基于紫胶红素的靶标有色化免疫层析试纸条联检大肠杆菌O157∶H7和沙门氏菌

为摆脱免疫层析试纸条对配对抗体的依赖,文章设计了一种新型靶标有色化免疫层析试纸条,使用紫胶红素和十二合水硫酸铝钾媒染剂,通过先媒后染的方法,实现了免疫层析试纸条的“可视化”。验证结果显示,该试纸条对大肠杆菌O157∶H7和沙门氏菌的检测限均达到了106 CFU/mL;同时,与常见食源性致病菌间不存在交叉反应,在鸡胸肉、鸡蛋、牛奶等食品基质中能够在增菌9 h内检出。文章成功设计了一种操作简单、检测成本低,更易国产化的快速检测免疫层析试纸条,为后续免疫层析试纸条的设计提供了新思路。

胶体金免疫层析试纸条在生物毒素检测领域的研究进展

胶体金免疫层析试纸条是一种常用的检测方法,广泛应用于疾病诊断、生物毒素检测等领域。该技术基于胶体金标记的特异性抗原(抗体)与待检样品中的目标分子相互作用,在试纸条上形成可见的测试线或信号变化。其流程包括样品预处理、标记抗体制备、试纸条组装步骤。胶体金免疫层析试纸条可以用于快速检测食品中的毒素残留、环境中的有害物质以及临床诊断中的相关指标。该技术具有无创、快速、灵敏和准确的特点,在临床应急检测和大规模筛查中能快速获得结果。文章总结了胶体金免疫层析试纸条技术及其在生物毒素检测中的研究进展,并分析了当前胶体金免疫层析试纸条技术的优缺点,展望了该技术在生物毒素检测领域的未来发展方向。

基于金纳米棒免疫层析试纸条快速检测玉米中的黄曲霉毒素B_(1)

传统的基于球状胶体金(Au spheres,AuSPs)试纸条由于检测灵敏度偏低,无法满足食品安全高灵敏检测的需求。因此,建立高灵敏、快速分析方法尤为重要。以黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin B_(1),AFB_(1))为检测对象,金纳米棒(Au nanorods,AuNRs)作为信号标签,偶联抗AFB_(1)单克隆抗体作为金标探针,基于竞争法制备免疫层析试纸条对玉米中AFB_(1)进行检测,试验结果通过便携式试纸条定量分析仪定量检测。结果表明:在单抗加入量为0.6μg、T线抗原质量浓度为0.1 mg/mL、探针使用体积为2.5μL的条件下制作标准曲线,基于AuNRs的试纸条检出限为0.124 ng/mL,IC50为1.593 ng/mL,此外实际玉米样品中对AFB_(1)的回收率为89.50%~111.70%;对玉米质控样进行检测,结果与所建立的方法一致。该方法可应用于玉米中AFB_(1)的快速检测,检测结果符合国家标准,具有良好的应用前景。

量子点微球免疫层析试纸条检测鸡蛋中恩诺沙星的性能评价

目的:现场快速筛查鸡蛋中恩诺沙星。方法:按《食品安全国家标准食品中41种兽药最大残留限量》要求,依据国家市场监督管理总局2023年1月发布的《关于规范食品快速检测使用的意见》,制备3个浓度水平的恩诺沙星加标样本。50份空白样本和50份标准限量要求0.5倍浓度水平(5μg/kg)的加标样本用以评价快检方法的假阳性率;50份标准限量要求1倍浓度水平(10μg/kg)的加标样本用以评价快检方法的假阴性率。50份实际鸡蛋样本用量子点微球免疫层析试纸条与HPLC-MS/MS方法分别进行检测。结果:量子点微球免疫层析试纸条可以满足国家限量要求,假阴性率为0%,假阳性率为0%。实际样本检测时,量子点微球免疫层析试纸条与HPLC-MS/MS方法的结果符合率高。结论:借助于便携式读取仪,量子点微球免疫层析法可获得数字化的准确结果,适合鸡蛋中风险因子的大批量样本现场快速筛查。

量子点标记免疫层析试纸条检测谷物中T-2毒素

利用量子点(QDs)标记T-2抗体(QDs-Ab)作为信号探针,建立了一种量子点免疫层析检测方法(QDICA),用于快速检测谷物中的T-2毒素。结果表明,QDICA的检测限为5μg·L^(-1)。整体检测时间不超过10 min,方法特异性良好且具有一定的有效性。T-2-QDICA操作简便快速,成本低,满足谷物中T-2残留量的快速检测要求。

