保加利亚乳杆菌发酵转化人参皂苷工艺研究

目的以人参为原料,通过保加利亚乳杆菌发酵提高人参皂苷含量。方法利用单因素试验和响应面法优化发酵工艺,并对发酵过程中原型人参皂苷生物转化可能途径进行分析。结果在发酵培养基为MRS液体培养基的前提下,最适发酵条件为发酵温度40℃,发酵时间3d,接种量3%,转化稀有人参皂苷含量在150μg/mL。经对比发现,原参中检测出Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rh17种皂苷,经过发酵后的人参中检测出Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rh1、Rd、R-rg3、CK 9种皂苷。同时原参中的常规皂苷含量经发酵后有所下降,稀有皂苷含量有所增加,且总酚、黄酮含量增加,总糖含量减少,发酵过程中人参皂苷生物转化的可能途径与人参皂苷含量变化趋势一致。结论保加利亚乳杆菌发酵人参能够有效将原型皂苷转化成稀有人参皂苷,为人参的深加工奠定基础,为人参发酵产品的开发和利用提供参考。

基于pH下降速率的反馈补料策略高密度培养保加利亚乳杆菌NQ2508

保加利亚乳杆菌是酸奶发酵剂和益生菌制剂的重要菌种,其高密度培养对于提高菌种在应用产品生产中的效率具有重要的现实意义。葡萄糖浓度和发酵pH是影响保加利亚乳杆菌生长的关键因子,底物葡萄糖被转化为细胞菌体和主要代谢产物乳酸,探究葡萄糖消耗速率与表征乳酸生成的发酵pH下降速率的关系,是研究保加利亚乳杆菌代谢流方向的重要方法。该实验通过培养基组成和培养条件对保加利亚乳杆菌生长的影响进行研究,同时对葡萄糖消耗速率-pH降低速率相关模型研究,并基于底物质量守恒定律建立了一条基于pH下降速率的保加利亚乳杆菌高密度培养的反馈补料发酵策略。通过化学中和法控制发酵pH为6.0~5.0,基于pH下降速率进行反馈补料将葡萄糖质量浓度控制在8~2 g/L,发酵液的活菌数达到3.6×10^(9)CFU/mL,是批次分批培养的2.4倍。该策略的应用结果为提高保加利亚乳杆菌的工业化生产效率提供参考。

保加利亚乳杆菌预处理制备液态黑蒜技术研究

文章研究了保加利亚乳杆菌预处理制备液态发酵黑蒜技术。以新鲜大蒜为原料,在180℃高温下分别对大蒜瓣进行9,10 min蒜氨酸酶灭活,将灭活后的蒜瓣处理成粒径为4 mm的颗粒,加水至液料比为4∶1,添加保加利亚乳杆菌比例为4%、5%、6%,室温下共存16,24,32 h,于恒温80℃发酵制备液态黑蒜,以未添加保加利亚乳杆菌的大蒜制备的液态黑蒜为参照(简称未处理),考察共存时间、保加利亚乳杆菌比例和灭酶时间对液态黑蒜品质的影响。液态黑蒜制备的最优条件为高温180℃、蒜氨酸酶灭活10 min、保加利亚乳杆菌比例6%、共存时间32 h、发酵时间18 d,此时总酸含量为48.48 g/kg,氨基酸态氮含量为7.79 g/100 g,还原糖含量为44.61 g/100 g,褐变值为62.49,总酚含量为8.779 mg/g,DPPH·、·OH清除率分别为66.92%、45.97%,相比于未处理的液态黑蒜,总酸含量是其3.88倍,氨基酸态氮含量是其1.41倍,还原糖含量是其2.23倍,褐变度是其1.31倍,总酚含量是其1.48倍,DPPH·、·OH清除率分别是其1.40倍和1.15倍。保加利亚乳杆菌预处理制备液态黑蒜技术可以提升黑蒜的品质,缩短黑蒜的发酵时间,具有较广阔的应用前景。

一株保加利亚乳杆菌的分离鉴定

目前抗生素的耐药性已经成为一个全球关注的问题,因此减抗和替抗成为关注的焦点。并且畜禽养殖业深受细菌病的影响,因此寻找具有抗菌活性、更经济、更安全的非抗生素饲料添加剂极其重要。本试验以奶样为实验材料,进行益生菌的分离鉴定,并对分离到的菌株进行抗生素耐受试验、溶血试验分析菌体特性。结果表明,试验从样品中分离鉴定出保加利亚乳杆菌,编号为NN231213。分离菌株对22种抗生素敏感,且不产生溶血现象,可为益生菌制剂的进一步开发和应用提供素材。

