一个遗传性凝血因子Ⅴ缺陷症家系的临床表型及分子致病机制研究

目的:探讨一个遗传性凝血因子Ⅴ缺陷症(coagulation factor V deficiency,FⅤD)家系的临床表型及分子致病机制。方法:采用一期法测定凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ(FⅡ∶C、FⅤ∶C、FⅦ∶C、FⅧ∶C、FⅨ∶C、FⅩ∶C、FⅪ∶C、FⅫ∶C)、活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)及凝血酶原时间(prothrombin time,PT)进行表型鉴定;应用高通量外显子测序筛查全基因变异,Sanger测序验证F5基因可疑变异;利用Mutation-Taster、PolyPhen-2生物信息学软件预测变异致病性、ClustalX软件分析氨基酸保守性和PyMol软件模拟变异蛋白模型。结果:先证者PT、APTT明显延长,FⅤ∶C仅为5.45%,TT、FIB及其余凝血因子均无明显异常。其母亲、父亲、姐姐的PT、APTT均延长,FⅤ∶C不同程度减低。基因检测显示先证者F5第3号外显子存在c.286G>C(p.Asp96His)纯合错义变异,其父亲、母亲、姐姐均存在c.286G>C(p.Asp96His)杂合错义变异。生物信息学分析提示p.Asp96His为致病变异,相关的氨基酸位点在10个物种中高度保守。蛋白模拟显示,Asp96变异为His96后可导致原有氢键消失和距离改变,破坏了原有的氢键相互作用力,影响蛋白结构的稳定性。结论:F5第3号外显子c.286G>C(p.Asp96His)错义变异可能导致了先证者及家系成员FⅤ∶C的减低,也是引起凝血因子Ⅴ缺陷症的遗传学病因。

获得性凝血因子Ⅴ缺乏症伴混合性结缔组织病1例并文献复习

获得性凝血因子Ⅴ缺乏症是一种罕见出血性疾病,临床表现为黏膜或软组织出血,甚至发生致命性出血,部分患者可无出血症状。笔者曾收治获得性凝血因子Ⅴ缺乏症伴混合性结缔组织病患者1例,现将诊疗过程归纳如下。

获得性凝血因子Ⅴ抑制物所致PT、APTT延长狼疮抗凝物假阳性1例报道

获得性凝血因子Ⅴ抑制物所致疾病是一种临床表现异质性较高的罕见疾病,凝血因子Ⅴ抑制物的存在会导致活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)和凝血酶原时间(prothrombin time,PT)延长。狼疮抗凝物(lupus anticoagulant,LA)检测出现假阳性时,如未能辨别,将掩盖APTT和PT延长的真实原因,干扰临床诊疗。本文报道1例获得性凝血因子Ⅴ抑制物致LA检测假阳性病例的诊断过程,并进行相关文献复习,为临床鉴别提供参考。

新型冠状病毒感染后获得性凝血因子Ⅴ抑制物一例

获得性凝血因子Ⅴ抑制物(acquired factorⅤinhibitor,AFVI)是一种极其罕见的疾病,通常发生在60岁以后,可导致严重的出血[1]。黏膜(如泌尿生殖道、胃肠道及呼吸道等)是最常见的出血部位,约占62%;血尿最为常见,颅内出血相对少见(约占8%),但致死率高[2]。

获得性凝血因子Ⅴ抑制物致消化道出血1例及诊断思路

获得性凝血因子抑制物是一种病理性循环抗凝物质,其所致的凝血障碍临床少见。多数抑制物针对凝血因子Ⅷ(FactorⅧ,FⅧ),而针对凝血因子Ⅴ(FactorⅤ,FⅤ)者罕见,年发生率达(0.09~0.29)/100万,文献报道200余例[1]。患者可伴有或不伴有严重出血症状[2],常因无法找到明确原因而被漏诊、误诊。实验室检查如凝血酶原时间(pro-thrombin time,PT)、活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)明显延长后,临床不知其中原因,常输注血浆处理;即使发现FⅤ活性降低,治疗效果也往往不佳;只有检测到FⅤ抑制物,才可明确诊断并对症处理。因此,实验室主动追查异常检验结果的原因,推动临床和实验室联合诊断模式,可能是探讨解决这类罕见或复杂出凝血疾病的有效策略。本院收治1例获得性FⅤ抑制物致消化道出血患者,现报道其诊疗过程。

