免疫转印技术在肾综合征出血热病毒多肽抗原研究中的应用

本文应用免疫转印技术(Immunoblotting)对我国分离的肾综合征出血热(HFRS)病毒抗原性多肽进行了分析,发现HFRS病毒50Kd多肽上可能存在着属特异性抗原决定簇。观察并讨论了实验条件对结果的影响,选择了最佳实验条件。

免疫转印法检测白色念珠菌菌丝组分蛋白抗体

目的 为了探讨血清中白色念珠菌菌丝相蛋白组分抗体的实验室诊断意义。方法 应用超声粉碎和ConA Sepharose4B亲和层析除去细胞壁甘露糖和甘露糖蛋白后 ,收集蛋白抗原 ,通过免疫转印技术 ,检测血清标本中相应抗原的抗体。结果 血库血清 40份中 ,1例阳性 ;白色念珠菌培养阳性的 90名患者 ,抗体阳性 5 8例 ;热带念珠菌培养阳性的 17名患者 ,10例抗体阳性。使用大量抗菌药物和 /或免疫抑制剂治疗而培养阴性的 14名患者中 ,抗体阳性 7例。抗体阳性的 75例结果中 ,15例出现 2 9ku和 47ku条带 ,5 1例单独出现 47ku条带 ,9例仅出现 2 9ku条带。结论 免疫转印法检测抗体可作为深部念珠菌感染的参考指标 ,并可提供抗体动态变化模式 ,为深入研究打下基础。

酶联免疫转印技术(EITB)在检测人类脑囊虫病患者血清IgG和IgG_4抗体中的应用

本试验对 4组脑囊虫病患者血清中的总 Ig G和 Ig G4亚类抗体水平进行研究。第 1组由未经治疗的 ,通过寄生虫学及临床表现确诊的感染者组成。第 2 ,3,4组由经过 1～ 3,4～ 6和 7～ 9疗程治疗的治疗后患者组成(每一疗程为 10天 ,吡喹酮治疗 ,剂量为 30 m g/kg.d)。用植物亲和层析纯化抗原 ,通过 EITB,检测 4组共 2 4 1份血清样品中的 Ig G和 Ig G4含量。对照组为采用健康个体的 36份血清。另外还检测了 2 7份肝包虫和肝吸虫患者血清。通过与对照组比较 ,4组中的总 Ig G和 Ig G4抗体水平分别为 96 .3%和 97.5% ,93.3%和 78.6 % ,88.0 %和 38.0 % ,86 .1%和 13.9%。4组中的 Ig G水平无显著差异 ( P>0 .0 1)。相对的 ,治疗后患者的 Ig G4抗体水平低于治疗组。对有症状的治疗后患者 ,检测其特异的抗体水平发现 77.1%的患者 Ig G4水平治疗前后有显著差异 ( P<0 .0 0 1) ,而只有 2 1.8%的患者没有显著差异。对于这四组而言 ,被 Ig G识别的抗原没有一种是独特的。许多患者的 Ig G最常识别 GP4 2和 GP2 4这两条带 ,但在最后两组中 ,Ig G4能特异识别 18k Da和13k Da低分子量抗原。36份阴性对照均为阴性。2 7份其他寄生虫感染中有 2例总 Ig G阳性 ,而 Ig G4均为阴性。这些观察结果表明 ,Ig

免疫转印技术在分析流行性出血热患者血清循环免疫复合物组份中的应用

免疫转印技术在分析流行性出血热患者血清循环免疫复合物组份中的应用武汉同济医科大学附属同济医院临床免疫研究室，武汉４３００３０陈悦，杨东亮，李方和，喻植群，郝连杰关键词出血热．流行性；循环免疫复合物；免疫转印技术中图法分类号Ｒ５１２．８免疫转印技术是本...

ABC免疫转印技术在分析抗肿瘤McAb识别抗原特性中的应用

利用ABC免疫转印技术分析一组共16个抗大肠癌McAbs识别抗原的特性,效果满意。该法不需分离纯化抗原和制备腹水,使用杂交瘤培养上清液即可得到清晰,准确的识别抗原区带,背景浅淡,用来分析识别抗原分子量及理化性质,特异性强、重复性好、敏感度高。可检测的最小肿瘤抗原蛋白量为1.25×10^(-6)mg,明显优于PAP免疫转印和间接酶免疫转印法。本文提示,ABC免疫转印是分析复杂而微量的抗原的有效方法。

免疫转印法检测扩张型心肌病抗心肌线粒体ADP/ATP载体自身抗体的应用探讨

以猪心肌线粒体为材料,应用免疫转印技术检测抗心肌线粒体ADP/ATP载体自身抗体。结果表明,扩张型心肌病患者血清中存在抗心肌线粒体30kd多肽抗体。检测的特异性为100%,敏感性为52.38%。

免疫转印试验测定单克隆抗体与传染性支气管炎病毒多肽反应性

传染性支气管炎（ＩＢ）是危害养鸡业的主要疫病之一，引起了兽医界的高度重视。由于其病原体传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）血清型极为复杂，给ＩＢ诊断带来了极大困难。为了弥补常规血清在诊断方面的不足，我们利用杂交细胞瘤技术，获得了３株抗ＩＢＶ单克隆抗体。为进一...

