类风湿关节炎血清总免疫复合物诱导破骨细胞分化引起骨质疏松的因素分析

背景:类风湿关节炎患者骨质疏松症的发生率明显增高,患者血清中存在的大量免疫复合物是否促进了骨质疏松症的发生与发展仍不明确。目的:探讨类风湿关节炎患者血清总免疫复合物与骨质疏松症的关系。方法:(1)临床试验:选择50名健康体检者(健康对照组)与50例初治型类风湿关节炎患者(类风湿关节炎组),回顾性分析两组患者的临床资料与实验室检查,比较两组血清总免疫复合物水平。将类风湿关节炎患者血清总免疫复合物与骨密度、骨转换标志物及其他临床指标进行相关性分析。(2)细胞实验:分离培养健康志愿者外周血单核细胞,分4组处理:类风湿关节炎组加入类风湿关节炎患者血清总免疫复合物悬液,正常对照组加入健康体检者血清总免疫复合物悬液,阳性对照组加入含巨噬细胞集落刺激因子与核因子κB受体活化因子配体的α-MEM培养基,阴性对照组加入α-MEM培养基。处理7 d后进行抗酒石酸酸性磷酸酶染色,观察破骨细胞形成情况。结果与结论:(1)临床试验:类风湿关节炎组患者血清总免疫复合物、血清碱性磷酸酶水平均明显高于健康体检者(P<0.01,P<0.05);Pearson相关分析结果显示,类风湿关节炎患者血清总免疫复合物与血沉(r=0.330,P=0.019)、血清碱性磷酸酶(r=0.545,P=0.001)、抗环瓜氨酸肽抗体(r=0.377,P=0.007)和Ⅰ型胶原C端肽(r=0.738,P=0.001)呈正相关关系,与腰椎骨密度(r=-0.595,P=0.001)呈负相关关系;二元Logistic回归分析结果显示,年龄[OR=1.086,95%CI(1.022,1.154),P=0.008]、抗环瓜氨酸肽抗体[OR=1.002,95%CI(0.999,1.005),P=0.035]、Ⅰ型胶原C端肽[OR=0.141,95%CI(0.015,8.900),P=0.008]和血清总免疫复合物[OR=2.895,95%CI(1.228,6.827),P=0.001]是类风湿关节炎患者骨量异常(骨量减少或骨质疏松)的影响因素;(2)细胞实验:阳性对照组、正常对照组、类风湿关节炎组可见抗酒石酸酸性磷酸酶染色阳性的破骨细胞,并且与正常对照组相比,类风湿关节炎组破骨细胞形成更多(P<0.01);(3)结果表明,血清总免疫复合物可作为预测类风湿关节炎并发骨质疏松症的潜在血清学指标,清除血清中的免疫复合物或者干预免疫复合物与其受体的结合可能成为临床预防和治疗类风湿关节炎并发骨质疏松症的有效手段。

益气活血化痰方对老年颈动脉粥样硬化患者低密度脂蛋白免疫复合物影响的临床研究

目的:探讨益气活血化痰法中药复方对颈动脉粥样硬化患者的疗效,并研究其机制是否与免疫调节氧化低密度脂蛋白免疫复合物有关,从而探讨中医药免疫调节抗动脉粥样硬化疗效和靶点机制。方法:以老年颈动脉粥样硬化患者为研究对象,随机分为两组(实验组予益气活血化痰方加辛伐他汀,对照组予辛伐他汀)干预12周,实验结束前后各组患者予以中医证候评分、颈动脉B超检查(记录IMT、RI、Course积分)、ELISA法检测血清胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白及低密度脂蛋白免疫复合物,统计分析数据。结果:实验结束后组内前后对比,实验组和对照组血清胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白均明显下降(P<0.01),LDL-IC水平有所下降(P<0.05);实验后实验组LDL-IC水平低于对照组(P<0.05),但两组间血清胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白水平无明显差异(P>0.05)。实验结束后组内前后对比,实验组和对照组颈动脉Course积分、颈动脉内-中膜厚度、阻力指数均无明显差异(P>0.05),试验后组间比较亦无明显差异(P>0.05)。实验结束后组间对比,实验组中医证候积分较对照组有明显好转(P<0.01)。表明联用益气活血化痰方具有降低颈动脉粥样硬化患者LDL-IC水平的作用,并且能够明显改善患者症状。结论:他汀类药物联用益气活血化痰方具有更强的抗动脉粥样硬化和改善症状的作用,其机制可能是调节免疫反应从而降低LDL-IC,减轻动脉粥样硬化。