血液透析患者合并获得性凝血因子Ⅴ缺乏症

42岁男性患者,规律血液透析1月,因“乏力、气短1 d”就诊。实验室检查显示凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间(APTT)显著延长,APTT纠正试验无法纠正,凝血酶时间正常,凝血因子Ⅴ活性降低,抑制物检测阳性,予以糖皮质激素单药治疗后凝血功能恢复正常。患者预后良好,在一年的随访中未复发。获得性凝血因子Ⅴ缺乏症很罕见,临床表现具有异质性,在有基础病患者群中预后不良,及时的诊断和治疗有助于改善患者预后,但需警惕药物相关并发症。

获得性凝血因子Ⅴ缺乏合并血小板功能障碍的病例研究并文献复习

本文报告1例以血尿起病的获得性FⅤ缺乏伴抑制物阳性患者的临床特征、实验室检查指标、诊治经过及转归并进行相关文献复习和讨论。患者男,69岁,血尿、皮肤瘀斑,凝血酶原时间(Prothrombin Time, PT)延长、活化部分凝血酶原时间(Activated Partial Thromboplastin Time, APTT)延长、FⅤ活性极低、FⅤ抑制物阳性;伴血小板功能障碍,基因测序发现PLAU基因错义突变,先后经输注血制品、免疫抑制剂治疗好转,感染后复发,后经利妥昔单抗治疗有效。本研究发现获得性FⅤ缺乏伴抑制物阳性所致凝血障碍为血液科罕见疾病,免疫抑制剂、利妥昔单抗治疗有效。凝血异常患者需同时注意血小板功能检测。下一代测序技术(Next-generation sequencing,NGS)可为探究其病因提供线索。

血栓弹力图与凝血因子Ⅴ、Serpine1对创伤性骨折患者术后下肢深静脉血栓的预测价值分析

目的探讨血栓弹力图(thrombelastography,TEG)与人纤溶酶原激活物抑制剂1(human plasminogen activator inhibitor-1,Serpine1)对创伤性骨折患者术后下肢深静脉血栓的预测价值。方法选取2019年10月至2021年10月于杭州整形医院就诊的疑似下肢深静脉血栓的创伤性骨折术后患者272例,以超声造影检查诊断为“金标准”,将确诊为下肢深静脉血栓的200例患者设为研究组,72例非下肢深静脉血栓患者设为对照组,两组患者均行TEG检查,检测两组的凝血因子Ⅴ、Serpine1水平。结果与对照组比较,研究组的TEG参数凝固时间(solidification time,K)、反应时间(reaction time,R)降低,最大幅度(maximum magnitude,MA)、凝固角(solidification angle,α)升高,且研究组重度患者的K、R较低,MA、α、凝血因子Ⅴ、Serpine1水平较高(P<0.05)。K、R、MA、α、凝血因子Ⅴ、Serpine1与研究组轻度、重度严重程度相关,且K、R、MA、α与凝血因子Ⅴ、Serpine1相关。K、R、MA、α、凝血因子Ⅴ、Serpine1联合检测对创伤性骨折患者术后下肢深静脉血栓的预测价值较高。结论TEG联合凝血因子Ⅴ、Serpine1对创伤性骨折患者术后下肢深静脉血栓有较高的预测价值,具有一定的临床价值。

遗传性联合凝血因子Ⅴ和Ⅷ缺乏症的诊疗现状

遗传性联合凝血因子Ⅴ和Ⅷ缺乏症(F5F8D)是一种罕见的常染色体隐性遗传性疾病,发病率约为1/百万,无性别差异。该病主要是LMAN1基因及MCFD2基因突变引起。临床上主要表现为轻至中度的出血倾向。实验室检查为FⅤ和FⅧ的活性同时下降所致的凝血酶原时间及活化部分凝血活酶时间延长。本文针对该病的发病机制、临床表现及诊疗进展等展开综述,以期提高儿科医师对该疾病的认识。

