猪细小病毒病(PPV_(S-1)株)灭活疫苗不同佐剂的比较试验

本研究分别用铝胶佐剂和ISA201佐剂配制的猪细小病毒病灭活疫苗来免疫乳鼠,乳鼠免疫后表现正常,无死亡;5倍剂量免疫仔猪后,免疫猪未出现不良反应;随后检测免疫14、21、30、60、90、120、150、180、210d时的抗体水平。结果显示,用ISA201佐剂配制的灭活疫苗免疫猪后免疫期可达6个月,用铝胶佐剂配制的灭活疫苗免疫猪后免疫期可达5个月。综合试验结果,建议选择用ISA 201佐剂作为猪细小病毒病灭活疫苗的佐剂。

动物病毒性疫苗中中药佐剂研究进展

综述了中药佐剂在动物病毒性疫苗中的研究进展,总结了中药佐剂的类型及在禽类和畜类病毒性疫苗中的应用,比较了中药佐剂与传统佐剂的免疫效果,并探讨了中药佐剂的增效方法,重点阐述了中药佐剂在不同动物病毒性疫苗中的效果,分析了当前中药佐剂的优点及存在的问题,提出相关建议,并展望了中药佐剂作为动物病毒性疫苗的应用潜力和前景。

新型疫苗佐剂研究进展

佐剂是增强和调节疫苗抗原免疫反应的免疫刺激物,与抗原一起使用能产生更强的免疫反应。佐剂能激活机体的天然免疫系统,当佐剂和抗原同时或预先注射到机体内,可改变抗原的形态并延长抗原在体内的滞留时间,促进单核吞噬细胞对抗原的递呈能力及刺激淋巴细胞增殖分化,从而增强机体对抗原的免疫应答或改变免疫应答类型。佐剂的发展史长达一百多年,目前使用最广泛的疫苗佐剂是铝佐剂,传统的灭活疫苗在很大程度上依靠以铝盐为主的复合物作为主要佐剂。但近年来,随着基因工程技术和生物技术的飞速发展,重组疫苗、基因工程载体疫苗、核酸疫苗等新型疫苗逐步被开发出来,这些新型疫苗与传统疫苗相比往往存在免疫应答能力差等问题,早期的抗原不纯导致传统的铝盐佐剂已无法满足需要。为解决新型疫苗免疫原性差的问题,科研人员致力于开发广谱且高效的新型疫苗佐剂用来增强新型疫苗的作用。新型疫苗佐剂种类繁多,功能各不相同且机制较为复杂,可分为新型油乳佐剂、脂质体佐剂、CpG寡核苷酸佐剂、细胞因子佐剂、纳米佐剂、多糖佐剂及复合系统类佐剂等。笔者对疫苗佐剂的发展史、作用机制及新型疫苗佐剂的分类进行分析和评述,以期为新型疫苗佐剂的研制及开发提供参考。

基于碳水化合物的佐剂作用机制研究进展

佐剂是指添加到疫苗中以刺激和增强免疫应答强度或改变免疫应答类型的物质。目前疫苗佐剂种类较多,包括铝佐剂、油乳佐剂和脂质体佐剂等,但临床使用的佐剂很少同时具备高效和低毒两大特点,因此迫切需要一种有效且安全的佐剂。基于碳水化合物的佐剂具有良好的生物相容性和易代谢的优点,同时,基于碳水化合物的佐剂种类广泛,且每种都有不同免疫特性,如基于多糖的佐剂可以增强巨噬细胞的吞噬活性及抗原提呈能力等。并且基于碳水化合物的佐剂还可与Toll样受体、C型凝集素受体等多种受体结合发挥上述免疫活性,但其作用机制尚不完全清楚。故本文基于碳水化合物的佐剂作用机制相关研究进展进行总结梳理,以期为相关佐剂的进一步研究提供参考。

