基于生理的毒代/毒效动力学定量体外-体内外推技术

基于新途径方法(NAMs)的下一代风险评估策略和技术体系在全球范围内悄然兴起。作为NAMs的重要组成部分,定量体外-体内外推(QIVIVE)已逐渐成为化学物质毒性测试与风险评估的重要技术之一。QIVIVE的实施依赖于计算毒理学的两大模型:基于生理的毒代动力学和基于生理的毒效动力学。本文重点介绍上述两大模型的基本原理、构建流程和应用等,旨在为化学物质的健康风险评估提供高效、准确的毒性测试路径。

影响刚地弓形虫组织包囊体内外形成因素的研究进展

在刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)发育为成熟组织包囊(bradyzoites)和卵囊(sporozoites)的两个时期,传统上需要进行动物试验,这极大地阻碍了对这些阶段的形态和代谢的生物学研究,而此阶段对弓形虫的感染至关重要。因此,在研究组织包囊时利用体外诱导的方法成为研究的重要途径,近年来这方面的研究也取得了一些突破性进展。文章综述了影响组织包囊形成的因素,旨在为弓形虫病的研究、预防和控制提供参考。

替代动物实验中的体外-体内外推方法

危害和暴露数据的匮乏是化学物质风险评估面临的艰巨挑战。21世纪以来,使用高效经济的非动物试验方法替代传统的资源消耗型动物试验已成为必然趋势,形成了以体外测试(in vitro)、计算机模拟(in silico)、交叉参照(read across)和体外-体内外推(IVIVE)等新路线方法学(NAMs),为下一代健康风险评估(NGRA)提供了新的解决方案。NAMs的主流技术路线利用体外测试方法获得化学物质的吸收、分布、代谢和排泄数据(ADME)构建毒代动力学(TK)模型、利用高通量体外测试和有害结局路径(AOP)等方法获得毒效动力学(TD)参数,代替传统危害评估中的动物实验方法。其中,IVIVE是沟通体外测试数据与动物试验数据等效链接的桥梁。本文从IVIVE的方法内涵与策略、生理毒代动力学模型(PBTK)技术框架与IVIVE流程、应用典型案例、风险管理实践等多角度综述分析IVIVE在推进替代动物实验方法应用以及在风险评估研究前沿中的重要地位,并以TK-IVIVE为重点讨论其在食品中化学物质风险评估与管理中的策略和应用。

盐酸安非他酮/氢溴酸右美沙芬混悬液处方优化、制备及体内外评价

目的制备盐酸安非他酮(BH)/氢溴酸右美沙芬(DMH)复方混悬液,并进行处方优化和体内外评价。方法以沉降体积比、再分散性、混悬体系黏度等为评价指标,单因素考察助悬剂、润湿剂及其各自用量,并通过含量、释放度、药物泄漏量和稳定性试验对制备的混悬液进行了体外评价,此外还进行了体内药动学评估。结果优化处方为:西黄蓍胶0.5%、黄原胶0.2%、高果糖玉米糖浆HFCS F4231%、吐温801%。稳定性试验结果表明,优化后的复方混悬液在高温、强光及加速6个月后表现出较好的稳定性(F>0.9,BH药物含量为98%~100%,DMH药物含量为96%~98%,释放度f2均>50,药物泄漏量均<0.3%)。大鼠灌胃的药动学结果显示,相比较于市售片剂,混悬液中BH的Cmax更低,tmax更长;DMH的t1/2更长和Cmax更高,相对生物利用度分别为116.53%和252.25%。且BH和DMH体内吸收与体外释药具备简单的相对关联性。结论本研究开发的BH/DMH复方混悬液,稳定性和生物等效性较好,证明通过离子交换树脂技术制备BH/DMH复方混悬液具有较好的可行性。

黄体酮混悬注射剂药动学及体内外相关性研究

探讨黄体酮混悬注射剂体外释放、体内药动学以及体内外相关性,以自制黄体酮混悬注射液为例,采用桨法和透析袋法测定3种不同粒径(3、5、7μm)的黄体酮混悬注射剂的体外释放曲线;以SD大鼠为实验动物,研究3种粒径黄体酮混悬注射剂的体内药动学,并将血药浓度-时间曲线经Wagner-Nelson法处理后得到体内累积吸收曲线,与透析袋法所得体外累积释放曲线建立体内外相关性。结果表明,黄体酮混悬注射液采用桨法测定体外释放度时,20 min内均迅速释放85%以上,而采用透析袋法测定时分别在40、84、120 h达85%累积释放度。透析袋法所得体外释放趋势与体内释药趋势基本一致,相关系数大于0.95,具有较强的体内外相关性。本研究为长效混悬注射剂体内外相关性的建立提供参考。

