基于脂质组学探究健脾利湿方对NAFLD小鼠肝脏脂质的调控作用

目的基于LC-MS脂质组学探讨健脾利湿方对非酒精性脂肪肝(NAFLD)小鼠肝脏脂质代谢的调控作用。方法将C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、健脾利湿方组3组,每组6只,采用60%高脂饲料饲喂12周诱导NAFLD模型,同时进行给药干预。通过生化指标检测及病理切片进行药效学评估,LC-MS脂质组学检测小鼠肝脏组织脂质变化。结果健脾利湿方改善了HFD诱导的体质量增加,HE、油红染色显示具有肝脏保护作用,可恢复葡萄糖代谢水平。其次,降低了肝脏Fasn、CD36、SCD1、Srebp1c的mRNA水平(P<0.05,P<0.01,P<0.001);此外,脂质组学研究发现,健脾利湿方对肝脏脂质组成存在调控作用。结论健脾利湿方具有降低体质量、调节血糖、保护肝脏的作用,脂质组学研究表明对肝脏脂质组成的调控可能是健脾利湿方治疗NAFLD主要作用机制。

疏肝健脾利湿方对慢性盆腔炎肝郁脾虚证患者中医证候积分、血清炎性因子及复发率的影响

目的:探讨疏肝健脾利湿方联合西医对慢性盆腔炎肝郁脾虚证患者中医证候积分、血清炎性因子及复发率的影响。方法:选取2019年8月~2021年12月期间我院收治的慢性盆腔炎肝郁脾虚证患者84例,采用随机数字表法分为研究组和对照组,每组42例。对照组患者予以西药治疗,研究组在对照组基础上联合使用疏肝健脾利湿方治疗。评估两组疗效,并比较治疗前后中医证候积分、血清炎性因子水平、血流变学指标水平及随访期间复发率。结果:治疗后,研究组治疗总有效率为95.24%,高于对照组的78.57%(P<0.05);两组少腹胀痛、腰骶胀痛、带下异常、月经不调以及经期腹痛评分均下降,且研究组低于对照组(P<0.05);两组白介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子(TNF-α)以及C反应蛋白(CRP)水平均下降,且研究组IL-2、TNF-α水平低于对照组(P<0.05);两组全血低切粘度、全血高切粘度以及血沉水平均下降,且研究组低于对照组(P<0.05);随访期间复发率研究组低于对照组(P<0.05)。结论:疏肝健脾利湿方联合西医治疗慢性盆腔炎肝郁脾虚证患者,可增强疗效,改善中医证候积分和血流变学,抑制血清炎性因子水平,并降低复发风险。

补肾健脾利湿方治疗肥胖型多囊卵巢综合征临床观察

目的:观察补肾健脾利湿方治疗肥胖型多囊卵巢综合征的临床疗效。方法:48例肥胖型多囊卵巢综合征患者给予补肾健脾利湿方治疗,研究采用自身前后对照法,观察治疗前后月经、卵巢体积及卵泡发育情况、血清FSH、LH、LH/FSH、T水平、体重指数变化。结果:补肾健脾利湿方可以明显降低血清LH、T、LH/FSH水平(P<0.05),卵巢体积变小(P<0.05),优势卵泡形成增加(P<0.05),体重指数下降(P<0.05),月经情况明显改善。结论:补肾健脾利湿方治疗多囊卵巢综合征有良好临床疗效。

