抗ABL酪氨酸激酶区胞内抗体对K562细胞在裸鼠体内生长的影响

目的观察人慢性粒细胞白血病细胞转导抗ＡＢＬ蛋白酪氨酸激酶区胞内抗体基因后，对其在裸鼠体内生长的影响。方法应用基因重组技术构建逆转录病毒载体ＭＳＣＶ－ｉｂＥ－ＩＲＥＳ－ｅＧＦＰ，将胞内抗体基因转导Ｋ５６２细胞，观察胞内抗体的表达和细胞内ｃ－ＡＢＬ及ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白酪氨酸激酶活性的变化；将表达胞内抗体的细胞与对照组Ｋ５６２细胞及转导空载体的细胞分别移植裸鼠，动态观察肿瘤的生长。结果获得表达胞内抗体基因的细胞模型：Ｋ５６２－ｉｂＥ，其靶蛋白酪氨酸激酶活性明显受抑。移植裸鼠后第１４，２１，２８天肿瘤体积均小于对照组的１／２。结论转导抗ＡＢＬ蛋白酪氨酸激酶区胞内抗体的细胞在裸鼠体内生长明显受抑制，这可能与胞内抗体显著抑制细胞内ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白酪氨酸激酶活性，阻断ＢＣＲ／ＡＢＬ信号途径，促进细胞凋亡，降低了细胞的体内致肿瘤性有关。

半胱胺耗竭体内生长抑素及其机制

半胱胺,又称β巯基乙胺,相当于半胺氨酸的脱羧产物,是辅酶A分子的组成部分,在体内有重要的生理意义。临床上用于治疗放射病、胱氨酸病、扑热息痛中毒和四乙基铅中毒。Selye等发现半胱胺可诱发大鼠十二指肠溃疡。在研究其致溃疡机制过程中。

可溶性CD44－免疫球蛋白融合蛋白抑制肿瘤的体内生长

目的：确定是否可通过阻断透明质酸的细胞表面受体ＣＤ４４Ｈ与它的配体的结合而抑制肿瘤生长。方法：观察ＣＤ４４Ｈ和免疫球蛋白的可溶性融合蛋白（ＣＤ４４Ｒｇ）对转染并稳定表达ＣＤ４４Ｈ的人Ｎａｍａｌｗａ淋巴瘤细胞生长的影响。结果：ＣＤ４４Ｒｇ可抑制Ｎａｍａｌｗａ肿瘤细胞在裸鼠体内形成肿瘤的能力，但对该细胞的体外生长则无影响。结论：破坏ＣＤ４４Ｈ与其生理学配体之间的作用，可能成为控制肿瘤在体内生长的一种新的手段。

CCK、胃泌素对体内生长胆管癌细胞增殖的影响

目的:探索胆囊收缩素(CCK)、胃泌素对体内生长的胆管癌细胞增殖的影响。方法:应用裸鼠胆管癌细胞QB移植模型及流式细胞分析技术,检测了CCK、胃泌素及其受体拮抗剂对体内生长的胆管癌细胞QB移植瘤体积、重量及增殖指数。

隐球菌荚膜体内生长机制研究进展

隐球菌（Cryptococcus neoformans and Cryptococcus gattii）最常侵犯人类或哺乳动物的中枢神经系统,引起致命的隐球菌性脑膜脑炎（Cryptococcal meningitis）,已是目前临床上最重要的致病真菌之一[1]。近20 a来,生物医学很多领域都取得重要进展,

TNP-470对人涎腺腺样囊性癌裸鼠体内生长和转移的影响

目的 :研究血管生成抑制物 TNP- 470对肺高转移性涎腺腺样囊性癌 (ACC- M)在裸鼠体内生长和转移的抑制作用 ,探讨其作用机制。方法 :46只接种 ACC- M细胞的裸鼠被随机分为 15、30、6 0 mg/ kg用药组及对照组。用药组在经尾静脉接种肿瘤细胞后第 7天分别给予皮下注射不同剂量的 TNP- 470 ,隔日 1次 ,共 8次 ;对照组同期给予皮下注射等量溶剂。接种 6周后处死实验动物。观察发生肿瘤肺转移的裸鼠数量 ,称量转移肺湿重 ,统计肺转移灶数目和肺转移灶面积 ,计算肺转移灶面积比。检测 ACC- M肺转移灶肿瘤微血管密度 (MVD)、肿瘤细胞增殖指数 (PE)及凋亡指数 (AI)。结果 :30和 6 0 mg/ kg组裸鼠肿肺转移率、转移灶数量、转移肺湿重、转移灶面积以及转移灶面积比均低于对照组 ,统计学分析有显著性差异 (P<0 .0 5 )。TNP- 470治疗组肿瘤细胞 PI与对照组无显著差异 ,但其 AI均较对照组增高 ,差异明显(P<0 .0 5 )。结论 :TNP- 470具有抗 ACC- M裸鼠肺转移作用 ,30和 6 0 mg/ kg组用药疗效较为理想。抑制肿瘤血管生成 ,诱导 ACC- M细胞凋亡可能与 TNP- 470抗 ACC-

