大肠癌及癌旁组织中抑凋亡基因bcl-2和促凋亡基因bax的表达及意义

目的 研究抑凋亡基因bcl 2和促凋亡基因bax在大肠癌及癌旁组织中的表达及意义。方法 应用免疫组织化学S P法对 3 1例大肠癌患者的癌组织及距癌组织外缘 3cm内的癌旁组织和 3cm以远的正常大肠组织中bcl 2和bax基因的表达进行检测。结果 大肠癌及其癌旁组织中bcl 2蛋白表达阳性率分别为 64 .5 %和 60 .0 % ,显著高于正常组织 (3 5 .0 % ) ,P<0 .0 5 ;bax蛋白表达阳性率分别为 45 .2 %和 45 .0 % ,显著低于正常组织 (60 .0 % ) ,P<0 .0 5 ;大肠癌组织与癌旁组织中bcl 2和bax蛋白表达阳性率的差异无显著性意义 (P>0 .0 5 )。bcl 2和bax蛋白在大肠癌组织中的表达与其病理类型和临床分期无明显关系 (P>0 .0 5 )。结论 大肠癌及其癌旁组织中有不同水平的bcl 2蛋白过度表达和bax蛋白低表达 ,两者通过参与调节细胞凋亡而与大肠癌的发生有关 ,但与大肠癌的病理类型、临床分期无关。距大肠癌组织外缘 3cm以内的癌旁组织应视为癌前期组织 。

促凋亡基因bak及其在星形细胞瘤中的表达关系研究

目的研究促凋亡基因bak及其在星形细胞瘤(Astrocytoma)中的表达与意义,探讨二者之间的关系及对患者临床康复意义。方法采用兔抗人Bak、Bax多克隆抗体及免疫组织化学SABC法。结果在99例星形细胞瘤中Bax阳性反应62例(62.6%),Bax阳性反应60例(60.6%),在10例用于对照的正常脑组织中,Bak阳性仅1例(10%),Bax阳性2例(20%)。Bak、Bax在星形胶质细胞瘤中的表达均强于正常对照组(P<0.01,χ2=6.80);二者在Ⅰ和Ⅱ、Ⅱ和Ⅲ、Ⅲ和Ⅳ级星形胶质细胞瘤相互间表达无显著差异(P>0.05,χ2=3.49);但在50例低度恶性星形细胞瘤(WHOⅠ～Ⅱ级)中明显均强于49例高度恶性星形细胞瘤(WHOⅢ～Ⅳ级)中的表达(P<0.01,χ2=7.71)。结论促凋亡基因促凋亡基因Bak及其Bax在大部分星形细胞瘤中有不同程度表达,Bak、Bax可能协同参与星形细胞瘤的凋亡调变,二者的表达与星形细胞瘤分化有关,其研究有利于采取有效的治疗措施为改善患者生活质量和减少功能损害提供依据。

促凋亡基因bad的表达与肝内胆管细胞癌分化的关系

目的 探讨促凋亡基因bad在原发性肝内胆管细胞癌 (ICC)中的表达及其与肿瘤分化程度的关系。方法 采用免疫组织化学DakoEnvision方法 ,对 48例原发性肝内胆管细胞癌 (ICC组 )和 2 5例肝细胞肝癌的癌旁肝组织汇管区胆管上皮组织 (对照组 )中bad基因的表达情况进行检测。结果 bad基因在ICC中的表达阳性率明显高于对照组 (P<0 .0 1) ;在中、低分化的ICC中bad基因的阳性表达水平明显高于高分化的ICC(P<0 .0 5 )。结论 在低分化的胆管细胞癌中bad基因的表达明显增强 ,bad基因的表达与肿瘤的分化程度相关。

促凋亡基因bax在骨巨细胞瘤中的表达及分化调控意义

目的：研究促凋亡基因ｂａｘ在骨巨细胞瘤中的表达及其与Ｊａｆｅ分级和预后的关系。方法：采用兔抗人Ｂａｘ多克隆抗体及免疫组织化学ＳＡＢＣ法。结果：７３例骨巨细胞瘤中，Ｂａｘ阳性４７例（６４４％）；其中Ｊａｆｅ病理分级中Ⅰ级２７例中，阳性２２例（８１５％），Ⅱ级３８例中阳性２３例（６０５％），Ⅲ级８例中，２例阳性（２５０％），Ｐ＜００５。在不同预后分组中Ｂａｘ阳性率间无显著差异（Ｐ＞００５）。结论：促凋亡基因在骨巨细胞瘤中不同程度的表达可能参与骨巨细胞瘤凋亡的调节，并与肿瘤分化程度有关。单一Ｂａｘ表达不能反应预后。

