响应面法优化侧柏叶精油的超声辅助水蒸气蒸馏提取工艺

以侧柏叶精油提取率为评价指标,选取超声功率、超声时间、液料比和提取时间为考察因素,通过单因素实验及响应面法优化了侧柏叶精油的超声辅助水蒸气蒸馏提取工艺。结果表明,各因素对侧柏叶精油提取率影响的大小顺序为:提取时间>超声功率>超声时间>液料比;确定最佳提取工艺为:超声功率80 W、超声时间32 min、液料比14∶1 (mL∶g)、提取时间6 h,在此条件下,侧柏叶精油提取率为0.821%,与预测值(0.817%)接近。该方法操作简单、稳定可靠,为侧柏叶精油的进一步开发利用提供了理论依据。

非剥脱点阵激光联合侧柏叶酊对斑秃小鼠IL-7/IL-7Rα信号通路和Tregs细胞亚群的影响

目的:研究1565 nm非剥脱点阵激光联合侧柏叶酊(Platycladus orientalis tincture,POT)对斑秃(Alopecia areata,AA)小鼠治疗作用以及对白细胞介素7(Interleukin 7,IL-7)/白细胞介素7受体α(Interleukin-7 receptorα,IL-7Rα)信号通路和调节性T细胞(Regulatory T cells,Tregs)亚群的影响。方法:将50只成年雄性C3H/HeJ小鼠随机分为对照组(C组),模型组[M组,环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)诱导AA模型],M+1565 nm组(1565 nm非剥脱点阵激光治疗AA),M+POT组(POT治疗AA)、M+1565 nm+POT组(1565 nm非剥脱点阵激光联合POT治疗AA),每组10只。流式细胞术检测C组和M组皮损组织中Tregs细胞亚群的比例和所有组血液中单个核细胞中Tregs细胞亚群的比例。Western blot法检测各组小鼠皮损组织中IL-7和IL-7Rα的表达。结果:与C组比,M组皮肤组织IL-7和IL-7Rα的表达均明显增加,而且Tregs细胞比例明显减少(P<0.05)。与M组比,M+1565 nm组和M+POT组IL-7的表达均降低(P<0.05)。与M组比,M+1565 nm+POT组IL-7和IL-7Rα的表达均降低,且Tregs细胞比例都显著增加(P<0.05)。结论:1565 nm非剥脱点阵激光联合POT治疗可以抑制斑秃小鼠IL-7/IL-7Rα信号并减少Tregs细胞的比例。

侧柏叶乙酸乙酯提取物缓解小鼠糖尿病心肌病

目的:研究侧柏叶乙酸乙酯提取物(EAEPOL)缓解糖尿病心肌病(DCM)的作用及其机制。方法:将健康成年C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、DCM组和EAEPOL组。以小鼠心脏超声心动图为指标观察心脏结构和功能。以心肌羟脯氨酸含量、心肌组织Masson染色和天狼星红染色及心肌I型胶原(Col I)和III型胶原(Col III)免疫组化染色评价心肌纤维化程度。试剂盒检测心肌丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和总抗氧化能力(T-AOC),以及qRT-PCR和Western blot检测心肌血红素加氧酶1(HO-1)和核因子E2相关因子2(Nrf-2)表达水平,评价心肌氧化应激状态。Western blot检测CD31和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,qRT-PCR检测钙黏素5(CDH5)和成纤维细胞特异性蛋白1(FSP1)的mRNA水平,以及心肌石蜡切片α-SMA免疫荧光染色,评价心肌内皮-间充质转化(EndMT)程度。结果:(1)小鼠心脏超声心动图显示,与正常对照组相比,DCM组小鼠心率(HR)和射血分数(EF)显著下降(P<0.05或P<0.01),收缩期和舒张期左心室前壁厚度(LVAWs和LVAWd)及收缩期和舒张期左心室后壁厚度(LVPWs和LVPWd)均显著增大(P<0.05);与DCM组相比,EAEPOL组小鼠HR和EF显著增大(P<0.01);LVAWs、LVAWd、LVPWs和LVPWd显著减小(P<0.05)。(2)与正常对照组相比,DCM组小鼠心肌羟脯氨酸含量、天狼星红和Masson染色所示胶原面积比及Col Ⅰ和Col Ⅲ免疫组化阳性面积比均显著增加(P<0.01);与DCM组相比,EAEPOL组小鼠以上心肌纤维化指标均显著下降(P<0.05或P<0.01)。(3)与正常对照组相比,DCM组小鼠心肌MDA含量和Nrf-2表达显著增加,SOD活性、T-AOC水平和HO-1表达显著下降(P<0.01);与DCM组相比,EAEPOL组小鼠心肌MDA含量显著减少,SOD、T-AOC、Nrf-2和HO-1水平显著增加(P<0.05或P<0.01)。(4)与正常对照组相比,DCM组小鼠心肌CD31和CDH5的表达显著减弱,α-SMA和FSP1的表达显著增强(P<0.05或P<0.01),α-SMA免疫荧光阳性面积显著增大(P<0.01);与DCM组相比,EAEPOL显著上调CD31和CDH5的表达,下调α-SMA和FSP1的表达,α-SMA免疫荧光阳性面积显著下降(P<0.05或P<0.01)。结论:EAEPOL可能通过抑制氧化应激,减轻EndMT,从而抑制DCM小鼠心肌纤维化,改善心功能。