免疫转印试验对热吸水链霉菌抗原组分的研究

免疫转印技术是一种将聚丙烯酰胺凝胶电泳与免疫酶标记技术相结合的新的电泳技术。我们试用此项技术动态观察了实验性农民肺家兔血清与热吸水链霉菌抗原组分的免疫反正。结果表明73Kd多肽是热吸水链霉菌的主要抗原，进一步分离提纯此抗原将有助于农民肺的血清学诊断和发病机制的探讨．

免疫转印技术一次检测Graves病患者多种自身抗体的探讨

以免疫转印技术检测64例Graves病、14例桥本病、68例其它甲状腺病、34例类风湿性关节炎和70例健康献血员的血清抗甲状腺抗原的特异性抗体。Graves病（46．9％～59．4％）和桥本病患者（42．9％～92．8％）血清可检出分子量为54、52、50、37、36和28ku多肽成分的抗体；Graves病患者（62．5％～92．2％）血清还可检出分子量为59、45、27、14和13ku多肽成分的抗体；献血员血清仅4．3％～8．6％可检出54、52、50和37ku的低滴度抗体；其它甲状腺病和类风湿性关节炎患者血清未测出上述抗体。免疫转印技术还可同时观察患者血清中多种自身抗体，对Graves病的诊断和研究有一定价值。

免疫转印技术对人结肠Mr40KD蛋白粗提物中干扰成份的分析

目的；分析ＥＬＩＳＡ包被抗原在检测溃疡性结肠炎血清ＡＣＡ的非特异性干扰物。方法：应用免疫转印技术结合酶标抗人ＩｇＧ抗体和荧光抗人ＩｇＧ抗体对含Ｍｒ４０ＫＤ蛋白包被抗原的人结肠提取物进行纯度和免疫学性质的分析。结果；包被抗原粗提物中除含有Ｍｒ４０ＫＤ蛋白外，还含有过氧化物酶和人ＩｇＧ活性成分。结论；过氧化物酶和人ＩｇＧ活性成分是应用ＥＬＩＳＡ法检测ＵＣ血清ＡＣＡ－ＩｇＧ的非特异性干扰物。

免疫转印技术分析流行性出血热病毒抗原组分的研究

免疫转印技术分析流行性出血热病毒（ＥＨＦＶ）陈株、Ｒ_(２２)株结构蛋白。病毒抗原系感染乳鼠脑内增殖，硫酸鱼精蛋白—ＰＥＧ法提取。采用免疫ＥＨＦＶ血清（浙江Ｒ３血清，抗Ｒ２２血清）及抗ＥＨＦＶ单克隆抗体（Ｒ_(３１)、Ａ_(１９)、Ａ_(２０)、Ａ_(３５)、Ａ_(２５—１)）对两株病毒多肽抗原进行分析。结果陈株具有７５ＫＤ，６９ＫＤ，６６ＫＤ，６１ＫＤ４条多肽，Ｒ２２株具有７２ＫＤ．６９ＫＤ，的ＫＤ３条多肽。抗体识别模式表明两株病毒抗原仅有微小的株间差异。

免疫转印法检测白色念珠菌菌丝组分蛋白抗体

目的 建立免疫转印检测方法探讨血清中白色念珠菌菌丝相蛋白组分抗体的实验室诊断意义。方法 应用超声粉碎和Ｃｏｎ Ａ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ亲和层析除去细胞壁甘露糖和甘露糖蛋白后，惧蛋白抗原通过免疫转印技术，检测相应抗原的血清抗体。结果 血库血清４０例，１例阳性：白色念珠菌培养阳性的９０例中５８例阳性；热带念珠菌２阳性１７例，１０例阳性。使用大量抗菌药物和／或免疫抑制剂治疗而培养阴性１４例７例阳性。

免疫转印法检测扩张型心肌病患者抗ADP／ATP载体抗体的敏感性及特异性

为探讨免疫转印（ＩＢ）法检测扩张型心肌病（ＤＣＭ）患者血清抗心肌线粒体ＡＤＰ／ＡＴＰ载体抗体的特异性及敏感性，对ＤＣＭ患者６３例和冠心病患者、正常人各３０例的血清进行随机编号，经ＩＢ法分析，结果表明ＤＣＭ患者血清主要存在针对心肌线粒体３０ｋＤ肽的自身抗体，其敏感性为７３％，特异性为１００％。与近３年试验结果综合比较，相同ＤＣＭ患者血清阳性率分别为７０％和７３％，证明ＩＢ法重复性良好。因此，抗ＡＤＰ／ＡＴＰ载体抗体阳性可作为ＤＣＭ临床诊断的重要指标之一。