肾病综合征患儿血清补体抗御免疫复合物致病性的研究

作者测定了60例肾病综合征患儿血清补体抑制免疫复合物沉淀和溶解免疫复合的能力(ICPIC,CMSC).临床分析表明,单纯性肾病患儿血ICPIC和CMSC无明显异常,而肾炎性肾病、乙肝性肾炎、紫癜性肾炎患儿则显著下降.肾脏病理分析表明,除微小病变型肾病无显著异常外,其它类型均有不同程度下降.此外,研究发现血ICPIC和CMSC可较好地反映肾病远期转归,而且反映肾脏病变活动性比血补体(CH_(50),C_3和C_4)和血循环免疫复合物敏感.

血浆淀粉酶联合循环免疫复合物在急性胰腺炎诊断中的应用价值

目的分析血浆淀粉酶(AMY)联合循环免疫复合物(CIC)在急性胰腺炎(AP)诊断中的应用价值。方法选取2022年1月至2024年1月医院收治的68例AP患者作为AP组,其中重度AP(SAP)15例、中度AP(MSAP)35例、轻度AP(MAP)18例。另选取同期的68名健康体检者为正常组。比较两组血浆AMY、CIC水平及急性生理与慢性健康状况量表(APACHEⅡ)评分,比较不同严重程度AP患者的血浆AMY、CIC水平及APACHEⅡ评分,采用Pearson相关性分析血浆AMY、CIC与APACHEⅡ评分的相关性,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析血浆AMY、CIC单独及联合诊断AP的应用价值。结果AP组血浆AMY、CIC水平及APACHEⅡ评分均高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。SAP组的血浆AMY、CIC水平及APACHEⅡ评分均高于MSAP、MAP组,且MSAP组高于MAP组,差异有统计学意义(P<0.05)。血浆AMY、CIC水平与APACHEⅡ评分呈正相关(r=0.376、0.391,P<0.05)。血浆AMY、CIC联合诊断AP的曲线下面积(AUC)为0.891,95%CI为0.851~0.952。血浆AMY、CIC联合诊断AP的灵敏度高于两者单独诊断(P<0.05)。结论AP患者血浆AMY、CIC水平异常增高,与患者病情的严重程度密切相关,两者联合诊断AP的灵敏度较高。

低密度脂蛋白免疫复合物对单核细胞源性巨噬细胞胆固醇代谢及低密度脂蛋白受体表达的影响

目的研究动脉粥样硬化过程中低密度脂蛋白免疫复合物对单核细胞源性巨噬细胞胆固醇代谢和低密度脂蛋白受体表达的影响。方法以佛波酯刺激分化的THP1细胞作为单核细胞源性巨噬细胞模型。通过胆固醇酶联法测定细胞内胆固醇含量,逆转录—聚合酶链反应检测细胞低密度脂蛋白受体mRNA的表达,Westernblot检测细胞低密度脂蛋白受体蛋白的表达。结果与低密度脂蛋白组、阴性组及IgG免疫复合物组比较,低密度脂蛋白免疫复合物组细胞内胆固醇水平明显增高,并且低密度脂蛋白受体mRNA及蛋白的表达增加。结论低密度脂蛋白免疫复合物能显著增加巨噬细胞内胆固醇含量,亦能够促进低密度脂蛋白受体mRNA与蛋白的表达,提示低密度脂蛋白免疫复合物在动脉粥样硬化进展过程中起重要的作用。