侧柏叶提取物对血液凝固的影响及其机制

目的探究侧柏叶提取物对血液凝固的影响及其机制。方法制备侧柏叶水提物及其石油醚、乙酸乙酯和正丁醇提取物,取家兔颈总动脉血液,用凝血板法,观察侧柏叶水提物和石油醚、正丁醇及乙酸乙酯提取物对血液凝固的影响;以RT、APTT、PT以及TT为指标,观察体外实验侧柏叶提取物对血液凝固的影响。将健康昆明种小鼠随机分为侧柏叶水提物低、高浓度组,乙酸乙酯提取物低、高浓度组,正丁醇提取物低、高浓度组以及空白对照组,每组8只;以凝血时间、APTT、PT、TT及凝血因子Ⅻ为指标,观察侧柏叶提取物对血液凝固的影响。通过灌胃5ml/kg的无水乙醇制备胃溃疡出血模型,以胃出血面积、胃组织切片后胃黏膜细胞形态为指标,观察侧柏叶提取物对胃出血模型的作用。结果在体外实验与空白对照组相比,石油醚、乙酸乙酯、正丁醇提取物和水提物组显著延长凝血时间和RT(P<0.05);正丁醇提取物、水提物组明显延长APTT和PT(P<0.05),乙酸乙酯提取物明显延长PT(P<0.05)。在体内实验与空白对照组相比,乙酸乙酯、正丁醇提取物、水提物低浓度组凝血时间明显缩短(P<0.05);乙酸乙酯提取物高浓度组和正丁醇提取物低浓度组分别显著缩短APTT和PT(P<0.05),而正丁醇、水提物高浓度组则显著延长TT(P<0.05);与空白对照组相比,乙酸乙酯低浓度组、正丁醇提取物高、低浓度组血浆ⅩⅡ因子含量明显升高(P<0.05)。与模型组相比,乙酸乙酯提取物高、低浓度组、正丁醇提取物高、低浓度组和水提物高、低浓度组胃出血面积明显缩小(P<0.05),乙酸乙酯提取物低浓度组胃出血面积最小。结论侧柏叶体内实验可促进凝血,乙酸乙酯提取物是主要的止血提取物,且低浓度的乙酸乙酯提取物止血效果更好。

侧柏叶生物炭对刚果红染料的吸附性能研究

在不同煅烧温度下制备侧柏叶生物炭,研究其对刚果红(CR)溶液的吸附性能.采用扫描电子显微镜、傅里叶变换红外光谱仪、比表面积和孔径分析仪、X射线衍射仪对生物炭进行表征,探讨了pH值、生物炭用量、吸附时间、振荡转速、温度及CR初始浓度等因素对CR溶液吸附性能的影响.结果表明:在pH=6、生物炭用量为0.06 g、吸附时间为30 min、振荡转速为150r·min^(-1)、温度为25℃、CR初始浓度为200 mg·L^(-1)时,800℃煅烧下的侧柏叶生物炭对CR溶液吸附效果最佳,其吸附率可达99.5%、吸附量可达165.9 mg·g^(-1).吸附等温符合Langmuir模型,动力学符合准一级模型,该吸附过程是自发的吸热过程.