包裹有CTA1-DD蛋白的OCS-DS纳米颗粒的制备及佐剂活性

重组CTA1-DD蛋白具有与完整CT分子相当的全身性和黏膜佐剂功能,但在复杂的生理环境中易被酶或酸降解。本研究以同样具有佐剂活性的O-羧甲基壳聚糖(OCS)和硫酸葡聚糖(DS)为载体,通过离子交联形成纳米颗粒,将CTA1-DD蛋白嵌入其中,使其得到稳定保护。包裹有CTA1-DD蛋白的OCS-DS纳米颗粒的粒径为50~150 nm,Zeta电位约-50 mV,质量浓度1.0 mg/ml的CTA1-DD蛋白投入制备的包裹有CTA1-DD蛋白的OCS-DS纳米颗粒载药率25.33%,包封率86.56%。体外模拟释放试验结果显示CTA1-DD蛋白可在7 d内缓慢释放。将CTA1-DD蛋白与PRV灭活抗原混合后,接种至小鼠鼻腔,结果表明,包裹有CTA1-DD蛋白的OCS-DS纳米颗粒能够同时诱导更高的血清IgG抗体和黏膜IgA抗体表达,证明了其作为黏膜佐剂的高效性。

不同局麻药佐剂在周围神经阻滞中的应用进展

超声引导下周围神经阻滞技术在临床麻醉和术后镇痛中的应用越来越广泛。目前,怎样缩短周围神经阻滞的起效时间、延长所用局麻药的作用时间、降低局麻药的毒性反应、增强周围神经阻滞效果是临床麻醉关注的热点问题。许多学者为了缩短周围神经阻滞麻醉的起效时间,增强阻滞效果,延长阻滞的作用时间,尝试了在局麻药中加入多种佐剂进行研究,对比了在周围神经阻滞中应用不同局麻药佐剂的作用效果。本文将对近年来在周围神经阻滞中应用不同局麻药佐剂的应用和研究进展做一综述,以期为临床麻醉医生进行周围神经阻滞提供指导。

禽流感疫苗新型佐剂的研究进展及未来发展方向

禽流感是一种高度接触的病毒性传染病,它对我国养殖业及公共卫生构成严重威胁。随着疫情的频发和病毒株的变异,研发更有效的疫苗及其佐剂成为迫切需求。为此,综述了禽流感疫苗新型佐剂的研究进展,包括佐剂的种类、作用机制、以及在禽流感疫苗中的应用实例,并对未来的研究方向提出了展望,这为禽流感疫苗新型佐剂的研发提供理论依据。

右美托咪定作为神经阻滞佐剂的研究进展

神经阻滞是一种麻醉和疼痛管理技术,其通过局部麻醉药物在特定神经区域阻断神经传导来实现。神经阻滞与全身麻醉相比具有许多优势,可以提供局部和选择性的镇痛效果,同时减少全身麻醉相关的并发症和药物副作用。右美托咪定是一种α2肾上腺素受体激动剂,作为潜在的佐剂,被广泛用于神经阻滞中。右美托咪定具有镇静、镇痛和抗焦虑的效果,可以与局部麻醉药物结合使用,以增强神经阻滞的效果。本研究将右美托咪定作为各个部位神经阻滞佐剂的临床作用进行综述,新增了其在颌面部神经阻滞和星状神经节阻滞中的运用,为神经阻滞麻醉和镇痛提供参考。

疫苗佐剂的作用机制及研究进展

疫苗是预防传染性疾病最有效的措施之一,对预防及控制传染病的传播起到了重要作用。而佐剂作为疫苗的辅助成分,在疫苗研发过程中不可或缺。理想的佐剂不仅可以增强免疫反应,使机体获得最佳的保护性免疫,还具有减少免疫物质用量、降低疫苗生产成本等重要作用。为满足新型疫苗的需求,已经研发了许多新型佐剂。但目前临床上仍缺乏一种安全、有效、易制备、纯度高、适用于多种疫苗的佐剂。本文根据佐剂的类别,通过计算机检索PubMed、Embase、The Cochrane Library、中国知网、维普数据库、万方数据库等数据库(英文检索关键词包括Adjuvants、Vaccine、Vaccine Adjuvant、aluminum salts、MF59、AS03、Toll-like receptor agonist等及其他相关检索词;中文检索词包括佐剂、疫苗佐剂、铝盐佐剂、弗氏佐剂、AS01等及其他相关检索词),总结常用的传统铝盐佐剂和较为新型的脂质体类、核酸类等佐剂的作用机制以及各自的特点,旨在为佐剂的研制和应用提供参考。