凝血因子Ⅴ缺乏症患者的围手术期血液管理并文献复习

目的探讨胰腺假性囊肿合并凝血因子Ⅴ(FⅤ)缺乏症患者的围手术期血液管理。方法术前:为判明冷沉淀和新鲜冰冻血浆(FFP)对提升FⅤ的效果,采用在静息状态下,交替输注冷沉淀和FFP,监测输注前、输注后1 h、24 h和48 h TEG、凝血功能及凝血因子活性,制定术中及术后输血策略,术前补充FFP 600 mL和冷沉淀10 U。术中:手术进行7 h,输注FFP 600 mL,无明显出血。术后:输注FFP。结果术前:患者凝血FⅤ活性2次检测结果分别为1.9%和1.8%,交替输注冷沉淀10 U和FFP 1200 mL后,FⅤ活性均升高,分别为5.1%和6.0%;TEG检测各指标无明显差异,PT和ATPP有不同程度降低。术中:手术顺利,无明显出血。术后:术后2 h输注FFP 500 mL,术后1—7 d每天输注FFP 250~500 mL,患者伤口未见明显渗血,TEG、PT、APTT和血红蛋白(Hb)与术前比较变化不大,患者于术后12 d顺利出院。基因检测结果为遗传性凝血FⅤ缺乏症,属于复合杂合变异。结论FⅤ缺乏症合并外科疾病患者的围手术期血液管理,需结合实验室检查和临床表现进行输血前评估和输血后评价,冷沉淀和FFP均可以有效补充凝血因子。判断FⅤ缺乏症患者的凝血状态时,TEG检测似乎优于凝血功能7项检测。

静脉血栓栓塞症患者活化蛋白C抗性及凝血因子Ⅴ活性和基因多态性研究

本研究旨在观察静脉血栓栓塞患者凝血因子Ⅴ(FactorⅤ,FⅤ)活性改变,检测活化蛋白C抗性(activatedprotein C resistance,APCR)和凝血因子Ⅴ基因FⅤLeiden、FⅤCambridge、FⅤHong Kong、FⅤAsp79His和FⅤI359T多态性。对95例静脉血栓栓塞患者(其中下肢深静脉血栓79例,肺栓塞4例,下肢深静脉血栓合并肺栓塞12例)和95例正常对照者。应用限制性内切酶片段长度多态性测定FV Leiden、FⅤCambridge和FⅤHong Kong多态性,用MassARRAYTM技术检测FⅤAsp79His、FⅤI359T多态性。以一期法和校正的APTT试验分别对其中的65例静脉血栓栓塞患者和60例正常对照者行凝血因子Ⅴ活性水平和活化蛋白C抵抗检测。结果表明:静脉血栓栓塞患者血浆凝血因子Ⅴ活性水平(108.03%±28.29%)高于对照组(95.17%±29.75%),差异有显著性统计学意义(P=0.008);静脉血栓栓塞组活化蛋白C抵抗阳性13例(20.0%),对照组3例(5.0%),二组比较,有统计学意义(P=0.012)。二组均未发现FV Leiden、FⅤCambridge、FⅤHong Kong、FVAsp79His和FV I359T多态性。结论:凝血因子Ⅴ活性升高和活化蛋白C抵抗是静脉血栓栓塞的危险因素,但APCR与FⅤLeiden、FⅤCambridge、FⅤHongKong、FⅤAsp79His和FⅤI359T多态性无关。

血浆凝血因子Ⅴ、Ⅷ及蛋白C活性与下肢深静脉血栓形成的相关性

目的通过检测下肢深静脉血栓患者血浆凝血因子Ⅴ、Ⅷ(简称FⅤ、FⅧ或Ⅴ因子、Ⅷ因子)及蛋白C活性,探讨其与患者下肢深静脉血栓形成的相关性及其早期诊断价值。方法随机选取在本院住院的下肢深静脉血栓患者70例,以同期健康体检者70例作为对照组,测定其血浆凝血因子Ⅴ、Ⅷ及蛋白C活性。结果采用Logistic回归分析结果表明,凝血因子Ⅴ、Ⅷ及蛋白C活性是患者发生下肢深静脉血栓的危险性因素。下肢深静脉血栓患者的血浆凝血因子Ⅴ、Ⅷ活性与健康对照组相比均明显增高,蛋白C活性与健康对照组相比均明显减低,差异具有统计学意义(P<0.001)。结论血浆凝血因子Ⅴ、Ⅷ活性与患者下肢深静脉血栓形成有显著相关性,而且血浆凝血因子Ⅴ、Ⅷ、蛋白C活性水平与下肢深静脉血栓形成危险性呈正相关,凝血因子Ⅷ活性异常增高、蛋白C活性降低是下肢深静脉血栓形成的独立危险因素。

