主要促进因子超家族成员2a在肝细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨主要促进因子超家族成员2a(MFSD2A)在肝细胞癌组织中的表达及其与肝细胞癌临床病理指标之间的相关性,评估其对肝癌患者预后的预测价值。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)数据库下载424例肝细胞癌和50例癌旁转录组数据以及相关临床信息。利用生物信息平台,在泛癌组织中比较MFSD2A的表达情况。使用Kaplan-Meier Plotter数据库,探索MFSD2A表达与肝癌患者预后的相关性。利用STRING数据库构建MFSD2A蛋白相互作用网络,使用GEPIA2数据库检索相关基因,进一步进行通路富集分析,探索MFSD2A的分子功能。采用免疫组织化学验证肝细胞癌肿瘤组织中MFSD2A蛋白的表达情况。结果:TCGA数据分析显示,MFSD2A基因在不同肿瘤和癌旁组织中表达水平普遍存在差异,与癌旁组织相比,在肝细胞癌组织中低表达(P<0.01)。MFSD2A在>60岁组(P=0.014)、病理分级G1组(P<0.01)、血液中AFP含量≤400 ng/mL组(P<0.01)表达量升高。MFSD2A高表达组肿瘤患者的总生存期(P=0.008)、无进展生存期(P=0.008)和无复发生存期(P=0.016)均显著延长。MFSD2A及其相互作用蛋白主要涉及脂质代谢相关的PPAR信号通路。免疫组织化学验证结果显示,相对于MFSD2A低表达组患者,MFSD2A高表达组患者预后更好(P=0.016),且随着患者MFSD2A评分升高,血清AFP水平下降。结论:MFSD2A在肝细胞癌组织中低表达,且与患者不良预后相关。MFSD2A可能通过调控肝脏脂质代谢抑制肝细胞癌的进展,提示其可能是肝细胞癌的潜在治疗靶点。

原癌基因c-erbB2和c-myb经丝裂原活化蛋白激酶和成熟促进因子途径调节卵母细胞的成熟

本研究探讨了原癌基因c-erbB2和c-myb对小鼠卵母细胞成熟的影响及其在调控卵母细胞成熟中与丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)和成熟促进因子(maturation promoting factor,MPF)的上下游关系。c-erbB2反义寡脱氧核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)和c-mybASODN均呈剂量依赖方式抑制卵母细胞的生发泡破裂(germinal vesicle breakdown,GVBD)率和第一极体(first polar body,PB1)排放率,并显著延迟其成熟时间。小鼠卵母细胞显微注射重组人c-erbB2蛋白和c-myb蛋白后,培养6h其GVBD率分别比对照组上升了23.1%(P<0.05)和32.2%(P<0.05),培养12h其PB1排放率分别比对照组上升了17.3%(P<0.05)和23.5%(P<0.05)。RT-PCR结果显示,小鼠卵母细胞中存在c-erbB2mRNA和c-mybmRNA表达;c-erbB2ASODN能明显抑制卵母细胞中c-erbB2mRNA和c-mybmRNA的表达,c-mybASODN能明显抑制卵母细胞中c-mybmRNA的表达,对c-erbB2mRNA无明显影响;MAPK抑制剂PD98059以及MPF抑制剂roscovitine在抑制卵母细胞成熟的同时,均能阻断显微注射重组人c-erbB2蛋白和重组人c-myb蛋白对卵母细胞成熟的促进作用,但对卵母细胞中c-erbB2mRNA和c-mybmRNA表达无明显影响。Westernblot结果显示,c-erbB2ASODN、c-mybASODN、PD98059、roscovitine均使卵母细胞中MAPK磷酸化水平和cyclinB1含量下降。结果提示,原癌基因c-erbB2、c-myb在卵母细胞成熟中起重要作用,可能是调控卵母细胞成熟中关键蛋白激酶如MAPK、MPF的上游激活物。

蛋白激酶A对小鼠受精卵早期发育过程中M期促进因子活性的影响

为研究小鼠体内 1 细胞期受精卵M期蛋白激酶A(PKA)对M期促进因子 (MPF)活性的影响 ,应用PKA激动剂cAMP及热稳定性抑制剂PKI显微注射入 1 细胞期受精卵内 ,观察MPF及PKA活性变化 .未经注射的对照组MPF活性在分裂期增高 ,分裂间期下降 ;而PKA活性在进入分裂期下降 ,分裂间期升高 .cAMP组PKA活性维持高峰值 ,直至注射HCG后 2 8h ,MPF活性高峰延迟 30min出现 ;PKI显微注射组PKA活性低 ,而MPF活性在注射HCG后 2 7 5h即达高峰 ,且维持高峰时间达1 5h .结果表明 ,PKA活性在细胞周期中也呈波动性 ,间期活性高 ,分裂期活性低 ;PKA高活性抑制MPF活性 ,而抑制PKA活性则MPF活性高峰提前出现 .