机械穿刺结合肿瘤坏死因子α及完全弗氏佐剂构建大鼠椎间盘源性腰痛模型

背景:椎间盘退变是导致下腰痛的重要原因。目前国内外对于椎间盘退变的造模方法众多,但缺乏一个针对椎间盘退变引起下腰痛的模型。目的:对比机械穿刺结合肿瘤坏死因子α+完全弗氏佐剂注射与传统仅机械穿刺下建立的大鼠椎间盘源性腰痛模型的效果。方法:将18只成年SD雄性大鼠,按照随机数字表法分3组,每组6只,空白组不进行任何操作;对照组大鼠L_(4-5)椎间盘建立传统机械穿刺椎间盘退变模型;实验组在机械穿刺基础上,以微量注射器向L_(4-5)椎间盘内注入肿瘤坏死因子α+完全弗氏佐剂建立机械穿刺结合炎症因子诱导的椎间盘退变模型。术后4周,热板法测大鼠痛阈值用于评估椎间盘退变大鼠对热伤害感受;MRI观察各组大鼠椎间盘退变情况;ELISA法检测血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6、前列腺素E2水平;苏木精-伊红和番红O固绿染色观察椎间盘形态变化。结果与结论:①在疼痛上,与对照组相比,实验组大鼠的行为学痛阈值持续降低,血清学各炎症因子指标显著增高;②在形态上,与对照组相比,实验组大鼠的MRI L_(4-5)髓核信号完全消失;组织病理学染色显示:对照组大鼠髓核完整,可见较多脊索细胞,部分纤维环破裂;实验组大鼠的脊索细胞稀少,髓核与纤维环结构紊乱,边界消失;③结论:大鼠椎间盘机械穿刺结合肿瘤坏死因子α+完全弗氏佐剂注射可成功建立椎间盘源性腰痛模型,该操作方法简单、经济,模型退变及腰痛明显,明显缩短椎间盘退变成模周期,可作为研究椎间盘源性腰痛模型的参考。

沙葱多糖对小鼠卵清白蛋白的免疫佐剂作用

本试验旨在研究沙葱多糖(AMRP)对模型抗原卵清白蛋白(OVA)免疫小鼠的佐剂作用。选择40只6~8周龄、体重为(20±2)g的无特定病原体(SPF)级雌性昆明小鼠,随机分为5组,分别为空白对照组(BC组)、OVA免疫对照组(OVA组)、OVA+低剂量沙葱多糖组(LAMRP组)、OVA+中剂量沙葱多糖组(MAMRP组)和OVA+高剂量沙葱多糖组(HAMRP组),每组8个重复,每个重复1只。预试期7 d,正试期34 d。第1~4天和第16~19天,BC组和OVA组小鼠灌胃生理盐水,LAMRP组、MAMRP组和HAMRP组分别灌胃15、20和25 mg/kg BW沙葱多糖,灌胃量为0.2 mL;第5天和第20天,BC组小鼠腹部皮下注射0.1 mL/只生理盐水,其余各组小鼠注射100μg/只OVA溶液,二免后2周进行样品采集。结果表明:1)与BC组和OVA组相比,不同剂量沙葱多糖对试验各阶段小鼠体重和增重率均无显著影响(P>0.05)。2)与BC组和OVA组相比,各剂量沙葱多糖组小鼠胸腺指数均无显著差异(P>0.05);MAMRP组脾脏指数极显著提高(P<0.01),脾脏生发中心直径显著提高(P<0.05)。3)与BC组和OVA组相比,MAMRP组和HAMRP组小鼠血清白细胞介素-10(IL-10)含量极显著提高(P<0.01);与OVA组相比,LAMRP组和MAMRP组血清干扰素-γ(IFN-γ)含量显著提高(P<0.05);各组间血清白细胞介素-2(IL-2)和白细胞介素-4(IL-4)含量均无显著差异(P>0.05)。4)与BC组相比,MAMRP组小鼠血清OVA特异性抗体免疫球蛋白G(IgG)含量极显著提高(P<0.01)。综上所述,沙葱多糖可提高小鼠对抗原OVA的免疫能力,进而表现出一定的佐剂效用,可以作为一种有效的疫苗佐剂诱导机体免疫应答;本试验条件下,以灌胃20 mg/kg BW沙葱多糖时佐剂效果较佳。