健脾利湿方药治疗多囊卵巢综合征脾虚痰湿型临床观察

目的评价健脾利湿方药治疗脾虚痰湿型多囊卵巢综合征的临床疗效。方法选取多囊卵巢综合征脾虚痰湿型患者66例,随机分为试验组(中西药组)和对照组(西药组),每组33例。西药组给予达英-35口服,中西药组在西药组的基础上,给予健脾利湿方药,3个月经周期为一个疗程。观察两组患者治疗前与停药后第1个月经周期及第6个周期患者临床症状、超声检查及内分泌激素的变化。结果两组患者共脱落3例,西药组31例,中西药组32例。停药1个月经周期,两组患者月经周期及BBT双相率均有所好转,与治疗前相比有统计学意义(P<0.01),两组间相比无明显差异(P>0.05);停药6个月经周期后,两组月经周期正常率、BBT双相率中西药组优于西药组(P<0.05)。停药1个月经周期,两组患者双卵巢体积明显减小(P<0.01),停药6个月经周期,中西药治疗组与治疗前相比仍明显减小(P<0.01),西药组恢复到治疗前状态(P>0.05)。停药1个月经周期,两组患者双卵巢的卵泡数较治疗前均明显减少(P<0.01),停药6个月经周期,中西药治疗组较治疗前仍明显减少(P<0.01),西药组恢复到治疗前状态(P>0.05)。停药1个月经周期,两组患者激素水平(LH、T、LH/FSH、PRL)与治疗前比较降低(P<0.01);停药6个月经周期,中西药治疗组仍较治疗前降低明显(P<0.01),西药组恢复到治疗前水平(P>0.05)。结论健脾利湿方药联合达英-35治疗脾虚痰湿型多囊卵巢综合征临床疗效确切,远期疗效稳定、持久。

益肾健脾利湿方对乙硫氨酸诱导的非酒精性脂肪肝小鼠的保护作用

目的:研究益肾健脾利湿方对乙硫氨酸诱导的非酒精性脂肪肝小鼠的保护作用及其作用机制。方法:40只昆明种小鼠随机分为正常对照组、脂肪肝模型组、益肾健脾利湿方组和二甲双胍组,每组10只。脂肪肝模型组、益肾健脾利湿方组和二甲双胍组小鼠灌胃DL-乙硫氨酸7 d,建立非酒精性脂肪肝模型。造模成功后各组小鼠灌胃相应药物,连续14 d。末次给药后,称定小鼠体质量和肝湿质量,计算其肝系数;并测定小鼠肝脏组织中TC、TG含量和血清中TC、TG、ALT、AST含量。结果:与正常对照组比较,脂肪肝模型组小鼠肝脏系数显著升高(P<0.01);肝脏组织中TC、TG含量显著增加(P<0.05,P<0.01);血清中TC、TG、ALT、AST含量显著增加(P<0.01)。与脂肪肝模型组比较,益肾健脾利湿方组和二甲双胍组小鼠肝脏系数显著降低(P<0.01);肝脏组织中TC、TG含量显著降低(P<0.01);血清中TC、TG、ALT、AST含量显著降低(P<0.01)。结论:益肾健脾利湿方对小鼠非酒精性脂肪肝具有保护作用,其机制与降低肝脏组织中TC、TG水平及血清中TC、TG、ALT、AST水平有关。

健脾利湿方治疗冻融胚胎移植周期中宫腔积液32例

目的:观察腹腔镜下双侧输卵管近端结扎术后,行冻融胚胎移植周期中出现宫腔积液患者采用健脾利湿方加减治疗的临床疗效。方法:选取既往因输卵管积水行腹腔镜下双侧输卵管近端结扎术,于2013年8月至2018年7月在本院生殖中心行冻融胚胎移植周期中出现宫腔积液的患者64例,采用随机数字表法分为治疗组和对照组,每组32例。对照组在发现宫腔积液时即行阴道B超引导下宫腔积液抽吸术,治疗组给予自拟健脾利湿方加减内服治疗。移植日进行B超检测,未发现宫腔积液则行胚胎移植术,发现宫腔积液复发患者取消该周期移植。观察两组患者移植日周期取消率、子宫内膜厚度、血清雌二醇(estradiol,E2)和孕酮(progesterone,P)水平,胚胎移植35 d临床妊娠率。结果:移植日治疗组周期取消率低于对照组,临床妊娠率高于对照组,差异无统计学意义(P>0.05);移植日治疗组子宫内膜厚(1.03±0.18) cm,对照组子宫内膜厚(0.89±0.14) cm,治疗组子宫内膜厚度明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);移植日治疗组血清P水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:健脾利湿方加减内服可降低患者移植日周期取消率,能增加患者子宫内膜厚度,提高临床妊娠率。