药源性循环免疫复合物检测方法的建立

目的通过重组人白介素1受体拮抗剂(rhIL-1Ra)的大鼠6mon重复给药毒性试验,建立临床前安全性评价中动物体内药源性循环免疫复合物(CIC)的检测方法,为临床CIC检测提供依据。方法从rhIL-1Ra免疫后的兔血清中纯化总IgG包被于酶标板上作为捕获抗体,SD大鼠抗rhIL-1Ra阳性血清与rhIL-1Ra以不同比例混和制成人工免疫复合物(AIC),通过双抗夹心ELISA检测AIC的效率来评价该方法有效性。定期采集连续26wk皮下注射rhIL-1Ra的大鼠血清并以上述方法检测CIC,同时用免疫组化法显示肾小球中的免疫复合物(IC)来验证该方法。结果双抗夹心ELISA法可显示AIC的数量差异,大鼠血清CIC显示出与给药时间一致的变化,并与肾小球中IC检测结果相印证。结论双抗夹心ELISA法可检测出动物因长期给予外源蛋白而产生的CIC,AIC则可作为该检测体系中的阳性对照。

低密度脂蛋白免疫复合物对小鼠腹腔巨噬细胞胆固醇酯蓄积和一氧化氮释放的影响

目的探讨低密度脂蛋白免疫复合物对小鼠腹腔巨噬细胞胆固醇酯的蓄积和一氧化氮释放的影响。方法密度梯度超速离心从新鲜人血浆分离天然低密度脂蛋白,与抗低密度脂蛋白抗血清IgG组分制备低密度脂蛋白免疫复合物,低密度脂蛋白免疫复合物与小鼠腹腔巨噬细胞孵育后采用酶荧光法检测细胞胆固醇酯含量,进行细胞形态学观察和组织化学分析,并用硝酸还原酶法测定细胞释放至培养基中的一氧化氮量。结果低密度脂蛋白免疫复合物剂量依赖性地诱导巨噬细胞内胆固醇酯的大量堆积,其效应显著强于氧化型低密度脂蛋白(P<0.01),经低密度脂蛋白免疫复合物处理的巨噬细胞呈典型泡沫细胞状,与猩红强染色,而天然低密度脂蛋白、抗低密度脂蛋白IgG处理的巨噬细胞内未见胆固醇酯的蓄积。此外,低密度脂蛋白免疫复合物剂量依赖性地抑制巨噬细胞一氧化氮的分泌。结论低密度脂蛋白免疫复合物不仅通过致小鼠腹腔巨噬细胞泡沫化,也通过损伤巨噬细胞分泌一氧化氮的功能参与致动脉粥样硬化作用。

反应型双特异性免疫复合物的免疫生物学

在国内外首创双特异性循环免疫复合物 (TCIC)的新概念 ,提出了一种检测循环免疫复合物的新分类方法 ,并在科研中实际应用 ,获国家教委科技进步 (甲类 )三等奖 .在对抗原 / Ig和抗原 /补体 - TCIC的研究中 ,发现了抗原 / Ig A- TCIC是有关疾病慢性化及其程度的重要指标 ,论证了抗原 /补体 - TCIC的免疫病理作用 ,获江西省科技进步二等奖 .在对 Ig/补体 - TCIC的研究中 ,阐明了免疫复合物病理生理意义的 Ig类型决定性和临床病型相关性等免疫生物学规律 ,获江西省科技进步二等奖 .

Ig/Ig双特异性免疫复合物定量及免疫调节作用

目的 建立Ig/Ig -TCIC的定量方法 ,研究Ig/Ig -TCIC是否具有免疫调节作用。 方法 以Ig的免疫生物学性质和数学计算相结合进行定量。通过研究Ig/Ig-TCIC与C3/Ig -TCIC、全血清和复合Ig与补体等体液免疫指标的关系来探讨其免疫调节作用。结果 成功地建立了Ig/Ig -TCIC的定量方法 ,并发现Ig/Ig -TCIC与有关体液免疫指标的相互关系具有明显规律性。结论 本定量法简便实用。Ig/Ig