促进因子对阿舒假囊酵母合成核黄素的影响

研究在发酵培养基中添加不同促进因子(玉米浆、酵母膏和豆油)对阿舒假囊酵母合成核黄素的影响。试验结果表明:添加10g/L玉米浆是最促进阿舒假囊酵母菌体生长和核黄素合成的最适质量浓度;40g/L酵母膏分别在0h补加20g/L,24h和48h各补加10g/L,其核黄素产量达到1587.37mg/L,比在0h1次添加40g/L酵母膏的产量提高了21.07%;在发酵培养基中添加2～5g/L豆油,对核黄素的合成均有促进作用。

活血解毒润燥方干预干燥综合征小鼠颌下腺细胞凋亡促进因子Smac表达的机制研究

目的:将干燥综合征(SS)模型小鼠颌下腺细胞凋亡促进因子Smac的表达作为靶点,探究活血解毒润燥方对SS模型小鼠颌下腺组织形态、腺体功能、细胞凋亡的影响及其干预机制。方法:实验选取雌性BALB/c57小鼠为正常对照组,自发性雌性非肥胖型糖尿病(NOD/Ltj)小鼠为SS模型并随机分为模型组、白芍总苷胶囊组和活血解毒润燥方低、中、高剂量组,每组各15只。各组小鼠给药量按照人与动物体表面积比计算等效剂量,正常对照组、模型组小鼠灌胃10 ml/kg蒸馏水,白芍总苷胶囊组(0.234 g/kg)和活血解毒润燥方低剂量组(15.6 g/kg)、中剂量组(31.2 g/kg)、高剂量组(62.4 g/kg)分别灌胃给药,每日1次。药物干预8周后,无菌分离颌下腺,观察各组小鼠颌下腺形态、功能的改变,并分别应用免疫组化法(IHC)、蛋白免疫印迹法(Western blot)、逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)测定细胞凋亡促进因子Smac的表达。结果:与正常对照组比较,模型组唾液流量及颌下腺指数均显著降低(P<0.01),颌下腺组织病理学评分显著升高(P<0.01),IHC和Western blot检测Smac表达明显升高(P<0.05),RT-PCR检测Smac表达显著升高(P<0.01)。治疗结束后,与模型组比较,活血解毒润燥方各剂量组和白芍总苷胶囊组唾液流量及颌下腺指数均显著升高(P<0.01),颌下腺组织病理学评分显著降低(P<0.01)。运用IHC和Western blot检测活血解毒润燥方高剂量组和白芍总苷胶囊组Smac表达明显降低(P<0.05),运用RT-PCR检测活血解毒润燥方高剂量组与白芍总苷胶囊组Smac表达显著降低(P<0.01)。结论:活血解毒润燥方可以改善SS模型鼠颌下腺腺泡的分泌功能,提高其颌下腺指数,增加SS模型鼠的唾液分泌量;其作用机制与下调SS模型鼠颌下腺细胞凋亡、促进因子Smac的表达水平有关。

放线菌促己酸菌产己酸的促进因子探究

白酒酿造过程中某些放线菌对己酸菌产己酸有促进作用已经得到证实,但其促进机理还有待探究。本研究以Streptomyces avicenniae GW01为出发菌株,通过产酸发酵试验,最终发现放线菌所产黑色素是其促进己酸菌产己酸的促进因子。该发现首次揭示了放线菌所产黑色素与己酸菌产己酸之间存在联系,为白酒酿造微生物放线菌的研究,以及己酸菌高产己酸的研究,提供了新思路和新方向。

高效耐高温石油降解菌降解石油的促进因子研究

将耐高温石油降解菌UM6-3菌悬液接种于100mL石油MSM中,在47.5℃下振荡培养6d。分别考察环境因子中的初始pH值、石油含量、振荡器转速,营养平衡因子中的氮源、氮磷比,生物因子中的接种量、酵母粉添加量对石油降解的促进作用。基于单因素实验结果,设计初始pH值、接种量、氮磷比、石油含量、振荡器转速的5因素4水平正交实验,结果表明,影响石油降解的主要因子是振荡器转速和接种量,初始pH值的影响最小;UM6-3降解石油的最佳促进因子为:初始pH值7,接种量4mL,氮磷比5∶1,石油含量1%,振荡器转速140r.min-1。