胫骨假体内外翻角对固定平台单髁关节置换后近期疗效的影响

背景:既往国内外均有文献报道活动平台单髁关节置换后胫骨假体内外翻角度对术后短期疗效的影响,然而对固定平台单髁关节置换后胫骨假体内外翻角度短期疗效的影响鲜有报道。目的:探讨膝关节内侧骨关节炎患者接受固定平台单髁关节置换后,胫骨假体内外翻角对近期临床疗效的影响。方法:选择2020年8月至2023年1月因膝关节内侧骨关节炎于徐州医科大学附属医院骨关节科行固定平台单髁关节置换的120例患者(122膝)为研究对象,分别由2名医师基于术后X射线片测量单髁关节置换后股骨假体内外翻角、胫骨假体内外翻角、股骨假体屈伸角以及胫骨假体后倾角。排除其余3个角度的影响后,将胫骨假体内外翻角测量结果分为<-2°、-2°-2°、>2°3组,分别记为第1,2,3组。记录各组患者术前、术后末次随访的膝关节活动度、美国特种外科医院膝关节评分、美国膝关节协会评分及人工关节遗忘指数,并进行对比。结果与结论:①共纳入120例患者(122膝),根据术后胫骨假体内外翻角大小进行分组,第1组37例,第2组60例,第3组23例,3组患者在年龄、性别、术侧等基线资料上差异无显著性意义(P>0.05);②患者置换后随访时间为3-30个月;③第2组术后末次随访美国特种外科医院评分高于第1组(P=0.015)和第3组(P=0.012);第2组术后末次随访美国膝关节协会临床评分显著高于第1组(P=0.014)和第3组(P<0.001);在术后人工关节遗忘指数上,第2组高于第1组(P=0.033)和第3组(P=0.016);④提示固定平台单髁关节置换术后,胫骨假体内外翻角处于-2°-2°时可以取得较好的短期临床疗效,假体自我化程度较高。

咖啡酸的生物药剂学分类系统及其大鼠体内外相关性预测

目的测定咖啡酸在不同pH环境中的平衡溶解度以及油水分配系数,推测其生物药剂学分类系统(BCS)分类;测定咖啡酸片溶出曲线,将相关参数代入大鼠生理药动学(PBPK)模型建模,利用Gastroplus软件预测其大鼠体内外相关性。方法采用高效液相色谱法定量,色谱柱Agilent Eclipse Plus C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相0.32%冰醋酸溶液-甲醇(70∶30),流速1.0 mL·min^(-1),检测波长323 nm,柱温25℃,进样体积10μL。采用摇瓶法和正辛醇-水体系测量咖啡酸在不同pH环境中的平衡溶解度、溶解度体积(DSV)和油水分配系数(P),推测其BCS分类;测定咖啡酸片在水、pH值1.2、pH值4.5和pH值6.8环境中溶出曲线,利用Gastroplus软件分析溶出曲线的Z-Factor值,将相关参数代入大鼠的PBPK模型,模拟大鼠体内药时(PK)曲线,与已知实测PK曲线进行比较,推测其大鼠体内外相关性。结果咖啡酸在pH值1.2、pH值4.5和pH值6.8环境中平衡溶解度为0.676、1.266和4.624 mg·L-1,DSV为443787、236967和64879 mL,为难溶性药物,且具有较强pH依赖性;咖啡酸在水、pH值1.2、pH值4.5和pH值6.8环境中油水分配系数(P)为4.33(logP=0.64)、28.87(logP=1.46)、19.77(logP=1.30)、0.28(logP=-0.56),推测其具有较高渗透性。软件模拟得到咖啡酸大鼠体内的C_(max)为0.358μg·mL^(-1),t_(max)为0.39 h,AUC为0.320μg·h^(-1)·mL^(-1),与已知的实测结果C_(max)为(0.250±0.037)μg·mL^(-1)、t_(max)为(0.33±0.12)h、AUC为(0.303±0.024)μg·h^(-1)·mL^(-1)一致,PK曲线基本吻合。结论咖啡酸为低溶解性、高渗透性的药物,推测其为BCS II类药物,其片剂在大鼠中表现出较高的体内外相关性。

阿司匹林肠溶片的制备及体内外评价

目的 制备阿司匹林肠溶片并考察它的体内外释药特性。方法 采用粉末直压法压片,以肠溶材料L30D-55水分散体、滑石粉和枸橼酸三乙酯(1∶1∶0.1)制备阿司匹林肠溶片包衣液固含量为20%,进行肠溶包衣,阿司匹林肠溶片包衣增重范围为15%~20%,制得0.1 g阿司匹林肠溶片,即自制制剂(T)。以0.1 g拜阿司匹林肠溶片(Bayaspirin^(R))为参比制剂(R),考察2种制剂的体外释放和体内餐后药动学行为。结果 阿司匹林肠溶片T与R的体外释放曲线f_(2)相似因子均大于50;检测物乙酰水杨酸的C_(max)、AUC_(0-t)和AUC_(0-∞)均满足相应的RSABE或ABE生物等效性评价标准。结论 T与R的体外释放和体内餐后药动学行为具有较好的一致性。