免疫转印技术在传染病研究中的应用进展

免疫转印技术（Immunoblotting,IB）是本世纪70年代后期出现的一种新的免疫生化技术,该技术将凝胶电泳的高分辨力与固相免疫测定的敏感性、特异性相结合,兼具两者的特点,被广泛应用于基础和临床医学研究。本文仅就近年来该技术在传染性疾病研究中的应用作简要介绍。病毒性疾病在甲肝病毒（HAV）感染的病人及动物体内可以检出循环免疫复合物（CIC）,但在血中很难检出 HAV 抗原。Margolis 等应用 IB 对感染 HAV 的猩猩血液中 CIC 进行了分析,发现CIC 中可检出 HAV 衣壳蛋白（VP1～VP3）,特异性IgM、IgG、补 C3及纤维连结蛋白（Fn）,并且以 IgM型 CIC 为至。免疫复合物的形成以及 Fn 与 HAV 的结合掩盖了 HAV 的抗原结合位点,导致血中难以检出 HAV 抗原。Madalinski 等对慢性乙肝患者血中 CIC 组份的分析结果表明,HBeAg 阳性患者大多数可在 CIC 中检出 HBs 蛋白,但未检出 HBe 蛋白,CIC 中 PreS1含量较 HBsAg 颗粒高;抗 HBe

用国产硝酸纤维素膜建立并改进脂多糖免疫转印技术

本文叙述了用国产硝酸纤维素膜建立的脂多糖免疫转印技术。该项技术具有较高的特异性,敏感性和可靠性。免疫酶技术便于该技术的推广应用,不仅可用于分析脂多糖的抗原性,还可对脂多糖的分子组成和结构进行初步分析。

牛海绵状脑病几种免疫学检测方法的比较

本文对免疫组化、免疫转印（Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）３种牛海绵状脑病（ＢＳＥ）免疫学检测方法进行了综合比较。通过比较发现免疫组化及免疫转印法与标准品真实情况的符合率均为１００％，ＥＬＩＳＡ的符合率稍差。免疫组化法操作简单、结果容易判断、价格低廉，是较适合我国使用的检测方法。用该方法对我国部分样品进行检测，结果均为阴性。

人中性粒细胞防御素HNP1-J链融合多肽的免疫印迹检测

目的:人中性粒细胞防御素具有广谱杀菌活性。将人中性粒细胞肽(HNP)-1基因与J链基因融合转染其他细胞有可能使HNP表达而发挥杀菌作用。文中分析HNP1与J链融合基因在COS-7细胞中表达蛋白的影响因素。方法:应用免疫印迹技术,注意控制影响蛋白转印的关键条件,分析影响J-HNP1蛋白表达的技术因素。结果:成功检测到融合基因J-HNP1在细胞内的表达。结论:采用Western blot法可检测到J-HNP1在细胞内的表达并可分泌到细胞外。

登革热循环免疫复合物特异性的检测分析

采用 SDS-聚丙烯凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫转印技术(Western blot)对27例登革热患者血清循环免疫复合物(CIC)进行组份分析。结果显示,在 SDS-PAGE 电泳图谱上出现20ku、46ku及57ku 三条主要的条带。免疫识别结果表明登革热 CIC 中存在特异性病毒抗原及 IgG、IgA、IgM 抗体和补体 C3组份。

流行性乙型脑炎患者血清IgG抗体对乙脑病毒蛋白的识别

目的：了解流行性乙型脑炎病毒各蛋白成分在刺激机体免疫应答方面所起的作用，给亚单位疫苗研制提供理论依据，进行该项研究。方法：建立乙脑病毒免疫转印方法，应用该法检查乙脑病人血清IgG抗体对乙脑病毒蛋白的反应情况，分析正常人群中筛选出的乙脑病毒隐性感染者血清IgG对乙脑病毒蛋白的反应性，并比较二者的差异。结果：经检测，绝大部分病人血清IgG可识别E蛋白，部分病人尚可识别NS5，NS3，NS1蛋白，而隐性感染者血清IgG对98kd（NS5）乙脑病毒蛋白的反应性显著低于乙脑患者。结论：研究结果显示，E蛋白是乙脑病人血清IgG识别的主要蛋白，在免疫保护方面起着主要作用。隐性感染者对NS5蛋白的反应机率明显低于显性感染者，提示NS5蛋白在乙脑病毒的致病过程中起重要作用。

猪繁殖-呼吸综合征病毒上海分离株的病毒特性研究

对猪繁殖 呼吸综合征病毒 (PRRSV)上海分离株 (SH1)的理化特性和结构蛋白进行研究。结果表明 ,SH1分离株能致Marc 145细胞典型病变 ,TCID50 为 10 5 9mL-1,对氯仿和乙醚、酸 (pH5 5以下 )、碱 (pH8以上 )、热 (水浴 5 6℃ 10min以上、 37℃ 2 4h以上、 2 8℃ 48h以上 )均敏感。病毒负染可见以具囊膜的球形为主 ,囊膜上有纤突 ,大小为 60～85nm。超薄切片可见病毒存在于细胞浆中。SH1分离株的病毒培养液经差速离心和非线性蔗糖密度梯度纯化 ,SDS PAGE显示病毒结构蛋白的相对分子质量为 2 40 0 0 ,195 0 0 ,16 0 0 0。免疫转印可见