结核分枝杆菌复活促进因子E的原核表达及纯化

目的构建结核分枝杆菌复活促进因子E(RpfE)的原核表达质粒,在大肠杆菌中表达并纯化。方法采用PCR方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA中扩增出RpfE基因,双内切酶消化后,与同样酶消化的pET32a(+)载体连接,转化大肠杆菌Top10。阳性克隆经酶切和DNA测序鉴定正确后,将重组质粒转化至大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导,由T7启动子调控表达RpfE蛋白,并对表达蛋白进行鉴定和纯化。结果双酶切鉴定所切下的片段大小与预期相符,测序结果与文献报道一致。经SDS-PAGE分析和Western blot鉴定,在相对分子质量41000处均可见特异性蛋白条带。经Ni2+-NTA金属螯合层析后,重组蛋白纯度可达90%以上。结论已成功地克隆并构建了RpfE基因的重组表达质粒pET32a(+)-RpfEv,并获得了高纯度的重组蛋白,为以后的深入研究奠定了基础。

宫颈癌患者miR指标与细胞凋亡促进因子、抑制因子表达的关系探究

目的:探究宫颈癌患者miR指标与细胞凋亡促进因子、抑制因子表达的关系。方法:选取2019年6月-2020年7月本院收治的60例宫颈癌患者作为观察组,同时期60例子宫肌瘤患者作为对照组。检测与比较两组组织miR指标(miR-19a、miR-34a)与细胞凋亡促进因子(Bax、caspase-3及caspase-7)、抑制因子(Bcl-2、Fas及FasL),并比较观察组不同分期、病理分级及淋巴结转移情况患者的检测结果,采用Pearson相关性分析miR指标与上述细胞凋亡促进因子、抑制因子的关系。结果:观察组组织miR-19a、细胞凋亡抑制因子均显著高于对照组,组织miR-34a、细胞凋亡促进因子均显著低于对照组,观察组不同分期、病理分级及淋巴结转移情况患者检测结果比较,差异均有统计学意义(P<0.001),Pearson相关性分析显示,宫颈癌组织miR-19a与细胞凋亡抑制因子呈正相关,与细胞凋亡促进因子呈负相关(P<0.05);宫颈癌组织miR-34a与细胞凋亡抑制因子呈负相关,与细胞凋亡促进因子呈正相关(P<0.05)。结论:宫颈癌患者组织miR指标与细胞凋亡促进因子、抑制因子均呈现异常表达的状态,且其之间有密切的关系,因此在宫颈癌患者中的检测价值较高。

成熟促进因子及其对卵母细胞成熟调控机制研究的新进展

卵母细胞成熟调控机制一直是发育生物学和生殖生物学领域的热点问题。以现代分子生物学理论为基础 ,科学家们对卵母细胞成熟分裂的分子生物学调控机理进行了大量研究。发现了细胞周期中许多关键的调控因子 :cdc基因、周期蛋白依赖性激酶 (CDKs)及细胞周期蛋白 (cyclin)等。本文对卵母细胞成熟调控的核心调控物质———成熟促进因子 (maturation promotingfactor,MPF)的分子结构、周期变化及其在卵母细胞成熟过程中与丝裂原激活蛋白激酶 (mitogen activatedproteinkinase,MAPK)相互作用关系的最新进展进行了综述。

副溶血弧菌一种糖蛋白酶(复苏促进因子)在大肠杆菌中的表达及性质

用PCR方法从副溶血弧菌8621.4基因组中扩增出1种细胞复苏促进因子家族的糖蛋白酶(Glycoprotease,Gcp)基因,核酸序列分析表明其含有完整的gcp基因开放阅读框,编码233个氨基酸组成的蛋白质。核酸序列与副溶血弧菌糖蛋白酶家族基因的序列相似性为100%。其氨基酸序列与哈维氏弧菌HY01、弧菌Ex25、溶珊瑚弧菌、拟态弧菌和杀鲑弧菌LFI1238等糖蛋白酶的序列相似性为67%～92%。将该基因克隆到表达载体pET28a,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,用Ni琼脂糖亲和柱层析纯化的蛋白为单一条带,利用纯化的Gcp免疫新西兰大白兔制备特异性抗体,Western-Blotting分析发现正常生长及活的非可培养状态(VBNC)诱导过程中的副溶血弧菌细胞内表达的Gcp蛋白为1条带,分子量约为27kDa,而在VBNC状态的菌体中检测到2条蛋白带。研究结果为进一步探索海洋弧菌活VBNC的形成和复苏机制奠定基础。

益生元—双歧杆菌生长促进因子

微生态学的观点认为肠道菌群的状况与人体健康密切相关,肠道中的有益菌如双歧杆菌、乳酸菌等在净化肠道、改善机体营养和维护宿主健康方面起到重要作用。益生元为人体不消化或难消化的食物成份,其中多数是非消化性的低聚糖,其作用可选择性地刺激肠道有益菌的生长和代谢活性,改善肠道菌群平衡从而有利于人体健康。本文对一些重要的功能性低聚糖的性质、生理功能及其生产了概述。