不同保加利亚乳杆菌与嗜热链球菌S10复配对发酵乳特性的影响

嗜热链球菌S10分离自青海地区自然发酵酸牛乳,具有良好的弱后酸化能力和发酵特性。本研究将分离自不同国家传统发酵乳及酸马奶的4株保加利亚乳杆菌IMAU20450、IMAU95110、IMAU62091和IMAU62161,分别与嗜热链球菌S10进行复配组成发酵剂(A、B、C和D),以商业发酵剂(E)为对照,采用多频扩散波谱法研究发酵过程中的微流变学特性,并对贮藏稳定性和后酸化进行综合评价。结果表明:发酵过程中A组发酵乳的固液平衡值最低,而黏性因子、弹性因子高于B、C、D组发酵乳,表明A组发酵乳形成具有较高强度的乳凝胶结构。在4℃贮藏21 d期间,A组和C组硬度与对照组无差异,均显著大于其它试验组(P<0.05),各试验组发酵乳的黏度、持水与对照组无显著性差异(P>0.05)。25℃贮藏14 d后酸化评价表明,B组和D组发酵乳pH值和滴定酸度均分别小于和大于其它各组(P<0.05),而A组和C组的发酵乳与对照组无显著性差异,说明A组和C组发酵剂具有弱后酸特性。同时A、C组感官评价得分最高,发酵乳酸甜比恰当,组织均匀,质地细腻丝滑。综上,保加利亚乳杆菌IMAU20450、IMAU62091分别与嗜热链球菌S10复配时酸乳发酵和贮藏特性较好,具有进一步研究价值和较好应用前景,为乳酸菌发酵剂开发提供物质基础和数据参考。

基于蔗糖代谢途径分析保加利亚乳杆菌的后酸化性能

弱后酸化能力是乳酸菌作为发酵剂使用时的重要特性。为研究保加利亚乳杆菌蔗糖代谢途径对发酵乳后酸化起到的作用,该研究比较了五株保加利亚乳杆菌的后酸化性能,分析了保加利亚乳杆菌的生长情况、糖代谢和产酸能力,探究了蔗糖代谢产酸相关基因的差异表达及关键酶活性,并研究了外源添加蔗糖代谢关键酶前后保加利亚乳杆菌的生长情况。结果表明,Lb.1后酸化能力最弱,在以蔗糖为碳源的培养基中生长缓慢,KLDS 1.0207后酸化能力最强。发酵24 h后,二者蔗糖转化率分别为5.85%和85.39%,乳酸含量分别为1.13 g/L和11.81 g/L。在含双糖(乳糖:蔗糖=1:1.5)的MRS培养基中生长时,KLDS 1.0207蔗糖代谢途径中基因sacA、pgi、gap、pgk、ldh表达量极显著高于Lb.1(P<0.01),KLDS 1.0207蔗糖酶活性显著高于Lb.1(P<0.05),达到1.31 U/mg。在Lb.1的蔗糖培养基中补充蔗糖酶后,OD600 nm增至原来的5倍。因此,蔗糖酶活性对保加利亚乳杆菌代谢蔗糖至关重要,编码蔗糖酶的sacA基因表达下调显著减弱蔗糖酶活性,菌株后酸化能力明显下降。

兰州百合粗低聚糖对嗜热链球菌ATCC-14485和保加利亚乳杆菌ATCC-11842产酸及增殖的影响

益生元在促进益生菌生长、调节肠道微生态平衡方面发挥着重要作用。为探究兰州百合粗低聚糖(crude lily oligosaccharides,CLOs)的益生元特性,以兰州百合干为原料,提取、表征CLOs;以低聚果糖和菊粉作为阳性对照,测定CLOs在人工胃肠溶液的水解度,以及对嗜热链球菌ATCC-14485和保加利亚乳杆菌ATCC-11842的产酸、增殖作用的影响。结果表明:CLOs分子量为1194 Da,主要由甘露糖、阿拉伯糖和葡萄糖组成,摩尔比为1:3.57:16.40;CLOs经人工胃肠溶液消化后水解度是26.96%,显著低于菊粉(P<0.05);CLOs促进乳酸菌发酵产酸的效果显著优于菊粉和低聚果糖(P<0.05);当CLOs的添加量为1.0%(W/V)时,能有效促进嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌的增殖,并减缓二者在货架期的死亡速率。研究结果说明CLOs具有益生元特性,可为新型共生发酵乳的研发提供理论依据。

海藻糖对保加利亚乳杆菌保护应用的研究

本文考察了不同工艺过程包括冷藏、冷冻、真空干燥、冷冻干燥以及喷雾干燥和室温下保存过程中不同保护剂对保加利亚乳杆菌存活性和产酸率的影响。结果发现,海藻糖具有最好的抗冷冻、抗脱水效果。浓度试验表明,海藻糖的最适添加量为5%～10%(w/v)。

