建立快速定量检测猪瘟兔化弱毒苗的荧光定量PCR技术

在猪瘟病毒兔化弱毒疫苗株的5挿潜嗦肭杓埔欢砸锖鸵惶跤馓秸?利用荧光定量PCR原理,结合LightCycler检测系统,首次建立了定量检测猪瘟兔化弱毒苗方法。结果表明,该方法的灵敏度为102拷贝数,线性范围为107-102,达6个数量级;标准样品的变异系数为2.3%-5.1%(n=10),疫苗样品组内实验变异系数为0.85%-2.8%(n=5)、组间实验为2.5%-7.3%(n=5),对同一样品分5次RNA提取和逆转录,其变异系数为5.0%;对9份疫苗样品进行了检测,与兔体定型热反应方法相比较,有很好的相关性;整个检测过程仅需4h。该法可望取代传统的兔体定型热反应用于疫苗生产过程中的效价测定及指导疫苗的配制,也为猪瘟病毒分子生物学研究提供了一种新的、简捷有效的工具。

猪瘟兔化弱毒苗在免疫猪体内动态分布研究

研究猪瘟兔化弱毒苗在免疫猪体内的动态分布,在注射猪瘟兔化弱毒苗后第1、7、14、21、28、35、63天采集免疫猪的脾、肾、肺、腹股沟淋巴结、扁桃体及血清,应用免疫组化、RT-PCR、猪瘟抗原、抗体检测试剂盒等方法,检测分析猪瘟病毒在猪体内的动态分布、存留时间及抗体水平。结果表明：应用免疫组化方法于免疫后第7~14天在脾脏、第7~21天在腹股沟淋巴结、第14~28天在肾脏组织分别检测到猪瘟病毒。在免疫后第7天检测到猪瘟病毒抗体,随后抗体水平持续上升至免疫后第63天;病毒抗原的分布与RT-PCR检测结果吻合。结论：猪瘟兔化弱毒苗在猪体内主要分布器官为脾、肾和腹股沟淋巴结,免疫后第7天脾和腹股沟淋巴结最早检测到猪瘟病毒,猪瘟病毒在肾停留时间可至免疫后第28天。实验过程中未在扁桃体、肺、外周血检测到猪瘟病毒。

后海穴注射猪瘟兔化弱毒苗的试验研究

利用不同剂量的猪瘟兔化弱毒苗后海穴免疫生长肥育猪6 0 0头,用正向间接血凝试验(IHA)检测出抗猪瘟病毒抗体的水平,并与传统方法耳根部注射免疫进行比较。结果显示,后海穴注射2头份猪瘟兔化弱毒苗产生的抗体水平最高,维持时间最长。1头份疫苗后海穴注射效果也比2头份的肌肉注射效果明显。表明后海穴注射疫苗能提前坚强免疫产生的时间,提高疫苗的免疫效应,是提高疫苗保护率的有效免疫途径之一。

猪瘟兔化弱毒苗生产

犊牛睾丸细胞培养冻干苗对猪瘟的预防起到了极其重要的作用，我国目前普遍使用这种疫苗，但许多地区发生不同程度的猪瘟疫苗免疫失败。提高猪瘟疫苗质量是避免免疫失败的有效方法之一。

猪瘟兔化弱毒苗免疫效果浅析

猪瘟兔化弱毒苗免疫效果浅析安徽农业大学姚太平，谢三星据１９８９年ＦＡＯ－ＷＨＯ－ＯＩＥ动物健康年鉴记载，猪瘟已发生于３６个国家和地区（还有两个国家可疑），给养猪业带来严重损失。而我国猪瘟兔化弱毒苗在预防和控制该病中起到重要作用，今就该苗有关问题作如下...

