中药五倍子对口腔致龋菌影响的体外实验研究

目的 研究五倍子对致龋菌生长、产酸及产胞外多糖的影响 ,探讨五倍子是否能有效调节口腔菌群生态平衡。方法 测定五倍子对 3种主要致龋菌———变形链球菌、粘性放线菌和血链球菌的最低抑菌浓度MIC。再测定低于MIC的 4个浓度的五倍子对 3种细菌产酸及产生水不溶性多糖能力的影响。结果 五倍子对 3种细菌的生长、产酸均有一定的抑制作用 ,且能够有效抑制变形链球菌产生水不溶性葡聚糖。结论 五倍子能有效抑制变形链球菌、粘性放线菌和血链球菌的生长、产酸及抑制变形链球菌产水不溶性葡聚糖。

兔骨膜成骨细胞与肾血管内皮细胞间接共培养的体外实验研究

目的 探讨兔骨膜成骨细胞 (RPOB)和肾血管内皮细胞 (RRVEC)不同比例下间接共培养对成骨细胞增殖及功能的影响 ,优选细胞间接共培养的适宜比例。方法 取 RPOB和 RRVEC,采用细胞嵌盒培养系统 ,对照组、试验 1、2、3组分别以 RPOB和 RRVEC按 1∶ 0、2∶ 1、1∶ 1和 1∶ 2间接共培养 4天。通过细胞计数、碱性磷酸酶 (AL P)活性测定及 3H-脯氨酸掺入试验观察 RPOB和 RRVCE增殖分化能力及功能状态。结果 试验 1组 RPOB较对照组、试验2、3组增殖活跃 (P<0 .0 5 ) ,且 3H-脯氨酸掺入较高 (P<0 .0 5 ) ;试验 1组 AL P活性较对照组和试验 3组高 (P<0 .0 5 ) ,但与试验 2组无显著差异 (P>0 .0 5 )。结论 RPOB和 RRVEC以 2∶ 1进行间接共培养时 RPOB增殖能力强、功能活跃 。

狗牙周膜细胞三维立体培养的体外实验研究

目的 :探讨异体脱矿松质骨基质 (CBM )和纳米羟基磷灰石材料 (nHAC)两种支架材料应用于牙周组织工程的可行性 ,为建立牙周组织工程的动物模型及下一步进行牙周组织工程的动物实验奠定实验基础。方法 :组织块法培养狗牙周膜细胞 ,传代扩增后 ,接种于CBM和nHAC 2种三维支架上 ,体外继续培养 3d ,进行细胞计数和扫描电镜观察。结果 :狗牙周膜细胞在 2种支架材料上均能形成良好贴附并增殖 ,扫描电镜可见 2种支架材料均具有良好的多孔网状结构 ,细胞在支架材料上生长旺盛 ,伸展充分。结论

β-磷酸三钙多孔陶瓷与骨髓间充质干细胞生物相容性的体外实验研究

目的 探讨 β 磷酸三钙 (β tricalciumphosphate ,β TCP)多孔陶瓷与骨髓间充质干细胞 (bonemarrowmes enchymalstemcells ,BMSCs)的生物相容性 ,为组织工程方法修复骨和软骨缺损提供依据。 方法 将骨髓间充质干细胞与β 磷酸三钙多孔陶瓷复合并体外培养 ,然后进行形态学、细胞增殖、DNA含量、蛋白质含量测定。 结果 骨髓间充质干细胞能够贴附在 β 磷酸三钙多孔陶瓷孔隙内生长 ,其DNA复制和蛋白合成功能不受 β 磷酸三钙的影响。 结论 β 磷酸三钙多孔陶瓷生物相容性良好 ,可作为组织工程的支架材料应用于骨和软骨缺损的修复。

基因转移FasL诱导人脑胶质瘤细胞凋亡的体外实验研究

目的 探讨体外基因转移Fas配体 (Fas Ligand ,FasL)对恶性人脑胶质瘤细胞凋亡的影响。方法 用携带人FasLcDNA的缺陷型重组腺病毒载体 (Ad FL) ,在体外转导 5株人脑胶质瘤细胞 ,并使其表达 ;通过流式细胞仪、RT PCR、TUNEL法及荧光显微镜分别进行Fas/FasL表达检测和相关凋亡检测、分析。结果 RT PCR和流式细胞仪检测 5株胶质瘤细胞表面均表达Fas ,不表达FasL ,而Ad FL转导的 5株胶质瘤细胞均能表达FasL ,Fas表达水平与抗Fas抗体诱导胶质瘤细胞凋亡敏感性无相关性。Ad FL能显著诱导 5株胶质细胞瘤在体外凋亡或抑制其生长。

