高效分子排阻色谱法测定头孢西丁钠中高分子杂质的含量

目的建立高效分子排阻色谱法测定头孢西丁钠的高分子杂质。方法采用TSK-G2000SWxl（7.8 mm×30cm,5μm）柱,流动相为磷酸盐缓冲液-乙腈（95：5）,检测波长235 nm,流速0.8 mL min-1,以头孢西丁对照品外标法计算高分子杂质的含量。结果头孢西丁对照品浓度在0.054 4~0.001 1 mg mL-1与其峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 2）。结论本方法简便快速,定量准确,重现性好,可用于头孢西丁钠高分子杂质的含量测定。

分子排阻色谱法测定头孢克肟聚合物

目的:建立用分子排阻色谱法分析头孢克肟高分子聚合物的方法。方法:采用SephadexG10色谱柱(300 mm×16mm,40～120μm),流动相A为0.1 mol·L^(-1)磷酸盐缓冲液(pH 7.0),流动相B为超纯水,流速1.5 ml·min^(-1),检测波长:254nm。结果:头孢克肟在5～80 mg·ml^(-1)范围内与头孢克肟高分子聚合物的峰面积呈良好的线形关系(r=0.999 3)。头孢克肟在5～400μg·ml^(-1)的范围内与头孢克肟缔合物的峰面积也呈良好的线性关系(r=0.999 7)。结论:该方法能较好地分离头孢克肟与其聚合物,且精密度、准确度均能满足质量控制的要求。

高效分子排阻色谱法测定头孢拉定胶囊中的聚合物

目的建立高效分子排阻色谱法测定头孢拉定胶囊中聚合物的方法。方法用TSKG2000SW色谱柱(7.8mm×300mm),紫外254nm检测,以头孢拉定对照品外标法计算聚合物含量,并与《中国药典》2005年版头孢拉定原料药中聚合物测定方法进行比较。结果本方法测定头孢拉定胶囊中聚合物的平均含量为1.0%,显著高于《中国药典》2005年版方法测定结果。结论高效分子排阻色谱法测定灵敏度高,准确性好,分析速度快,可有效控制头孢拉定胶囊中聚合物的含量。

高效分子排阻色谱法测定滇黄精多糖的分子量

目的建立测定滇黄精多糖分子量的高效分子排阻色谱法。方法色谱柱采用TSK G3000 PWXL凝胶柱(300 mm×7.8 mm,10μm),配有Shodex RI-101型示差检测器,检测波长为210 nm,流动相为纯水,流速为0.5 m L/min,柱温为30℃,进样量为20μL。结果葡聚糖对照品重均分子量(Mw)的线性范围为10.0×10^(3)~200×10^(3)。滇黄精多糖组分PK-F1和PK-F2中多糖主峰P1的保留时间(t_(R))为10.55 min,Mw为145850;多糖主峰P2的t_(R)为12.78 min,Mw为24565。滇黄精多糖组分PK-F3多糖主峰P3的t_(R)为16.91 min,Mw为907。结论该方法简易、准确、可靠,可为滇黄精的质量控制提供参考。

高效分子排阻色谱法测定比阿培南中聚合物杂质

目的建立高效分子排阻色谱法（HPSEC）对比阿培南中的聚合物杂质进行分离分析，并采用液－质（LC-MS）联用的方法确定其分子量，进行初步研究。方法采用Protein－Park^TM 60（7．8mm×300mm，10μm）色谱柱，流动相为5mmol／L的乙酸铵溶液，流速为0．5mL／min，检测波长为220nm，进样量为20μL。用LC-MS法测定聚合物杂质分子量。结果采用HPSEC法，比阿培南聚合物杂质与比阿培南能完全分离，聚合物杂质在含比阿培南0．06-0．16mg／mL浓度范围内线性关系良好（r=0．9991），重复性较好（RSD=1．6％，n=6）。采用LC-MS法推断聚合物杂质主要是比阿培南的二聚物和三聚物。结论HPSEC法简便、灵敏、重复性好，适用于比阿培南中聚合物杂质的测定。