银杏内酯、银杏黄酮对蛛网膜下腔出血及脑淋巴阻滞后大鼠脑组织促凋亡基因Fas配体表达的影响

目的探讨银杏内酯、银杏黄酮对蛛网膜下腔出血(SAH)及脑淋巴阻滞(CLB)后大鼠脑组织促凋亡基因Fas配体(FasL)表达的影响。方法将96只Wistar大鼠分为正常对照组、SAH组、SAH+CLB组、SAH+CLB+生理盐水组(NS组),以及银杏内酯高、低剂量组和银杏黄酮高、低剂量组。用结扎颈部淋巴管、摘除淋巴结及注入自体动脉血法制作CLB和SAH大鼠模型。制作CLB模型后1 d诱导SAH模型。用免疫荧光法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测大鼠脑组织FasL蛋白及mRNA的表达。结果各模型组大鼠脑组织FasL蛋白及mRNA表达明显高于正常对照组(P<0.05～0.01),其中以SAH+CLB组、NS组表达最高。SAH组、银杏内酯和银杏黄酮高剂量组大鼠脑组织FasL蛋白及mRNA的表达水平明显低于SAH+CLB组、NS组(均P<0.01),其中两高剂量组表达又明显低于低剂量组(均P<0.01),两低剂量组大鼠脑组织FasL蛋白阳性细胞数与SAH+CLB组及NS组差异无统计学意义。结论 SAH+CLB能诱导脑组织FasL表达水平显著增高,银杏内酯和银杏黄酮对其有抑制作用,尤以高剂量组效果更明显。

促凋亡基因Bax在膀胱癌表达的免疫组化检测

目的：研究促凋亡基因Ｂａｘ在膀胱移行细胞癌（ＴＣＣ）中的表达，探讨Ｂａｘ在ＴＣＣ发生、发展中的作用和预后复发中的意义。方法：采用兔抗人Ｂａｘ多克隆抗体及Ｓ－Ｐ免疫组化法检测。结果：５６例ＴＣＣ中有３４例Ｂａｘ蛋白表达阳性，阳性率６０．７％。２０例正常膀胱粘膜中有６例表达阳性，阳性率３０％。两组差异显著（Ｐ＜０．０５）。Ｂａｘ蛋白表达部位在细胞胞浆中。Ｂａｘ蛋白表达与病理分级、临床分期及肿瘤复发无显著相关性。结论：促凋亡基因Ｂａｘ在大部分ＴＣＣ中具有不同程度的表达与其发生有关，与ＴＣＣ分级、分期及复发无关。

KIR2DL4基因多态性及促凋亡基因HtrA2在老年白血病病人中的表达及与预后的相关性研究

目的探讨KIR2DL4基因多态性及促凋亡基因HtrA2在白血病病人中的表达及与预后的相关性。方法选择2016年7月至2018年1月收治的老年白血病病人156例作为研究对象,设为观察组,其中急性淋巴细胞白血病(ALL)67例,急性髓系白血病60例,慢性髓系白血病(CML)29例,所有病人均给予常规方法治疗,随访2年。选择同期健康体检的老年人79例,设为对照组。完成基因组DNA提取,检测KIR2DL4基因分型;采用实时荧光PCR技术测定2组促凋亡基因HtrA2 mRNA水平;对KIR2DL4基因多态性及促凋亡基因HtrA2表达与老年白血病病人预后的相关性进行分析。结果2组KIR2DL4基因多态性中2DL4-001、2DL4-005、2DL4-006、2DL4-008、2DL4-0011差异无统计学意义(P>0.05);观察组9A型KIR2DL4高于对照组(P<0.05);10A型KIR2DL4低于对照组(P<0.05)。观察组HtrA2 mRNA水平高于对照组(P<0.05)。随访期间死亡54例,死亡率为34.62%。死亡组2DL4-0011、9A型KIR2DL4检出率均高于存活组(P<0.05),10A型KIR2DL4检出率和HtrA2表达水平低于存活组(P<0.05)。多因素Cox回归分析结果表明老年白血病病人预后与2DL4-006、9A型KIR2DL4基因多态性及HtrA2表达水平均有关(P<0.05)。结论KIR2DL4基因多态性及促凋亡基因HtrA2在老年白血病病人中表达异常,其水平与预后存在相关性。

