国产尿促卵泡素(FSH)促排卵治疗的临床疗效观察

目的观察国产FSH用于促排卵治疗的临床疗效。方法选取2002年8月～2003年4月妇科门诊就医、符合入选标准患者共44例,随机分成2组,实验组与对照组分别22例,对照药物为进口高纯度FSH制剂MetrodinHP,激素撤退性出血或月经第3～5天开始肌注国产FSH或MetrodinHP75IU/日,B超监测优势卵泡直径≥18mm时,停药,改为HCG10000iu,肌注1次,注射后30～36小时同房或人工授精,HCG用药后第2天B超检查以证实排卵,出现卵泡发育或排卵或妊娠者判定为治疗有效。结果两组各22例均为显效病例,其中出现排卵者均为21例,排卵率均为95.5%。实验组妊娠者共6例,妊娠率28.6%;对照组妊娠者共5例,妊娠率23.8%。两组比较,治疗有效率、排卵率及妊娠率均无显著性差异。治疗组出现1例不良反应,停止治疗,对症处理后缓解。结论国产FSH与MetrodinHP在促排卵治疗中有一定的等效性,安全性可靠,经济有效,值得临床推广应用。

抑制素A对牦牛颗粒细胞FSH、LH及其受体表达的影响

为了探明抑制素A(INHA)对牦牛卵泡颗粒细胞中促卵泡素(FSH)和促黄体素(LH)与其受体结合发挥的作用,通过体外培养牦牛卵泡颗粒细胞,采用免疫荧光技术(IF)检测促卵泡素受体(FSHR)和促黄体素受体(LHR)在颗粒细胞中的分布情况,用不同浓度外源性INHA(0、1.25、2.5、5、10、20 ng·mL^(-1))作用12 h后,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测颗粒细胞中FSHβ、LHβ、FSHR、LHR基因的表达情况,采用酶联免疫分析试验(ELISA)检测细胞内外FSH、LH的含量。结果显示,FSHR和LHR在颗粒细胞质与细胞核中均有表达。FSHβ和LHβ基因在颗粒细胞中的表达随INHA浓度的增大呈先降后升的趋势;INHA浓度接近5 ng·mL^(-1)时,FSHβ表达最低;INHA浓度接近10 ng·mL^(-1)时,LHβ表达最低;FSHR和LHR基因的表达与INHA浓度呈负相关。INHA浓度接近5 ng·mL^(-1)时,颗粒细胞内外FSH含量最低;INHA浓度接近10 ng·mL^(-1)时,颗粒细胞内外LH含量最低;其他INHA浓度下,当颗粒细胞内容物中FSH和LH含量降低时,细胞上清中含量升高。综上所述,INHA对FSHR和LHR基因在颗粒细胞中的表达存在明显的抑制作用,并且影响FSHβ和LHβ基因在颗粒细胞中的表达。研究表明INHA可以抑制牦牛卵泡颗粒细胞中FSH、LH与其受体的结合;同时,INHA对颗粒细胞内外FSH和LH的含量具有重要调节作用。本研究为进一步探索抑制素对雌性牦牛生殖调控的影响提供了理论依据。

不同日粮组成中添加褪黑素对乌鸡垂体分泌促卵泡素和促黄体素的影响

为了研究褪黑素(MLT)对乌鸡垂体分泌促卵泡素(FSH)和促黄体素(LH)的影响,试验采用体外细胞培养和放射免疫测定法(RIA),研究了不同日粮组成饲喂乌鸡12 d后,添加100 pg/mL MLT对体外培养乌鸡垂体细胞分泌FSH和LH的影响。选择15只乌鸡,分成3组,即高能组、中能组、低能组。结果表明:低能组与高能组相比,对FSH和LH的影响分别为极显著(P<0.01)和显著(P<0.05),低能组与中能组相比,对FSH和LH的影响分别为极显著(P<0.01)和显著(P<0.05),而中能组与高能组相比,对FSH和LH的影响均不显著(P>0.05)。说明在不同日粮组成中添加MLT对乌鸡垂体分泌FSH和LH有促进作用。