蛋白质复性的分子排阻色谱法的研究进展

包涵体蛋白质复性是生物工程下游技术中的一个重要问题。利用传统的方法复性复性率低和步骤繁琐 ,无法用于大规模生产。最近出现的层析复性方法 ,具有较强的优势。其原理是将层析技术应用于蛋白质复性和纯化 ,使变性蛋白质在层析柱上折叠为正确的空间构象 ,在洗脱的同时实现部分纯化。在层析技术中分子排阻色谱法由于操作简便 ,复性效率高 ,成为研究的重点。文章就分子排阻色谱法的研究情况作一综述。

高效分子排阻色谱法测定头孢呋辛酯片中的高分子量杂质

目的建立头孢呋辛酯片高分子量杂质的检查方法。方法采用TSK-GEL G2000HHR色谱柱(7.8mm×300mm,5μm),流动相为含30mmol/L溴化锂的N,N-二甲基甲酰胺溶液,流速0.33m L/min,检测波长278nm。结果对该分析方法的专属性、精密度、线性与范围、灵敏度、重复性等进行考查,各项指标均良好;3批头孢呋辛酯片样品高分子量杂质的含量分别为0.45%、0.41%和0.45%。结论该法简便、准确、专属性高,可用于头孢呋辛酯片中高分子量杂质的检查。

高效分子排阻色谱法测定丙二醇头孢曲嗪原料药中聚合物的含量

目的：建立测定丙二醇头孢曲嗪原料药中聚合物含量的方法。方法：采用高效分子排阻色谱法。色谱柱为SephadexG-10，流动相A为0.01mol/L磷酸盐缓冲液[0.01mol/L磷酸氢二钠溶液-0.01mol/L磷酸二氢钠溶液（61∶39，V/V）]（pH7.0），流动相B为水，流速为1.0ml/min，检测波长为254nm，柱温为30℃，进样量为200μl。结果：丙二醇头孢曲嗪原料药中聚合物的检测质量浓度线性范围为2.07～103.30μg/ml（r＝0.9994）；定量限为10.4ng、检测限为4.1ng；精密度、重复性试验的RSD＜3％。结论：该方法专属性强、灵敏度高、重复性好，可用于丙二醇头孢曲嗪原料药中聚合物的含量测定。

分子排阻色谱法检测双黄连注射液中的高分子杂质

目的分子排阻色谱法考察双黄连注射液中高分子杂质。方法采用分子排阻色谱法测定了3个厂家6批双黄连注射液,用TSKk-GEL G2000SWxL色谱柱,以乙腈-水-三氟乙酸(体积比40∶60∶0.07)为流动相,流速为0.5 mL·min-1,柱温为30℃,二极管阵列检测器,检测波长为214 nm。结果相对分子质量对数与出峰时间呈良好的线性关系(r=0.996 8),相对分子质量对照品(人胰岛素)检出限为0.386 mg·L-1,6批双黄连注射液中均未检出高分子物质,加速稳定性试验检测相对分子质量3 108>Mr≥1 638杂质的含量稳定。结论国内的双黄连注射液质量稳定,在加速稳定性试验中无高分子物质聚合产生,作者建立的检测方法可用于双黄连注射液中高分子杂质的检查。

分子排阻色谱法测定马罗匹坦注射液中磺丁倍他环糊精钠的含量

[目的]建立马罗匹坦注射液中磺丁倍他环糊精钠的含量测定方法。[方法]采用分子排阻色谱法,以0.1 mol/L硝酸钾溶液-甲醇（65∶35）为流动相,采用分子排阻色谱法检测马罗匹注射液中磺丁倍他环糊精钠的含量。[结果]磺丁倍他环糊精钠与相邻峰的分离度均大于3.0;在6-180μg范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系（r=0.999 9,n=8）;在80%、100%、120%3种添加水平下的平均回收率分别为95.96%（RSD=0.5%,n=3）、98.41%（RSD=0.4%,n=3）、97.77%（RSD=0.5%,n=3）。[结论]该方法专属性强、准确度好、适应范围宽,可作为马罗匹坦注射液中磺丁倍他环糊精钠的含量测定方法。