重组的r-Caspsae-3促凋亡基因体内外治疗胰腺癌的试验研究

目的 观察重组活化的Caspsae 3(r Caspase 3)促凋亡基因对胰腺癌细胞 (PC Ⅱ )及裸鼠皮下种植瘤的治疗作用。方法 采用先前构建的r Caspase 3促凋亡基因转染胰腺癌细胞 ,细胞形态学、DNA电泳、流式细胞学观察胰腺癌细胞凋亡状况 ;用脂质体 pcDNA3.1(+) /r Caspase 3复合物 ,治疗人胰腺癌细胞裸鼠种植瘤 ,观察肿瘤生长速度并计算肿瘤体积大小。结果 DNA电泳、流式细胞学可分别观测到特征性的DNALadder和凋亡峰 ,皮下种植肿瘤治疗后生长速度开始减缓 ,组织切片HE染色可见散在凋亡细胞 ;对照组肿瘤生长速度明显快于治疗组。结论 r Caspase 3具有自催化凋亡诱导活性 ,以r Caspase 3为目的基因的基因治疗可能为治疗胰腺癌以及其它恶性肿瘤开辟新的途径。

氧化应激对肺泡Ⅱ型上皮细胞中促凋亡基因细胞周期和凋亡调控蛋白1表达的影响

目的探讨氧化应激对肺泡Ⅱ型上皮细胞中促凋亡基因细胞周期和凋亡调控蛋白1(CCAR1)表达的影响。方法常规培养人肺泡Ⅱ型上皮细胞系A549细胞。分为正常对照组(无过氧化氢处理的A549细胞)、0.1mmol/L过氧化氢处理的A549细胞组、0.5mmol/L过氧化氢处理的A549细胞组和1.0mmol/L过氧化氢处理的A549细胞组。利用DNA梯状电泳检测细胞凋亡。免疫荧光细胞化学检测CCAR1蛋白在A549细胞中的表达和分布。Western blot检测过氧化氢对A549细胞中CCAR1蛋白表达的影响。比色法测定半胱氨酸蛋白水解酶(Caspase-3)的活性。结果DNA梯状电泳检测显示,1.0mmol/L过氧化氢处理A549细胞24h,电泳出现反映细胞凋亡的梯形条带。免疫荧光细胞化学检测显示CCAR1主要定位在细胞核,但胞质中也有分布。Western blot结果显示过氧化氢呈剂量依赖性地诱导A549细胞中CCAR1蛋白表达上调(Pa<0.05)。CCAR1蛋白的表达与促凋亡的Caspase-3的活性呈显著正相关(r=0.7212P<0.05)。结论氧化应激诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞中促凋亡基因CCAR1蛋白表达上调。CCAR1可能参与了氧化应激诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡的调控,其机制可能涉及到Caspase-3活性改变。

细胞凋亡抑制基因和促凋亡基因在喉鳞癌组织中的表达与临床意义

目的研究细胞凋亡抑制基因(bcl-2)、促凋亡基因(Bax)在喉鳞癌中的表达情况及其临床意义。方法收集2017年1月至7月在本院确诊的54例喉鳞癌患者的癌组织和对应的癌旁组织,用免疫印迹法测定这2种组织中Bcl-2蛋白、Bax蛋白的表达情况;用免疫组化(SP)法测定Bcl-2蛋白、Bax蛋白与血管内皮生长因子-C(VEGF-C)蛋白水平及其阳性表达情况,探讨Bcl-2蛋白、Bax蛋白表达与喉鳞癌患者临床病理特征之间的关系,分析Bcl-2蛋白、Bax蛋白的表达与VEGF-C表达的关系,探讨Bcl-2蛋白、Bax蛋白阳性表达病例在这2种组织中微血管密度(MVD)间的差异。结果免疫印迹法测得:喉鳞癌患者癌组织中的Bcl-2蛋白、Bax蛋白表达明显高于对应癌旁正常组织(P<0.05)。SP测得:Bcl-2蛋白、Bax蛋白、VEGF-C蛋白在喉鳞癌患者癌组织中的表达阳性率分别为53.7%,50%,42.6%,明显高于癌旁正常组织,差异均有统计学意义(均P<0.05)。喉鳞癌患者癌组织中Bcl-2蛋白、Bax蛋白表达阳性率跟喉鳞癌临床分期、喉鳞癌复发或转移、淋巴结转移均相关(均P<0.05)。经Pearson相关性分析,喉鳞癌患者癌组织中Bcl-2蛋白、Bax蛋白的表达均与VEGF-C表达呈正相关(r=0.762,0.703;均P<0.05)。在癌组织中,Bcl-2蛋白、Bax蛋白阳性表达病例MVD值分别为56.21±1.76,52.05±1.31;均明显高于癌旁正常组织中MVD值(30.83±1.45,29.93±1.27),差异均有统计学意义(均P<0.05)。在癌组织中,Bcl-2蛋白、Bax蛋白阴性表达病例MVD值分别为31.03±2.14,30.16±1.95,与癌旁正常组织中的MVD值比较差异无统计学意义(均P>0.05)。结论喉鳞癌组织中Bcl-2蛋白和Bax蛋白存在异常表达,其可能会促进VEGF-C表达,以诱发微血管在喉鳞癌癌组织中的新生。