细胞周期素G_1反义硫代脱氧寡核苷酸抑制HL-60细胞在裸鼠体内生长的实验研究

目的 探讨细胞周期素G1 (cyclinG1 )反义硫代脱氧寡核苷酸对HL 6 0细胞在裸鼠体内生长的抑制作用。方法 将裸鼠随机分成对照组、正义寡核苷酸 (SON)组、反义寡核苷酸 (ASON)组 ,其中SON组和ASON组接种转染的HL 6 0细胞 (HL 6 0 S和HL 6 0 AS)前接受 3Gy的6 0 Co照射 ;将各组HL 6 0细胞接种于裸鼠皮下连续观察裸鼠的出瘤时间、瘤体大小 ,计算抑瘤率 ;病理切片用苏木精 伊红染色 ,电镜观察移植瘤组织的结构和细胞形态变化 ;用流式细胞仪 (FCM)和RT PCR分别检测cyclinG1 蛋白和mRNA水平的表达 ;电镜和FCM检测细胞凋亡。结果 ①cyclinG1 ASON组与SON组和对照组比较 ,对HL 6 0细胞在裸鼠体内生长有明显抑制作用 ,抑瘤率为 6 9.4 %。成瘤率、瘤重、瘤体积明显小于SON组和对照组。②镜下见cyclinG1 ASON组的HL 6 0细胞部分细胞形态发生改变 ,核分裂象少见 ,细胞的异型性较小 ,并且有凋亡细胞出现。结论 cyclinG1 ASON能明显抑制HL 6 0细胞在裸鼠体内的生长 ,并且促使部分细胞发生凋亡。

茶氨酸溴香酰胺对人肝癌细胞体内外生长的抑制作用

以L-茶氨酸作对照,评估本实验室合成的新颖的茶氨酸衍生物-茶氨酸溴香酰胺(TBrC)对人肝癌HepG2细胞系体内外生长的抑制作用,并初步探究其作用的分子机制。采用MTT法检测不同浓度的TBrC对HepG2细胞体外生长的影响,应用蛋白质印迹法检测解析HepG2细胞中与癌细胞凋亡和生长密切相关蛋白的表达和药物可能作用的分子靶点。此外,建立动物肿瘤模型,与对照组茶氨酸和临床常用抗癌药物五氟尿嘧啶组相比较,评价TBrC对荷瘤裸鼠人肝癌HepG2肿瘤生长的抑制效果。实验结果显示,TBrC抑制人肝癌细胞体内外生长的活性超过其母体化合物茶氨酸分别为3倍和4倍以上,对小鼠生长无明显毒性。TBrC比茶氨酸更显著地抑制肝癌细胞生长因子受体c-Met和抗凋亡的Bcl-2等蛋白的表达;此外,TBrC大大上调促进凋亡的Bax蛋白的表达。TBrC抑制c-Met信号传导通路,下调Bcl-2/Bax蛋白比率可能是其作用的分子机制之一。这些结果提示,TBrC具有广泛应用于临床治疗和(或)辅助治疗人肝癌和其他癌症的潜力。

茶氨酸溴香酰胺对人宫颈癌细胞体内外生长的抑制作用

将茶氨酸为母体合成的茶氨酸衍生物茶氨酸溴香酰胺(TBrC)与茶氨酸作比较,评估茶氨酸溴香酰胺对人宫颈癌细胞体内外生长的抑制作用与其分子机制。应用MTT等方法检测不同浓度的TBrC对人宫颈癌细胞体外生长的影响,运用蛋白质印迹法检测解析这些人宫颈癌细胞中与凋亡和生长密切相关蛋白的表达和药物可能的作用靶点。此外,通过建立动物肿瘤模型,评价TBrC对荷瘤裸鼠人宫颈癌生长的抑制效果。实验结果显示,TBrC抑制人宫颈癌细胞体内外生长的活性超过其母体化合物茶氨酸多倍,对小鼠生长无明显毒性;TBrC作用的分子机制之一可能与抑制VEGFR1-Bcl-2/Bax信号传导通路相关。研究结果提示,TBrC具有广泛应用于临床治疗和(或)辅助治疗人宫颈癌和其他癌症的潜力。

