冻干兔血浆在金黄色葡萄球菌检验中的应用研究

探讨冻干兔血浆在金黄色葡萄球菌检验中的凝固性能。按照GB 4789.10-2010金黄色葡萄球菌检验方法,比较本实验室制备的冻干兔血浆与国内其它两个厂家的兔血浆对金黄色葡萄球菌标准菌株及分离菌株血浆凝固酶实验效果,并用乳胶凝集实验对冻干兔血浆检测结果进行验证。本实验室制备的冻干兔血浆的凝固性能与新鲜兔血浆相当,对金黄色葡萄球菌凝固酶阳性菌株检测特异性均为100%。本实验室制备的冻干兔血浆对金黄色葡萄球菌凝固酶的检测特异性很高,具有简便、快速等优点,其性能优于其它两个厂家。

HPLC-荧光法测定兔血浆中羟基喜树碱的浓度

目的建立高效液相色谱法（HPLC）测定兔血浆中羟基喜树碱含量的方法。方法采用HPLC-荧光法。检测器激发波长为363nm，发射波长为550nm，Liehrospher C18色谱柱，流动相为乙腈-0．075mol／L醋酸铵缓冲液（pH6．4）（32：68，含0．2％三乙胺），流速1．0mL/min，采用内标法测定浓度。结果免血浆样品中羟基喜树碱与内标（喜树碱）峰分离良好，内源性杂质不干扰样品峰，最低检测浓度为1．0μg/L。HCPT浓度范围在2．832～5800μg/L间呈线性相关，回归方程为y=0．008596＋0．004282C，相关系数为r=0．9992，相对回收率分别为100．0％-105．0％，日内和日间变异均小于15．0％。结论本实验方法具有专属性，且灵敏、可靠。适用于HCPT类制剂给药后血药浓度的检测，有助于深入研究HCPT在体内的药代动力学特征。

柱层析──化学发光法测定兔血浆中儿茶酚胺类物质

本文以二氧化二铝为吸附剂，经柱层析分离后，对家兔血浆中儿茶酚胺类神经递质，用高灵敏的有机偶合化学发光技术进行测定，效果良好，线性范围为２×１０－１１～８×１０－９ｇ／ｍＬ，最低检测下限为８．２２×１０－１３ｇ／ｍＬ，回收率为９７．３％。

高效液相色谱电化学检测法测定兔血浆单胺递质及其相关化合物

采用苯基柱电化学检测法直接测定兔血浆单胺递质及其相关化合物去甲基肾上腺素、肾上腺素、多巴胺、5 羟色胺。优化了色谱条件 ,流动相为 2 0mmol柠檬酸三钠 (pH 4.5 0 ) 甲醇 (95∶5 ) ;柱温为 2 5℃ ,该方法稳定可靠、简单易行 。

肝炎平对血吸虫性肝纤维化家兔血浆谷胱甘肽及半胱氨酸的影响

目的:探讨肝炎平抗家兔血吸虫性肝纤维化的作用及对血浆谷胱甘肽及半胱氨酸水平的影响。方法:实验分为3组:正常对照组(N组)、血吸虫感染+吡喹酮组(A组)及血吸虫感染+吡喹酮+肝炎平治疗组(B组)。采用高效液相色谱法(HPLC)测定各组血浆谷胱甘肽(glutathione ,GSH )及半胱氨酸(cysteine)水平。结果:B组胶原纤维含量低于A组;B组与A组比较,血浆谷胱甘肽及半胱氨酸水平均升高(P <0. 0 5 )。A组家兔血浆谷胱甘肽水平为(2 6 .18±2 .3 6) μmol/L ,B组为(4 1 0 0±5 3 2 ) μmol/L ;A组血浆半胱氨酸水平为(94. 83±8 .84) μmol/L ,B组为(117. 44±16 .88) μmol/L。结论:肝炎平通过调节血吸虫性肝纤维化家兔体内含硫氨基酸代谢,使血浆谷胱甘肽及半胱氨酸水平升高,增强抗氧化能力,可能是其具有抗肝纤维化作用的机制之一。

桂麻合方对实验性疼痛家兔血浆中环磷酸腺苷及前列腺素E_2的影响

目的:探讨桂麻合方中方与方间在镇痛作用方面的协同与拮抗关系。方法:通过灌服桂枝汤、麻黄汤、桂枝麻黄各半汤、桂枝二麻黄一汤之家兔血浆中环磷酸腺苷(cAMP)及前列腺素E2(PGE2 )含量的观察,揭示桂麻合方中方与方间存在着功效的相加、协同或拮抗。结果:桂麻合方中对各组日本大耳白兔血浆中的cAMP、PGE2 浓度均有明显的抑制作用,与桂枝汤及麻黄汤比较,从趋势上比较,桂麻各半先合后煎汤剂在镇痛方面有明显的协同作用;桂二麻一先合后煎为相加作用;桂麻各半先煎后合及桂二麻一先煎后合为拮抗关系。结论:桂麻方中方与方间有协同或拮抗关系的存在,其存在原因和两方的相合方法与相合比例有关。