分子排阻色谱法测定水解蛋白注射液中高分子物质

目的:采用分子排阻色谱法测定水解蛋白注射液中小分子肽的分子量。方法:采用TSK-GEL G2000SWXL色谱柱(7.8mm×300 mm,5μm),以磷酸盐缓冲液(pH 6.8)(含0.1 mol.L-1Na2SO4与0.05%NaN3)为流动相,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃,检测波长280 nm。结果:水解蛋白注射液中分子量大于胰岛素的高分子物质含量均在5%以下。结论:该方法简单,重现性好,可以作为控制水解蛋白注射液中高分子物质的方法。

分子排阻色谱法检测胰岛素中的大分子蛋白质

中国药典规定，用柱色谱法对胰岛素中的大分子蛋白进行测定，但所检测出的含量只能是一个相对准确值，重现性较差，出现偏差时也无法判断．文章通过柱色谱法及分子排阻色谱法两种方法对胰岛素中的大分子蛋白质进行定量的测定比较，认为可以用分子排阻色谱法代替柱色谱法检测胰岛素中的大分子蛋白质，并提交国家药典委员会，建议使用．

分子排阻色谱法测定云芝糖肽的分子量分布

目的建立分子排阻色谱法测定云芝糖肽的分子量分布的方法。方法用分子排阻色谱法,色谱柱:TSKgelG 4000SW(7.5mm×300m m)柱,流动相:0.02mol/L醋酸钠溶液,柱温:30℃,已知分子量右旋糖酐分子量标准品作校正标准,示差折光检测器。流速:0.50m l/min;进样量:10μL。结果根据建立的方法测定,分析了3批样品,得到云芝糖肽的排阻色谱图并计算出重均分子量大于40000的相对百分比为59.7%,63.6%,66.6%。结论该方法简便、快速,可用云芝糖肽的质量控制。

高效分子排阻色谱法测定头孢唑肟钠中聚合物的含量

目的建立高效分子排阻色谱法（HPSEC）测定头孢唑肟钠中的聚合物等杂质。方法采用球状蛋白亲水改性硅胶柱（Zenix SEC-150，7．8mm×300mm，3gm）；流动相为磷酸盐缓冲液（pH7．0）[0．075mol／L磷酸氢二钠溶液-0．075mol／L磷酸二氢钠溶液（61：39）1-乙腈（90：10）；流速为1．0mL／min；检测波长为254nm；进样量为10此。结果头孢唑肟的线性范围为1．15～57．40gg／mL（r=0．9999）；定量限为3．2ng、检出限为1．2ng；聚合物等杂质测定的线性范围为0．0500～4．998mg／mL（r=0．9995）；对照品溶液重复进样的精密度（RSD）为0.31％（n=6），样品测定的重复性（RSD）为0．67％（n=6）。结论该方法适于测定头孢唑肟钠中聚合物等杂质，灵敏度高，重复性好，操作简便。

分子排阻色谱法测定玻璃酸钠相对分子质量及其分布

目的使用分子排阻色谱(SEC)法测定玻璃酸钠(SH)相对分子质量(Mr)及其分布。方法考察进样浓度、柱温及流速对SEC法测定SH的Mr及其分布的影响。结果进样浓度对高分子SH的色谱峰形及测定结果影响较大,降低进样浓度色谱峰形明显改善,且测定结果精密度良好;柱温对SH的Mr测定结果有一定的影响;流速对SH的Mr及其分布基本无影响。结论在SH进样浓度0.1 mg/mL,柱温30℃,流速0.5 mL/min的色谱条件下,用SEC法测定SH的Mr及其分布的色谱峰形良好,结果准确可靠,可用于SH的质量控制和应用研究。