基于网络药理学和分子对接技术探究侧柏叶防治慢性牙周炎的作用机制

目的:基于网络药理学和分子对接方法探讨侧柏叶防治慢性牙周炎的作用机制。方法:利用中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP),筛选侧柏叶中的活性化学成分及可能作用的蛋白质靶点,通过UniProt数据库转换为Gene Symbol,利用OMIM数据库和GeneCards网站收集慢性牙周炎相关基因。选取交集靶点,利用Cytoscape软件绘制慢性牙周炎-侧柏叶-活性成分-靶点的网络图。利用STRING数据库构建基于交集靶点的蛋白质间相互作用(PPI)网络。借助Metascape平台,对靶点进行基因本体(GO)功能分类和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路的富集分析。利用MCODE插件确定关键基因簇,最后通过分子对接方法找到可能作用的靶点。结果:通过筛选得到侧柏叶主要活性成分7个,共获得98个防治慢性牙周炎的潜在靶点,KEGG通路富集、基因本体论(GO)分类富集结果显示,侧柏叶防治慢性牙周炎的机制涉及多个生物学过程,包括细胞对无机物的反应、细胞对化学刺激的反应等过程。蛋白-蛋白互作后发现关键基因簇,包括TP53、AKT1、白细胞介素(IL)-6等。分子对接结果表明,各靶点皆具有较为良好的亲合能。结论:侧柏叶治疗慢性牙周炎通过多成分、多靶点、多通路协同起效。

侧柏叶的药效成分和分析方法研究进展

总结了侧柏叶及其炮制品的药效成分和分析方法。侧柏叶中的黄酮类、萜类和挥发油可能是其生发作用的物质基础,黄酮类成分可能是其止血作用的药效成分。侧柏叶的分析方法有液相色谱法、液相色谱-质谱联用法、气相色谱-质谱联用法、毛细管电泳法和薄层色谱法。后续建议继续深入研究侧柏叶的药效成分,并在此基础上选用合适的分析方法对其质量进行评价。

庆阳市侧柏叶枯病防治存在的问题及其对策

近年来,甘肃省庆阳市侧柏叶枯病的发生日益严重,严重危害侧柏林生态安全。为加强侧柏叶枯病防治,打赢侧柏叶枯病防治攻坚战,保护侧柏林生态安全,深入分析了庆阳市侧柏叶枯病防治存在的监测预警体系不健全、药剂防治具有一定的局限性、营林管理措施执行难度较大、技术研发与成果转化存在短板等问题,并提出了构建智能监测预警体系、提升药剂防治成效、落实营林管理措施、加强技术研发与成果转化等对策。

侧柏叶有效成分提取及酪氨酸酶活性影响评价

目的:研究侧柏叶有效成分总黄酮的最佳提取工艺,并评价有效提取成分对酪氨酸酶活性的影响。方法:采用单因素试验、正交试验考察了提取过程中各因素对侧柏叶总黄酮含量的影响;采用蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法考察提取成分对酪氨酸酶活性的影响。结果:本实验确定最优的提取工艺为90%乙醇作为提取液,按照1∶15的料液比(g∶mL),以70℃的超声温度进行提取,超声时间为60 min,此条件下总黄酮提取量为1.394 mg/g。0.5 g/mL乙酸乙酯提取物的激活率最小,为-211.68%±2.42%;0.5 g/mL石油醚提取物的激活率最大,为20.30%±1.32%。结论:本研究确定了侧柏叶有效成分提取的最佳工艺,经过对有效成分活性测试可知,乙醇粗提取物和乙酸乙酯提取物对酪氨酸酶的活性有抑制作用且随着浓度升高而升高,石油醚提取物低浓度有抑制作用,高浓度有激活作用。