免疫层析试纸条在食品安全检测中的应用

随着现代食品安全问题的日益凸显,研发快速、准确、低成本的食品安全检测方法具有重要意义。免疫层析试纸条作为一种常用的检测工具,已被广泛应用于食品安全领域。本研究旨在探究免疫层析试纸条在食品安全检测中的应用潜力。通过对相关文献进行综述,可知免疫层析试纸条具有高度的选择性和敏感性,能够迅速检测出食品中的有害物质和致病菌。此外,免疫层析试纸条还具有操作简便、不需要复杂仪器设备、检测周期短等优点,适用于在实验室和现场进行食品安全快速检测。

量子点荧光微球免疫层析试纸条定量检测恶性疟原虫

以羧基化Cd Te/Zn Se量子点荧光微球为荧光标记物,采用1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳酰二亚胺（EDC）法偶联抗恶性疟原虫富组氨酸蛋白（Pf）单克隆抗体制备荧光探针;以羊抗恶性疟原虫组氨酸多克隆抗体和驴抗鼠二抗分别喷涂硝酸纤维膜,形成试纸条检测线和质控线,建立了免疫层析试纸条定量检测血清中恶性疟原虫的方法。所使用的羧基化量子点荧光微球的荧光强度为单个量子点的2800倍。实验结果表明,该荧光试纸条定量检测血清中恶性疟原虫线性范围为5.8-8010 Parasite/μL,最低灵敏度达到5.8 Parasite/μL,单个样品检测时间只需15 min。加标回收实验显示,试纸条批内回收率为93.0%-111.8%,批间回收率为98.3%-115.1%,且批内、批间的相对标准偏差均小于5%。

CdTe/ZnSe核壳量子点免疫层析试纸条检测克伦特罗的研究

采用巯基丁二酸作为表面修饰剂,水相法合成水溶性的CdTe/ZnSe核壳量子点,然后在N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)的作用下,将CdTe/ZnSe核壳量子点与抗克伦特罗多克隆抗体(Anti-CLE pAb)连接。通过凝胶电泳和斑点杂交实验,验证CdTe/ZnSe核壳量子点与Anti-CLE pAb连接成功,并且CdTe/ZnSe-Anti-CLE pAb偶联物能识别克伦特罗-BSA抗原(CLE-BSA)。光谱分析表明,量子点与抗体连接后荧光增强,荧光峰位从628nm红移至635nm。将合成的CdTe/ZnSe-Anti-CLE pAb偶联物作为指示克伦特罗(CLE)分子的荧光标记物,制备出一种用于检测CLE的免疫层析试纸条,其最低检测量可达1μg/L。与ELISA法的对比实验表明,此试纸条能应用于CLE残留的快速检测。

时间分辨荧光免疫层析试纸条在油料饼粕黄曲霉毒素B_1检测中的应用

采用黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析试纸条及配套的时间分辨荧光速测仪,对油料饼粕中黄曲霉毒素B1的快速检测进行了应用研究。该时间分辨荧光免疫分析技术是基于时间分辨荧光免疫层析试纸条和载有Eu（Ⅲ）标记特异性单克隆抗体的样品瓶建立的检测技术。时间分辨荧光速测仪可内置标准曲线,直接输出检测结果。对6种油料饼粕做黄曲霉毒素B1添加回收率实验,回收率在70%~120%之间,批间、批内变异系数〈15%。在实际样品的检测中,时间分辨荧光免疫层析试纸条检测技术与液相色谱-串联质谱法相比,检测结果相对误差〈15%。时间分辨荧光免疫层析试纸条检测技术测定快速、准确,技术稳定、可靠,设备经济、小型,适用于大批量油料饼粕样品的快速检测和风险评估。

上转换发光免疫层析试纸条快速定量检测己烯雌酚

采用溶剂热法合成上转换纳米颗粒(UCNPs)-Na YF4∶Yb,Er,进行表面功能化修饰,将其与己烯雌酚(DES)单克隆抗体偶联,制备荧光探针,以牛血清白蛋白-己烯雌酚(BSA-DES)偶联物和羊抗鼠二抗分别喷涂硝酸纤维膜,形成试纸条检测线(T线)和质控线(C线),建立了上转换发光免疫层析试纸条快速定量检测DES的方法。实验结果表明,此试纸条定量检测DES线性范围为25~10000 ng/m L(y=0.43927x-0.57647,R2=0.996),检出限为20.84 ng/m L,单个样品检测时间为15 min,批内和批间变异系数均小于10%,特异性识别能力强,在37℃存放下7天检测值RSD的平均值约为15%。加标回收实验显示平均回收率为90.1%~115.2%,相对标准偏差小于5%,与高效液相色谱法有较好的一致性。