ELISA 技术检测猪瘟抗原和兔化弱毒苗免疫效果的探讨

笔者在1986年4至6月间作了207头份的猪瘟抗体检测,测出不同水平的抗体194头份,同时检测了147头份的猪瘟抗原,检出阳性6份,它与酶标记抗体检测猪肾(直接法)作了符合率试验,其结果完全一致。一、材料与方法(一)材料 1.猪血清、尿液、肝、脾、心、肺、肾,取我市城关等八区一镇的207头份的,经过不同时期猪瘟兔化弱毒疫苗免疫的猪全血3—4毫升及肝脾心肾肺。

初生仔猪接种猪瘟兔化弱毒苗后血清中和抗体检查

已有报告初生仔猪在产后吮母猪奶前接种猪瘟疫苗既安全又能产生可靠免疫力。我国众多种猪场,在现阶段经营管理方式下,是否可采用此法作为预防猪瘟的一项免疫程序,值得探讨。作者等在3个成年种猪和后备猪场,进行常规猪瘟预防接种。

猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞苗免疫程序研究

给空怀母猪免疫接种猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞苗１５００个兔感染量，以ＰＰＡ－ＥＬＩＳＡ监测其血清抗体。结果，ＥＬＩＳＡ效价ＯＤ值保护率６～７个月为１００％，８个月为７７．５％，表明１５００个兔感染量免疫母猪，一年应免疫接种２次，才能避免非免空隙，保持坚强免疫力。给怀孕母猪免疫，所产亲代仔猪的母源抗体消失很快，ＥＬＩＳＡ效价ＯＤ值保护率，１０日龄为９６．５％，２０日龄为７１．６％，３０日龄为４０％，４０日龄为１２．５％。给３０日龄仔猪免疫接种１５００个兔感染量，以ＰＰＡ－ＥＬＩＳＡ检测其免疫后６、７、８、９、１０个月的血清抗体，结果其ＥＬＩＳＡ效价ＯＤ值保护率６～９个月均为１００％，１０个月为９４％；攻ＨＣＶ强毒，６～１０个月均１００％保护。综上试验证明，仔猪３０日龄、母猪空怀免疫接种猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞苗１５００个兔感染量，是最佳的免疫程序。

猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞苗免疫程序研究

作者用猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞苗(以下简称猪瘟犊睾细胞苗)750个对兔感染量(以下简称感染量),在配种前40天至配种后45天内免疫母猪,所产亲代仔猪在20～28日龄时猪瘟间接血凝滴度(IHA)4~×(++)占10/32、8~×占11/32、16~×占10/32、32~×占1/32;41～43日龄时,IHA滴度4~×占11/43、8~×占21/43、16~×占9/43、32~×占2/43;在55～58日龄时,IHA滴度4~×占9/33、8~×占17/33、16~×占7/33。用600、760、900、1500个感染量分别给20～28日龄、41～43日龄、55～58日龄仔猪实施免疫,免疫后6～8个月时,监测其抗体水平,结果表明:IHA滴度16~×以上者达100％。750个感染量免疫20～28日龄仔猪组,注苗后持续6个月,IHA滴度32~×以上者达100％;8个月时32~×以上者达87.5％,16~×占12.5％。用猪瘟石门系强毒攻毒,获100％保护。试验首次发现:用猪瘟犊睾细胞苗免疫母猪所产仔猪母源抗体明显低于猪瘟乳兔苗免疫母猪所产仔猪的母源抗体。对猪瘟犊睾细胞苗免疫母猪所产亲代仔猪在20～28日龄用该苗一头剂(750个感染量)进行免疫,8个月之内能抵抗猪瘟感染或强毒攻击,突破了以往认为仔猪用猪瘟乳兔苗免疫应在45日龄以后的常规,为猪瘟犊睾细胞苗的免疫提供了新的免疫程序。