从叶熙春治血证用侧柏叶初探其药性寒温之别

叶熙春治疗血证善用侧柏叶,取清热止血之用。当代医家亦多认为其为苦寒之性,具有凉血止血之功。笔者结合古今文献资料及临床报道,发现侧柏叶在唐朝之前普遍被认为是一味微温性的止血药;现代实验研究发现侧柏叶对于虚寒性出血亦有较好的止血效果;临床上对于侧柏叶的使用,无论寒热皆有应用。故推断侧柏叶应为平性止血药。

响应面法优化水蒸气提取侧柏叶精油工艺研究

侧柏叶(Platycladi Cacumen)为中药材,其精油对多种腐败菌和致病菌均具有抗菌活性,有望作为天然抗菌剂应用于食品工业和医药领域。为寻找侧柏叶精油最佳提取工艺,为今后的开发利用提供科学依据,采用水蒸气蒸馏法提取侧柏叶精油,并结合单因素试验和响应面法优化提取工艺。结果表明:各参数对于侧柏叶精油提取率的影响比较为:蒸馏时间>NaCl浓度>液料比。在考虑经济可行性条件下,最佳提取条件为NaCl浓度2.3%、料液比1:8.0 g/mL、蒸馏时间2.0 h,实际提取率为1.22%。

侧柏叶枯病防治中存在的问题及对策研究

侧柏叶枯病作为一种严重威胁侧柏生长的病害,其防治工作一直备受关注。然而,在实际防治过程中,仍存在诸多问题,如防治技术不规范、农药使用不当、环境因素制约等,这些问题严重影响了防治效果。本文旨在分析侧柏叶枯病防治中存在的问题,并提出相应的对策:选择抗性更加好的品种来种植,高度重视科学水肥管理机制的构建,切实做好药物杀菌工作和病枝修剪工作,以期为侧柏叶枯病的有效防治提供参考。

侧柏叶枯病发生情况和防治措施

侧柏属侧柏科,别名五叶柏、青柏木,为侧柏属常绿乔木,是优良的园林绿化树种。它树形美观,四季常青。具有生长快,寿命长,适应性强等特点,被广泛用于绿化、园林、城市道路、公园等。随着侧柏种植面积的不断扩大,侧柏叶枯病的发生也日益严重。侧柏叶枯病是侧柏常见病害之一,多发生在幼树上,主要危害叶和枝条。如不及时防治,严重时会导致整株死亡。对此,详细阐述侧柏叶枯病发生情况和防治措施,以期能够为相关种植人员提供一些必要的参考。

1565nm非剥脱点阵激光联合侧柏叶酊对斑秃小鼠IFN-γ信号及NKG2D^(+)CD8^(+)T细胞比例的影响

目的研究1565 nm非剥脱点阵激光联合侧柏叶酊干预对斑秃小鼠干扰素-γ(IFN-γ)信号与NKG2D^(+)CD8^(+)T细胞的影响。方法将50只雄性C3H/HeJ小鼠随机分为正常组、模型组、点阵激光组、侧柏叶酊组及点阵激光联合侧柏叶酊组,每组10只。除正常组外,其余组小鼠均采用环磷酰胺诱导斑秃。在造模期间,点阵激光组给予1565 nm非剥脱点阵激光治疗;侧柏叶酊组给予5%侧柏叶酊在脱毛部位轻微按摩2~3 min;点阵激光联合侧柏叶酊组给予1565 nm非剥脱点阵激光及5%侧柏叶酊按摩治疗。观察各组小鼠皮肤状态和毛发生长情况;实验第7天取血,流式细胞术检测血液中NKG2D^(+)CD8^(+)T细胞比例,Western blot法检测毛囊组织中IFN-γ及其受体IFNGR1和IFNGR2表达情况。结果模型组小鼠斑秃部位的毛发出现断裂、变细,裸露皮肤表面出现黑点;各干预组斑秃情况均较模型组轻,其中点阵激光联合侧柏叶酊组最轻。模型组血液中NKG2D^(+)CD8^(+)T细胞比例和毛囊组织中IFN-γ、IFNGR1、IFNGR2蛋白相对表达量均明显高于正常组(P均<0.05)。点阵激光组、侧柏叶酊组仅毛囊组织中IFN-γ蛋白相对表达量均明显低于模型组(P均<0.05),点阵激光联合侧柏叶酊组血液中NKG2D^(+)CD8^(+)T细胞比例和毛囊组织中IFN-γ、IFNGR1、IFNGR2蛋白相对表达量均明显低于模型组及点阵激光组、侧柏叶酊组(P均<0.05)。结论1565 nm非剥脱点阵激光联合侧柏叶酊外用可通过抑制IFN-γ信号通路和NKG2D^(+)CD8^(+)T细胞的积累,从而有效改善斑秃。