铁筷子多糖抑制鼠S180生长的形态学观察

目的 观察铁筷子多糖 (HelleborusthibetanusFranchpolysaccharose,HFPS)对小鼠体内肉瘤S180生长的影响及荷瘤鼠肉瘤、胸腺组织的组织学变化。方法 设立正常对照组、肿瘤模型组、铁筷子多糖处理组和阳性对照组 (复方天仙胶囊处理组 )。用小鼠肉瘤S180细胞株建立动物肿瘤模型 ,灌胃给予荷S180小鼠HFPS后 ,计算抑瘤率及观察荷瘤鼠胸腺组织及肉瘤组织的形态变化。结果 铁筷子多糖有明显抑制S180肉瘤细胞体内生长的作用 ;对照鼠S180肉瘤模型 ,多糖 (HFPS)治疗组荷瘤小鼠胸腺皮质厚度较明显增加 ,胸腺细胞增多 ;小鼠肉瘤组织中肉瘤细胞发生不同程度的变性和坏死以及中性粒细胞、淋巴细胞为主的炎细胞浸润。

Tip30基因修饰的ACC-M细胞裸鼠体内致瘤性观察

目的:观察肿瘤抑制基因Tip30修饰后的人涎腺腺样囊性癌高转移细胞(ACC鄄M)所致裸鼠移植瘤体内生长的变化。方法:BALB/Cnu/nu鼠30只(4周龄,体重18￣20g),随机分3组,各10只;Tip30基因修饰的ACC鄄M细胞(AdTIP30/ACC鄄M)、野生型ACC鄄M细胞(wt/ACC鄄M)及对照基因LacZ修饰的ACC鄄M细胞(AdLacZ/ACC鄄M)分别注射小鼠颌下区皮下,观察肿瘤生长情况及小鼠存活时间。结果:(1)经TIP30基因修饰组肿瘤出现的时间比野生型对照组及基因对照组晚3d,且肿瘤生长缓慢(P<0.01);(2)存活时间显示,基因修饰组(53.0±3.3)d,有2只长期存活;野生型对照组(26±2.2)d;对照基因组(29±2.4)d。结论:抑癌基因Tip30能够显著抑制人涎腺腺样囊性癌细胞在裸鼠体内的生长,延长荷瘤小鼠存活期。

可溶型尿激酶受体基因的表达及其对肿瘤生长的影响

目的建立逆病毒介导的可溶型尿激酶受体基因转移系统,并分析可溶型尿激酶受体(suPAR)基因转移对乳腺癌细胞生长的影响。方法应用PCR技术从人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中克隆suPAR基因,并建立逆病毒介导的suPAR基因转移系统;用获得的病毒感染乳腺癌细胞系MDA-MB-231,PCR检测靶细胞中suPAR基因的整合与表达;在裸鼠体内观察基因表达的乳腺癌细胞的生长情况。结果从内皮细胞中克隆的suPAR基因可编码301个氨基酸,其GenBank注册号为AY029180;通过脂质体转染与交互感染策略获得病毒生产细胞PT67/suPAR,其病毒滴度约为3.5×105CFU/ml;PCR分析显示靶细胞中有suPAR基因的整合和表达;转染该基因的MDA-MB-231在裸鼠体内的生长受到抑制(P<0.05)。结论成功地构建了逆病毒介导的可溶型尿激酶受体基因转移系统;可溶型尿激酶受体基因表达具有抗乳腺癌细胞生长的作用。

茶氨酸溴香酰胺对肺癌细胞生长的影响与其作用分子机制的研究

以茶氨酸作为对照,评估现已合成的茶氨酸衍生物茶氨酸溴香酰胺(TBrC)对肺癌细胞生长的抑制作用与其分子机制。采用苔芬兰染色等方法检测不同浓度的TBrC对肺癌细胞和正常细胞生长的影响,运用Hoechst33258荧光染色观察分析有关活性成分对肺癌细胞凋亡的诱导作用,应用蛋白质印迹法检测解析这些肺癌细胞中与凋亡和生长密切相关蛋白的表达和药物可能的作用靶点。此外,通过建立动物肿瘤模型,评价TBrC对荷瘤小鼠肺癌生长的抑制效果。实验结果显示,TBrC抑制肺癌细胞体内外生长的活性超过其母体化合物茶氨酸多倍,对正常细胞和小鼠生长无明显毒性;TBrC显示了诱导肺癌细胞凋亡的作用,其分子机制可能与抑制VEGFR1-Akt-NF-κB信号传导通路相关。本研究结果提示,TBrC具有广泛应用于临床治疗和(或)辅助治疗高转移肺癌和其他癌症的潜力。

