重组人促卵泡激素联合绒促性素治疗排卵障碍性不孕症患者的效果

目的:研究重组人促卵泡激素联合绒促性素治疗排卵障碍性不孕症(ovulation dysfunction infertility,ODI)患者的效果。方法:选取2020年7月—2023年7月滨州医学院附属医院收治的100例ODI患者作为研究对象,以电脑编号单双数字法随机分为联合组(n=50)与参考组(n=50)。参考组实施绒促性素肌注治疗,联合组在参考组基础上应用实施重组人促卵泡激素注射治疗。比较两组优势卵泡直径与成熟卵泡数量,内分泌指标[促卵泡生成素(follicle-stimulating hormone,FSH)、促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、雌二醇(estradiol,E2)、孕酮(progesterone,P)]水平,成功排卵率、妊娠率,卵巢血流动力学[搏动指数(pulsation index,PI)、阻力指数(resistance index,RI)及收缩期峰值流速(peak systolic velocity,PSV)]。结果:治疗后,两组优势卵泡直径、成熟卵泡数量及FSH、LH、E2、P、PI、PSV水平较治疗前升高,且联合组较参考组高,两组RI较治疗前降低,且联合组较参考组低,差异有统计学意义(P<0.05);联合组成功排卵率、妊娠率较参考组高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:重组人促卵泡激素与绒促性素联用可提高ODI患者卵巢功能,改善内分泌指标水平,提高排卵率与妊娠率。

左炔诺孕酮宫内节育系统联合促性腺激素释放激素激动剂对子宫内膜异位症患者促卵泡激素和微炎症因子的影响

目的观察左炔诺孕酮宫内节育系统联合促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-α)治疗对子宫内膜异位症患者促卵泡激素和微炎症因子的影响。方法选取西安国际医学中心医院2020年10月至2023年10月收治的86例子宫内膜异位症患者,按照随机数字表法分为研究组和对照组,各43例,对照组采用GnRH-α治疗,研究组则联用左炔诺孕酮宫内节育系统,比较2组方案的临床疗效。结果研究组治疗总有效率高于对照组,且月经量评分、子宫内膜下血流阻力指数(RI)、搏动指数(PI),以及血管内皮生长因子(VEGF)、糖类抗原125(CA125)、促卵泡激素(FSH)、雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平均低于对照组(P<0.05)。结论左炔诺孕酮宫内节育系统联合GnRH-α治疗子宫内膜异位症效果较好,能够有效调节患者性激素水平,抑制子宫内膜异常增殖,改善子宫血流动力学和微炎症刺激,从而缓解临床症状和预后表现,实用性较高。

DMB衍生-高效液相色谱法测定重组人促卵泡激素中的唾液酸含量

目的建立采用4,5-亚甲二氧基-1,2-苯二胺二盐酸盐(DMB)衍生-高效液相色谱-荧光检测器(HPLCFLD)法(DMB衍生法)同时测定重组人促卵泡激素(rhFSH)中2种唾液酸组分N-羟乙酰神经氨酸(Neu5Gc)和N-乙酰神经氨酸(Neu5Ac)含量的方法。方法将DMB衍生法与邻苯二胺衍生-高效液相色谱法(邻苯二胺衍生法)进行对比研究,对DMB衍生法中的水解条件进行优化并确定最终方法为rhFSH原液经酸水解后,采用DMB进行衍生,经Agilent ZORBAX 300SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,采用荧光检测器检测。结果与邻苯二胺衍生法相比,DMB衍生法能够实现Neu5Gc与Neu5Ac相关杂质的有效分离。该方法Neu5Gc和Neu5Ac分别在0.5~5.0μg·mL^(-1)(r=0.9999)和25~250μg·mL^(-1)(r=0.9998)浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系;Neu5Gc和Neu5Ac的检测限分别为11.07、10.30 ng·mL^(-1),定量限分别为33.21、20.60 ng·mL^(-1),两者回收率分别为(99.63±1.33)%(n=9)和(100.62±1.58)%(n=9),RSD分别为1.3%(n=9)和1.5%(n=9)。结论该方法专属性强、灵敏度高、精密度和准确度良好,可用于准确测定rhFSH中唾液酸Neu5Gc和Neu5Ac的含量。