丹参对CAPD大鼠腹膜间皮细胞凋亡及凋亡相关基因的影响

目的:探讨丹参对持续性非卧床式腹膜透析(CAPD)相关性腹膜硬化的治疗价值。方法:将40只大鼠随机分为对照组(A组,给予0.9%NaCl40mL/d),凋亡模型组(B组,给予4.25%腹透液40mL/d),低剂量丹参组(C组,给予4.25%腹透液40mL/d和600mg·kg-·1d-1丹参),高剂量丹参组(D组,给予4.25%腹透液40mL/d和2400mg·kg-·1d-1丹参)。8周后检测腹膜间皮细胞凋亡及促凋亡基因(Fas)和抑凋亡基因(Bcl-2)的蛋白表达,计算凋亡细胞指数(AI)和基因的蛋白阳性表达指数(PEI)。结果:B组FasPEI高于A组(P<0.01),C、D组FasPEI明显低于B组(P<0.01),与A组相近(P>0.05)。A、B、C组Bcl-2PEI差别无统计学意义,D组Bcl-2PEI明显高于A、B组(P<0.01)。B组AI明显高于A组,C、D组AI明显低于B组(P<0.01)。结论:丹参可通过下调Fas基因的蛋白表达,上调Bcl-2基因的蛋白表达,对CAPD时腹膜间皮细胞凋亡产生抑制作用。

脑缺血再灌注后细胞凋亡基因的研究进展

急性脑血管病以高发病率、高死亡率、高致残率给社会、家庭和患者带来沉重的经济和精神负担。其治疗原则是及时恢复缺血区的血液灌注。然而在某些情况下缺血后再灌注不仅没有使组织功能恢复,反而使缺血所致的功能障碍和结构破坏进一步加重，这种现象即缺血再灌注损伤（ischemia reperfusion injury）。许多研究表明，脑缺血再灌注损伤过程包括坏死和凋亡。脑缺血再灌注可诱导多种基因表达，包括促凋亡基因和抑制凋亡基因。这些基因编码的蛋白质产物可直接或间接参与凋亡的调控。

地西他滨对体外培养人子宫肌瘤细胞增殖及凋亡相关基因表达的影响

目的探讨地西他滨对体外培养人子宫肌瘤细胞增殖及凋亡相关基因表达的影响。方法选取29例子宫肌瘤患者的子宫肌瘤及肌瘤旁正常组织细胞进行原代培养。将子宫肌瘤细胞分为对照组及0.1μmol/L、0.5μmol/L、1.0μmol/L地西他滨组,地西他滨组给予相应浓度的地西他滨进行干预,24 h、48 h、72 h后检测各组细胞增殖及凋亡情况。提取子宫肌瘤细胞、肌瘤旁正常组织细胞及经0.1μmol/L、0.5μmol/L、1.0μmol/L地西他滨干预的子宫肌瘤细胞的总RNA,检测X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)、XIAP相关因子1(XAF1)、P21、P16、细胞周期蛋白D1(Cyclin-D1)m RNA表达水平。结果 0.1μmol/L、0.5μmol/L、1.0μmol/L地西他滨组子宫肌瘤细胞增殖抑制率及细胞凋亡比例依次升高(均P<0.05),3组的抑制率及细胞凋亡比例均随时间延长而升高(均P<0.05)。与瘤旁子宫肌细胞比较,子宫肌瘤细胞的XIAP和Cyclin D1 m RNA表达水平升高,而XAF1、P16和P21 m RNA表达水平减低(均P<0.05);与未经地西他滨处理的子宫肌瘤细胞相比,0.5μmol/L、1.0μmol/L地西他滨组XIAP和Cyclin D1 m RNA表达水平下调而XAF1及P21 m RNA表达水平上调,1.0μmol/L地西他滨组P16 m RNA表达水平上调(均P<0.05)。结论地西他滨可抑制子宫肌瘤细胞的增殖并促进其凋亡,并可抑制XIAP、Cyclin-D1等抗凋亡基因表达并上调XAF1、P16和P21等促凋亡基因表达。