高效液相色谱法分析兔血浆中菌灭的浓度

建立了一种检测兔血浆中菌灭浓度的高效液相色谱（HPLC）法。用甲醇沉淀蛋白质，过滤膜过滤，应用Waters高效液相色谱仪进行分析，色谱柱为Scienhome Kromasil ODS-1 250mm×4．6mm，5μm；流动相为甲醇-水（60：40，85％磷酸调pH=3．0）；流速为1mL／min；柱温为（30．0±0．5）℃；紫外检测波长为278nm；内标为苯甲酰环丙沙星。血浆中菌灭浓度在0．05—100μg／mL范围内，标准曲线方程为y=5．5416x＋0．3087，R^2=0．9998。高、中、低3个浓度的回收率相对误差分别为1．3％，5．0％，-9．0％，小于15％，日内及日间相对标准差均小于10％。检测结果表明，该法可用于兔血浆中菌灭浓度的检测。

兔血浆及脏器中西沙必利薄层扫描测定法

目的建立薄层扫描法测定血浆中西沙必利浓度.方法样品经醋酸乙酯提取后,乙醇定容,点样于硅胶GF254-硅胶G(5:3)板后,以二氯甲烷-甲醇(10:0.8)为展开剂,展开,斑点于岛津CS-930扫描仪λs=307nm,λR=360nm处进行扫描.结果标准曲线在0.20～10.0μg范围内线性关系良好,平均回收率为97.92%,RSD=3.8%(n=9).用此法测定了家兔灌胃西沙必利后的血浆浓度,绘制了药-时曲线.结论本法灵敏、易行,可用于药代动力学研究及临床监测.

超高效液相色谱-串联质谱法检测兔血浆中利格列汀及其药代动力学研究

目的建立一种检测兔血浆中利格列汀浓度的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)的方法。方法以地西泮为内标,血浆样品用乙腈沉淀后检测。用Acquity UPLC BEH C18柱为分离柱,流动相:乙腈-0.1%甲酸梯度洗脱,总运行时间为3.0 min,利格列汀的洗脱时间为1.09 min;用AcquityXevo TQD三重四级杆质谱仪检测,用多反应监测法测定样品中的药物浓度。考察该方法的专属性、线性关系、精密度、准确度和回收率及稳定性。结果色谱图显示血浆中的利格列汀保留时间为1.09 min,无内生峰干扰;校准曲线的典型方程:y=0.1646x+0.0303,r=0.9914,线性关系良好;日内、日间精密度及准确度范围均低于15%;药物回收率在76.0%~82.1%范围内;在不同储存条件下浓度的偏差在均值的±15%以内,较稳定。结论该方法简便、快速,可用于兔血浆利格列汀的检测、药代动力学研究和药物相互作用研究。

模拟兔血浆中富马酸福莫特罗的HPLC-ECD测定

采用液液萃取方法,建立了模拟兔血浆中富马酸富莫特罗的高效液相色谱-电化学检测（HPLC-ECD）测定新方法.实验结果表明,富马酸富莫特罗质量分数的线性范围为47～2500 μg/mL（r=0.999 9）,提取回收率为77.8％～80.1％,方法回收率为96.2％～106.0％ （RSD≤1.9％）.该法有望用于动物体内药物代谢分析.

电针内关对急性心肌缺血家兔血浆中内皮素、血栓烷素B_2和6-酮-前列腺素的影响

目的:观察电针双侧内关对急性心肌缺血家兔血浆中内皮素(ET)、血栓烷素B2(TXB2)和6酮前列腺素(6KetoPGF1α)含量的影响。方法:结扎左冠状动脉前降支造成急性心肌缺血模型,采用放免技术,检测急性心肌缺血家兔血浆中ET、TXB2和6KetoPGF1α的含量。结果:与假手术组相比,模型组血浆中ET、TXB2含量显著升高(P<0.05),而6KetoPGF1α含量则下降(P<0.05),T/K(TXB2/6KetoPGF1α)比值显著上升(P<0.05)。且模型组血浆ET的浓度的升高与T/K比值呈良好的正相关(r=0.768,P<0.05)。电针内关后可使家兔血浆中ET、TXB2含量显著下降(P<0.05),而6KetoPGF1α含量显著上升(P<0.05),而T/K比值显著下降(P<0.05)。结论:电针内关可以调节血浆中ET、TXB2、6KetoPGF1α的含量,且能使T/K比值趋于正常,改善缺血心肌组织的损伤,这可能是针灸发挥治疗作用的重要机制之一。