牛促卵泡激素α亚基cDNA的克隆与序列分析

从牛脑垂体中提取总ＲＮＡ，分离ｍＲＮＡ，反转录获得ｃＤＮＡ，ＰＣＲ扩增获得长为３８０ｂｐ的牛促卵泡激素α亚基ｃＤＮＡ片段，将它克隆于ｐＵＣ１９中，进行序列分析，结果表明：所克隆的α亚基基因编码区序列与Ｅｒｗｉｎ所发表的序列基本相同，仅编码第２４位赖氨酸的密码有差异，同时将所获基因的核苷酸序列及相应氨基酸序列与人、啮齿类的同类基因相比较，具有很高的同源性．

两种不同来源促卵泡激素对早卵泡期长效长方案不同体重指数患者IVF/ICSI-ET临床结局的影响

目的:比较不同体重指数(BMI)预期卵巢正常反应患者在早卵泡期长效长方案(长长方案)体外受精/卵胞浆内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)中应用尿促卵泡激素(uFSH)和基因重组人促卵泡激素(rFSH)临床结局的差异。方法:回顾性收集2015年9月至2019年12月在郑州大学第三附属医院生殖医学中心行长长方案IVF/ICSI-ET助孕且预期卵巢正常反应的患者,按照BMI分为偏瘦或正常组(BMI<24 kg/m2,1056例)、超重组(24 kg/m2≤BMI<28 kg/m2,554例)和肥胖组(BMI≥28 kg/m2,112例)。在3组不同BMI的患者中,分别对使用uFSH或rFSH进行超促排卵IVF/ICSI-ET助孕的两组患者以年龄、窦卵泡数、不孕年限、基础FSH和抗米勒管激素(AMH)进行1∶1倾向性评分匹配,对匹配后患者的数据进行分析。比较两组患者Gn启动量、Gn时间、Gn总量、Gn费用,HCG日内膜厚度、LH、E2、P、≥14 mm卵泡数、获卵数、可利用胚胎数以及两组患者优质胚胎率、中重度卵巢过度刺激(OHSS)综合征发生率、胚胎着床率、临床妊娠率、流产率、活产率、累积妊娠率和累积分娩率的差异。结果:3组不同BMI的患者rFSH组和uFSH组比较,获卵数、中重度OHSS发生率、临床妊娠率、活产率差异均无统计学意义(P>0.05),uFSH组的Gn启动量均高于rFSH组(P均<0.05),而Gn费用低于rFSH组(P<0.05);偏瘦或正常组和超重uFSH组的Gn总量均高于rFSH组(P<0.05);肥胖组中uFSH组的优质胚胎率(44.03%)高于rFSH组(32.10%),差异有统计学意义(P<0.001)。结论:uFSH的临床有效性不低于rFSH,控制性卵巢刺激有效性低于rFSH;uFSH成本低,更具有经济学优势;肥胖患者可能更适合选用uFSH进行超促排卵。

血清雌二醇、促卵泡激素、黄体生成素在中枢性性早熟女童诊断中的价值分析

探究在中枢性性早熟女童的诊断中,应用血清雌二醇、促卵泡激素、黄体生成素的临床价值。方法 将本次研究开展时间的起始点确定为2022年1月,将截止点确定为2024年10月,将此时段内,在我院接受诊治的中枢性性早熟女童100例纳入观察组。将此时段内,在我院实施体检的健康发育女童100例纳入对照组。记录并比较两组女童的血清雌二醇、促卵泡激素和黄体生成素指标的检测结果,并利用ROC曲线图对这些指标诊断中枢性性早熟的临床价值展开分析。结果 对照组女童的血清雌二醇、促卵泡激素、黄体生成素指标数据均明显低于观察组,(p<0.05)。血清雌二醇、促卵泡激素、黄体生成素联合检测的灵敏度、特异度及准确度就明显高于单独检测,(p<0.05)。结论 在中枢性性早熟女童的诊断中,血清雌二醇、促卵泡激素与黄体生成素联合检测具备较高的应用价值,有助于临床医师对病情的判断和后续治疗。

