半滑舌鳎促黄体激素基因克隆和表达分析及其血清浓度测定

利用RACE技术首次克隆了半滑舌鳎脑垂体中促黄体激素(LH)基因cDNA全长序列。该基因全长670 bp,开放阅读框为477 bp,编码158个氨基酸。与其他脊椎动物的LH成熟肽氨基酸序列同源性比较表明:半滑舌鳎LH与鲽形目和鲈形目同源性高58%～68%。另外,半滑舌鳎LH含有12个保守的半胱氨酸残基和1个N-糖基化位点(19～21 NQT)。实时荧光定量组织表达分析表明,LH mRNA在脑、垂体、卵巢等组织中表达,垂体中表达量最丰富,其他组织尤以脑、性腺表达量较高,推测半滑舌鳎LH可能具有广泛的垂体外生理功能;实时荧光定量PCR方法对繁殖周期雌性半滑舌鳎LH表达水平进行测定,结果表明,LH mRNA在Ⅱ～Ⅵ各繁殖周期的脑、垂体、卵巢3种组织都有表达,但表达水平有差异,在Ⅳ、V期表达量最丰富,说明LH主要促进卵母细胞最终成熟及排卵。利用125I标记的放射免疫测定(RIA)技术检测繁殖周期半滑舌鳎血清LH浓度,结果表明LH在V期含量最丰富,也说明LH主要促进卵母细胞最终成熟及排卵。

不同繁殖力新疆山羊发情周期血清FSH和LH浓度变化规律研究

为了探究不同繁殖力母羊发情周期血清中促卵泡激素(FSH)和促黄体激素(LH)分泌变化规律,试验选择新疆山羊高繁殖力母羊17只和低繁殖力母羊14只,采用酶联免疫分析法测定母羊发情周期血清中FSH和LH浓度。结果表明:高、低繁殖力母羊发情周期中FSH和LH浓度均呈脉冲波动式分泌,高繁殖力母羊血清中FSH浓度在发情周期第1,5,13,21天出现4个波峰,LH浓度在发情周期第2,5,11,21天出现4次波峰;低繁殖力母羊血清中FSH浓度在发情周期第1,5,21天出现3个波峰,LH浓度在发情周期第5,13,21天出现3次波峰。在发情期和发情前期母羊血清中FSH和LH浓度均高于发情后期和间情期,高、低繁殖力母羊血清中FSH和LH浓度均在发情前期(>17~21 d)开始升高,在发情期(0~48 h)当天达到峰值之后呈波动式下降趋势,且高繁殖力母羊发情周期4个阶段血清中FSH和LH浓度均高于低繁殖力母羊。高、低繁殖力母羊血清中FSH和LH基础浓度均在发情期最高,间情期最低。说明不同繁殖力新疆山羊母羊发情周期中FSH和LH分泌变化规律一致,高繁殖力母羊在整个发情周期中FSH和LH浓度高于低繁殖力母羊且波峰数量多于低繁殖力母羊。

更年宁心胶囊对阴虚内热型更年期综合征患者FSH、LH、E_2的影响及疗效

目的 :观察更年宁心胶囊对女性阴虚内热型更年期综合征患者FSH、LH、E2 和临床症状的作用。方法 :采用随机数字表法将 10 5例阴虚内热型女性更年期综合征患者按 2∶1比例随机分入治疗组 70例和对照组 35例 ,分别采用更年宁心胶囊和更年安片治疗 ,疗程 30天。观察治疗后患者FSH、LH、E2 的变化及更年期症状积分值的改善情况。结果 :治疗组治疗后血清E2 水平明显升高 ,LH明显降低 ,且优于对照组 (P <0 .0 1) ;治疗组治疗后症状积分值明显改善并优于对照组 (P <0 .0 1)。结论 :更年宁心胶囊能显著改善阴虚内热型女性更年期综合征患者的血清E2 水平和临床症状 ,临床总疗效明显优于更年安片。