保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌相互作用的研究

探讨了嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌之间的相互作用(拮抗和共生效果),指出这两个菌种的许多菌株在代谢过程中会产生过氧化氢、细菌素等抑菌性物质,导致嗜热链球菌与保加利亚乳杆菌间表现出非协同生长的现象。在此基础上,建立了评价发酵剂之间相互作用的新的指标体系,旨在方便优良酸奶发酵剂菌种的筛选工作。

保加利亚乳杆菌的特性及其应用

保加利亚乳杆菌是乳酸菌中应用较广的一种,与人类的生活关系密切。文中介绍了保加利亚乳杆菌的生长特性、产酸特性、产香特性、产胞外多糖特性以及其在食品发酵、工业乳酸发酵、医疗保健和饲料行业等领域的应用。

嗜热链球菌与保加利亚乳杆菌麦芽复合汁增菌培养基的优化筛选

研究了在麦芽汁中添加不同的营养因子对嗜热链球菌S.t-3的细胞生长量的影响,进一步采用正交试验优化筛选出S.t-3的麦芽复合汁增菌培养基,并对保加利亚乳杆菌L.b-DR和L.b-S1进行了验证性增菌试验。结果表明,S.t-3、L.b-DR和L.b-S1在麦芽汁中能进行正常的产酸代谢,大豆蛋白胨、牛肉膏、酵母膏可显著促进S.t-3的细胞生长(P<0.05);K2HPO4不仅可以促进菌体增殖,而且还可缓冲基质pH值的变化,避免了低pH值对乳酸菌的伤害;利用L9(33)正交试验,筛选出S.t-3的麦芽复合汁增菌培养基最佳配比为:在10%的麦芽汁中添加0.5%大豆蛋白胨、0.5%酵母膏、1%牛肉膏、0.2%K2HPO4;在麦芽复合汁增菌培养基中,S.t-3、L.b-DR和L.b-S1,37℃恒温培养16 h,活菌数分别为2.42×109cfu/mL、2.85×109cfu/mL和4.81×109cfu/mL,与液体MRS培养基的活菌数相当,成本较MRS培养基降低1 000元人民币/t。

保加利亚乳杆菌与嗜热链球菌的比例变化对酸奶品质的影响

通过对不同比例的这两种菌搭配所发酵酸奶的产酸能力、酸奶后酸化、黏度和持水率的测定,以及对酸奶风味的评价,研究了保加利亚乳杆菌与嗜热链球菌的比例对酸奶品质的影响,旨为酸奶生产中发酵剂的选择提供参考。

嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌增菌培养研究

对传统酸奶发酵剂菌种嗜热链球菌 (L N- 6 )和保加利亚乳杆菌 (L N- 8)的基础培养基和生长促进物质分别进行了研究。结果表明 ,无脂乳固体为 110 g/kg的脱脂乳作为基础培养基效果较好 ,L N- 6和 L N- 8的活菌数分别为 2 .8× 10 8和 1.9× 10 8m L- 1。生长促进物质番茄汁、猕猴桃汁、肝浸汁对 L N- 6有一定的抑制作用 ,蜜桔汁和酵母膏则有较明显的促进作用。对 L N-

冷冻和冻干过程对保加利亚乳杆菌存活性影响的研究

研究了预冻过程中冷冻温度、冷冻时间以及升华干燥过程中发酵剂含水量对保加利亚乳杆菌(Lactobacillusdelbrueckiisubsp.bulgaricus)L.b-S1细胞存活率的影响。结果表明:-20～-18℃和-40～-35℃冷冻,对细胞存活率无显著影响(P>0.05);冷冻起始至完全冻结,细胞存活率差异显著(P<0.05),而冻结后细胞存活率并不随冷冻时间延长而存在显著差异(P>0.05);干燥过程中,发酵剂含水量对细胞干燥存活率影响显著(P<0.05),但存活率降低程度因含水量下降水平不同而出现差异,其中以含水量由40%左右至5%左右的过程影响最大,细胞存活率由88.68%降至40.11%,下降约50%左右,差异显著(P<0.05)。本研究为研制开发高效浓缩型直投式酸奶冻干发酵剂,合理调控冻干工艺提供指导依据。

保加利亚乳杆菌与嗜热链球菌共生机理的研究进展

乳酸菌在乳中的共生机制是非常复杂的网络体系。通过对蛋白质代谢、核苷酸碱基代谢、氧化性应激以及碳源物质代谢等方面的研究,对保加利亚乳杆菌与嗜热链球菌共生机理的研究进展进行详细的阐述。旨在为发酵剂菌体的筛选及应用提供参考。