血浆氧化型低密度脂蛋白水平与低密度脂蛋白循环免疫复合物的相关性

为探讨血浆氧化型低密度脂蛋白水平与低密度脂蛋白循环免疫复合物间关系。分别建立了以抗人IgG为包被抗体、酶标抗载脂蛋白B为检测抗体的低密度脂蛋白循环免疫复合物酶联免疫吸附试验;以抗氧化型低密度脂蛋白为包被抗体、酶标抗载脂蛋白B为检测抗体的氧化型低密度脂蛋白酶联免疫吸附试验。同时测定60例冠心病患者及50例对照人群低密度脂蛋白循环免疫复合物、氧化型低密度脂蛋白水平并进行相关性分析。结果发现,冠心病患者甘油三酯、脂蛋白(a)和载脂蛋白B水平均显著升高;高密度脂蛋白胆固醇和载脂蛋白AI水平降低;且低密度脂蛋白循环免疫复合物(2.74±0.73比1.38±0.78,P<0.001)、氧化型低密度脂蛋白水平(595.5±194.8比440.3±175.0μg/L,P<0.001)均显著升高。低密度脂蛋白循环免疫复合物水平分别同血浆总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、脂蛋白(a)及载脂蛋白B正相关;同载脂蛋白AⅠ负相关。氧化型低密度脂蛋白水平亦分别同血浆总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、脂蛋白(a)及载脂蛋白B正相关。氧化型低密度脂蛋白水平与低密度脂蛋白循环免疫复合物亦呈正相关(r=0.313,p<0.005)。结果提示,氧化型低密度脂蛋白及循环免疫复合物升高是动脉粥样硬化发生的危险因素。

突出的椎间盘组织中巨噬细胞浸润及免疫复合物表达

目的 :检测突出椎间盘组织中巨噬细胞的浸润及免疫复合物表达 ,进一步探讨腰椎间盘突出症的病理生理改变及其致痛机制。方法 :以猪为实验动物 ,手术制作椎间盘突出的模型 ,用免疫组化法对突出的椎间盘组织中巨噬细胞浸润及免疫复合物进行观察。结果 :3 2例突出的椎间盘组织中 2 3例有巨噬细胞浸润 ,15例存在免疫复合物表达。 12例对照组中仅 1例巨噬细胞浸润 ,无 1例存在免疫复合物的表达。结论 :突出的椎间盘组织中存在巨噬细胞及免疫复合物 ,它们是椎间盘突出后引起下腰痛及坐骨神经痛的重要病理生理基础之一 ,免疫复合物不是炎症反应的始动因素。

突出腰椎间盘组织中免疫复合物的表达及意义

目的 :检测突出腰椎间盘组织中是否有免疫复合物 (ImmuneComplexesIC)的表达 ,以便进一步探讨突出腰椎间盘组织的致痛机制。方法 :取 76例不同类型突出腰椎间盘组织标本用生物素化羊抗人IgG抗体进行免疫组化染色。结果 :48例脱出和游离型腰椎间盘组织标本中 40例IC表达阳性 (占 83 % ) ,2 8例膨出和突出型中仅 8例 (占 2 8% )表达阳性。结论 :突出腰椎间盘组织中存在着IC的表达 ,且IC很可能是盘源性下腰痛及坐骨神经痛的重要病生基础之一。

酸解离HBsAg免疫复合物以提高HBsAg检出率的探讨

酸解离ＨＢｓＡｇ免疫复合物以提高ＨＢｓＡｇ检出率的探讨广州暨南大学医学院微生物和免疫学教研室（５１０６３２）林晨，罗伟中，刘小澄，韦静附属医院检验科宋爱华用ＥＬＩＳＡ检测乙肝病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）时。有时出现与临床不符的阴性结果。我们考虑是否病毒...

免疫复合物、补体C_3和CRA在囊虫发病机理中的作用

采用琼脂单向扩散法检测了囊虫病人血清中补体Ｃ_３，ＰＥＧ沉淀－紫外分光法检测ＣＩＣ，免疫酶法检测ＣＲＡ。检测结果发现囊虫病人血清中Ｃ_３含量和ＣＲＡ水平明显低于正常人（Ｐ＜０．０５～０．０１），但ＣＩＣ水平明显高于正常人（Ｐ＜０．０１）。提示囊虫病人随着病程的进展，囊虫抗原不断入血与相应抗体结合形成ＣＩＣ。机体在血清中Ｃ_３水平和ＣＲＡ低下时，ＣＩＣ含量升高，ＣＩＣ可能作为免疫抑制因子抑制ＡＤＣＣ，对囊尾蚴的杀伤作用，有利于虫体逃避机体免疫功能作用。