茶氨酸硝香酰胺对人宫颈癌细胞生长的抑制作用

前期研究发现本试验合成的茶氨酸衍生物茶氨酸硝香酰胺(TNC)具有显著抑制人肺癌细胞体内外生长的作用,为进一步探索研究TNC的抗癌活性和作用的分子机制,以其母体化合物茶氨酸为对照,评估现TNC对人宫颈癌细胞生长的抑制作用。采用MTT方法检测不同浓度的TNC对人宫颈癌细胞生长的影响,应用蛋白质印迹法检测解析这些癌细胞中与凋亡和生长密切相关蛋白的表达和药物可能作用的分子靶点。此外,通过建立动物肿瘤模型,评价TNC对荷瘤裸鼠体内人宫颈癌He La肿瘤生长的抑制效果。实验结果显示,TNC抑制人宫颈癌细胞体内外生长的活性超过其母体化合物茶氨酸多倍,对小鼠生长无明显毒性;TNC抑制人宫颈癌细胞生长的分子机制可能与抑制VEGFR2-NF-κB信号传导通路相关。本研究结果提示,TNC具有应用于临床治疗和(或)辅助治疗高转移人宫颈癌的潜力。

新发现的基因突变对人生长激素市场的扩展作用

美国Maryland Medical Ctr.大学的Avinoam Kowarski发现了一种遗传突变,他认为这种突变在一定程度上造成身材矮小。他发现一些儿童体内生长激素的量正常值却身材矮小。因其生长激素基因(GH-1)发生了突变。被称为Kowarski综合症的这种突变造成生长激素分子异常,功能降低。 日本Kobe University School of Medicine的一些研究人员近期发表的一篇论文支持Kowarski的观点。

Accretropin 关键词：重组人生长激素

加拿大Cangene公司开发的重组人生长激素（rhGH）注射剂Accretropin已经通过美国FDA的批准。该药用于那些因体内生长激素分泌不足而导致发育迟缓的儿童患者，也可用于那些因特纳氏综合征（Turner syndrome）而导致身材矮小且骨骺尚未闭合的儿童。

双膦酸盐对骨形成蛋白诱导骨骨吸收抑制作用的研究

目的研究双膦酸盐(bisphosphonate YM 175)对骨形成蛋白(bone morphogenetic protein．简称BMP)诱导骨骨吸收的抑制作用。方法 42只大白鼠背部植入BMP,诱导出异位骨后,将大白鼠分成2组,即投药组和对照组。投药组在BMP植入后第3w至第7w,双膦酸盐(YM 175)每周投药3次,剂量1(μg／kg．d)。对照组按同样的方式给予等量的生理盐水。在BMP植入第3w、 4w、7w和10w,将BMP诱导骨取出,采用TRAP和cathepsin K染色方法来观察双膦酸盐对破骨细胞的作用。结果 BMP诱导骨3w时(即未投双膦酸盐药前),在BMP植入体周边形成编织骨 (woven bone),大量破骨细胞出现在新生骨组织表面。在4 w时,双膦酸盐投药组和对照组,新生骨组织均向BMP植入体内生长,但双膦酸盐投药组的破骨细胞较对照组有减少。在10 w时,双膦酸盐投药组和对照组均可观察到骨细胞变小并且有规律地排列的板层状骨(lamellar bone)的特征。而双膦酸盐投药组,破骨细胞死亡,与对照组比较,破骨细胞数目明显减少。结论双膦酸盐对破骨细胞性骨吸收有明显的抑制作用。

体内转染生长抑素二型受体基因治疗胰腺癌移植瘤

目的观察生长抑素二型受体(SSTR2)基因体内转染对胰腺癌移植瘤的治疗作用。方法将缺乏SSTR2表达的胰腺癌细胞株panc-1种植于裸小鼠背部皮下形成移植瘤模型,动物随机分成3组,每组6只;第Ⅰ组不做处理为空白对照组,第Ⅱ组瘤内注射空载体pCMV-6C-脂质体为治疗对照组,第Ⅲ组瘤内注射pCMV-6C-SSTR2-脂质体为治疗组。观察肿瘤生长速度,最后测量瘤体大小及重量,用免疫组织化学方法和免疫印迹技术(Western blot)检测转染效率,用凋亡原位检测方法(Tunel)检测胰腺癌细胞的凋亡率。结果Ⅲ组SSTR2蛋白表达,肿瘤生长速度显著慢于Ⅰ组、Ⅱ组,肿瘤大小(0.318±0.098)cm3显著小于Ⅰ组(2.058±0.176)cm3、Ⅱ组(2.025±0.163)cm3(t值分别为21.190、22.029,P值均<0.05);重量(0.523±0.090)g也显著小于Ⅰ组(1.412±0.146)g、Ⅱ组(1.365±0.116)g(t值分别为11.602、13.233,P值均<0.05);癌细胞凋亡率(1.47±0.13)%显著高于Ⅰ组(0.56±0.09)%、Ⅱ组(0.57±0.11)%(t值分别为13.265、14.362,P值均<0.05)。Ⅰ、Ⅱ组间差异无统计学意义。结论大多数胰腺癌不表达SSTR2可能是其快速生长的重要原因之一;体内转染SSTR2基因后能显著抑制裸鼠移植瘤的生长,显著增加胰腺癌细胞的凋亡。