促卵泡素对体外培养牛卵泡类固醇合成相关基因表达的影响

本研究旨在探究促卵泡素(follicle stimulating hormone,FSH)处理对体外培养的牛有腔卵泡颗粒细胞和膜细胞类固醇激素合成相关基因表达的影响。采集牛卵巢表面直径9~11 mm的有腔卵泡,用含不同浓度FSH的DMEM/F12体外培养牛有腔卵泡24 h。提取卵泡颗粒细胞、膜细胞RNA并反转录成cDNA,利用实时荧光定量PCR检测卵泡颗粒细胞、膜细胞中类固醇激素合成酶基因(CYP11A1、3β-HSD、CYP17A1、CYP19A1、17β-HSD)和促性腺激素受体基因(FSHR、LHR)的表达水平。结果显示,FSH处理上调了颗粒细胞中CYP11A 1、3β-HSD和CYP19A 1基因表达,其中,25 ng/mL FSH处理极显著上调了CYP11A 1基因表达(P<0.01),10 ng/mL FSH处理显著上调了3β-HSD基因表达(P<0.05),50 ng/mL FSH处理显著上调了CYP19A 1基因表达(P<0.05);50 ng/mL FSH处理显著或极显著上调了膜细胞中CYP11A 1、3β-HSD和CYP17A 1基因表达(P<0.05;P<0.01),但在10和25 ng/mL FSH处理组中CYP11A 1、3β-HSD和CYP17A 1基因表达显著或极显著下调(P<0.05;P<0.01)。对FSHR、LHR基因研究结果显示,不同浓度FSH处理对颗粒细胞中FSHR、LHR基因的表达均无显著影响(P>0.05),只有25和50 ng/mL FSH处理显著或极显著上调了膜细胞中LHR基因表达水平(P<0.05;P<0.01),且不同处理组之间膜细胞中CYP11A 1、3β-HSD和CYP17A 1基因的表达变化与LHR基因表达变化趋势较一致。结果表明,FSH处理可提高牛有腔卵泡颗粒细胞中CYP11A 1、3β-HSD和CYP17A 1基因的表达,膜细胞中CYP11A 1、3β-HSD和CYP17A 1基因对LH的刺激更敏感,FSH可能通过影响LHR基因的表达来调节膜细胞中类固醇合成酶基因的表达。

非繁殖季节中国美利奴羊血清E_2、P4、FSH、LH激素变化规律研究

为了在非繁殖季节判断绵羊的发情状况,试验以新疆高海拔地区中国美利奴羊为研究对象,采用酶联免疫测定(ELISA)法测定绵羊血清中雌二醇(E2)、孕酮(P4)、促卵泡素(FSH)、促黄体生成素(LH)的含量,研究激素诱导发情羊、发情症状不明显羊、不发情羊体内激素分泌规律的差异。结果表明:激素诱导发情羊的E2含量比不发情羊高,差异显著(P<0.05);但是在P4、FSH、LH水平上,激素诱导发情羊要低于不发情羊,差异不显著(P>0.05)。发情羊与发情不明显羊在4种激素含量上差异不显著(P>0.05),说明公羊试情存在一定缺陷,而通过测定E2含量判定绵羊发情状态将成为未来研究的重点。

日粮能量水平对柴鸡促性腺激素分泌和产蛋性能的影响

为了研究日粮能量水平对柴鸡血浆促性腺激素分泌和柴鸡产蛋性能的影响,试验以日粮能量水平将柴鸡分为低能2组、低能1组、对照组、高能1组、高能2组进行饲养试验。结果表明:与对照组相比,高能1,2组柴鸡促卵泡素、促黄体素浓度均有不同程度的提高,高能1组效果较好;血浆中的促卵泡素、促黄体素浓度与产蛋率呈正相关。

卵母细胞成熟相关激素和生长因子受体在马扩展型和紧凑型卵丘-卵母细胞复合体表达的研究

旨在比较一些与卵细胞成熟相关的激素和生长因子受体在两种卵丘-卵母细胞复合体(Ex-COC和Cp-COC)中的表达以探究两种类型的马卵母细胞成熟和发育能力差异的原因。本研究在屠宰场采集蒙古马离体卵巢带回实验室回收COCs,并根据卵丘细胞形态区分Ex-和Cp-COCs;通过qPCR和免疫荧光检测FSHR、LHR、IGF1R、IGF2R、ESR1、ESR2,BMP15和GDF9受体BMPR1B、BMPR2和ALK5在两种COCs中的表达模式;将雌二醇、IGF2、GDF9和BMP15分别添加进马IVM培养体系中检测其对马卵母细胞体外成熟率的影响。结果显示,这些受体基因的表达量在Ex-和Cp-COCs的卵丘细胞和卵母细胞中均有差异,在Cp-COCs中,卵丘细胞的大部分受体基因表达量高于卵母细胞;而在Ex-COCs中,卵母细胞与卵丘细胞的基因表达水平相似或高于卵丘细胞。相较于Cp-COCs的卵母细胞,大部分的受体基因在Ex-COCs的卵母细胞中表现出更高表达水平。体外成熟培养试验表明雌二醇和IGF2的添加可能有利于提高马的卵母细胞体外成熟率。马扩展型和紧凑型COCs中FSH、LH、IGF1、IGF2、雌激素、BMP15和GDF9等重要激素或生长因子受体表达水平的差异可以解释其体外成熟和发育能力的差异,在成熟培养体系中添加IGF2和E2可能会提高马两种类型卵母细胞体外成熟率。