基于HPLC指纹图谱结合化学模式识别评价侧柏叶的质量

目的 建立不同产地侧柏叶的HPLC指纹图谱,并采用化学模式识别评价侧柏叶质量。方法 采用HPLC法。以ZORBAX Eclipse plus-C18为色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速:1.0 mL·min^(-1),检测波长:254 nm。利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)建立24批侧柏叶HPLC指纹图谱并进行相似度评价,结合混合对照品图谱确定共有峰。采用SPSS 25.0软件进行聚类分析。采用Simca-P软件进行主成分分析和偏最小二乘法-判别分析,并筛选影响侧柏叶质量的差异性成分。结果 侧柏叶指纹图谱中共有13个共有峰,与对照指纹图谱相比,除S2一批外,其余23批药材的相似度均高于0.92。并指认了杨梅苷、槲皮苷、异槲皮苷、穗花双黄酮4个共有峰。聚类分析结果显示24批药材聚为两类,S1、S3-S24聚为一类,同一产地的药材有较大差异,不同产地药材也有相似性;S2聚为一类为圆柏叶。主成分分析结果表明6类主成分的累计方差贡献率为88.412%,可以反映原始色谱峰大部分信息。偏最小二乘法判别分析筛选出5种成分,是24批药材产生质量差异的标志性成分。结论 所建HPLC指纹图谱方法操作简便、准确,结合化学模式识别可用于侧柏叶的质量控制。峰8等5个成分为影响侧柏叶质量的差异性成分。

中药侧柏叶治疗脂溢性脱发的探讨

脂溢性脱发在日常生活中较为常见,且病因复杂,其发病机制尚未明确。随着人们生活水平的不断提高,人们对自身外在形象的要求也越来越高。中医药治疗脂溢性脱发具有较好的临床疗效,复发率低,且不良反应较少。侧柏叶气清香,味苦涩、微辛,归肺、肝、脾经,具有凉血止血、化痰止咳和生发乌发之功效。本研究通过概述脂溢性脱发的病因病机、侧柏叶治疗脂溢性脱发的作用成份及治疗机理、临床治疗相关研究和治疗效果,以期为临床治疗脂溢性脱发提供新方向和新思路。

侧柏叶抗红色毛癣菌主要活性成分α-蒎烯以ERG-3为靶点发挥抗真菌作用

红色毛癣菌(Trichophyton rubrum,T.rubrum)是皮肤癣最主要病原;侧柏叶(Cacumen Platycladi)是侧柏[Platycladus orientali s(L.)Franco]的干燥嫩枝梢及叶,被《苗族医学》收录用于治疗皮肤癣。本研究旨在探讨侧柏叶抗T.rubrum的主要活性物质及其抗真菌机制,为抗皮肤癣新药研发提供帮助。本研究通过测定最小抑菌浓度和孢子萌发率分析了侧柏叶活性物质对T.rubrum的抑菌活性,使用电镜观察T.rubrum菌丝形态和孢子超微结构,并检测侧柏叶活性物质对T.rubrum细胞膜通透性、完整性和麦角甾醇含量的影响,从而阐述侧柏叶活性物质对T.rubrum抑菌机理,最后采用GC-MS和qRT-PCR方法找到其抗T.rubrum的作用靶点。结果显示,侧柏叶石油醚部位的α-蒎烯为主要抗菌活性成分,MIC为32μg·mL^(-1),极显著抑制孢子萌发(P<0.01);α-蒎烯可致细胞膜发生明显损伤和内容物流出、通透性极显著增加(P<0.01)以及24 h内细胞膜中麦角甾醇和24(28)脱氢麦角甾醇含量显著下降(P<0.05);引起脂质色谱图中ERG3活性抑制相关的“麦角甾烷-7,24-二烯-3β-醇”色谱峰出现;可极显著降低ERG3的相对表达量(P<0.01)。结果表明,α-蒎烯是侧柏叶中发挥抗T.rubrum活性最主要成分且以ERG3为其抗真菌靶点。

