采用蔗糖保存优于海藻糖。并且发现红细胞冻融存活率与细胞黏弹性的优劣不具备相关性。结论黏弹性作为评估回收细胞质量的独立指标,无法替代或省略。本研究有助于加深对低温损伤机制的理解。单细胞黏弹性的评估在优化低温保存过程和筛选最佳保护剂等方面展现巨大的应用潜力。同时,鉴于红细胞膜的简单性和特异性,本文研究也可以为其他细胞类型的研究提供新的思路。

玻璃化超低温保存对独占春原球茎生理生化特性影响

为探明兰花稀缺品种独占春(Cymbidium eburneum Lindl.)玻璃化超低温保存技术中成活率较低的问题,以独占春原球茎为研究对象,研究了玻璃化超低温保存技术对其生理生化特性的影响,并分析了各生理指标之间的相互关系。结果表明:逆境胁迫中,含水量随玻璃化超低温保存进程缓慢降低,卸载处理迅速降低,其含水量是对照处理的79.06%;相对电导率逐渐升高,卸载处理达到最高(86.36%);氧化损伤指标中的丙二醛(MDA)质量摩尔浓度显著升高,玻璃化处理达到最大;蛋白质羰基(PCO)质量摩尔浓度则是先升高后降低再升高,玻璃化处理质量摩尔浓度最低;氧化物质指标中的过氧化氢酶(CAT)活性和抗坏血酸(ASA)质量摩尔浓度变化趋势一致,均先升高后降低,且预培养处理达最大值;超氧化物歧化酶(SOD)活性先降低后升高,呈现双峰变化趋势;活性氧成分中H_(2)O_(2)和·OH质量摩尔浓度在玻璃化处理均达到最大值,且H_(2)O_(2)质量摩尔浓度变化趋势和CAT活性变化趋势在玻璃化超低温保存进程中表现为相互抑制。通过相关性分析,CAT活性和超氧自由基(O·-2)质量摩尔浓度呈极显著正相关,和H_(2)O_(2)质量摩尔浓度呈显著负相关,表明氧化酶物质对活性氧成分具有清除作用。

不同稀释保护液对羊精子在4℃低温保存条件下品质影响的探索研究

本研究旨在评估不同稀释保护液(含蛋黄、大豆卵磷脂、甘油等成分)在4℃条件下保存6 d对种公羊精子参数的影响,从而为种公羊鲜精低温延时保存技术提供科学依据,并提高优质种公羊的利用率。实验通过混合精液样本以消除个体差异,并将混合后的精液均分为三份,分别添加至三种不同的稀释保护液(Tris基础液+大豆卵磷脂、Tris基础液+蛋黄、牛奶+果糖)中进行等温稀释,使最终精子浓度达到40×10^(6)个/mL。随后,将稀释后的精子分装至0.25 mL麦管中,并使用聚乙烯醇进行密封,储存于4℃恒温冰箱中。在储存后的0、72、120和144 h,采用计算机辅助精子分析系统(CASA)测定精子活力参数,并利用伊红染色技术评估精子顶体完整性和异常率。实验结果显示,在初始状态下,各组精子活力相近且未检出异常率;然而,随着储存时间的延长,精子活力逐渐降低,异常率逐渐上升。特别是在储存144 h后,牛奶+果糖组的精子活力最低,异常率最高;相比之下,Tris基础液+大豆卵磷脂组在短期内对精子活力的保持效果更佳,且精子异常率相对较低。因此,本研究表明,在4℃低温保存种公羊精子时,选择合适的稀释保护液对于维持精子活力和降低异常率至关重要,其中Tris基础液+大豆卵磷脂稀释保护液表现出较好的应用潜力。

山丹茎尖玻璃化超低温保存技术体系的建立

为建立山丹(Lilium pumilum DC.)茎尖玻璃化超低温保存技术程序,以山丹无菌苗茎尖为试验材料,采用单因素试验方法,对玻璃化超低温保存技术的关键因素预培养基蔗糖浓度、预培养时间、装载处理时间、PVS2溶液处理时间进行依次筛选。最佳条件为:将茎尖接种于含0.5 mol/L蔗糖的预培养基中预培养7 d,装载处理20 min,PVS2溶液处理80 min后,保存于液氮中即可;可获得70.91%的茎尖存活率和51.85%的再生率,为山丹种质资源提供了简单易行、高效的长期保存方法。

颗粒野生稻愈伤的诱导继代与超低温保存

为了更好地保存颗粒野生稻资源,选取引自国际水稻研究所的2种颗粒野生稻,诱导愈伤并建立组培快繁体系,对愈伤组织进行超低温保存。结果表明:通过种子诱导以及发芽后的胚根诱导,都得到了颗粒野生稻愈伤;NB和MS培养基交替继代培养有助于提高愈伤活性;利用高糖预培养和干燥处理结合的方式,2种颗粒野生稻愈伤在超低温保存后成功存活,新生愈伤率分别为34.24%和23.95%,且恢复生长的愈伤组织可分化出新的颗粒野生稻植株。组培快繁技术与超低温保存相结合,为颗粒野生稻种质保存提供了有效途径。