莫昔克丁长效注射剂对反刍动物体内外寄生虫的药效学研究进展

莫昔克丁是一种新型的被用于防控动物体内外寄生虫的大环内酯类广谱抗生素。在莫昔克丁不同剂型中,因注射剂具有长效、持续药物活性的特点,已在欧洲等国家被广泛用于预防和治疗反刍动物胃肠道线虫、呼吸道线虫和某些节肢动物如蜱虫、螨虫、虱子和跳蚤等体外寄生虫的混合感染。本文综述了莫昔克丁长效注射剂对反刍动物体内外寄生虫的药效学,以期为其在反刍动物临床应用中提供参考。

双醋瑞因胶囊溶出曲线的建立及体内外相关性研究

参考印度药典及进口注册标准中双醋瑞因胶囊的溶出度方法,建立了双醋瑞因胶囊具有区分力的溶出曲线测定法,并对此测定方法的区分力进行考察及方法学验证,最终用其评价自制双醋瑞因胶囊与参比制剂溶出曲线的相似性,同时通过体内生物等效性研究结合体外溶出试验结果分析体外溶出和体内吸收的相关性。结果显示,筛选得到的具有区分力的溶出方法可以用于区分不同处方工艺双醋瑞因胶囊的质量差异,且其方法学验证结果均符合规定,自制双醋瑞因胶囊和参比制剂在各介质中均具有相似的溶出特性,在体内具有生物等效性,提示该溶出曲线具有一定的体内外相关性。本研究为双醋瑞因胶囊的一致性评价提供了试验依据。

难溶性小分子药物微球体内外释放及相关性研究进展

本文对近10年来难溶性小分子药物微球的体内外释放及体内外相关性的文献资料进行了整理和分类,对研究方法进行归纳和比较,列举了在考察难溶性小分子药物微球释放和吸收时常用的实验方法和条件,希望为该类药物微球制剂的体内外评价研究提供借鉴。

阿苯达唑伊维菌素片对羊体内外寄生虫病的治疗效果观察

本文分析了阿苯达唑伊维菌素片在治疗羊体内外寄生虫病中的效果。研究选取了2020年12月至2021年12月期间,甘肃省甘南州合作市佐盖曼玛镇地区自然感染体内外寄生虫病的100只患病羊作为研究对象,并将其随机分为2组。实验组65只病羊选用阿苯达唑伊维菌素片治疗,对照组35只羊给予阿苯达唑片治疗。结果显示,用药14 d后,实验组体内寄生虫(除毛首线虫外)虫卵减少率与转阴率均达到了100%,显著高于对照组(P<0.05)。此外,实验组体外寄生虫驱净率也达到100%,显著高于对照组驱净率33.5%(P<0.05)。阿苯达唑伊维菌素片在治疗羊体内外寄生虫病方面表现出显著效果,具有较高的应用价值。

脱卷积法进行自制尼群地平缓释制剂体内外相关性研究

目的 用脱卷积法进行自制尼群地平缓释制剂体内外相关性的研究。方法 以自制尼群地平口服溶液剂的犬体内血药浓度数据为权函数,根据3种自制尼群地平缓释制剂试验犬体内血药浓度数据,采用脱卷积法计算体内释药特性,与相应的体外释药特性进行比较,考察体内外相关性。结果 用脱卷积法计算3种尼群地平缓释制剂的体内外释药相关性良好。结论 脱卷积法适用于自制尼群地平缓释制剂的体内外相关性研究。

异荭草苷体内外抗呼吸道合胞病毒活性研究

【目的】研究清热消炎中草药淡竹叶中异荭草苷的体内外抗病毒活性,并初步探讨其作用机制。【方法】采用MTT法测定异荭草苷的细胞毒性,并以异荭草苷的最大无毒浓度为起始浓度,采用空斑减数法测定其体外抗RSV活性,计算其抗病毒的选择性指数(SI值);继而采用空斑减数法,研究异荭草苷对RSV复制周期不同阶段的影响,采用实时定量PCR法,检测异荭草苷对病毒蛋白m RNA合成的影响;选取3周龄BALB/c雄性小鼠研究异荭草苷体内抗RSV活性,小鼠灌胃给药4 d,经鼻腔滴入RSV病毒液造模,继续灌胃给药3 d,取小鼠肺组织称重、切片、HE染色,显微镜下观察肺组织病理性改变,并用空斑减数法检测小鼠肺组织内病毒含量。【结果】异荭草苷体外抑制RSV A2株和LONG株的IC50分别为(3.6±0.8)μg/m L和(2.4±0.2)μg/m L,比阳性药利巴韦林的活性略低,因异荭草苷的细胞毒性比利巴韦林小,其抗RSV的选择性指数(SI)为利巴韦林8.3倍;初步的作用机制研究表明,异荭草苷主要抑制RSV在宿主细胞内的复制过程,也可一定程度地抑制病毒进入宿主细胞,实时定量PCR结果显示,异荭草苷可以不同程度地降低RSV的L、F和P蛋白对应的m RNA的表达;异荭草苷可降低小鼠肺组织的病毒滴度,且可缓解病毒引起的炎症。【结论】清热消炎中药淡竹叶中的异荭草苷,具有较好的体内外抗病毒活性,且能一定程度缓解病毒性炎症;该化合物主要在病毒进入宿主细胞后的复制阶段(复制晚期)起作用,能抑制与病毒复制晚期相关的L、F和P蛋白的m RNA表达。