左归饮对围绝经期大鼠卵巢促卵泡激素受体表达的影响及机制

目的探讨左归饮对围绝经期大鼠卵巢促卵泡激素受体(follicle-stimulating hormone receptor,FSHR)表达的影响及机制。方法采用围绝经期大鼠动物模型,分别给予低、中、高剂量左归饮灌胃处理8周,用RT-PCR和免疫组化法检测卵巢FSHR mRNA及蛋白的表达。未成年大鼠注射孕马血清后收集培养卵巢颗粒细胞,用RT-PCR方法检测给予不同处理因素后FSHR mRNA的表达水平。结果(1)围绝经期大鼠卵巢FSHR的表达明显低于青年组(P<0.01),给予不同剂量左归饮处理后,FSHR表达均显著升高(P<0.01)。(2)培养颗粒细胞给予不同处理因素,结果显示,与对照组相比,左归饮提取物可促进FSHR mRNA表达(P<0.01);与单纯加入左归饮提取物相比,同时加入左归饮提取物和福司考林(Forskolin)可进一步促进FSHR mRNA的表达(P<0.01),同时加入左归饮提取物和酪氨酸蛋白激酶抑制剂Genistein则能明显削弱左归饮的促进作用。结论左归饮可通过上调围绝经期大鼠卵巢FSHR的表达,提高卵巢对卵泡刺激素的反应性,改善围绝经期卵巢功能。左归饮对FSHR mRNA表达的促进作用可能是通过激活腺苷酸环化酶-蛋白激酶A(cAMP-PKA)及酪氨酸蛋白激酶途径实现的。

超排卵时卵巢对促性腺激素的反应与颗粒细胞促卵泡激素受体的表达

目的 :探讨促排卵周期卵巢对促性腺激素反应性与颗粒细胞促卵泡激素受体 (FSHR)表达的关系。方法 :根据取卵时卵泡发育数不同 ,将卵巢对促排卵药物的反应分为低反应型 (卵泡数≤ 3个 )、中反应型 (卵泡数 4～13个 )和高反应型 (卵泡数≥ 14个 ) ,分别为 11例、15例和 13例。采用逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)测定 3种反应类型的卵泡颗粒细胞 FSHR m RNA的表达量。结果 :低反应型 FSHR m RNA表达量显著低于中、高反应型 (相对积分值分别为 0 .5 4± 0 .0 7、0 .90± 0 .17和 1.2 0± 0 .4 5 ,P<0 .0 5 )。结论 :卵巢对促性腺激素的反应与颗粒细胞FSHR m RNA的表达量高低有关。

东北虎促卵泡激素和促黄体激素基因的克隆及其序列分析

本研究首次从东北虎 (Pantheratigrisaltaica)脑垂体提取总RNA ,利用RT PCR技术扩增出东北虎垂体促性腺激素α亚基、促卵泡激素 (FSH) β亚基和促黄体激素 (LH) β亚基的编码区序列 ,并进行克隆、测序和比较分析。结果表明 ,其α亚基、FSHβ亚基、LHβ亚基基因的开放阅读框分别为 36 3bp、 390bp和 4 2 9bp ,分别编码 12 0、 12 9和 14 2氨基酸的前体蛋白。与已发表的人、牛、绵羊、猪、大鼠、小鼠等物种相应序列比较 ,无论在核苷酸水平 ,还是在氨基酸水平都显示出较高的同源性 (6 4 7%～ 96 6 %) ,其中与猪的同源性最高(86 %～ 96 6 %)。东北虎的基因序列还具有其明显的特异性 ,首次发现LHβ亚基cDNA编码的前体蛋白在信号肽部分比其它物种相应序列多一个亮氨酸残基 (Leu)。

籽鹅促卵泡激素α亚基基因的克隆、序列分析及其原核表达载体的构建

以雌性籽鹅脑垂体的总RNA为模板,利用特异性引物通过RT-PCR扩增获得长为363 bp的籽鹅促卵泡激素α亚基的cDNA片段,将扩增的促卵泡激素α亚基基因片段克隆至pMD18-T载体后进行测序。将测序结果与鸡、鹌鹑、火鸡、鼠、羊、牛等多种禽类和哺乳动物的该基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列进行同源性分析。结果表明,这些物种促卵泡激素α亚基基因序列具有较高的保守性,其中与鸡、鹌鹑、火鸡的核苷酸同源性最高,均为95.9%,推导的氨基酸序列与鸡、鹌鹑、火鸡的同源性最高,均为97.5%。为了对克隆的籽鹅促卵泡激素α亚基基因功能研究提供基础,将籽鹅促卵泡激素α亚基基因克隆至pET-32a(+)原核表达载体。