螺旋藻多糖抗HSV-1作用的体外实验研究

报道从钝顶螺旋藻中提取的一种水溶性多糖类化合物 ,即钝顶螺旋藻多糖(PSP) ,在培养细胞内抗单纯疱疹病毒 1型 (HSV 1)作用的研究。以不同剂量的PSP作用于病毒复制周期的各个阶段 ,以病毒半数感染量 (TCID50 ) ,细胞病变 (CPE) ,蚀斑形成(PFU) ,MTT染色细胞保护率 (MTT法 )及核酸分子杂交作为评价指标 ,判断药效。结果表明 :PSP对Vero细胞毒性极低 ;对HSV 1无直接灭活作用 ,可干扰病毒向宿主细胞吸附 ,且经PSP预处理的细胞 ,能明显阻滞病毒产生细胞病变 ;PSP可有效地抑制病毒复制 ,但不影响病毒的释放 ;PSP可明显抑制HSV 1糖蛋白 gGmRNA的表达。提示PSP抗病毒靶位在于阻断病毒吸附和抑制感染细胞内病毒的复制及抑制HSV 1糖蛋白 gG基因的转录。

中药泽泻不同部位提取物对草酸钙结晶形成影响的体外实验研究

目的 :探讨中药泽泻在体外对草酸钙结晶形成的影响 ,并初步确定其抑制草酸钙结石形成的有效部位。方法 :应用种晶技术检测泽泻不同部位的提取物在体外对一水草酸钙晶体生长指数 (G)的影响。结果 :泽泻乙酸乙酯浸膏高、低剂量组的草酸钙晶体生长指数从 32 .37%分别降至 3.86 %、10 .0 1%。结论 :中药泽泻乙酸乙酯提取物能明显抑制草酸钙晶体的生长 ,是泽泻抑制草酸钙结石形成的有效部位 。

CPC提高椎体钉固定强度的体外实验研究

目的探讨磷酸钙骨水泥(calcium phosphate cement,CPC)强化骨质疏松椎体钉后穿透单侧椎体皮质固定的可行性。方法选用新鲜成人尸体胸腰段骨质疏松标本24个,实验组为骨水泥(PMMA)和磷酸钙骨水泥灌注后椎体钉穿透单侧椎体皮质固定;对照组为无骨水泥强化,螺钉穿透双侧椎体皮质固定。应用螺钉拔出实验,记录螺钉最大拔出力并观察椎体破坏形态。结果三组拉出力值PMMA组(811.19±188.58N)、CPC组(541.89±101.44N)、对照组(374.21±77.66N)差异有显著性,P<0.01。分别增加122%±56%和50%±37%。对照组(8例)螺钉拔出破坏时均为螺钉抽出,在8例PMMA强化椎体中所有椎体均有不同程度骨折。而在8例CPC强化椎体中仅1例发生椎体骨折。结论应用CPC强化骨质疏松椎体钉简化手术步骤、增加手术安全性是可行的。

徐长卿水提物抗乙型肝炎病毒的体外实验研究

目的 初步探讨徐长卿水提物的抗乙型肝炎病毒(HBV)作用。 方法 通过徐长卿水提物作用于体外培养的2 .2. 15细胞株,观察其对2. 2. 15细胞株分泌HBsAg和HBeAg的影响,以初步评价其抗HBV作用。 结果 徐长卿水提物作用于2 .2 .15细胞株12d后,对2. 2. 15细胞株的半数毒性浓度为62 65g/L,对HBsAg的半数抑制浓度小于0 78 g/L、对HBeAg的半数抑制浓度为10 .13 g/L;对HBsAg治疗指数大于80 .32,对HBeAg治疗指数为 6. 18。结论 徐长卿水提物在体外细胞培养中对两抗原的分泌有较好的抑制作用。