健脾利湿方对湿疹患者生活质量的影响

目的观察中药健脾利湿方对湿疹患者生活质量的影响。方法采用DLQI量表,以消风止痒颗粒为对照药,观察中药健脾除湿方对湿疹生活质量的影响。共观察96例,治疗组(健脾除湿方组)与对照组(消风止痒颗粒组)均为48例。分别于治疗前、治疗后2周、4周各随访观察1次,进行记录评分。结果⑴在皮肤病生活质量指数(DLQI)总分上,治疗组及对照组均有明显改善(P<0.01),且治疗组患者的DLQI总分改善程度均要优于对照组(P<0.01)。⑵在分项指标上,治疗组及对照组均有明显改善(P<0.01)。治疗组患者治疗后皮肤病生活质量指数分项"朋友或亲戚关系"、"睡眠"、"治疗所花费的时间、副作用及经济负担"记分改善程度要优于对照组(P<0.01,P<0.05,P<0.05)。结论中药健脾除湿方对湿疹患者生活质量具有较明显的改善作用。

健脾利湿方联合硫酸镁及钙离子拮抗剂治疗妊娠期高血压的效果

目的观察硫酸镁联合钙离子拮抗剂治疗妊娠期高血压的临床效果。方法选取嵊州市人民医院妇产科2014年1月~2015年6月收治的妊娠期高血压患者共81例,按随机、双盲法分为观察组41例和对照组40例。对照组患者给予硫酸镁及钙离子拮抗剂治疗,观察组患者在对照组基础上给予健脾利湿方治疗,观察比较2组患者治疗前后的收缩压、舒张压、24 h尿蛋白定量（24 h urinary protein,24 h UTP）、尿转铁蛋白（transferrin,TRF）、血液黏度、红细胞聚集指数及疗效对比。结果观察组患者治疗后收缩压、舒张压值分别为（125.73±5.48、80.06±3.34）mm Hg,均低于对照组（140.16±7.02、86.79±5.21）mm Hg（P〈0.05）;观察组患者治疗后24 h UTP、TRF的含量分别为（1.75±0.14）g/24 h、（1.41±0.28）mg/L,均低于对照组（2.55±0.18）g/24 h、（2.23±0.37）mg/L（P〈0.05）;观察组患者治疗后血液黏度、红细胞聚集指数分别为（2.00±0.23）m Pa·s、（3.11±0.20）,均低于对照组（2.56±0.47）m Pa·s、3.69±0.41）（P〈0.05）;观察组患者治疗后总有效率为95.12%,明显高于对照组的80.00%（P〈0.05）。结论健脾利湿方联合硫酸镁及钙离子拮抗剂可有效降低患者的血压,同时改善血液黏度,联合用药的治疗效果优于单独用药。