不同RID猪瘟兔化弱毒细胞苗免疫效果评价

为了比较不同兔体感染剂量（RID）的猪瘟兔化弱毒细胞苗的免疫效果，试验在市场上随机选取A、B两厂家生产的猪瘟兔化弱毒细胞苗（A厂家原代细胞苗12000RID、B厂家传代细胞苗30000RID）对四川省内江市某种猪场提供的186头20日龄健康仔猪进行免疫，将186头仔猪随机分为6组，每组31头，分别于20日龄、60日龄使用1，2，4头份三个剂量进行首免及加强免疫，并分别于免疫前（20日龄）、50日龄、100日龄采血分离血清，用猪瘟间接酶联免疫吸附试验（ELISA）测定抗体水平。结果表明：以l头份（30000RID）B厂家生产的猪瘟传代细胞苗免疫效果最好，其次是A厂家生产的4头份（48000RID）原代细胞苗，而l头份（12000RID）免疫效果较差。说明猪瘟兔化弱毒细胞苗RID含量在30000～60000RID时免疫效果较好。

猪瘟兔化弱毒细胞苗免疫程序的研究

应用猪瘟兔化弱毒细胞苗在1997年春、秋两季防疫各免疫8头剂,1998年、1999年春、秋两季防疫各免疫6头剂,猪瘟IHA抗体滴度由免疫前的7.20、8.17、8.60、9.18和9.32log_2值分别提高3.21、2.03、1.70、0.92和0.90log_2值,各次免疫后均达到10.10log_2值以上。1997年、1998年仔猪应用猪瘟兔化弱毒细胞苗2头剂超前免疫IHA抗体滴度到150日龄时分别达到5.2、5.0log_2值。1999年仔猪未进行超前免疫,母源抗体持续到73日龄达5.3log_2值,68日龄首免后IHA抗体到150日龄达5.2log_2值。

甘肃省酒泉市规模猪场猪瘟疫苗免疫抗体监测及效果分析

猪瘟是由猪瘟病毒引起的急性传染病．对养猪业危害极大．我市应用猪瘟乳兔组织苗、猪瘟兔化弱毒苗等疫苗免疫．取得了显著的防制效果．但近年来免疫猪群经常发生猪瘟疫情．给养猪生产造成严重的经济损失。为了分析发病原因．制定科学的免疫程序．有效控制疫情．我们于2006年11月对辖区内39个规模猪场采血清425份．进行了猪瘟免疫抗体监测．现将监测结果分析报告如下。

仔猪猪瘟首免日龄与疫苗剂量测定的小样本试验

猪瘟是危害我国养猪业的重要传染病，目前多表现为非典型猪瘟。长期以来，接种猪瘟疫苗是综合控制猪瘟的主要措施，但由于各猪场的母猪群、仔猪间母源抗体的分布参差不齐，免疫程序和免疫剂量更是千差万别，导致许多猪场出现“经过猪瘟免疫但还是发生猪瘟”的现象，尤其是各猪场仔猪群免疫时，由于母源抗体滴度对猪瘟兔化弱毒苗的免疫保护效力有影响，导致疫苗接种达不到预期效果。为了确定某场仔猪猪瘟首免日龄与疫苗剂量，特进行了仔猪群猪瘟母源抗体滴度测定和母源抗体水平较低状态时不同剂量疫苗免疫效力的小样本试验。

新生仔猪接种猪瘟疫苗过敏及防治

新生仔猪在哺乳前进行猪瘟兔化弱毒苗的超前免疫，对猪瘟的发生起到了很好的预防作用，这种做法日益被各个猪场所采纳。但是在采用新生仔猪超前免疫兔化弱毒苗时，偶尔又会遇到新生仔猪猪瘟苗的过敏现象。

七大用苗问题影响免疫效果

除鸡新城疫疫苗、鸡传染性喉气管炎疫苗、猪瘟兔化弱毒苗等少数几种疫苗使用后较快产生免疫力，可以用于紧急预防接种外，一般情况下，疫苗接种时机应选择在疫病流行季节之前1～2个月，最好在疫病流行前完成全程免疫，这样，可在疫病流行高峰时节，使动物的免疫力达到最高水平。但在实际生产中，有些养殖户怕麻烦、图省事，或者抱着侥幸心理，