促卵泡激素受体结合抑制剂抑制小鼠卵巢发育

目的探讨不同浓度的促卵泡激素受体结合抑制剂(FRBI)对小鼠卵巢发育、生殖激素分泌及其蛋白表达的影响。方法给FRBI组小鼠分别肌肉注射20、30和40 mg/kg FRBI;促卵泡激素(FSH)组注射10 IU/kg FSH;对照组(CG)注射0.2 mL 0.9%氯化钠溶液,每组均连续注射5 d。精确称量每只小鼠体质量和双侧卵巢质量;测定卵巢组织切片中皮质厚度(OCT)和次级卵泡形态大小;ELISA测定血清FSH浓度;Western blot检测卵巢FSH受体(FSHR)表达。结果实验第15天起,FRBI组小鼠卵巢质量低于CG和FSH组(P<0.05),以FRBI-30 mg组小鼠卵巢质量最低;FRBI组OCT、次级卵泡最大纵径(MLD)和最大横径(MTD)低于CG组和FSH组(P<0.05),FRBI-40 mg组小鼠卵巢的MLD和MTD值最低;第15天时,FRBI-30 mg组小鼠血清FSH的浓度最低;随着FRBI注射剂量的增加,卵巢中FSHR表达水平逐渐降低,FRBI组的FSHR蛋白水平明显低于FSH组(P<0.05)。结论 FRBI能抑制卵巢和卵泡发育,降低血清FSH浓度,下调卵巢FSHR蛋白表达水平。

人促卵泡激素光激化学发光免疫分析法的建立及性能评价

目的利用光激化学发光免疫分析法(AlphaLISA)建立人促卵泡激素(hFSH)的快速检测试剂。方法使用2株配对的hFSH单克隆抗体,一株hFSH单克隆抗体用生物素标记,另一株hFSH单克隆抗体包被于受体微球上,与包被有链霉亲合素的供体微球共同构成检测试剂,优化反应体系并对试剂的各项性能指标进行评价。结果自制hFSH试剂分析敏感性和功能敏感性分别为0.09和0.12 U/L,线性测量范围为0.09～192.00 U/L,试剂的分析内变异系数(CV)和分析间CV分别为4.2%～7.1%和7.5%～8.3%,均<10.0%,与人黄体生成素(hLH)、人促甲状腺素(hTSH)和人绒毛膜促性腺激素(hCG)的交叉率分别为0.16%、0.08%和0.02%。100份临床血清样本用本试剂与西门子Immulite 2000促卵泡生成激素化学发光(CLIA)检测试剂盒检测,其相关系数为0.979(P<0.001)。结论自制hFSH AlphaLISA试剂的各项性能指标均能达到临床检测要求,可用于临床血清样本hFSH浓度的测定。

血清抗苗勒管激素和促卵泡激素水平在多囊卵巢综合征诊断中的价值

目的:分析血清抗苗勒管激素(AMH)和促卵泡激素(FSH)水平对多囊卵巢综合征(PCOS)的诊断价值。方法:106例PCOS患者作为PCOS组、同期92例健康妇女作为对照组,检测2组妇女月经周期血清AMH及FSH水平、PCOS组内不同症状患者血清AMH及FSH水平;建立AMH、FSH单一及联合检测对PCOS患者预测的受试者工作特征曲线(ROC)下面积(AUC),分析AMH、FSH单一指标检测及联合检测预测PCOS的诊断价值。结果:PCOS组患者血清AMH水平明显高于对照组、FSH明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);PCOS组中稀少或无排卵、高雄激素血症(HA)、卵巢多囊样改变(PCOM)者基础血清AMH水平明显高于无症状者,FSH水平明显低于无症状者,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线显示基础血清AMH、FSH单一指标检测及联合检测均对PCOS均具有预测价值,血清AMH对PCOS的临床价值较高,其预测PCOS的最佳临界值为5.5μg/L,此时敏感度和特异度分别为84.5%、70.1%,AUC为0.843,AMH与FSH联合检测PCOS的敏感性和特异度分别为89.8%、72.7%,AUC为0.906。结论:PCOS患者体内AMH、FSH分泌异常,患者血清AMH和FSH水平可作为预测PCOS的指标,两项指标联合检测的价值更高。

补肾养精汤与活血汤周期疗法治疗肾虚血瘀型多囊卵巢综合征疗效及对血清促卵泡激素的影响

目的探讨补肾养精汤与活血汤周期疗法治疗肾虚血瘀型多囊卵巢综合征(PCOS)患者疗效及对血清促卵泡激素的影响。方法将72例肾虚血瘀型PCOS患者随机分为2组,对照组36例给予克罗米芬治疗,研究组36例在对照组治疗基础上加用补肾养精汤与活血汤周期疗法,2组均持续治疗3个月。记录2组治疗前后中医证候积分,比较2组治疗后临床疗效,观察2组治疗前后血清促卵泡素激素(FSH)以及卵巢B超检查指标水平变化情况。结果治疗后,研究组中医证候积分明显低于对照组(P<0.05),治疗总有效率明显高于对照组(P<0.05);2组FSH均明显升高(P均<0.05),且研究组明显高于对照组(P<0.05);2组卵泡数目和卵巢体积均明显降低(P均<0.05),且研究组均明显低于对照组(P均<0.05)。结论补肾养精汤与活血汤周期疗法治疗肾虚血瘀型PCOS患者疗效好,可升高血清促卵泡激素水平,值得临床推广应用。