健脾利湿方对白兔骨筋膜室综合征早期肿胀的影响

目的:观察健脾利湿方对白兔骨筋膜室综合征早期肿胀的影响。方法:将健康白兔30只适应性喂养2 d后,按照随机数字表法分为空白组10只和模型组20只。模型组造模成功分为健脾利湿组和模型对照组,每组各10只。空白组不做灌胃处理,健脾利湿组给予健脾利湿方灌胃,模型对照组给予生理盐水灌胃。观察各组白兔造模前及造模后2 h、12 h、24 h、48 h、96 h、7 d下肢周径、组织内压、尿量、肌肉神经病理变化情况。结果:造模后各时间点,模型对照组下肢周径大于空白组;造模后2 h、12 h、24 h、48 h、96 h,健脾利湿组下肢周径大于空白组;造模后48 h、96 h、7 d,健脾利湿组下肢周径大于模型对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。造模后各时间点,健脾利湿组和模型对照组组织内压大于空白组;造模后96 h、7 d,健脾利湿组组织内压大于模型对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。造模后2 h、12 h、24 h,健脾利湿组尿量少于空白组,差异有统计学意义(P<0.05);造模前、造模后12 h、48 h、96 h、7 d,健脾利湿组尿量与模型对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。空白组骨骼肌纤维正常;模型对照组伤侧组织坏死,结构破坏,大量炎细胞浸润;健脾利湿组伤侧细胞肿胀破坏程度较轻,有炎细胞浸润。结论:将自拟健脾利湿方运用于白兔骨筋膜室综合征,可降低组织内压力,增加尿量,从而减轻下肢肿胀程度,改善局部病理损伤程度。

健脾利湿方联合利拉鲁肽治疗42例肥胖2型糖尿病患者的临床研究

目的:探究健脾利湿方联合利拉鲁肽治疗肥胖2型糖尿病(T2DM)患者的临床效果。方法:选取我院肥胖T2DM患者84例,采用随机数字表法分组,各42例。对照组予以利拉鲁肽治疗,观察组予以健脾利湿方联合利拉鲁肽治疗。对比两组治疗前后体质量指数(BMI)、空腹血糖(FPG)、餐后2h血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、人急性时相血清淀粉样蛋白A(ASAA)、丙二醛(MDA)水平。结果:治疗后观察组BMI、FPG、2hPG、ASAA、MDA低于对照组(P<0.05)。结论:健脾利湿方联合利拉鲁肽治疗肥胖T2DM患者,可减轻炎症反应,抑制氧化应激,降低BMI,控制血糖水平。

健脾利湿解毒方治疗慢性结肠炎脾虚湿毒证疗效研究

目的:观察健脾利湿解毒方治疗慢性结肠炎脾虚湿毒证的临床疗效。方法:选取120例确诊为慢性结肠炎脾虚湿毒证的患者,采取随机数字表法分为观察组以及对照组,每组60例。对照组采取口服复方嗜酸乳杆菌片治疗,观察组在对照组治疗的基础上采取口服健脾利湿解毒方治疗,疗程均为3个月。治疗完成后比较两组治疗前后中医证候积分及脑肠肽[血管活性肠肽(VIP)、5-羟色胺(5-HT)、P物质(SP)、生长抑素(SS)]、炎症因子[C-反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-17(IL-17)]和粪便钙卫蛋白(FC)水平。比较两组总有效率及不良反应发生情况。结果:治疗后,观察组总有效率高于对照组(P<0.05);治疗后,两组中医证候积分均较治疗前降低,组间相比,观察组水平更低(均P<0.05);治疗后,两组VIP、5-HT、SP、SS、CRP、TNF-α、IL-17水平以及FC水平较治疗前降低,组间相比,观察组水平更低(均P<0.05)。两组均无不良反应。结论:健脾利湿解毒方可改善慢性结肠炎患者各项症状,抑制脑肠肽水平及炎性反应,且临床安全性高、无明显不良反应。