氧化石墨烯量子点对鸡卵清蛋白递送-免疫增强佐剂效力评估

利用改进的Hummers法氧化鳞片石墨,获得富含羟基和羧基的氧化石墨烯量子点(GOQDs)。通过透射电子显微镜、X射线衍射、红外光谱及拉曼光谱测试表征其理化性质。此外,利用鸡卵清蛋白(OVA)作为模式抗原,构筑GOQDs/OVA纳米疫苗并评估其载量、安全性、免疫效力等。结果显示,GOQDs/OVA纳米疫苗直径在5 nm左右,具有高度的水分散性和稳定性。其对OVA的最大负载量约为500 mg·g^(-1),在pH=5.5和7.4环境下24 h的释放率分别为74.65%和56.93%,表现出pH刺激响应释放性能。当GOQDs浓度在500μg·mL^(-1)以下时,不会引起溶血、细胞损伤、重要组织发生病变等现象。免疫后,与OVA单独免疫对照组相比,GOQDs/OVA纳米疫苗可以诱导产生高水平的免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白G1(IgG1)及免疫球蛋白G2a(IgG2a)抗体,提高白细胞介素(IL)-1β、IL-2、IL-4和IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和γ干扰素(IFN-γ)的分泌,同时促进脾中辅助性(CD4+)和细胞毒性(CD8+)T淋巴细胞百分比的增加。

WT1多肽乳佐剂疫苗的免疫增强效应及其对急性髓系白血病抗肿瘤效应研究

目的 评价Wilm瘤基因1(Wilms’ tumor gene1, WT1)多肽联合AddaVax^(TM)乳佐剂疫苗的稳定性、安全性、免疫增强效应及其对急性髓系白血病抗肿瘤效应。方法 用MALDI-TOF-MS飞行时间质谱评价该佐剂疫苗中WT1多肽的稳定性;将C57BL/6雌性小鼠按照随机数字表法分成3组:PBS组、WT1组和WT1+AddaVax^(TM)组,使用免疫剂量为抗原50μg/只、佐剂50μg/只,按照第0、14、28天肌肉注射免疫程序进行免疫。用HE染色评价疫苗肌肉注射小鼠脏器组织毒性;用ELISA检测细胞因子水平;ELISpot检测脾细胞分泌IFN-γ细胞数量;流式细胞术检测疫苗促体外骨髓来源树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cells, BMDCs)成熟和促淋巴细胞活化及H-2Db WT1四聚体检测特异性CD8+T细胞比例;用C1498-mWT1稳转细胞株构建小鼠白血病肿瘤模型后,评价其预防与治疗的抗肿瘤效应。结果 WT1多肽可在疫苗中稳定存在,对小鼠肌肉注射未发生明显的脏器组织变化;对小鼠肌肉注射WT1+AddaVax^(TM)疫苗后,与WT1组相比,WT1+AddaVax^(TM)组可诱导高水平的Th1细胞免疫应答γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及其Th17免疫应答白介素17A(IL-17A)(P<0.05);与WT1组相比,WT1+AddaVax^(TM)组促进脾淋巴细胞分泌IFN-γ的细胞数量增加(P<0.01),促进BMDCs成熟的标志物CD40^(+)/CD11c^(+)、CD86^(+)CD80^(+)/CD11c^(+)细胞比例增加(P<0.05),促进淋巴细胞中CD4^(+)/CD3^(+)T、CD69^(+)/CD8^(+)T细胞比例增加(P<0.05)及其特异性CD8+T细胞比例增加(P<0.05);利用C1498-mWT1小鼠急性髓系白血病皮下荷瘤模型的抗肿瘤效应中,WT1+AddaVax^(TM)组中位生存期相比于WT1组小鼠延长了6 d。在第50天时,WT1多肽+AddaVax^(TM)组小鼠生存率为28.5%,其他组小鼠全部死亡(P<0.05)。结论 WT1多肽联合AddaVax^(TM)乳佐剂疫苗具有良好的免疫学和明显抗肿瘤效果。