缓释制剂的体内外相关性试验及检验

目的 :探讨缓释制剂体内外相关试验方法。方法 :以植入用缓释依托泊苷为例 ,根据体内及体外预试验数据 ,求算对应时间点关联系数K ,按中华人民共和国药典要求作对应时间点的点对点相关试验及检验。结果 :成功进行植入用缓释依托泊苷的体内外相关试验并实现相关。结论 :此法为长效缓释制剂提供了一种体内外相关试验的参考方法。

pH依赖型愈肠宁结肠靶向片的制备及体内外释放评价

目的制备用于治疗溃疡性结肠炎的pH依赖型愈肠宁结肠靶向片(pH-dependen t Y uchangn ing T ab let forco lon-spec ific de livery,PYTCSD),并对其体内外释放性能进行评价,探讨制备中药结肠靶向制剂的可行性。方法以苦参碱和氧化苦参碱体外释放度为指标,对制剂的包衣处方进行筛选;采用体外释放度测定法考察该制剂的体外释放性能;采用硫酸钡造影技术对该制剂在人体内的释放性能进行评价。结果拟订了PYTCSD的制备方法:将药物制备得片芯后,以质量浓度3.70%(g/mL)丙烯酸树脂Ⅲ(Eudrag itⅢ)、0.37%(g/mL)邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、0.93%(g/mL)滑石粉的乙醇混悬溶液为包衣液,包衣使片芯增重8%,即得;体外释放度测定结果表明,在人工胃液2 h时溶出液中未检测到苦参碱和氧化苦参碱,在人工小肠液4 h时两指标累积溶出率均<10%,而在人工结肠液1 h时苦参碱和氧化苦参碱分别累积溶出86.5%和86.8%;体内释放度试验结果表明,PYTCSD在8名志愿者体内均能完整到达回盲部或升结肠,并在上述部位崩解释放出药物。结论制备得pH依赖型愈肠宁结肠靶向片能达到较好结肠定位释药的目的。

miR-21对ADAMTS-1的调节在肺纤维化体内外实验中的研究

目的:探讨mi R-21在肺纤维化模型中对ADAMTS-1表达水平的调节作用。方法:(1)建立博来霉素诱导的小鼠肺纤维化模型和构建体外肺纤维化模型,应用q RT-PCR检测mi R-21表达水平,Western blot法观察ADAMTS-1蛋白的表达。(2)通过体外转染mi R-21相似剂(mimics)及抑制剂(inhibitors)至NIH3T3细胞,Westem blot法检测ADAMTS-1蛋白的表达。结果:(1)在小鼠肺纤维化模型中,与空白对照组比较,博来霉素处理后的3个时间点,小鼠肺组织mi R-21表达明显上调,而ADAMTS-1蛋白表达明显下调(P<0.01)。(2)在构建体外肺纤维化模型中,NIH3T3细胞经5μg/L的TGF-β1刺激后,ADAMTS-1蛋白表达下调,mi R-21表达量明显上调(P<0.01)。(3)对NIH3T3细胞转染mi R-21相似物及抑制剂后实验结果显示,高表达mi R-21后,NIH3T3细胞ADAMTS-1蛋白表达下调,反之亦然。结论:(1)体内外实验证实,肺纤维过程中mi R-21表达上升,ADAMTS-1蛋白表达下降。(2)mi R-21可负调控细胞ADAMTS-1的表达水平。

灯盏花素固体分散体缓释胶囊的制备及犬体内外相关性研究

以乙基纤维素为载体,制备难溶性药物灯盏花素(1)的固体分散体。粉碎后制成1含量为60mg的胶囊,考察其体外释放度和犬体内吸收情况。用HPLC测定血药浓度,并进行体内外相关性研究。结果表明,胶囊的体外释药行为用Higuchi方程拟合较好,在犬体内有明显的缓释效果,体内外相关系数为0.9808。