基于网络药理学和分子对接方法探讨健脾利湿养肝方治疗慢加急性肝衰竭的作用机制

目的运用网络药理学和分子对接探究养肝方治疗慢加急性肝衰竭(acute-on-chronic liver failure,ACLF)的作用机制。方法依托TCMSP及GeneCards等多种数据库,获得健脾利湿养肝方治疗ACLF疾病的相关靶点。应用String及Cytoscape构建作用靶点的PPI网络,筛选出核心作用靶点并采用DAVID进行GO功能注释和KEGG通路富集分析。对健脾利湿养肝方重复出现的活性成分以生物利用度OB值≥30%,类药性DL≥0.18为筛选条件,分选出中药复方健脾利湿养肝方的主要活性成分,并对该主要活性成分与核心作用靶点亲和力进行分子对接及动物体内实验验证。结果共获得健脾利湿养肝方治疗ACLF的活性成分536个,交集靶点基因244个,并筛选出核心靶点基因7个。分子对接显示核心靶基因AKT1、SRC、VEGFA、STAT3、EGFR、MAPK3、HRAS与健脾利湿养肝方中的主要活性成分槲皮素亲和力较好,具有很强的结合活性。另外,体内实验验证健脾利湿养肝方能够降低HRAS、EGFR、STAT3、SRC、VEGFA的表达,以延缓ACLF疾病进展。结论健脾利湿养肝方可能作用于HRAS、EGFR、STAT3、SRC、VEGFA等核心靶点,以达到治疗ACLF的作用。

健脾利湿通络方联合涌泉穴艾灸治疗下肢静脉性水肿湿邪瘀阻证的随机对照研究

目的观察健脾利湿通络方联合涌泉穴艾灸治疗慢性下肢静脉性水肿湿邪瘀阻证的临床疗效。方法将符合纳入标准的70例慢性下肢静脉性水肿湿邪瘀阻证患者随机分为2组,每组35例。对照组采用艾灸涌泉穴治疗,试验组在对照组治疗方案的基础上服用健脾利湿通络方治疗。两组患者均治疗4周。统计两组患者的治疗总有效率,比较两组患者治疗前后中医证候积分、患肢症状及体征积分、患肢周径、血清炎症因子水平和安全性。结果试验组共34例患者纳入最终结果统计,治疗总有效率为91.17%(31/34);对照组共33例患者纳入最终结果统计,治疗总有效率为69.70%(23/33)。试验组治疗总有效率高于对照组(P=0.026)。两组患者治疗后中医证候积分、患肢症状及体征积分、患肢髌骨下缘下15 cm处及胫骨内髁上缘上2 cm处周径、血清炎症因子(IL-6和TNF-α)水平均低于治疗前(均P<0.05),且治疗后试验组上述各指标(除胫骨内踝上2 cm处周径外)均低于对照组(均P<0.05)。治疗过程中,两组患者的肝、肾功能均未见明显异常,均未出现严重不良反应。结论健脾利湿通络方联合涌泉穴艾灸治疗慢性下肢静脉性水肿能够明显改善患肢的症状、体征,减轻机体炎症反应。

健脾利湿解毒方内外兼治宫颈锥切术后持续HPV感染的临床效果研究

目的探讨健脾利湿解毒方内外兼治宫颈锥切术后持续人乳头瘤病毒(HPV)感染的临床效果。方法选取2021年1月至2022年12月沧州市人民医院收治的104例宫颈锥切术后持续HPV感染患者作为研究对象,按照随机数字表法分为对照组和观察组,各52例。对照组以重组人干扰素α-2b阴道泡腾片治疗,观察组增加健脾利湿解毒方内外兼治。3个疗程后,比较两组临床疗效、中医证候积分、炎症因子、免疫功能、治疗安全性。结果观察组总有效率为92.31%(48/52),高于对照组的76.92%(40/52),差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组各项中医证候积分均低于对照组(P<0.05)。观察组沉默调节蛋白1(SIRT1)、Nod样受体蛋白3(NLRP3)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-3(TIMP-3)低于对照组(P<0.05)。观察组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)高于对照组,CD8^(+)低于对照组(P<0.05)。两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论健脾利湿解毒方内外兼治宫颈锥切术后持续HPV感染临床效果显著,可促进HPV转阴,改善中医证候,抑制炎症因子表达,提升免疫水平,安全性良好。