锰纳米佐剂的制备及生物学效应

锰作为生命活动中重要微量元素参与了多种生理过程。对于能量代谢、神经系统发育和免疫系统正常运行至关重要。与可溶性锰离子相比,纳米锰可维持锰离子在注射部位持续释放,以诱导局部的免疫应答,并增强树突状细胞(dendritic cells,DCs)对抗原的摄取,促进DCs在体内活化与成熟。本文从纳米锰作用机制、制备方法、功能表征、纳米佐剂存在的问题和解决策略等方面进行综述,重点介绍了纳米锰作为疫苗佐剂的应用,并提出存在问题及解决策略。

猪流行性腹泻灭活疫苗佐剂筛选

为探究不同佐剂对猪流行性腹泻灭活疫苗免疫效果的影响,选用水包油佐剂A(O/W)、油包水佐剂B(W/O)和双相佐剂C(W/O/W)3种不同佐剂配制疫苗,分别接种3~5日龄仔猪后攻毒,综合评价不同佐剂的免疫效果。结果显示:A、B佐剂组疫苗免疫猪的抗体水平低于C佐剂组;攻毒后进行猪流行性腹泻病毒检测发现,仅C佐剂组试验猪全部呈阴性;剖检所有疫苗免疫组试验猪均未发现脏器病变。结果说明:双相佐剂制备的灭活疫苗免疫效果明显优于水包油和油包水佐剂疫苗,且安全性较高,可优先选择双相佐剂制备猪流行性腹泻灭活疫苗。本研究为猪流行性腹泻疫苗制备、生产提供了技术支撑。

布鲁氏菌病疫苗新进展及其佐剂的应用

布鲁氏菌病是严重危害人类健康和畜牧业发展的人兽共患传染病之一,疫苗接种已成为预防和控制布鲁氏菌感染的有效方法之一,市场上已有不少动物用的减毒活疫苗,但是目前尚无人用疫苗。伴随着基因工程和分子生物信息学研究的不断深入,各种亚单位疫苗应运而生,例如DNA疫苗、多表位疫苗、重组蛋白疫苗和载体疫苗。疫苗佐剂是针对不同免疫应答需要而研发出来的,本文将对布鲁氏菌病疫苗的研究进展进行综述,同时参考目前常用的疫苗佐剂进行介绍,以期能够对后续疫苗的研发提供新的思路。