保加利亚乳杆菌番茄复合汁增菌培养基的优选研究

研究了在番茄汁基础培养基中添加不同营养物质对保加利亚乳杆菌生长的影响,进一步采用正交试验优化筛选了保加利亚乳杆菌L.b-S1的增殖培养基。结果表明,在番茄汁基础培养基中添加胰蛋白胨、酵母膏、碳酸钙可显著促进试验菌株的细胞生长(P<0.01);利用L933正交试验筛选出增殖培养基的最佳配比为:在番茄汁基础培养基中添加0.5%酵母膏、1.0%胰蛋白胨、0.3%碳酸钙;试验菌株在增殖培养基中经37℃培养18h,活菌数可达为2.25×1010mL-1,较液体MRS培养基的活菌数(4.98×108mL-1)提高了45.18倍,成本较液体MRS培养基降低1500元/t。为工业化大规模培养乳酸菌并研制开发直投式酸奶发酵剂提供了经济廉价的增菌培养基。

保加利亚乳杆菌高密度培养的初步研究

对培养保加利亚乳杆菌的基础培养基进行优选,确定为基础MRS培养基。然后优化培养条件:发酵时间为12h,起始pH为6.4,发酵温度为37℃。培养基:MRS培养基+7.5%番茄汁+12%麦芽汁+5%海带汁+ 2%乳清。通过正交试验证明,保加利亚乳杆菌菌体浓度可达到1.0×10^(12) cfu/mL。

酸奶中保加利亚乳杆菌分离条件的优化

为优化从酸奶中分离保加利亚乳杆菌的培养条件 ,初步建立一种较简单有效的分离方法。以成都市市售的主要酸奶——华西牌瓶装酸牛奶为来源 ,采用 MRS、SL、L S、番茄酵母 4种经典的乳酸菌选择性培养基 ,并分别进行有氧及烛缸厌氧分离培养测定其得率。采用 X2 检验对不同组的分离得率进行统计学分析。结果表明 MRS培养基为酸奶中保加利亚乳杆菌分离首选培养基 ,分离得率达 6 6 .6 7% ;微氧环境优于有氧环境 (P<0 .0 5 )。

保加利亚乳杆菌原生质体的制备与回复研究

目的 :通过对保加利亚乳杆菌的原生质体的制备和回复的方法学探讨 ,为乳杆菌的基因操作和其相关研究提供技术思路和实验条件。方法 :用酶浓度分别为 1μg/ml、4 μg/ml、10 μg/mlMutanolysin(变溶菌素 )对保加利亚乳杆菌进行处理 ,脱去细胞壁以探讨其原生质体形成与时间和酶浓度的关系 ;并选用较为适宜的酶浓度制备其原生质体 ,在自制的双层再生培养基上观察其原生质体在普通培养、CO2 培养、厌氧培养时的回复生长情况。结果 :保加利亚乳杆菌对Mutanolysin较敏感 ,酶浓度为 1μg/ml时只需 4 0min大部分菌体形成原生质体。经 1μg/mlMutanolysin处理后制得的保加利亚乳杆菌原生质体倾入自制的双层再生培养基中 ,置于CO2 和厌氧环境条件下培养能很好的回复生长。结论 :本文的研究为乳杆菌的基因工程方面的研究提供了相关的技术条件和实验基础。

酸奶中保加利亚乳杆菌药物敏感性分析

从酸奶中分离保加利亚乳杆菌,对其遗传多样性和药物敏感性进行分析,并进一步对耐药菌株的抗性基因进行检测。利用改良MRS培养基,从国内不同品牌酸奶中分离获得18株保加利亚乳杆菌。18株分离菌先经RAPD分型后采用琼脂稀释法测定其对11种抗生素的药敏性,并通过PCR对耐药菌株中可能存在的抗性基因进行检测。结果显示,18株受试菌具有明显的遗传多样性和耐药表型多样性。18株菌全部对罗红霉素敏感,而全部对卡那霉素耐药;对氨苄青霉素、青霉素G、金霉素、氯霉素、四环素、林克霉素、链霉素、新霉素及庆大霉素等9种抗生素均表现出不同程度的耐药性。通过检测耐药菌株的抗性基因,从1株菌(B-8)中检出四环素抗性基因tet(M),从2株菌(B-8和B-41)中检出链霉素抗性基因ant(6),从4株菌(B-43、B-47、B-49和B-51)中检出卡那霉素抗性基因aph(3’)-Ⅲa。结果表明,供试18株保加利亚乳杆菌多重耐药现象比较严重。