清热利湿健脾方对溃疡性结肠炎大鼠肠道菌群、免疫炎性反应及内质网应激的影响

目的 探讨清热利湿健脾方对溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠道菌群、免疫炎性反应及内质网应激的影响。方法 雄性SD大鼠SPF级40只,随机分为4组,每组10只。制备UC大鼠模型。低剂量组大鼠给予1.42 g/kg清热利湿健脾方汤灌胃,持续14 d;高剂量组大鼠给予5.68 g/kg清热利湿健脾方灌胃,持续14 d;模型组和正常组大鼠灌胃氯化钠溶液等剂量,持续14d。比较各组大鼠DAI评分,肠道菌群,免疫炎性因子,ATF4、CHOP和GRP78蛋白表达情况。结果 与正常组比较,其余各组UC大鼠DAI评分、大肠杆菌和肠球菌相对表达量、IL-6、IL-17、ATF4、CHOP和GRP78蛋白表达灰度值升高,而乳酸杆菌和双歧杆菌相对表达量、IL-10水平降低(P<0.05);与模型组比较,低剂量组和高剂量组UC大鼠DAI评分、大肠杆菌和肠球菌相对表达量、IL-6、IL-17、ATF4、CHOP和GRP78蛋白表达灰度值降低,而乳酸杆菌和双歧杆菌相对表达量、IL-10水平升高(P<0.05);与低剂量组比较,高剂量组UC大鼠乳酸杆菌和双歧杆菌相对表达量、IL-10水平降低,而乳酸杆菌和双歧杆菌相对表达量、IL-10水平升高(P<0.05)。结论 清热利湿健脾方可改善UC大鼠肠道菌群,减轻免疫炎性反应,下调ATF4、CHOP及GRP78蛋白表达。

“健脾利湿化瘀方”联合治疗激素敏感性前列腺癌的真实世界研究

目的:观察“健脾利湿化瘀方”联合雄激素受体抑制剂/雄激素合成抑制剂+促性腺激素释放激素激动剂(MAB)治疗激素敏感性前列腺癌(hormone-sensitive prostate cancer,HSPC)的临床疗效。方法:选取2019年11月至2021年6月于天津中医药大学第一附属医院、天津医科大学总医院就诊的HSPC患者100例,随机分为治疗组和对照组各50例,对照组接受MAB治疗,治疗组在对照组基础上给予“健脾利湿化瘀方”。主要观察指标为中位无进展生存期(median progression-free survival,mPFS)、前列腺特异性抗原(prostate specific antigen,PSA);次要观察指标为血清睾酮、中医临床症状评分、肿瘤生存质量调查表(EORTC QLQ-C30)、KPS功能状态评分。结果:治疗组较对照组可延长mPFS 4个月(16个月vs.12个月)、明显降低PSA水平、改善中医临床症状、改善QLQ-C30、提高KPS评分(均P<0.05)。亚组预后因素分析显示,治疗前KPS评分90分组、PSA最低值≤1 ng/mL、PSA下降≥90%的患者在治疗组中获益更显著。结论:“健脾利湿化瘀方”联合MAB治疗延长患者的m PFS,更好地降低PSA水平,实现PSA的深度应答,降低血清睾酮至去势水平,延长激素敏感时间,改善中医临床症状,提高患者的生存质量。