胶体金免疫层析试纸条定量检测猪尿中克伦特罗

目的:建立胶体金免疫层析试纸条快速、定量检测尿样中克伦特罗的方法。方法:采用正交设计获得克伦特罗胶体金试纸条最佳工艺条件,建立T/C比值法定量检测尿样中克伦特罗残留。结果:胶体金免疫层析试纸条检测尿样中克伦特罗的最低检测限0.22ng/mL;当尿液中克伦特罗质量浓度在0.1～2.0ng/mL范围内,胶体金免疫层析试纸条具有较好的线性关系且50%抑制质量浓度(IC50)为0.36ng/mL;加标回收实验结果表明,阴性尿样分别添加0.5、1.0、1.5ng/mL克伦特罗,试纸条检测的平均回收率为(102.4±7.8)%、(96.5±6.8)%以及(103.3±7.2)%。结论:成功建立了基于胶体金免疫层析试纸条定量检测尿样中克伦特罗的方法。

菊酯类农药广谱型免疫层析试纸条的研究及应用

建立了菊酯类农药广谱型免疫层析检测方法,可同时检测水果、蔬菜中12种甲氰菊酯、溴氰菊酯、氯氰菊酯、三氟氯氰菊酯农药残留。以粒径20 nm的胶体金标记羊抗小鼠IgG抗体于金标垫上,分别固定包被原（检测线,T线）、兔抗山羊IgG抗体（质控线,C线）于硝酸纤维素膜（NC膜）上,与吸水垫及聚氯乙烯（PVC）底板组合成层析试纸条。10 g样品经乙腈提取,PBS稀释4倍,取100μL与菊酯类农药的单克隆抗体混合后,直接用于试纸条检测。结果表明,试纸条对甲氰菊酯、溴氰菊酯、氯氰菊酯、三氟氯氰菊酯农药的裸眼观察检测灵敏度为0.5,5.0,5.0和5.0μg/mL,检测时长为8~10 min,采用QuEChERS方法,方法检测灵敏度可提高16倍。对蔬菜和水果的方法验证表明,除辣椒基质干扰呈假阳性外,其它样本的检测结果均与GC方法结果一致。试纸条采用金标羊抗小鼠IgG二抗的方法,使检测结果的重现性更好、更稳定,且抗基质干扰能力强,为菊酯类农药的累积毒性检测提供了新方法。

量子点标记免疫层析试纸条快速检测莱克多巴胺的研究

本实验通过莱克多巴胺抗原抗体的制备、量子点的制备、试纸条的组装和测试等步骤研究一种将量子点应用于莱克多巴胺免疫层析试纸条的新方法。结果表明,莱克多巴胺快速检测试纸条的检测限为3ng/ml,检测时间为10min。本法使用方便、经济,适合于莱克多巴胺现场快速检测。

胶体金免疫层析试纸条快速检测水和玉米中阿特拉津的残留

本文以胶体金作为抗体标记物,建立了一种检测阿特拉津残留的免疫层析试纸条快速检测方法。该方法的检出限为2ng/mL,10 min内可以得到检测结果。本文以自来水和玉米作为样品进行了添加回收实验,水样不需要任何前处理直接检测,水样的检出限为2 ng/mL;玉米样品经简单前处理后检测,玉米样品的检出限为40 ng/g,且该方法的检测结果与间接竞争ELISA方法的结果一致。该方法具有成本低、操作简单、灵敏度高、检测快速,结果易于判定等优点,适用于大量样品的现场筛选。

rk39免疫层析试纸条检测黑热病效果评价

目的评价rk39试纸条(Dipstick)对临床黑热病现症患者的诊断效果,为现场应用提供依据。方法以病原学检查结果或特效药物治疗效果为依据,判断rk39试纸条检测黑热病的敏感性和特异性。结果接受rk39试纸条与病原学2种方法检查的83人中,均为阳性者56例,阴性4人,两者符合率为100%(56/56);单一显示rk39试纸条阳性23例;病原学与rk39试纸条阳性率分别为70.89%(56/79)、100%(79/79)。而未做病原学检查的51人中,rk39试纸条阳性12例。对单一显示rk39试纸条阳性35例,用锑剂治疗有效或治愈,证实都是黑热病。结论采用rk39试纸条诊断黑热病现症患者的阳性检出率达100%。与病原学相比,rk39试纸条法快速、简便、敏感和特异性高,适于在基层推广使用。