淫羊藿抑制颌骨骨吸收的体外实验研究

从乳兔长骨分离出培养破骨细胞 ,并与人下颌骨骨磨片体外共同培养 ,分别加入不同浓度 (0 ,0 15 ,1 5和 15mg/ml)的淫羊藿注射液 ,倒置相差显微镜观察破骨细胞形成的骨吸收陷窝 ,并对陷窝数目和面积进行图像分析 ,探讨淫羊藿对破骨细胞性颌骨骨吸收的影响。结果显示 ,与对照组相比 ,淫羊藿 3个实验组 (0 15 ,1 5和 15mg/ml)均能有效抑制破骨细胞在下颌骨片上形成的吸收陷窝的数量和面积 ,并且抑制作用呈剂量依赖性递增。

豆楮方对人肝癌细胞株抑制作用的体外实验研究

目的:研究豆楮方对人肝癌细胞株HepG2、SMMC7721的生长增殖抑制作用。方法:按文献方法制备豆楮方含药血清,用MTT法观察细胞增殖情况。结果:豆楮方含药血清在体外对人肝癌细胞株HepG2、SMMC7721均有抑制作用,对HepG2的最高抑制率为91.48%,对SMMC7721的最高抑制率为89.42%,抑制肝癌细胞的效果优于含5Fu血清。

联合化疗对膀胱癌细胞株BIU-87毒性作用的体外实验研究

实验采用微量细胞培养噻唑蓝显色法观察丝裂霉素C（MMC）、阿霉素（ADM）、羟基喜树碱（HCPT）和噻替派（TSPA）等药物联合应用对膀胱癌细胞株BIU－87的毒性作用。结果显示HCPT与MMC、ADM联合应用能取得较好疗效。连续用药组预期50％抑制率剂量（ID50）与实测ID50的比值分别为13．59、11．26；序贯用药组先用HCPT，后用MMC、ADM、TSPA等药物，抑制率明显大于相同剂量药物单用抑制率。联合用药能增强化疗药物对BIU－87细胞的毒性作用。

鼠疟原虫感染过程中IFN-γ对MΦ合成NO诱导作用的体外实验研究

为探讨疟原虫感染过程中IFN γ对巨噬细胞合成NO的诱导作用 ,我们应用Griess反应检测了约氏疟原虫感染小鼠脾细胞和MΦ培养上清中NO的分泌情况。结果显示 ,去除淋巴细胞则脾细胞中的MΦ合成NO水平显著下降 ;外源性IFN γ的加入可明显地提高MΦ合成NO的水平。这表明 ,在约氏疟原虫感染过程中 ,淋巴细胞的存在能促进MΦ合成NO ;IFN

CD基因转移及与放射联合对宫颈癌细胞株作用的体外实验研究

目的 研究胞嘧啶脱氨酶 (CD )基因转移联合 5 氟胞嘧啶 (5 Fc)在体外对人宫颈癌细胞株Hela生长的影响及放射增敏作用。方法 将CD基因转入Hela细胞 ,加入含 5 Fc的培养基 ,联合放射 ,采用MTT法和克隆形成试验分别比较单一CD/5 Fc体系及与放射治疗联合对该细胞生长的影响。结果 5 Fc能显著抑制转入了CD基因的Hela细胞的生长 ,并能通过旁观者效应杀死基因转移细胞周围未转入该基因的细胞。CD /5 Fc体系联合放射作用于Hela细胞 ,其生长抑制强度与单一治疗相比显著增强 ,两者的联合作用具有协同效应 (P <0 .0 5 )。结论 CD基因转移联合 5 Fc作用对Hela细胞具有显著的杀伤作用 ,对放射具有增敏作用。

肝细胞癌基因治疗的体外实验研究

目的 :构建一种对肝细胞癌有直接、间接治疗作用的重组腺病毒。方法 :用PCR方法扩增CD基因和glyES基因片段 ,插入腺病毒穿梭质粒。用细菌内同源重组方法与腺病毒骨架质粒重组构建出重组腺病毒质粒。经脂质体介导转染293包装细胞扩增获取重组腺病毒rAd CDglyES。用MTT法检测其对肝癌细胞株 (SMMC -7721)的生长抑制率及其表达产物对经ECGF处理的脐静脉血管内皮细胞 (ECV -304)增殖的影响。结果 :纯化的重组腺病毒滴度为1×1013 3TCID50/L ,对SMMC 7721的生长抑制率达 (82 1±8 3) % ,与对照组 (24 6±14 1) %比较有显著性差异 (P<0 01)。浓缩的转染了该重组腺病毒的细胞培养上清液对ECV 304细胞增殖的抑制率为(78 7±1 8) % ,而同样浓缩的转染了对照重组腺病毒rAd CD的细胞培养上清液的抑制率仅为 (24 2±9 7) % ,两者亦有显著性差异 (P<0 01)。结论 :rAd