苯卟啉衍生物单环酸A(BPD-MA)在兔血浆中的代谢特性

目的 :在体条件下分析兔血浆中的BPD -MA的吸收特性及排出情况 ,为BPD -MA用于PDT治疗血管性疾病的可行性和时机选择提供依据。方法 :动物给药后 ,在不同时间取血 ,采取荧光分光光度法测定BPD -MA含量。结果 :兔血浆中BPD -MA含量在给药后 5min最高 ,5～ 2 0min下降最快 ,2 0min后下降幅度减慢 ,12 0min趋于稳定 ,当给药量为 5mg/kg时 ,血药浓度变化最明显。结论 :血浆药物浓度与给药浓度有关 ,随时间的变化呈典型的峰值 -快速下降期 -平台期。

RP-HPLC测定家兔血浆中的替普瑞酮

目的采用RP-HPLC法,测定兔血浆中的替普瑞酮。方法血浆样品中加入丁烯二酸二异辛酯和NaH2PO4溶液(0.05mol·L-1,pH2.5),用叔丁醚振荡萃取后测定。色谱柱为LunaC8柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(92:8),流速1.0m.lmin-1,柱温25℃,检测波长205nm。结果替普瑞酮0.086～3.440μg.ml-1线性关系良好(r=0.9991),平均方法回收率为98.25%,日内和日间RSD均小于10%。结论所建方法简便、灵敏、准确、重复性好,适用于替普瑞酮的药物动力学研究。

用于血浆凝固酶试验的兔血浆制备和贮存方法

目的 建立一种实用方便的兔血浆制作、贮存方法 ,用于葡萄球菌血浆凝固酶实验。方法 EDTA·K2 抗凝兔血浆 ,生理盐水 4倍稀释 ,比较 2～ 8°C、- 2 0°C及 - 85°C的贮存效果 ,并同时与病人血浆、法国生物梅里埃公司胶乳试剂作比较。结果 5 4株受试菌 ,该法与胶乳法符合率为 10 0 % ,优于病人血浆。结论 该方法实用方便 ,结果准确 。

肝素钠的兔血浆与羊血浆效价测定平行性考察

目的 :采用兔血浆法和羊血浆法测定肝素钠的效价 ,比较两种方法在临床操作过程中的可行性并考察两种方法测定结果的平行性。方法 :采用兔血浆和羊血浆法。结果 :羊血浆法比兔血浆法易于掌握 ,误差较小。结论

高效液相—荧光检测法测定兔血浆中羟基喜树碱的含量

目的建立高效液相—荧光检测法测定兔血浆中羟基喜树碱含量的方法。方法色谱柱为Discovery C18(15.0mm×4.6mm,5μm),流动相为柠檬酸缓冲液-乙腈-75nmol/L磷酸二氢钾(70:23:7),75nmol/L磷酸二氢钾中含1%三乙胺,流速为1.0ml/min,柱温为40℃,荧光检测波长为363nm和530nm。结果该方法的线性范围为13.7656～1957.4468ng/ml(r=0.9993)。萃取回收率和方法回收率分别为80.90%～103.59%、102.72%～108.16%,日内RSD≤7.49%,日间RSD≤9.40%。最低检测限为5.2ng/ml。结论该方法专属性强,重现性好,操作简便,适用于羟基喜树碱的药代动力学研究和血药浓度监测。

高效液相-荧光检测法测定兔血浆中羟基喜树碱的含量

目的 建立高效液相-荧光检测法测定免血浆中羟基喜树碱含量的方法学。方法 色谱柱为Discovery C18（15cm×4．6mm，5μm），流动相为柠檬酸缓冲液-乙腈-75nmol·L^-1磷酸二氢钾（70：23：7），75nmol·L^-1磷酸二氢钾中含1％三乙胺。流速为1．oml·min^-1，柱温为40℃，荧光检测波长为λex363nm和λem530nm。结果 该方法的线性范围为13．7656-1957．4468ng·mL^-1（r=0．9993）。提取回收率和方法回收率分别为80．900／00～103．59％．102．72％～108．16％．日内RSD≤7．49％，日间RSD≤9．40％。最低检测限为5．2ng·mL^-1。结论 该方法专属性强，重现性好，操作简便，适用于羟基喜树碱的药代动力学研究和血药浓度监测。

肝素的兔血浆移位均值法效价测定

目前各国药典收载的肝素效价测定方法均是生物检定法,均应用其抗血凝的药理作用进行测定,具体方法则有所不同。例如,英国药典(1980)、日本药局方(XI)用硫酸钠—牛全血法,英国药典(1980)还规定可用硫酸钠—牛血浆、枸橼酸钠—羊血浆法(英国药典1983、1986增补本已将肝素的效价测定改为此法)。