“健脾利湿化瘀方”对人前列腺癌PC-3细胞荷瘤小鼠的抑瘤作用研究

目的:探讨"健脾利湿化瘀方"对人前列腺癌PC-3细胞小鼠荷瘤模型的抑瘤作用。方法:取60只雄性裸鼠,右前肢皮下接种人前列腺癌PC-3细胞,建立人前列腺癌PC-3细胞小鼠荷瘤模型。确定造模成功后随机分为荷瘤对照组、健脾利湿化瘀方治疗组(全方组)、扶正治疗组、化瘀治疗组、解毒治疗组、长春瑞滨治疗组(西药组),每组10只小鼠。荷瘤对照组给予0.3 m L生理盐水灌胃,每日灌胃2次;中药各治疗组给予0.3 m L中药汤剂灌胃(浓度2 g/m L),每日灌胃2次;长春瑞滨组每日腹腔注射1次,药物浓度6.7 mg/kg。给药14 d后,观察各组小鼠生存状态、测量其体质量及瘤体大小,处死后称量瘤重,计算抑瘤率。结果:各组间,西药组小鼠的生存状态最差,精神状态萎靡,灌胃期不满1周时就死亡过半,即脱落实验。荷瘤对照组小鼠灌胃期间共死亡3只,全方组灌胃期间死亡1只。体质量比较情况:第7天,各组间小鼠体质量下降比较无统计学差异(P>0.05);第14天,全方组与空白对照组相比,小鼠体质量下降具有统计学差异(P=0.032<0.05)。瘤体积变化情况:第7天、第14天各组间差异均无统计学意义(P>0.05)。瘤重结果显示:各组间小鼠瘤重差异具有统计学意义(P=0.04<0.05)。全方组、扶正治疗组、化瘀治疗组、解毒治疗组抑瘤率分别为53.97%、34.92%、22.22%、19.05%。结论:实验研究得出,"健脾利湿化瘀方"能够抑制人前列腺癌PC-3细胞裸鼠移植瘤的生长,有效改善裸鼠生存状态。

基于IGF/MMP信号通路研究健脾利湿化瘀方有效拆方对前列腺癌细胞侵袭、迁移的影响

[目的]在健脾利湿化瘀方临床疗效的基础上,结合前期动物实验研究,初步运用前列腺癌细胞增殖实验初筛健脾利湿化瘀方的最佳作用拆方;再基于胰岛素样生长因子(IGF)/基质金属蛋白酶(MMP)信号通路探究作用机制,为进一步研究全方作用机制奠定基础。[方法]用四甲基噻唑蓝(MTT)法检测健脾利湿化瘀方各拆方组含药血清,包括健脾扶正组(黄芪、刺五加、补骨脂)、化瘀散结组(姜黄、大黄、王不留行)、清热解毒组(白英、蛇六谷、车前草),对前列腺癌PC3和DU-145细胞的增殖抑制率,并取化瘀散结组药物作为进一步研究用药;通过Transwell、划痕实验评估化瘀散结组药物影响细胞的侵袭、迁移情况;用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-Time PCR)方法检测前列腺活化间质细胞中基质细胞衍生因子-1(SDF-1)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、MMP、纤维粘连蛋白(FN)基因的mRNA转录水平的变化情况;用蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测化瘀散结组药物对前列腺活化间质细胞系胞SDF-1、IGF-1、MMP、FN蛋白表达的影响。[结果]不同拆方组中,化瘀散结药物组对PC-3、DU-145抑制率最高,且随着药物浓度增加,分别从18.77%、58.89%增加至87.30%,呈一定剂量依赖性(P<0.05);细胞迁移实验中化瘀散结组药物与阴性对照组相比,DU-145侵袭细胞数分别为(7.33±2.51)、(22.00±2.65)个(P=0.002),PC-3侵袭细胞数为(3.67±0.58)、(22.67±7.77)个(P<0.05),差异均有统计学意义;划痕实验结果显示化瘀散结组药物PC-3、DU-145细胞24 h迁移距离分别为(330.12±13.15)、(453.34±42.74)μm,阴性对照组迁移距离分别为(525.40±6.58)、(759.75±40.88)μm,P值分别为0.01、0.018,差异均有统计学意义。化瘀散结组药物明显降低Vimentin、SM22、SMM的蛋白表达,而Calcyclin的表达与阴性对照组比较差异无统计学意义。化瘀散结组药物对IGF-1、MMP基因相对表达量均在高剂量组中较低,降低SDF-1、IGF、MMP蛋白表达。[结论]化瘀散结药物组能够有效地抑制前列腺癌细胞的增殖、侵袭、迁移,其机制可能与化瘀散结药物下调IGF/MMP信号通路有关。