侧柏叶总黄酮固体脂质纳米粒的配方优化及其体外释药行为

通过单因素试验和响应面分析方法优化制备固体脂质纳米粒的配方,并对固体脂质纳米粒进行外观形态、粒径、电位及体外透皮吸收行为的考察。结果表明:最佳配方为侧柏叶总黄酮与单硬脂酸甘油酯的质量比1∶11、乳化剂(大豆卵磷脂)用量313 mg、水相体积33 mL,所得固体脂质纳米粒外观呈类球形且分布均匀,包封率为79.62%,粒径为218 nm,多分散系数PDI为0.173,Zeta电位为-25.6 mV,体外透皮吸收明显优于侧柏叶总黄酮水溶液,体外透皮吸收行为符合Higuchi模型(R^(2)=0.9892)。该配方稳定可行,可用于制备具有缓释特性的侧柏叶总黄酮固体脂质纳米粒。

侧柏叶标准汤剂制备及质量标准研究

目的:参照《中药配方颗粒质量控制与标准制定技术要求》,对15批侧柏叶饮片进行标准汤剂制备,建立特征图谱,并测定其槲皮苷含量,提供一种可靠的评价侧柏叶标准汤剂质量的方法。方法:以槲皮苷为含量指标成分,分别对15批不同产地的侧柏叶饮片标准汤剂进行测定,计算转移率和出膏率,建立高效液相特征图谱方法,同时采用液质联用技术对共有峰进行指认。结果:15批侧柏叶标准汤剂出膏范围为10.51%~20.35%,平均值为16.08%;槲皮苷含量范围为0.69%~1.12%,平均值为0.91%;槲皮苷转移率的分布范围为51.11%~67.16%,平均值为57.67%。特征图谱呈现13个特征峰,其中10个共有峰被指认,与对照特征图谱相比,侧柏叶标准汤剂的相似度均大于0.90。结论:侧柏叶饮片标准汤剂制备规范,槲皮苷含量测定与特征图谱方法可靠、准确性和重现性好,可评价侧柏叶标准汤剂的质量,也可以评价侧柏叶配方颗粒的质量。

侧柏叶及其水煎液HPLC特征图谱的相关性研究

目的比较侧柏叶药材及其水煎液高效液相色谱(HPLC)特征图谱的差异,探讨其特征图谱的相关性。方法采用Zorbax SB-Aq C18色谱柱;流动相为乙腈-磷酸溶液(体积分数为0.1%),梯度洗脱;检测波长为254 nm;柱温为40℃;流速为1.0 mL·min-1。结果侧柏叶药材标示出22个共有特征峰,水煎液标示出药材的16个特征峰,鉴别了5个黄酮类特征峰(杨梅苷、异槲皮苷、槲皮苷、槲皮素、穗花杉双黄酮)。分别以10批药材及其水煎液特征图谱生成的共有模式为对照,各批次药材及其水煎液的相似度分别大于0.99和0.90。同批次药材及其水煎液特征图谱之间的相似度,有7批大于0.95,3批低于0.90。结论水煎煮方式能大部分提取侧柏叶的主要特征成分。本研究为侧柏叶粉末及含侧柏叶复方粉末水煎液外用的物质基础研究提供了一定的依据。