尿激酶对动脉粥样硬化患者血清纤维蛋白原、凝血因子Ⅴ和凝血因子Ⅷ的影响

目的探讨尿激酶对动脉粥样硬化患者血清纤维蛋白原、凝血因子Ⅴ和凝血因子Ⅷ的影响,以评价尿激酶对动脉粥样硬化患者凝血功能的影响。方法选择2011年2月~2013年1月期间来在本院诊断为动脉粥样硬化的100例患者,并接受尿激酶静脉注射治疗。根据临床分期分成隐匿期(n=25)、缺血期(n=25)、坏死期(n=25)和纤维化期(n=25)。检测所有患者治疗前后血清纤维蛋白原、凝血因子Ⅴ和凝血因子Ⅷ浓度,并计算各指标的变化率。结果治疗后各组纤维蛋白原(Fg)、凝血因子Ⅴ(FⅤ)和凝血因子Ⅷ浓度均显著低于治疗前(P<0.05)。血清纤维蛋白原变化率隐匿组为(52.11±1.47)%,缺血组为(52.21±1.22)%,坏死组为(49.89±1.43)%,纤维化组为(50.73±1.71)%,各组间比较差异均无统计学意义。凝血因子Ⅴ变化率隐匿组为(62.83±2.25)%,缺血组为(62.63±1.92)%,坏死组为(60.89±2.11)%,纤维化组为(61.36±2.14)%,各组间比较差异均无统计学意义。凝血因子Ⅷ变化率隐匿组为(43.02±2.28)%,缺血组为(42.04±2.13)%,坏死组为(39.99±2.93)%,纤维化组为(40.93±2.94)%,各组间比较差异均无统计学意义。结论尿激酶可通过降低动血清纤维蛋白原、凝血因子Ⅴ和凝血因子Ⅷ浓度来降低动脉粥样硬化患者凝血功能,以达到抑制血栓形成的作用。

血浆凝血因子Ⅴ、凝血因子Ⅷ、纤维蛋白原和抗凝血酶Ⅲ在2型糖尿病早期干预中的应用

2型糖尿病属于一组代谢性紊乱性疾病,极易发生血管并发症,累及冠状动脉、眼底静脉等很多重要组织及器官血管,因此具有极高的致残率及死亡率[1]。针对这一情况,对糖尿病患者血管病变的发生进行有效地防止具有极为重要的临床意义。为此须对患者的血液高凝状态及血栓形成进行有效的预防。

凝血因子Ⅴ Leiden突变检测对肺血栓栓塞症的预测价值

目的探讨我国东北地区肺血栓栓塞症(PTE)患者中凝血因子ⅤLeiden突变(FVL)的发生频率。方法病例组是81例经螺旋CT肺动脉造影(CTPA)或核素肺灌注显像结合临床症状确诊的PTE患者,对照组是81例年龄、性别相匹配,来自相同地区的健康人群。采用聚合酶链式反应(PCR)对实验组及对照组抽提出的DNA片段进行扩增,对确认扩增成功的PCR产物,用HindⅢ限制酶进行酶切,酶切产物行琼脂糖凝胶电泳检测FⅤL基因突变情况。结果两组凝血因子Ⅴ基因经HindⅢ酶切后,均仅出现241 bp一条带,FⅤL发生频率为0%,病例组与对照组相比无显著差异(P>0.05),病例组及对照组均未发现凝血因子V基因杂合子及纯合子突变。结论凝血因子ⅤLeiden突变在我国东北地区发生率低,可能对我国东北地区人群PTE诊断没有预测价值。

血浆凝血因子Ⅴ、Ⅷ及蛋白C活性与下肢深静脉血栓形成的关系

目的观察血浆凝血因子Ⅴ、Ⅷ及蛋白C活性与下肢深静脉血栓形成(DⅤT)的关系。方法取2012年4月至2016年8月医院收治下肢DⅤT患者300例,设为观察组,取同期入院健康体检者300例,设为对照组。采用发射底物法检测2组血浆凝血因子Ⅴ、Ⅷ及蛋白C活性水平,对危险因素进行Logistic回归分析,分析血浆凝血因子Ⅴ、Ⅷ及蛋白C活性与下肢DⅤT的关系。结果观察组血浆凝血因子Ⅴ、Ⅷ水平,高于对照组(P<0.05);观察组蛋白C活性水平,低于对照组(P<0.05);下肢DYT发生率与血浆凝血因子Ⅴ、Ⅷ高表达及蛋白C活性水平低表达关系密切(P<0.05)。结论下肢DⅤT中血浆凝血因子Ⅴ、Ⅷ存在高表达,蛋白C活性低表达,是下肢深静脉血栓的独立危险因素。