“健脾利湿化瘀方”联合治疗去势抵抗性前列腺癌的临床研究

[目的]通过多中心随机对照试验,观察“健脾利湿化瘀方”联合治疗去势抵抗性前列腺癌(CRPC)的临床疗效。[方法]收集符合纳入标准的CRPC患者120例,随机分为对照组(单纯西医治疗组)和治疗组(在对照组的基础上予以口服健脾利湿化瘀加减方)各60例。观察治疗前和治疗后2、4、6、8周5个时间段,两组患者的血清前列腺特异抗原(PSA)、血清游离睾酮、淋巴细胞亚群分析、最大尿流率、中医临床症状评分、卡氏(KPS)评分和国际前列腺癌症状评分等疗效评价指标,并观察血常规、肝肾功能损伤等安全性指标的变化。[结果]与对照组相比,治疗组在治疗后4周有效地降低患者总前列腺特异抗原(tPSA)值、游离前列腺特异抗原(fPSA)值;使KPS评分趋于平稳;在治疗后4周,增大最大尿流率,改善患者的临床症状;尤其在前列腺癌中医临床症状和国际前列腺症状评分的改善方面,治疗组显著优于对照组,明显改善患者乏力、尿频、尿痛等临床症状,提高患者生活质量。[结论]“健脾利湿化瘀方”联合治疗方案能更好地降低患者PSA值,明显改善CRPC患者的尿频、尿痛和精神萎靡等中医临床症状、生理状况、功能状况,提高最大尿流率以及减轻患者前列腺癌相关临床症状,减轻患者不良情绪,增进社会家庭关系。

基于PI3K/AKT/eNOS信号通路探讨健脾利湿化瘀方抑制前列腺癌血管生成的实验研究

[目的]在健脾利湿化瘀方临床疗效和前期实验的基础上,继续探讨健脾利湿化瘀方及其拆方在抑制人前列腺癌PC-3细胞荷瘤小鼠血管生成方面的作用,及其对PI3K/AKT/eNOS信号通路的影响。[方法]选取6~8周雄性裸鼠36只建立人前列腺癌荷瘤小鼠模型,随机分为空白对照组、西药组、全方组、君药组、臣药组和佐药组。实验各组干预14 d后处死取血称瘤质量,计算抑瘤率;使用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清中血管内皮生长因子(VEGF)、内皮型一氧化氮合成酶(eNOS);免疫组化法观察各组瘤组织中VEGF、ANG1的表达;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测肿瘤组织中磷脂酰肌3-羟激酶(PI3K)、丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(AKT)、磷酸化的AKT(p-AKT)、eNOS蛋白表达水平。[结果]各给药组瘤体积、瘤质量均低于空白对照组(P<0.01),西药组、全方组、君药组、臣药组、佐药组的抑瘤率分别为53.95%、41.05%、19.21%、27.37%、31.32%,拆方组间比较,佐药组抑瘤效果较好,但无统计学差异(P>0.05);ELISA检测显示:各组VEGF、eNOS含量均低于空白对照组,其中西药组、全方组显著降低(P<0.05或P<0.01);Western Blot结果显示:各组PI3K、eNOS的蛋白表达均显著降低(P<0.05或P<0.01),AKT蛋白表达无显著变化(P>0.05),p-AKT呈降低趋势(P<0.05),其中西药组、全方组、佐药组呈显著下降(P<0.01)。[结论]尽管与西药对比抑瘤作用较弱,但中药健脾利湿化瘀方对前列腺癌在血管生成方面具有确切的抑制作用,尤其是具有化瘀消癥散结作用的佐药组,可能与姜黄、王不留行中某些有效成分能够下调PI3K、eNOS蛋白,影响AKT磷酸化,阻断PI3K/AKT/eNOS信号通路相关。