甲型肝炎的免疫球蛋白－补体循环免疫复合物

采用捕捉法－ＥＬＩＳＡ检测１１５例甲型肝炎患者的ＩｇＭ、ＩｇＧ和ＩｇＡ特异性激活补体类循环免疫复合物（ＩｇＭ／Ｃ３－ＣＩＣ、ＩｇＧ／Ｃ３－ＣＩＣ和ＩｇＡ／Ｃ３－ＣＩＣ），其阳性率依次为４７．８％、５６．５％和４７．８％。分别与患者的性别、年龄、病程、丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）、黄疸指数（ＢＴ）、免疫球蛋白（Ｉｇ）和补体作比较后发现，ＩｇＭ／Ｃ３－ＣＩＣ与这些指标均无相关性；ＩｇＧ／Ｃ３－ＣＩＣ与ＡＬＴ、ＢＴ和ＩｇＡ有关，ＩｇＡ／Ｃ３－ＣＩＣ与病程、ＡＬＴ、ＢＴ和ＩｇＡ有关。结果提示，不同免疫球蛋白类型的激活补体类ＣＩＣ在甲型肝炎中的病理生理意义不同，其中ＩｇＧ和ＩｇＡ／Ｃ３－ＣＩＣ可能参与肝损害过程。甲型肝炎具有一定程度的免疫应答紊乱。

鸡传染性法氏囊病免疫复合物疫苗与活疫苗免疫鸡病毒载量和免疫效果的比较研究

为比较鸡传染性法氏囊病(IBD)免疫复合物疫苗与活疫苗免疫鸡法氏囊及外周血淋巴细胞(PBMC)中的病毒载量及免疫效果,本研究采用IBD免疫复合物疫苗和鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)BX株活疫苗免疫1日龄SPF鸡,于免疫后7d、14d、21d、28d、35d、42d采用SYBRGreenI荧光定量PCR、ELISA方法及中和试验检测免疫鸡法氏囊和PBMC中IBDV载量和免疫鸡血清中IBDV抗体滴度,并攻毒,计算两种疫苗的保护率。结果显示,活疫苗免疫7d时IBDV在法氏囊和PBMC中的载量均比其它时间点的高,在14d时到达到最高,之后逐渐下降;两种疫苗刺激产生的IBDV抗体滴度随免疫时间的延长呈升高趋势;在免疫后7d攻毒两种疫苗的保护率均为0,其它时间的攻毒保护率均为100%。本研究结果表明,IBD免疫复合物疫苗与活疫苗免疫后病毒在鸡体内开始大量复制的时间并不相同,但免疫效果基本相同。本实验为IBD免疫复合物疫苗的研发提供实验依据。

抗瓜氨酸化肽特异性免疫复合物对类风湿关节滑膜细胞功能影响的研究

目的:研究类风湿关节炎(RA)患者血清抗瓜氨酸化肽特异性免疫复合物(ACPA-IC)对RA患者关节成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖和分泌细胞因子功能的影响。方法:用PEG沉淀法提取RA患者血清免疫复合物(IC),ELISA法检测IC中ACPA-IC水平。用G蛋白免疫亲和层析法从6份ACPA-IC(+)RA血清、4份ACPA-IC(-)RA血清及10份正常人血清中提取IC。体外培养RA关节FLS;分别用RA ACPA-IC(+)提取物、ACPA-IC(-)提取物及健康人血清IC(C-IC)刺激FLS,用CCK-8(Cell Counting Kit-8)试剂检测FLS增殖情况,液态芯片技术检测不同来源IC刺激对FLS分泌IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8、IL-10、IL-15、IL-17、TNF-α、GM-CSF、EGF、VEGF等11种细胞因子水平的影响。结果:RA患者ACPA-IC(+)提取物能够显著促进FLS增殖,与对照组IC比较,在培养24小时时间里,四种浓度(25、50、75和100μg/ml)的ACPA-IC都能显著促进FLS增殖。RA患者血清ACPA-IC(+)和ACPA-IC(-)提取物刺激FLS 24小时后,可诱导细胞分泌大量IL-6、IL-8和GM-CSF;其中ACPA-IC(+)组刺激FLS分泌GM-CSF和IL-8量均显著高于ACPA-IC(-)组和C-IC组,ACPA-IC(+)组刺激FLS分泌IL-6水平显著高于C-IC组,但与ACPA-IC(-)组无显著性差异。三组间刺激分泌IL-1β、IL-2、IL-10、IL-15、IL-17、TNF-α、EGF、VEGF等其他8种细胞因子含量均无显著性差异。结论:RA患者血清ACPA-IC可促进FLS增殖,并诱导其分泌IL-6、IL-8和GM-CSF等炎性细胞因子,进而进一步诱发滑膜炎症反应及骨质破坏。