免疫层析试纸条技术及其在食源性致病菌检测中应用的研究进展

食源性致病菌是引起食物中毒的最主要原因之一,全球每年由其引发的食物中毒事件达上亿例。免疫层析试纸条法是一种简便、快速且价格低廉的检测方法,广泛应用于国内基层单位对食源性致病菌现场快速检测及诊断。本文就其在食源性致病菌检测方面的研究现状及发展方向进行综述。

免疫层析试纸条诊断旋毛虫病的研究

目的建立一种能诊断人体旋毛虫病及动物旋毛虫感染的快速血清学方法。方法以胶体金标SPA和旋毛虫肌幼虫ES抗原制备免疫层析试纸条(immunochromatographic strip),对旋毛虫病及其它寄生虫病患者血清、旋毛虫及其它寄生虫感染的动物血清进行检测。结果试纸条检测旋毛虫病患者与旋毛虫感染的小鼠、大鼠、兔、猪血清的阳性率分别为100%(20/20)、97.87%(92/94)、100%(5/5)、100%(5/5)及100%(25/25),15min内肉眼可观察结果;其它寄生虫病(并殖吸虫病、血吸虫病、华支睾吸虫病、囊虫病及包虫病等)患者及正常人血清、其它寄生虫感染动物及正常动物血清均为阴性。试纸条和ELISA对100条幼虫感染小鼠血清检测的阳性率分别为91.3%(21/23)和95.7%(22/23)(χ2=0.36,P>0.05),两种方法对200～500条幼虫感染小鼠血清检测的阳性率均为100%(71/71)。试纸条对乡土旋毛虫、布氏旋毛虫、伪旋毛虫及纳氏旋毛虫感染小鼠血清检测的阳性率亦均为100%。试纸条在4℃可保存13个月,检测结果在室温可保存3个月。结论该试纸条可用于人体旋毛虫病和动物旋毛虫感染的快速血清学诊断,也可用于其它种旋毛虫感染的血清流行病学调查。

CdTe量子点免疫层析试纸条检测克伦特罗

以巯基乙酸作为稳定剂,利用水热反应制备了水溶性的高荧光Cd Te量子点,量子产率为54.961%。研究了该量子点在1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基丁二酰亚胺的作用下与抗克伦特罗抗体的共价连接。结果表明:该量子点与克伦特罗抗体连接后体系的荧光强度和吸光度均增强,且峰位均未发生明显移动,F/P值为4.20。将该偶联反应物Cd Te-Anti CLE p Ab作为荧光标记物,组装出一种用于检测克伦特罗的荧光免疫试纸条,最低检测限达0.5μg/L,与酶联免疫吸附法进行对比,该试纸条能够实现对克伦特罗的快速检测。

沙丁胺醇免疫层析试纸条的应用研究

用胶体金和纳米金-聚苯胺-纳米金微球(GPG)分别标记制备的沙丁胺醇多克隆抗体,喷涂在玻璃纤维垫上,将包被抗原和羊抗兔二抗分别固定到硝酸纤维素膜上作为检测线(T-Line)和质控线(C-Line),干燥后组装试纸条,建立免疫层析分析方法。考查检测试纸条的灵敏度和稳定性,并应用于动物源性食品(猪肉、牛肉、羊肉和猪肝)中沙丁胺醇残留的可视化检测。实验结果可以看出,沙丁胺醇胶体金标记免疫层析分析方法的样品检出限为5μg/L,沙丁胺醇GPG标记免疫层析分析方法的样品检出限为10μg/L。

胶体金免疫层析试纸条快速检测乙型流感病毒

目的建立有效、简便的胶体金免疫层析试纸条快速检测乙型流感病毒感染的方法。方法通过对乙型流感病毒核蛋白单克隆抗体进行胶体金标记,成功研制了乙型流感病毒免疫层析检测试纸条。结果该试纸条操作简单,肉眼于10～15 min内判定结果,对乙型流感病毒具有高度特异性,与甲型H1N1、H3N2亚型流感病毒等其他重要呼吸道病毒无交叉反应。试纸条在室温保存12个月、2～8℃保存18个月,其特异性和灵敏度无明显变化。对从内蒙自治区医院收集的流感样症状病人的702份鼻咽部分泌物进行检测,与美国Quidel公司同类产品的符合率为95%。结论建立的乙型流感病毒免疫层析检测方法具有简便、快速、特异、敏感和稳定等特点,对乙型流感病毒感染疾病的临床检测与早期诊断具有重要意义。