瘦素对胃癌细胞系SGC7901增殖和凋亡的影响

目的 观察人胃癌细胞系SGC7901瘦素及瘦素受体的表达及瘦素对SGC7901增殖及凋亡的影响。方 法 免疫组化和RT-PCR检测SGC7901瘦素和瘦素受体的表达,噻唑蓝比色实验观察瘦素对SGC7901的增殖 作用,流式细胞仪检测瘦素对细胞周期及凋亡的影响,RT-PCR方法半定量检测瘦素对促凋亡基因bax mRNA 表达的影响。结果SGC7901既表达瘦素又表达瘦素受体,重组瘦素呈剂量依赖性地促进细胞的增殖,并明显 抑制细胞的凋亡,瘦素可抑制促凋亡基因bax mRNA的表达。结论 瘦素可能以自分泌方式调节人胃癌细胞系 SGC7901的增殖及凋亡。

川芎嗪和葛根素配伍使用对脑缺血大鼠神经细胞凋亡的影响

目的观察川芎嗪和葛根素合适配伍对脑缺血大鼠神经细胞凋亡的影响。方法雄性SD大鼠48只,随机分为6组,每组8只。假手术组、模型组给予等量生理盐水;川芎嗪组给予川芎嗪50 mg/kg;葛根素组给予葛根素50 mg/kg;川芎嗪+葛根素组给予川芎嗪50 mg/kg,葛根素50 mg/kg;阳性对照组给予依达拉奉3 mg/kg。给药方式均为腹腔注射,给药时间为缺血后0 h、6 h。通过神经功能评分Western Blot检测缺血区脑组织凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达和组织免疫荧光标记观察川芎嗪和葛根素配伍对脑缺血损伤后的细胞凋亡影响情况。结果川芎嗪+葛根素组脑缺血损伤大鼠神经功能评分为(1.83±0.41)分,较模型组(2.67分±0.52分)明显降低(P<0.01)。与模型组相比,川芎嗪+葛根素组促凋亡相关基因Bax蛋白表达降低,抗凋亡相关基因Bcl-2蛋白表达增加。结论川芎嗪和葛根素配伍治疗脑缺血可能是通过降低缺血脑组织促凋亡相关蛋白和增加抗凋亡相关蛋白表达而达到治疗效果。

汉族和维吾尔族妇女子宫内膜异位症凋亡调节基因Fas和c-myc的对比研究

目的 检测凋亡调节基因Fas和c myc在汉族和维吾尔族妇女子宫内膜异位症中的表达 ,以探讨凋亡调节基因在子宫内膜异位症发病中的作用。方法 2 0 0 2年 9月至 2 0 0 3年 4月新疆医科大学第一附属医院妇科应用免疫组化法 ,检测凋亡调节基因Fas和c myc在无异位症妇女的正常子宫内膜与卵巢子宫内膜异位症患者的在位内膜 ,异位内膜中的表达。结果 Fas和c myc主要定位于子宫内膜的腺上皮中 ,其中Fas在异位症患者在位及异位内膜中表达较低 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,c myc在异位症患者异位、在位内膜中的表达较无异位者增强 ,差异有显著性意义 (P <0 0 1 )。维、汉族内膜异位症异位内膜中这两者的表达差异无统计学意义 (P >0 0 5 )。结论 子宫内膜异位症中凋亡调节基因的表达与无异位症者不同 ,促凋亡基因的表达减弱 ,抑制凋亡基因的表达增强 ,有利于异位内膜的种植 ,生存和发展。维族和汉族内膜异位症的表达差异无显著性。