以新型脂肽为佐剂的LP-LNP构建及其对mRNA疫苗的增效作用

目的构建以新型脂肽为佐剂的递送系统脂肽-脂质纳米颗粒(lipopeptide-lipid nanoparticle,LP-LNP),初步探究其对mRNA疫苗的增效作用。方法设计并合成2种新型脂肽SS-10和SQ18,微流控技术将编码增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,eGFP)、萤火虫荧光素酶(firefly luciferase,F-luc)和卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)的mRNA包载到LP-LNP中,构建以新型脂肽为佐剂的mRNA递送系统;利用动态光散射法表征LP-LNP的粒径、多分散系数;利用HEK-Blue TM mTLR2报告细胞检测其Toll样受体2(Toll-like receptors 2,TLR2)的激活作用,筛选最优脂肽掺入比;将优选的LP-LNP-eGFP-mRNA转染至HEK293T细胞,荧光显微镜观察eGFP的表达;利用活体成像技术考察LP-LNP-F-luc-mRNA在小鼠体内的表达水平;流式细胞术评价LP-LNP-OVA-mRNA免疫小鼠后诱导引流淋巴结中树突状细胞(dendritic cells,DCs)成熟水平以及交叉递呈抗原的能力。结果脂肽SQ18和SS-10分别以0.50%、0.75%的摩尔比掺入后,得到的LP-LNP平均粒径分别为127和121 nm,平均多分散系数分别为0.11和0.08,包封率均在90%以上,且体外安全性好;该配方条件下激活TLR2的能力显著强于阳性对照Pam 2 CSK 4(P<0.01);优选的LP-LNP均可以实现有效的体外转染,其中SQ18以0.50%掺入制备的LP-LNP体内转染效果显著优于传统LNP(P<0.01),且可以显著促进引流淋巴结DCs的成熟以及抗原的交叉递呈(P<0.05)。结论以新型脂肽为佐剂的LP-LNP可以增强mRNA的递送能力,进一步提高mRNA疫苗的免疫效果。

艾灸对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织Beclin-1、LC3-Ⅱ表达的影响

目的观察艾灸对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)大鼠炎症因子白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)及滑膜细胞中自噬相关因子Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(microtubule-associated protein1 light chain 3-Ⅱ,LC3-Ⅱ)表达的影响,探索艾灸治疗RA的作用机制。方法将36只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、甲氨蝶呤组、艾灸组,每组9只。采用弗氏完全佐剂造模法制备RA大鼠模型。造模成功后艾灸组予艾灸足三里、关元,每次20 min,每天1次;甲氨蝶呤组予甲氨蝶呤0.35 mg/kg灌胃,每周2次。空白组、模型组、甲氨蝶呤组每天给予艾灸组大鼠同样时长及强度的捆绑。每组均干预3周。观察大鼠一般情况,采用足趾容积测量仪检测大鼠左后肢足趾容积,ELISA法检测血清中IL-2含量,Western blot检测大鼠踝关节滑膜组织中Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白相对表达量。结果与模型组比较,甲氨蝶呤组及艾灸组精神一般,反应尚可,体质量恢复,较活跃,摄食、饮水尚可,足部肿胀、红肿缓解,其局部炎症及全身多发性关节炎情况均轻于模型组。与空白组比较,模型组大鼠于造模后第3、10、17、24天足趾容积明显增大(P<0.01),结合一般情况,提示模型制备成功;甲氨蝶呤组、艾灸组足趾容积于第24天增大(P<0.05)。与模型组比较,甲氨蝶呤组造模后第17、24天足趾容积降低(P<0.05,P<0.01),艾灸组第10、17、24天足趾容积明显降低(P<0.01)。干预3周后,与空白组比较,模型组血清中IL-2含量明显升高(P<0.01),滑膜组织Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达量明显上升(P<0.01);与模型组比较,甲氨蝶呤组、艾灸组血清中IL-2含量降低(P<0.05),艾灸组滑膜组织Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达量下降(P<0.05)。结论艾灸能改善RA大鼠关节肿胀,降低IL-2含量,其作用机制可能是通过调节自噬因子Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达量有关。

黄精醇提物佐剂对小鼠免疫效果的评价

为了评价黄精醇提物佐剂对小鼠的免疫效果,将60只ICR小鼠随机分为12组,即空白组、模型组、对照组、PSE30组(低、中、高)、PSE50组(低、中、高)和PSE70组(低、中、高),定期接种OVA,检测免疫细胞数量及活性、血清特异性抗体水平、脾细胞增殖及分泌IL-2含量。结果显示:与模型组相比,PSE30中、高剂量组、PSE50高剂量组和PSE70高剂量组的NK细胞活性显著提高(P<0.05),PSE50中、高剂量组小鼠血清IgG、IgG1、IgG2a和IgG2b滴度显著升高(P<0.05);PSE50高剂量组和PSE70低、高剂量组均能促进小鼠脾细胞增殖(P<0.05);PSE50中、高剂量组和PSE70高剂量组小鼠脾细胞分泌的IL-2含量显著升高(P<0.05);对照组的中性粒细胞数量、NK细胞活性、IgG、IgG1、IgG2a和IgG2b滴度、脾细胞增殖能力及分泌的IL-2含量均极显著升高(P<0.01)。综上,黄精醇提物佐剂可显著提高小鼠的细胞免疫和体液免疫功能,以PSE50中、高剂量组效果最佳。