缺氧对心肌细胞DNA链损伤的体外实验研究

目的 :研究缺氧条件下对体外培养的心肌细胞DNA链的损伤及其探讨损伤机制。方法 :利用单细胞电泳技术结合激光扫描共聚焦显微镜来观察乳鼠心肌细胞的DNA损伤 ,以慧星样细胞出现率、慧尾长度和尾距 (尾部DNA占总DNA的百分比与头尾部中心间距的乘积 )来评价心肌细胞DNA的损伤程度。结果 :缺氧 12h后 ,心肌细胞DNA发生了损伤 ,慧星样细胞出现率、慧尾长度和尾距均增加 ,与对照组有显著差异 (P <0 .0 5 ) ;并随缺氧时间的延长 ,DNA的损伤程度和慧星样细胞的出现率均随之增加 ,呈现明显的时间———效应趋势。结论 :单细胞电泳可快速、灵敏地检测缺氧引起的心肌细胞DNA损伤。缺氧导致细胞的DNA损伤可能是诱导心肌细胞凋亡发生的重要机制之一。

丹参酮Ⅰ对HepG2细胞抑制作用的体外实验研究

目的 通过丹参酮Ⅰ (TanshinoneⅠ )对人肝癌细胞 (HepG2 )的体外实验 ,研究丹参酮Ⅰ抗肿瘤作用及作用机制。方法 HepG2细胞培养液中加入不同浓度的丹参酮Ⅰ ,培养 72h ,观察HepG2细胞的增殖率 ;倒置显微镜观察HepG2细胞的形态变化 ;流动血细胞计数 (FCM)检测HepG2细胞周期及凋亡率 ;免疫细胞化学检测HepG2细胞的增殖凋亡调控相关基因bax、bcl 2的蛋白表达。结果 丹参酮Ⅰ抑制HepG2细胞生长 ,阻滞HepG2细胞周期于G0 G1 期并诱导细胞凋亡 ;丹参酮Ⅰ通过下调bcl 2基因表达 (P <0 .0 1)、上调bax基因表达 (P <0 .0 1)诱导HepG2细胞凋亡。结论 丹参酮Ⅰ具有抗肿瘤活性 ,其作用机制之一是诱导细胞凋亡。

芪苓解浊颗粒剂抗解脲支原体的体外实验研究

测定芪苓解浊颗粒剂体外对解脲支原体(Uu)的抑菌及最低抑菌浓度,并与美尔力胶囊(多西环素)对照。研究芪苓解浊颗粒剂治疗非淋菌性尿道炎的作用机制。结果:芪苓解浊颗粒剂与美尔力胶囊对Uu均有较强的体外抑菌作用。MIC值分别为:≤7.81mg/mL和≤19.5μg/mL。芪苓解浊颗粒剂治疗非淋菌性尿道炎的作用机制可能与抑制Uu繁殖有关。

饮料对牙釉质表面硬度的影响的体外实验研究

目的 本实验用显微硬度测量法,定量研究和评估人离体牙釉质在酸性饮料中的硬度变化,比较牙釉质在饮料中浸泡时间及浸泡频率对釉质表面硬度的影响。方法 实验设人工唾液组(对照组)和可口可乐组、橙汁组,共9组,每组1 0个牙块。浸泡在饮料中1次/天、3次/天、7次/天,均在37℃恒温箱中进行,每次1 0分钟,共进行4天。在0天、2天、4天测量牙釉质表面硬度(韦氏法)。结果 ①对照组实验前后无显著性差异。②可口可乐组1次/天和7次/天在4天的硬度值为1 6 2±5 0和6 8±4 0 ,有显著性差异(P =0 .0 1 ) ;橙汁组1次/天和7次/天在4天的硬度值为2 1 0±6 3和93±34,有显著性差异(P =0 .0 0 1 )。③此外,可口可乐组和橙汁组牙釉质表面的平均硬度从0天(基线值)到2天均有一个急剧的下降过程并持续至第4天(各为0天335±34,2天1 4 3±84 ,4天1 0 4±5 9和0天343±2 8,2天1 85±72 ,4天1 5 4±74 ) ,两饮料组之间无显著性差异。结论 可口可乐和橙汁可使牙釉质表面硬度降低,浸泡的时间和频率起主要作用。这对于儿童合理使用饮料并预防龋齿有临床指导意义。