不同繁殖力山羊年周期中FSH和LH分泌规律的研究

比较高繁殖力的济宁青山羊和低繁殖力的沂蒙黑山羊年周期血浆中促卵泡素(FSH)和促黄体素(LH)的分泌变化规律,分析FSH和LH与山羊繁殖力之间的关系。采用放射免疫分析法(RIA)测定血浆中FSH和LH浓度,结果表明:济宁青山羊和沂蒙黑山羊血浆中FSH和LH浓度都存在季节性变化,即秋季最高,春季次之,夏季最低;济宁青山羊和沂蒙黑山羊全年各月血浆中FSH和LH的分泌呈波浪式变化;高繁殖力的济宁青山羊各月份和4个季节血浆中FSH浓度均高于低繁殖力的沂蒙黑山羊,但尚未达到显著水平(P>0.05),2种山羊血浆中LH浓度各月份和4个季节基本无差别。

抑制素基因免疫诱导单胎绵羊孪生的研究

应用抑制素基因免疫重组质粒 (PCIS)免疫绵羊 ,首次免疫后 ,绵羊能够产生抗抑制素抗体 ,加强免疫后抗体增加显著 (P <0 0 5 ) ,免疫羊的抗体阳性率可达 4 6 7%。免疫组与对照组促卵泡素 (folliclestimutatinghormone ,FSH)的含量在加强免疫第 4 5天时差异显著 (P <0 0 5 )。在首次免疫第 2 0天与加强免疫第 4 5天 ,抗体阳性羊的促卵泡素含量显著高于抗体阴性羊 (P <0 0 5 )。免疫羊的双羔率达 39 2 % ,显著高于对照组 (P <0 0 5 ) ,比对照组提高 2 9 2 %。

巴美肉羊发情期血清FSH和LH浓度变化规律及其与产羔数关系分析

为了研究巴美肉羊血清生殖激素的动态变化及其与产羔数的关系，试验采用电化学发光免疫测定法分别测定了产单、双羔母羊发情期血清中2种促性腺激素（FSH和LH）的浓度，分析其动态变化规律，并用SAS9．0的方差分析程序分析激素浓度与产羔数的关系。结果表明：血清中FSH和LH均呈脉冲式分泌，单、双羔母羊FSH在发情后的1小时都出现1个峰值（P〈0．001），LH在发情后的12-24h出现峰值；经方差分析，双羔羊FSH水平在发情后1小时极显著高于单羔羊（P〈0．001），12小时显著高于单羔羊（P〈0．05）；双羔羊LH水平在发情后12小时极显著高于单羔羊（P〈0．001），24小时显著高于单羔羊（P〈0．05）。说明巴美肉羊产羔数增加与血清FSH和LH浓度升高有关。

ESR和FSHβ基因对丹系长白猪产仔数的影响

为了研究雌激素受体(ESR)和促卵泡素β亚基(FSHβ)基因不同基因型的分布对丹系长白猪产仔数的影响,试验采用苯酚-氯仿抽提法提取241头长白猪耳组织DNA,经PCR反应后,琼脂糖凝胶电泳分析其基因多态性。结果表明:ESR基因的A基因频率高达89.6%,对产仔数的影响为BB>AB>AA,且AB基因型显著高于AA基因型(P<0.05);FSHβ基因的B基因频率较高为74.7%,对产仔数和产活仔数的影响为AA>AB>BB,AB和BB基因型差异不显著(P>0.05),AA基因型与AB、BB基因型相比差异显著(P<0.05)。说明ESR基因的BB型为优势基因型,FSHβ基因的AA基因型为优势基因型。