表达胸腺肽和干扰素融合蛋白的重组乳酸乳球菌作为鸡新城疫病毒活疫苗免疫佐剂的初步研究

为评估以滴鼻方式免疫表达鸡胸腺肽和鸡干扰素融合蛋白的重组乳酸乳球菌能否作为新城疫病毒(NDV)活疫苗的免疫佐剂及对其免疫效力的影响,本研究以表达鸡胸腺肽和鸡γ干扰素融合蛋白(cTα1-cIFN-γ,后简写为Tα1-IFN)的重组乳酸乳球菌(Tα1-IFN/r-L.lactis)与NDV活疫苗混合后(Tα1-IFN/r-L.lactis+NDV活疫苗)滴鼻免疫14日龄SPF鸡,同时设NDV活疫苗组、L.lactis+NDV活疫苗组及PBS阴性对照组。分别于免疫后不同时间(3 d、7 d、14 d、21 d、28 d)采血,于免疫后14 d、21 d、28 d分别检测各组鸡血清中的HI抗体效价;采用间接ELISA测定免疫后3 d、7 d及14 d各组鸡血清中主要细胞因子的分泌水平;分离各组鸡免疫后21 d及28 d外周血单个核细胞(PBMC)和外周血白细胞,分别通过CCK-8法检测各组鸡PBMC和白细胞中抗原递呈细胞(APC)的增殖活性。HI抗体检结果显示,分别在免疫后14 d、21 d,Tα1-IFN/r-L.lactis+NDV活疫苗组鸡的NDV HI抗体效价与NDV活疫苗组以及L.lactis+NDV活疫苗组均无显著差异;但免疫后28 d,该组鸡血清中的NDV HI抗体效价极显著高于其余两组(P<0.0001)。细胞因子检测结果显示,在免疫后各时间点Tα1-IFN/r-L.lactis+NDV活疫苗组鸡血清中IFN-γ及IL-2(Th1型细胞因子)和IL-4(Th2型细胞因子)的分泌水平基本均显著或者均极显著高于NDV活疫苗组、L.lactis+NDV活疫苗组及阴性对照组(14 d的IL4除外)。Tα1-IFN/r-L.lactis+NDV活疫苗组鸡血清中IL-1β(促炎因子)和IL-10(抗炎因子)的分泌水平在免疫后3 d、7 d、14 d均极显著高于其余各组(P<0.0001)。细胞增殖活性的检测结果显示,免疫后21 d和28 d,Tα1-IFN/r-L.lactis+NDV活疫苗组鸡PBMC的增殖活性均极显著高于其余各组;免疫后28 d,该组鸡PBMC的增殖活性均极显著高于L.lactis+NDV活疫苗组和阴性对照组(P<0.0001),但与NDV活疫苗组差异不显著(P>0.05);免疫后21 d和28 d,Tα1-IFN/r-L.lactis+NDV活疫苗组鸡外周血白细胞中APC的增殖活性均极显著高于其余各组(P<0.0001);免疫后28 d,该组鸡白细胞中APC的增殖活性极显著高于NDV活疫苗组(P<0.01),但与L.lactis+NDV活疫苗组和阴性对照组均无显著差异。上述结果表明,本研究采用表达Tα1-IFN的重组乳酸乳球菌与NDV活疫苗同时滴鼻免疫SPF鸡后,可诱导其产生较高水平的体液免疫及细胞免疫反应,增强SPF鸡免疫系统的应答能力,同时又能维持鸡体内的免疫稳态。有望成为一种新型的、有潜力的免疫佐剂,为新型免疫佐剂的开发提供了重要实验数据及参考依据。