基于Caspase3探讨余甘子叶提取物对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道高反应、肺泡上皮细胞活性的影响及作用机制

目的 基于胱天蛋白酶(Caspase)3探讨余甘子叶提取物对慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)大鼠气道高反应、肺泡上皮细胞活性的影响及作用机制。方法 选取60只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常(A)组、模型(B)组、乙酰半胱氨酸颗粒(富露施,C)组、余甘子叶提取物(D)组、Caspase3抑制剂(Z-DEVD-FMK,E)组、余甘子叶提取物+Caspase3抑制剂(F)组,每组10只,对B、C、D、E、F组采用香烟发生器+脂多糖法建立慢阻肺模型,A组不建立该模型,建模成功后,C组灌胃50 g/kg富露施,D组灌胃50 mg/kg余甘子叶提取物,E组灌胃10μg/kg Z-DEVD-FMK,F组给予余甘子叶提取物联合Z-DEVD-FMK,A、B组同期给予灌胃同体积生理盐水,无创肺功能仪检测气道高反应,干湿重法测定肺体脂数(LBF)、肺含水量(LWC),苏木素-伊红(HE)染色法检测肺组织病理形态,TUNEL法检测肺组织细胞凋亡,免疫组化法检测肺组织中Caspase3蛋白表达。结果 与A组比较,B组气道阻力、LBF、LWC含量、肺泡上皮细胞凋亡、肺组织Caspase3蛋白表达显著升高(P<0.05),肺组织病理形态遭到破坏;与B组比较,C、D、E、F组气道阻力、LBF、LWC含量、肺泡上皮细胞凋亡、肺组织Caspase3蛋白表达明显降低(P<0.05),肺组织病理形态明显改善,且D组较C组变化更显著(P<0.05),E组与D组相比无明显差异(P>0.05),F组较E组变化显著(P<0.05)。结论 余甘子叶提取物可有效改善慢阻肺大鼠气道高反应及肺泡上皮细胞活性,其作用机制可能与抑制Caspase3表达有关。

余甘子叶提取物对荷瘤小鼠抑瘤及免疫功能影响的研究

目的研究余甘子叶提取物(Phyllanthus emblica L.,PL)对小鼠H22实体瘤的生长抑制作用及免疫调节作用。方法①通过小鼠急性毒性试验计算出PL的半数致死量(LD50),推算出PL高、中、低剂量组的给药剂量。②建立小鼠H22实体瘤动物模型,随机分为模型对照组、环磷酰胺组和PL高、中、低剂量组,连续灌胃7d后测定各组瘤重、脏器指数、小鼠廓清指数、NK细胞活性及血清中IL-2、TNF-α的含量。结果①PL经口灌胃给药的LD50为9.911 g/kg,95%可信区间为6.807～15.831 g/kg。②与模型组比较,PL各剂量组均有一定的抑瘤作用,其中以PL高剂量(1.982 g/kg)组最为显著(0.01<P<0.05),抑瘤率达到33%;PL高(1.982 g/kg)、中(0.991 g/kg)剂量组能显著提高荷瘤小鼠脾指数(P<0.05)、胸腺指数(P<0.05),碳廓清能力(P<0.05),NK细胞活性(P<0.01或P<0.05),血清IL-2、TNF-α的含量(P<0.05),但在实验所用剂量的PL各组对荷瘤小鼠血清溶血素含量和脾淋巴细胞增殖无明显影响。结论余甘子叶提取物具有较强的抗肿瘤以及促进荷瘤小鼠非特异性免疫的作用。

余甘子叶提取物对小鼠免疫功能的影响研究

目的:探讨余甘子叶提取物(PLFs)对正常小鼠免疫功能的影响。方法:选取70只健康昆明小鼠进行PLFs的急性毒性试验。各项实验的健康小鼠随机分为对照组及余甘子提取物高(1.982 g/kg)、中(0.991 g/kg)、低剂量组(0.496 g/kg),10只/组,对照组给予等容积双蒸水灌胃。灌胃1次/d,连续给药7 d。小鼠椎脱臼处死取胸腺、脾脏称量质量,计算小鼠胸腺指数和脾指数;尾静脉注射经印度墨汁,眶后静脉丛采血比色测定廓清指数K及吞噬系数α;各组常规制备脾脏细胞,酶标分析仪测定NK细胞杀靶活性和对T、B淋巴细胞的增殖影响情况;腹腔注射绵羊红细胞,测定对小鼠血清溶血素的影响。结果:余甘子叶提取物的LD50为9.911 g/kg;余甘子叶提取物高、中剂量能显著升高小鼠碳廓清能力(P<0.05)、吞噬指数(P<0.05)和NK细胞活力(P<0.05)。结论:余甘子叶提取物具有促进正常小鼠非特异性免疫功能的作用。