基于熵权TOPSIS模型的桃儿七种子超低温保存条件筛选

探索适宜桃儿七(Sinopodophyllum hexandrum)种子超低温保存的条件,为桃儿七种子的长期保存提供技术支撑。以桃儿七种子为试验材料,利用硅胶干燥法、自然阴干法及浸泡法获取1.6%、9.6%、20.9%、30.5%的4种不同含水量种子,并通过直接冷冻、缓慢冷冻及玻璃化冷冻3种方式对其进行超低温保存,同时测定超低温保存前后桃儿七种子生活力及其种子内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、丙二醛(MDA)、总蛋白(TP)、可溶性淀粉、可溶性糖的含量变化。研究结果发现:(1)不同含水量的桃儿七种子经3种超低温冷冻方式保存后,种子生活力均呈现不同程度的下降,但含水量为1.6%、9.6%和20.9%的桃儿七种子经缓慢冷冻后较对照组无显著差异(P>0.05);(2)4种含水量的桃儿七种子经超低温保存后,其种子内可溶性糖和总蛋白含量总体呈上升趋势,且可溶性糖含量增幅最大,而种子内淀粉含量、超氧化物歧化酶和过氧化物酶活性总体呈下降趋势,但超氧化物歧化酶和过氧化物酶活性在含水量为1.6%和9.6%时降幅较小,丙二醛含量在含水量为1.6%和30.5%时呈上升趋势,而在含水量为9.6%和20.9%时表现为下降趋势,说明不同含水量的桃儿七种子经液氮冷冻后均受到不同程度损伤,引起抗氧化酶活性下降,同时蛋白含量的增加和淀粉降解导致的可溶性糖含量积累又提高了种子的低温耐性,导致冷害产物丙二醛含量呈现不同的变化趋势;(3)熵权TOPSIS综合排序在前3位的分别是含水量为1.6%的玻璃化冷冻组种子、含水量为9.6%的直接冷冻组和缓慢冷冻组的种子。结果表明,桃儿七种子液氮超低温保存技术是可行的,含水量为9.6%的种子经直接冷冻或缓慢冷冻为最佳的超低温保存条件。

添加胰岛素-转铁蛋白-亚硒酸钠对牛体外胚胎生产、低温保存及常规冷冻效果的影响

【目的】探究添加胰岛素-转铁蛋白-亚硒酸钠(insulin-transferrin-sodium selenite,ITS)对牛体外胚胎生产、4℃低温保存及常规程序冷冻效果的影响,以期应用ITS提高牛体外胚胎的生产及保存效果。【方法】对屠宰场卵巢来源的牛卵母细胞进行体外受精,①研究在胚胎体外培养后期液M2中添加ITS对囊胚率的影响,试验分为M2中添加ITS组(M2+ITS)和M2中未添加ITS的对照组(M2-control);②研究在M2中添加ITS后进一步在前期培养液M1中添加ITS对早期胚胎发育的影响,试验分为M1和M2中均添加ITS组(M1+M2+ITS)和仅M2中添加ITS的对照组(M1-control);③在三气培养条件下对ITS改善胚胎发育的效果进行评估,试验分为添加ITS组(ITS)和未添加ITS的对照组(control),以上各组均统计卵裂率、7 d囊胚率及总囊胚率;④将获得的7 d牛囊胚在添加ITS的M2保存液(Hypo-ITS组)中低温保存(4℃)24 h后复苏培养,或者在添加ITS(Cryo-ITS组)的冷冻保存液中常规程序冷冻解冻后培养,以低温保存液中未添加ITS(Hypo-control组)和冷冻液中未添加ITS(Cryo-control组)为对照,统计胚胎的存活率和孵化率。【结果】与对照组相比,M2+ITS和M1+M2+ITS组的7 d囊胚率均显著提高(P<0.05);三气培养条件下,ITS组7 d囊胚率显著提高(P<0.05)。Hypo-ITS组4℃低温保存复苏的牛胚胎存活率与对照组差异不显著(P>0.05),但孵化率显著高于对照组(P<0.05);Cryo-ITS组的常规程序冷冻解冻的牛胚胎存活率及孵化率与对照组均无显著差异(P>0.05)。【结论】ITS可作为添加剂及低温保护剂用于提高牛体外胚胎生产及低温保存效果,但在常规程序化冷冻液中添加ITS对牛体外胚胎常规程序冷冻效果的提升并不明显。