深圳地区3～8岁女童血清N．ADR，ER，FSH，LH表达水平的调查

目的探讨深圳地区3～8岁女童血清中肾上腺素（N．ADR），雌激素受体（ER），促卵泡激素（FSH），促黄体激素（LH）的表达水平。方法随机抽取2008年1月～12月来该院进行入园、入学体检的女童，3～4岁、5～6岁、7～8岁各50例。N．ADR及ER采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法，试剂由美国ADL有限公司提供。FSH及LH采用免疫化学发光法，试剂由美国贝克曼有限公司提供。结果①不同年龄段女童血清N．ADR，ER表达水平，三组间差异均有统计学意义（P〈O．05）。②不同年龄段女童血清FSH表达水平，3～4岁较其他两组差异有统计学意义（P〈O．05），而5～6岁较7～8岁FSH表达水平及三个组LH表达水平问差异无统计学意义（P〉0．05）。结论通过对深圳地区3～8岁女童激素水平初步调查，证实了不同年龄段其激素表达水平有所不同，从而进行更合理的膳食调配及儿童保健，达到预防早熟的目的。

拮抗剂方案中卵泡期促黄体生成素水平对不同卵巢反应者体外受精-胚胎移植结局的影响

目的探寻拮抗剂方案中添加拮抗剂的最佳时机及人绒毛膜促性腺激素(hCG)注射日合理的促黄体生成素(LH)水平区间。方法回顾性队列研究分析1 327例拮抗剂方案的取卵周期资料,根据基础窦卵泡数(AFC)将卵巢反应性依次分为卵巢低反应组(AFC≤5,n=278)、卵巢正常反应组(6≤AFC≤15,n=756)、卵巢高反应组(AFC≥16,n=293),并根据拮抗剂添加日及hCG注射日的LH水平再分组比较临床结局。结果 (1)在拮抗剂添加日,不同卵巢反应者LH<5 IU/L及≥5 IU/L组的妊娠结局差异均无统计学意义,但卵巢低反应者在LH≥5 IU/L时开始添加拮抗剂可能获得较高的优质胚胎率,卵巢正常反应者在LH≥5 IU/L时开始添加拮抗剂Gn使用时间较少。(2)在hCG注射日不同卵巢反应者的LH水平对其妊娠结局均无影响。结论拮抗剂添加日LH水平及hCG注射日LH水平均不影响拮抗剂方案的临床妊娠率,但不同卵巢反应者卵泡期适合的LH水平可能有所不同。

多囊卵巢综合征患者的辅助生殖治疗结局

多囊卵巢综合征（PCOS）是育龄期妇女常见的内分泌紊乱性疾病，发病率达6％～10％。由于稀发排卵或无排卵，常常伴发不孕的问题。近年来，辅助生殖技术（ART）越来越多地应用于此类患者。研究表明不同类型的PCOS患者，如肥胖、高促黄体生成激素（LH）、高雄激素及胰岛素抵抗（IR），其ART助孕结局均较非PCOS患者差，虽然发生机制各有特点，但不同的病理生理异常相互作用，最终多反映为卵子质量下降，表现为PCOS患者ART治疗的临床妊娠率低、早期自然流产率高。本文就不同类型的PCOS患者的辅助生殖治疗结局以及影响其结局的因素进行论述，并探讨能够改善PCOS患者辅助生殖治疗结局的措施。

短肽修饰的甲氨蝶呤的制备及细胞毒性作用

目的:制备促黄体激素释放激素-甲氨蝶呤(LH-RH-MTX)并考察其对表达有促黄体激素释放激素(LH-RH)受体的肿瘤细胞的毒性作用。方法:以临床抗恶性肿瘤药物甲氨蝶呤(MTX)为模型药物,以促黄体激素释放激素[D-Lys6]LH-RH为导向物,通过共价键连接制备LH-RH-MTX。应用MTT法分别考察游离MTX和LH-RH-MTX对鼻咽癌HNE-1及前列腺癌PC-3细胞株的细胞毒性作用。结果:MTT法结果表明游离MTX和LH-RH-MTX对2种细胞株均有生长抑制作用,对前列腺癌PC-3细胞的抑制率大于鼻咽癌HNE-1细胞;给药12h后抑制率达到最大;当药物质量浓度为200.0μg.L-1,作用12h后:LH-RH-MTX对前列腺癌PC-3细胞的抑制率可高达97.73%,游离MTX为49.90%;LH-RH-MTX对鼻咽癌HNE-1细胞的抑制率为38.92%,游离MTX为7.41%;在同一种细胞株上,LH-RH-MTX的IC50值小于游离MTX。结论:经过短肽修饰的化合物LH-RH-MTX可与表达有LH-RH受体的肿瘤细胞特异性结合并发挥抑制作用,抗肿瘤活性高于游离MTX。提示用LH-RH作为TDDS的导向物,实现药物的靶向释放,提高药物生物利用度是可行的。