不同因素对家兔超数排卵效果的影响

为了研究不同生殖激素、季节及生理状态等因素对家兔超数排卵(简称超排)的影响,试验采用孕马血清促性腺激素(PMSG)和促卵泡素(FSH)结合人绒毛膜促性腺激素(hCG)在不同季节对不同生理状态的家兔进行超排处理。结果表明:应用PMSG、FSH递减法进行超排时,60 IU/只试验组的排卵点数、回收卵子数极显著高于80 IU/只组(P<0.01),显著高于40 IU/只组(P<0.05)。春季(3—5月份)、夏季(5—8月份)、秋季(9—11月份)、冬季(12—2月份)4个季节相比,春季家兔的超排效果显著好于冬季(P<0.05);春季、夏季、秋季和夏季、秋季、冬季相比家兔的排卵数差异不显著(P>0.05)。超排开始时,家兔所处发情周期的阶段不影响超排效果,间情期、发情前期、发情期和发情后期的排卵数差异不显著(P>0.05)。

FSH对绵羊卵母细胞体外发育能力的影响

为了探讨绵羊卵母细胞体外成熟过程中促卵泡素(FSH)的适宜添加量,试验将FSH分为0.01,0.02,0.03 IU/mL 3个浓度梯度,用于绵羊卵母细胞的体外成熟与体外受精,统计第一极体排出率、卵裂率和囊胚率。结果表明:不同浓度FSH对第一极体排出率影响差异不显著(P>0.05),体外受精后以0.02 IU/mL组效果最好,卵裂率显著高于0.03 IU/mL组(P<0.05),但与0.01 IU/mL组相比差异不显著(P>0.05);0.02 IU/mL组囊胚率与其他2组相比显著升高(P<0.05)。

不同组分体外成熟培养基对绵羊卵母细胞成熟、代谢及孤雌胚胎发育的影响

为了探究不同组分体外成熟培养基对绵羊卵母细胞体外成熟的影响,试验从健康绵羊卵巢中分离卵丘-卵母细胞复合体(COCs),将分离的COCs分为V-FSH+LH+E_(2)+FBS组、V-FSH+FBS组、V-FSH+LH+E_(2)+BSA组、P-FSH+LH+E_(2)+FBS组、P-FSH+FBS组、P-FSH+LH+E_(2)+BSA组,每组分别添加以V-促卵泡素(FSH,垂体中提纯的FSH)和P-FSH(体外基因重组表达的FSH)为基础设计的体外成熟培养基以进行体外成熟试验,即各组依次添加V-FSH+促黄体素(LH)+雌激素(E_(2))+胎牛血清(FBS)、V-FSH+FBS、V-FSH+LH+E_(2)+牛血清白蛋白(BSA)、P-FSH+LH+E_(2)+FBS、P-FSH+FBS、P-FSH+LH+E_(2)+BSA体外成熟培养基,体外成熟后检测各组卵丘扩展指数(CEI)、第一极体排出率、卵母细胞氧化还原态、乳酸生成量、葡萄糖消耗量、ATP生成量;统计孤雌胚胎的卵裂率、囊胚率、囊胚细胞数,比较不同组分体外成熟培养基对卵母细胞成熟、代谢及孤雌胚胎发育的影响。结果表明:V-FSH+LH+E_(2)+FBS组CEI最高,除与P-FSH+FBS组差异不显著外(P>0.05),与其他组均差异显著(P<0.05)。V-FSH+LH+E_(2)+FBS组和P-FSH+FBS组卵母细胞的第一极体排出率较其他组高,但各组间均差异不显著(P>0.05)。V-FSH+LH+E_(2)+FBS组、P-FSH+FBS组、P-FSH+LH+E_(2)+BSA组的相对氧化还原比均接近1且差异不显著(P>0.05),但均显著低于其他组(P<0.05)。P-FSH+FBS组的COCs乳酸生成量/COCs葡萄糖消耗量最高,除与V-FSH+LH+E_(2)+FBS组、P-FSH+LH+E_(2)+FBS组差异不显著(P>0.05)外,显著高于其他组(P<0.05)。V-FSH+LH+E_(2)+FBS组与P-FSH+FBS组的COCs ATP生成量差异不显著(P>0.05),但均显著高于其他组(P<0.05)。V-FSH+LH+E_(2)+BSA组、P-FSH+LH+E_(2)+BSA组卵裂率差异不显著(P>0.05),但均显著低于其他组(P<0.05)。V-FSH+LH+E_(2)+FBS组与P-FSH+FBS组囊胚率均显著高于其他组(P>0.05),但各组的囊胚细胞数差异不显著(P>0.05)。说明不同来源的FSH与不同组分协同作用会对绵羊卵母细胞的成熟、代谢及孤雌胚胎发育产生不同的效果,并影响了其后续胚胎的发育能力。