重组人促卵泡激素(rhFSH)肽图分析方法研究

目的建立重组人促卵泡激素(rh-FSH)的标准肽图分析方法。方法通过超滤、透析、冷冻干燥法富集制备rh-FSH对照品。通过尿素变性、二硫苏糖醇(DTT)还原、碘乙酸酰基化制备供试品溶液。采用N型-糖苷酶F(PNGaseF)酶解去除rh-FSH糖侧链,经SDS-PAGE验证切糖结果后,用胰蛋白酶水解,酶解所得肽段通过RP-HPLC分析,得到rh-FSH肽图。结果利用国外原研厂rh-FSH制剂富集制备的rh-FSH结构完整,可用作rh-FSH肽图分析的对照品。国产样品的肽图谱与对照品一致。结论建立的肽图分析方法可作rh-FSH产品的结构确证。

促卵泡激素的径向色谱纯化工艺

比较了径向离子交换色谱与经典离子交换色谱在纯化工艺放大过程中的分离效果 ,证实了径向色谱比经典色谱更适合于促卵泡激素 (FSH)的纯化 ,并建立了适合于大规模生产FSH的径向色谱纯化新工艺。纯化后FSH的比活性为 180IU/mg ,活性回收率为 5 6 % 。

人促卵泡激素时间分辨荧光免疫分析检测试剂的研制

目的利用时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）技术建立人血清促卵泡激素（hFSH）的检测试剂。方法采用双抗体夹心法建立hFSH—TRFIA检测试剂，对试剂的各项指标进行评价。结果hFSH—TRFIA检测试剂的测量范围为1～256U／L，灵敏度为0．08U／L，分析内和分析间的精密度分别为2．6％～4．2％，6．1％～8．6％，与人黄体生成素（hLH）、人促甲状腺素（hTsH）和人绒毛膜促性腺激素（hCG）的交叉率分别为0．14%，0．08％和0．01％。30份异常血样用该试剂与进口的同类试剂同时检测，其相关系数为0．993。结论试剂各项指标均达到临床检测要求，可替代国外同类产品。

绝经后女性促卵泡激素水平与血脂指标的关系

目的:探讨绝经后女性促卵泡激素(FSH)水平与各项血脂指标的关系,为评估绝经后女性的血脂异常风险提供依据。方法:选取绝经1年以上女性129例,依据FSH中位数将研究对象分为低水平FSH组(FSH<57.6IU·L-1)和高水平FSH组(FSH≥57.6IU·L-1)。收集受试者身高、体质量、体质量指数(BMI)、年龄、绝经年龄、绝经年限、吸烟史和基础疾病史等资料,采用统一方法检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、非高密度脂蛋白胆固醇(non-HDL-C)、雌二醇(E2)、FSH、静脉空腹血糖(FBG)和血尿酸(SUA)等指标。应用多因素Logistic回归分析FSH水平与血脂异常的关系。结果:纳入本研究的绝经后女性受试者平均年龄为(61.22±7.30)岁,绝经年龄为(49.97±4.00)岁,绝经年限为(11.16±7.98)年。绝经后女性受试者并发血脂异常的比例为65.9%(85/129),低水平FSH组和高水平FSH组受试者并发血脂异常的比例比较差异无统计学意义(P>0.05)。低水平FSH组受试者的TG水平高于高水平FSH组(P<0.01),而HDL-C水平低于高水平FSH组(P<0.01),2组间TC、LDL-C和non-HDL-C水平比较差异无统计学意义(均P>0.05)。多因素Logistic回归分析,校正E2水平、年龄、绝经年限、高血压病史、糖尿病史、有无脂肪肝和BMI等级因素后,FSH水平与TG升高(≥2.3mmol·L-1)呈负相关关系(P<0.05),FSH每升高10IU·L-1则TG升高的风险下降29.5%(95%CI:3.6%~48.5%),而FSH水平与TC升高(≥6.2mmol·L-1)、LDL-C升高(≥4.1mmol·L-1)、HDL-C降低(<1.0 mmol·L-1)和non-HDL-C升高(≥4.9 mmol·L-1)无明显相关性(均P>0.05)。结论:绝经后女性的FSH水平与TG升高呈明显负相关关系,提示低水平FSH是绝经后女性血脂异常的危险因素。