获得性凝血因子Ⅴ缺乏症1例

本文报道了1例腹腔镜胆囊切除术后患者凝血功能异常,发生两次腹腔大出血,第二次腹腔大出血凝血因子检查显示凝血因子Ⅴ活性为0.7%,Ⅴ抗体为8.0 BU,并确诊为获得性凝血因子Ⅴ缺乏症。经查阅文献后分析了该患者发生获得性凝血因子Ⅴ缺乏的原因,可能与感染、输血浆及抗生素的使用相关,通过血浆置换与免疫抑制治疗,患者凝血功能逐渐恢复正常。本文对获得性凝血因子Ⅴ缺乏症的治疗方案进行文献查阅,为临床医生的诊断和处理提供思路。

2型糖尿病患者血浆凝血因子Ⅴ、凝血因子Ⅷ和纤维蛋白原、抗凝血酶Ⅲ联合检测的临床应用价值

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者血浆凝血因子Ⅴ、凝血因子Ⅷ、纤维蛋白原和抗凝血酶Ⅲ在临床上的应用价值。方法随机选取在本院住院治疗的T2DM患者60例,其中有并发症患者30例(并发症组),单纯糖尿病患者30例(单纯糖尿病组),并以同期健康体检者30例作为对照组。测定各组患者血浆凝血因子Ⅴ、凝血因子Ⅷ、抗凝血酶Ⅲ活性和纤维蛋白原。结果T2DM患者血浆凝血因子Ⅴ、凝血因子Ⅷ活性和纤维蛋白原与健康对照组相比均明显增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。其中并发症组血浆凝血因子Ⅴ、凝血因子Ⅷ活性和纤维蛋白原明显高于单纯糖尿病组,血浆抗凝血酶Ⅲ活性明显低于对照组(P<0.05);而单纯糖尿病组抗凝血酶Ⅲ活性与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论监测血浆凝血因子Ⅴ、凝血因子Ⅷ、纤维蛋白原水平和抗凝血酶Ⅲ的活性,有利于对T2DM患者凝血状态进行评估,从而为早期干预T2DM患者血管并发症提供参考依据。

一个遗传性凝血因子Ⅴ缺陷症家系的基因分析

目的:探讨无出血症状凝血因子Ⅴ(FⅤ)缺陷症的分子病理机制。方法:检测先证者及其家系成员的活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)等;采用一期法测定血浆凝血因子活性,PCR法扩增FⅤ25个外显子及其侧翼序列,纯化测序后与Genbank里的标准序列(AY364535)比对,以发现基因变异。结果:先证者APTT、PT显著延长,分别为104.1s和31.5s,凝血因子Ⅴ活性(FⅤ:C)4%;先证者及家系成员基因分析发现13、15和16号外显子存在12个单核苷酸多态性(SNP)位点,基因型为纯合型和复合杂合型,尚未发现新的基因突变位点。结论:凝血因子Ⅴ缺陷症无出血症状与B结构域的SNP位点有关。

凝血因子Ⅴ抑制物致多项凝血因子活性假性降低

目的分析获得性凝血因子Ⅴ缺乏症患者多项凝血因子活性假性降低的原因。方法4例患者凝血酶原时间(PT)及活化部分凝血活酶时间(APTT)均延长,对其进行纠正试验、狼疮抗凝物及凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ活性检测,并对活性降低的凝血因子稀释不同倍数后复检,对稀释后活性没有明显变化的凝血因子进行相应的抑制物筛查。结果4例患者均出现多项凝血因子降低,纠正试验提示不纠正,狼疮抗凝物检测提示超出检测限,经不同稀释倍数稀释后,除凝血因子Ⅴ外,其他凝血因子活性水平大幅升高,凝血因子Ⅴ抑制物检测阳性。结论获得性凝血因子V缺乏症患者常伴有多种凝血因子活性假性降低,凝血因子Ⅴ抑制物的存在会干扰狼疮抗凝物的检测。