高效分子排阻色谱法测定注射用盐酸头孢替安高分子杂质

目的建立高效分子排阻色谱(HPSEC)法测定注射用盐酸头孢替安高分子杂质。方法采用TSK-Gel2000SWXL凝胶色谱柱(7.8 mm×30 cm,5μm);流动相:0.1 mol·L^(-1)磷酸盐缓冲液[0.1 mol·L^(-1)磷酸氢二钠-0.1 mol·L^(-1)磷酸二氢钠(61∶39)];流速为0.7 m L·min-1;检测波长为254 nm;柱温为30℃;进样量为20μL,外标法定量。结果头孢替安的线性范围为5.0~25.0μg·m L^(-1);检测限与定量限分别为0.1和0.246μg·m L^(-1);实验RSD为0.50%(n=6);样品溶液室温放置不稳定。结论该方法分离效率高,专属性好,为注射用头孢替安高聚物进一步研究提供参考。

高效分子排阻色谱法分析头孢米诺钠

目的建立高效分子排阻色谱(HPSEC)法分析头孢米诺钠聚合物等杂质。方法采用高效凝胶色谱柱(TSKgel G2500PWXL 7.8mm×300mm);流动相为pH 7.0的0.005mol.L-1磷酸盐缓冲液[0.005mol.L-1磷酸氢二钠-0.005mol.L-1磷酸二氢钠(61∶39)];流速为0.5mL.min-1;检测波长为254nm;进样量为10μL。结果头孢米诺的线性范围为2.02～40.36μg.mL-1(r=0.9999);定量限为0.8ng;样品测定的线性范围为0.4～2.5mg.mL-1(r=0.9995)。结论该方法能够较好地分离头孢米诺钠和聚合物等杂质,简便快速、定量准确、重复性好,可用于头孢米诺钠中聚合物等杂质的检验。

分子排阻色谱法测定头孢氨苄聚合物

目的建立用分子排阻色谱法分析头孢氨苄聚合物的方法。方法色谱柱:Sephadex G-10色谱柱(15.0mm×300mm,40～120μm);流动相A:pH8.0的0.2mo1/L磷酸盐缓冲液[0.2mo1/L磷酸氢二钠溶液-0.2mo1/L磷酸二氢钠溶液(95:5)];流动相B:超纯水;检测波长:254nm;流速:1.5mL/min。以头孢拉定作对照加校正因子外标法定量(头孢氨苄:头孢拉定=1:1)。结果头孢氨苄聚合物在1～20μg/mL范围内呈良好的线形关系(r=0.9992)。结论方法简便易行,能较好的分离头孢氨苄与其聚合物,且精密度、准确度均能满足质量控制的要求。

高效分子排阻色谱法测定头孢硫脒聚合物含量

目的建立以凝胶色谱柱的分子筛机制为分离原理的高效分子排阻色谱法测定头孢硫脒聚合物含量。方法采用TSK-GELG2000S WXL柱（7.8mm×30cm,5μm）,以0.01mol·L^-1醋酸铵溶液∶乙腈（93∶7）为流动相,流速0.5mL·min^-1;检测波长254nm。结果头孢硫脒浓度在0.4-2.0mg·mL^-1范围内与聚合物的峰面积呈良好的线性关系（r=0.9989）。结论本方法简便快速,定量准确,重现性好,可用于头孢硫脒聚合物的含量测定。

高效分子排阻色谱法分析拉氧头孢钠中的聚合物等杂质

目的：建立高效分子排阻色谱法（HPSEC）分析拉氧头孢钠中的聚合物等杂质。方法：采用以球状蛋白色谱用亲水硅胶为填料的色谱柱Zenix SEC-150（7.8 mm×300 mm,3μm）;流动相为磷酸盐缓冲液（pH 7.0）[0.005 mol·L-1磷酸氢二钠溶液-0.005 mol·L-1磷酸二氢钠溶液（61∶39）]-乙腈（95∶5）;流速为0.8 ml·min-1;检测波长为254 nm;柱温为25℃;进样量为10μl。结果：拉氧头孢钠和聚合物等杂质能很好分离,拉氧头孢的线性范围为0.98~97.73μg·ml-1（r=0.999 9）;定量限为2.9 ng、检出限为1.0 ng;样品测定的线性范围为0.45~2.80 mg·ml-1（r=0.999 5）。结论：该方法简便快速、定量准确、重复性好,可用于拉氧头孢钠中聚合物等杂质的检验。