鸡传染性法氏囊病免疫复合物疫苗对SPF雏鸡的免疫效果

用鸡传染性法氏囊病免疫复合物疫苗和活疫苗分别免疫1日龄SPF雏鸡,免疫后9d观察法氏囊病变,免疫后14、21、28d对各组鸡采血测定IBDV中和抗体,21d及28d时用强毒攻击,计算各组疫苗保护率。结果表明,免疫后9d免疫复合物疫苗组鸡法囊正常,活疫苗组鸡法氏囊全部明显萎缩;免疫后14、21、28d,免疫复合物疫苗组鸡IBDV中和抗体分别为2.9±0.99、8.1±0.88和10.6±1.78,活疫苗组IBDV中和抗体分别为3.3±1.14、8.3±1.16和9.2±1.23,免疫后21d及28d疫苗免疫组均100%保护。试验证明免疫复合物疫苗比活疫苗更为安全,免疫复合物疫苗免疫SPF雏鸡产生比活苗更高的IBDV中和抗体,保护率达100%。

水蛭清除慢性肾炎循环免疫复合物作用的研究

水蛭在慢性肾炎治疗中体现出较好的疗效。笔者通过对临床病例及系膜增殖性肾炎家兔模型以水蛭为主治疗前后CIC水平的测定，肯定了水蛭对慢性肾炎CIC的清除作用，其药理机制为水蛭有较强的抗凝作用。同时通过临床病例观察，提示影响CIC清除的因素是多方面的，应避免以偏概全。

免疫复合物对猪繁殖与呼吸综合征病毒诱导的PAM细胞因子转录的影响

本试验通过研究免疫复合物影响猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在巨噬细胞内增殖的因素,来进一步探讨免疫复合物经FcγR介导的PRRSV感染机制。本研究将含200TCID50PRRSV病毒液与等体积的终浓度为1.30mg·mL-1的猪IgG-兔抗猪IgG复合物分别先后和同时接种于PAM细胞,分别于12、24、36、48h收集细胞液,同时设PRRSV感染对照组、免疫复合物对照组和健康细胞对照组,利用建立的相对荧光定量PCR和绝对荧光定量PCR方法分别检测巨噬细胞中IFN-α、IL-10和TNF-α的mRNA转录水平及PRRSV的RNA水平,并进行定量分析,同时采用ELISA方法检测健康细胞中IFN-α的蛋白水平。结果显示,在感染后12～36h期间,免疫复合物能够抑制PRRSV诱导的IFN-α的mRNA水平,TNF-αmRNA水平在感染后12h被促进,而在24～36h期间被抑制。在感染后48h,免疫复合物能促进IFN-α和TNF-α的mRNA水平,而在12～48h期间均能抑制IL-10的mRNA水平,此外,免疫复合物在感染12、24和36h时间段内均能明显促进病毒的增殖,但在48h后不显著。健康细胞中IFN-α的蛋白水平在培养12～48h之内呈"降-升-降"的趋势。结果表明,IFN-α蛋白的表达与其mRNA的转录不同步。在PRRSV感染初期,免疫复合物能抑制PRRSV诱导的抗病毒因子的mRNA水平,病毒的复制被促进,而在感染后期,抗病毒因子达到一定的浓度后发挥抗病毒作用,在一定程度上抑制病毒的复制。而TNF-α的转录规律不明显,表明免疫复合物可能同时与激活型和抑制型FcγR结合来共同调节PRRSV诱导的细胞因子的转录。