余甘子叶提取物体外抗菌实验研究

目的:用体外细菌培养方法研究余甘子叶提取物是否具有抗菌作用,并确定余甘子叶的抗菌有效部位。方法:采用琼脂稀释法测定余甘子叶提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌敏感株、金黄色葡萄球菌耐药株、白色念珠菌、伤寒沙门菌、肺炎克雷伯杆菌、甲型链球菌、乙型链球菌的抑制作用。结果:余甘子叶提取物在体外对肺炎克雷伯杆菌、金黄色葡萄球菌敏感株、金黄色葡萄球菌耐药株、大肠杆菌、伤寒沙门菌、白色念珠菌均有不同程度的抑制作用,其中cc部位作用最为明显;M IC除D部位小于4.0 mg/m l外,其余部位均大于4.0 mg/m l。结论:余甘子叶提取物具有抗菌作用,其有效成分集中在cc部位。

余甘子叶提取物对慢性支气管炎并肺气肿大鼠的保护作用研究

目的研究余甘子叶提取物是否对慢性支气管炎并肺气肿大鼠有保护作用。方法采用气管内注入脂多糖(LPS)及烟熏的混合刺激方法建立慢性支气管炎并肺气肿大鼠模型,采用病理组织切片及血气分析方法观察余甘子叶提取物对慢性支气管炎及肺气肿的病理及血氧含量的影响。结果余甘子叶提取物乙酸乙酯膏(cc)部位对由LPS+烟熏引起的慢性支气管炎并肺气肿大鼠的支气管炎症及肺泡病理损害有明显保护作用,能减少支气管壁炎症细胞浸润及肺大泡形成,并能提高动脉血氧含量,各项指标均优于模型对照组及阳性药物组,而接近于正常对照组。结论余甘子叶提取物cc部位具有防治慢性支气管炎并肺气肿的作用。

余甘子叶提取物对荷瘤小鼠外周血T淋巴细胞CD4^+、CD8^+亚群的影响

[目的]观察余甘子叶提取物(PL)对荷瘤小鼠外周血T淋巴细胞CD4+、CD8+亚群的影响。[方法]建立H22荷瘤小鼠模型,灌胃给予余甘子叶提取物高、中、低剂量(1.982,0.991,0.496 g/kg),观察余甘子叶提取物对荷瘤小鼠外周血T淋巴细胞CD4+、CD8+亚群的影响。[结果]余甘子叶提取物高、中剂量(1.982,0.991 g/kg)能显著提高荷瘤小鼠T淋巴细胞及其CD4+亚群相对数量(P<0.05),上调CD4+/CD8+亚群比例(P<0.05)。[结论]通过提高T淋巴细胞及其CD4+亚群相对数量,使CD4+/CD8+比例接近正常值,此可能是余甘子叶提取物抗肿瘤的免疫学机制之一。

余甘子叶提取成分没食子酸的体外抗肿瘤实验研究

目的探讨从余甘子叶提取分离得到的活性成分没食子酸的抗肿瘤作用。方法采用MTT法和细胞集落形成法观察没食子酸对人肝癌细胞株Bele7404、人胃癌细胞株SGC7901、小鼠肝癌细胞株H22和小鼠肉瘤细胞株S1804种肿瘤细胞的体外抑制作用。结果MTT法和细胞集落形成法测定的结果均显示,当没食子酸浓度在2.5μg/m l以上时,4种肿瘤细胞株的生长均受到明显抑制。结论余甘子叶提取成分没食子酸在体外对不同组织来源的肿瘤细胞增殖有明显的抑制作用。