中药复方理囊散对不孕大鼠模型生殖激素的影响

为了研究中药复方制剂"理囊散"对不孕大鼠模型血清中促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、雌二醇(E_2)和睾酮(T)的影响,以进一步探讨该方剂治疗不孕症的作用机理。取9日龄雌性SD大鼠于颈背部皮下一次性注射丙酸睾丸酮制备肾虚不孕大鼠模型,将其分为模型组、理囊散治疗组、正常组(共3个组),从80日龄用药28 d后,采血、分离血清,用ELISA酶联免疫试剂盒检测血清中FSH、LH、E_2、T水平。结果显示,模型组T水平极显著高于其他两组(P<0.01);模型组血清中FSH、LH、E_2水平明显低于正常组和理囊散治疗组血清中FSH、LH、E_2水平(P<0.01)。表明中药复方"理囊散"通过降低T,使其转化为E_2,增加血清中FSH、LH含量,以促进卵巢、卵泡发育、成熟及排卵。

FSH处理对奶牛活体采卵的影响

本试验研究了FSH激素处理与非激素处理组在活体采卵获卵数上的差异。结果表明:处理组的平均获卵数显著高于对照组(P<0.05)差异显著,优质卵母细胞率虽有所提高(P>0.05),但差异不显著。

海南黑山羊繁殖周期生殖激素的分泌规律研究

为了通过同期发情、超数排卵、人工授精等扩繁技术增加海南黑山羊种群数量,试验以发情、妊娠、哺乳、空怀四个时期的黑山羊母羊作为试验动物,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法对繁殖周期母羊血清中促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)、雌二醇(E2)、催乳素(PRL)、孕酮(P4)的含量进行测定,分析黑山羊母羊在整个繁殖周期中生殖激素的分泌规律。结果表明:FSH与LH分泌规律基本一致,整个繁殖周期中呈现先下降(发情期到妊娠期)后上升(哺乳期到空怀期)的趋势;进入妊娠期后E2分泌量减少,哺乳期过后分泌量逐渐恢复;各个时期PRL分泌变化不显著(P>0.05);妊娠期P4分泌水平极显著高于非妊娠时期(P<0.01)。说明海南黑山羊在繁殖周期中生殖激素的分泌有一定规律,可以作为扩繁新技术应用的理论依据。

cAMP信号通路对卵泡发育调控机制的研究进展

在雌性动物卵巢中,卵泡发育要经历卵泡组装、促性腺激素调控、减数分裂阻滞与恢复、能量代谢等关键过程。然而卵泡的发生、持续发育和排出都离不开cAMP信号通路的调节:cAMP通路参与卵泡的形成和调节性激素的分泌;cAMP在卵泡发育过程中抑制减数分裂并在排卵前激增,解除抑制;cAMP还可以通过腺苷挽救途径参与卵泡的能量代谢。文章综述了cAMP信号通路对卵泡各个阶段的影响及作用机制,以期为卵泡发育的分子调控机制研究提供参考。

吐鲁番黑羊发情周期血清FSH和LH的分泌规律

为了探究吐鲁番黑羊生殖激素分泌规律与繁殖活动的调控关系,试验以吐鲁番黑羊为研究对象,采用酶联免疫吸附试验测定整个发情周期血清促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)水平,并分析其分泌规律。结果表明:在发情期和发情后期,血清FSH和LH呈现出脉冲式的分泌规律;发情期FSH的基础浓度、分泌峰值和分泌谷值均高于发情后期,且发情期的振幅要显著高于发情后期(P<0.05);发情期LH的分泌谷值和振幅均显著高于发情后期(P<0.05)。在发情间期和发情前期,血清FSH和LH既有脉冲式分泌又有波动式分泌,发情前期FSH和LH的振幅显著或极显著高于发情间期(P<0.05或P<0.01)。在整个发情周期内,血清FSH和LH呈现周期波动式分泌,各有4个分泌峰值。说明FSH和LH的含量变化对吐鲁番黑羊的发情、排卵具有重要作用。

不同营养水平对大足黑山羊血浆中FSH与LH水平的影响

为了研究营养对大足黑山羊繁殖性能的影响,试验选择10只大足黑山羊进行不同营养水平饲喂试验,在发情间期每天采集2次血样,发情期每3 h采集1次血样,分离血浆后采用酶联免疫(ELISA)双抗体夹心法测定血浆中的促黄体素(LH)和促卵泡素(FSH)浓度。结果表明:在发情周期内,FSH和LH呈波动式分泌,发情前出现LH峰,发情期FSH出现最高峰值,高营养水平组大足黑山羊血浆中FSH和LH水平显著高于低营养组(P<0.05)。说明增加饲料营养水平能够提高大足黑山羊繁殖性能。