成熟促进因子对克隆重构胚核重编程的调控

成熟促进因子 (maturationpromotingfactor,MPF)由催化亚单位P34cdc2 和调节亚单位cyclin组成 ,对细胞周期的调控起着重要作用。目前 ,在核移植研究中发现 :供体核在MPF的作用下发生核膜破裂 (nuclearenvelopbreakdown ,NEBD)和早熟染色体凝集 (prematurechromosomecondensation ,PCC) ,促进了核、质蛋白质因子的交换 ,有利于核重编程的进行。

M期促进因子在唾液腺腺样囊性癌中的表达

目的:研究M期促进因子(MPF)的表达与唾液腺腺样囊性癌(SACC)临床病理特点之间的关系。方法:应用免疫组织化学SP法检测40例SACC组织及40例正常唾液腺组织中MPF的表达。应用Western印迹测定SACC细胞系SACC-83和SACC肺高转移细胞系SACC-LM中MPF的表达。采用SPSS11.5统计软件包,分别应用χ2检验、配对t检验和线性相关分析进行统计学处理。结果:SACC组织中MPF的表达明显升高,与正常唾液腺组织之间存在显著差异(P<0.05)。MPF的表达与SACC的病理类型有关(P<0.05)。体外培养的SACC细胞系SACC-LM中MPF的表达显著高于SACC-83中MPF的表达(P<0.05)。结论:MPF在SACC组织中呈高表达,其表达与SACC的发生密切相关,MPF的异常激活是SACC恶性增殖的原因之一,MPF与SACC的转移能力有关。

有机磷中毒心肌损伤患者血清凋亡促进因子及抑制因子的表达变化研究

目的:观察研究有机磷中毒心肌损伤患者血清凋亡促进因子及抑制因子的表达变化情况。方法:选取本院2017年6月-2018年6月收治的有机磷中毒心肌损伤患者50例作为A组,同期有机磷中毒无心肌损伤患者50例作为B组,另选取体检健康者50名作为C组。检测比较三组的血清凋亡促进因子(Caspase-3、Caspase-9)及抑制因子(Bcl-2、sFas、sFasL)的表达水平,以及A、B组不同中毒程度患者的上述检测指标表达水平。结果:A组的血清Caspase-3、Caspase-9、sFas及sFasL表达水平均明显高于B、C组,血清Bcl-2表达水平均明显低于B、C组,差异均有统计学意义(P<0.001);但B组与C组的上述检测指标表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。A、B组不同中毒程度患者的上述检测指标表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.001)。结论:有机磷中毒心肌损伤患者血清凋亡促进因子及抑制因子的表达明显异常,在有机磷中毒心肌损伤患者中具有较高的检测价值。

血管生成促进因子在糖尿病视网膜病变新生血管形成中的作用

糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是糖尿病最常见和最严重的并发症之一。目前,DR的发病机制尚不明确,但近年来研究表明,血管生成促进因子与DR新生血管的发生、发展密切相关,是导致视网膜新生血管形成的主要致病因子。本文就血管生成促进因子在DR新生血管形成中的作用进行综述。

后期促进因子与细胞周期

近年来,发现了细胞周期中许多关键的调控因子,cdc 基因、周期蛋白依赖性激酶(CDKs)及细胞周期蛋白(cyclin)等。其中有丝分裂后期促进因子(APC)构成泛素 蛋白水解酶复合体通路,参与周期蛋白和周期蛋白依赖激酶降解,促进细胞周期的运转。同时,APC的活性也受到 G1 期和 M期的细胞周期依赖蛋白激酶(CDK)的调节, cdc20 为APC的正调控因子,APC与细胞周期各因子间协调作用,促进细胞周期的运转。

红酵母RY-2001产类胡萝卜素促进因子的选择

对几种类胡萝卜素促进因子进行初步研究 ,从中选出对红酵母的色素产量和生物量有显著影响的促进因子核黄素和番茄汁共同实验 ,结果显示红酵母的色素产量和生物量分别比对照增加了 71 31%和 6 9 95 %。

细菌复苏促进因子──Rpf

细菌复苏促进因子Rpf是第一个被发现的原核生物自分泌生长因子,该因子在放线菌门细菌中广泛存在,具有促进细菌休眠体复苏的作用。Rpf在细菌生长代谢过程中所发挥的重要调节作用,使其具有潜在的应用价值。

视网膜新生血管性疾病与血管生长促进因子

视网膜新生血管性疾病是世界范围最严重致盲性眼病之一,其发病机制尚未明了,但近年来生长因子在视网膜新生血管形成中的作用已形成共识。本文就与视网膜新生血管相关的血管生长促进因子作一综述。