棕色绿僵菌最适培养基和杀蝇蛆分生孢子浓度探究

为了研究昆虫寄生性真菌—棕色绿僵菌(Metarhizium brunneum)的最适培养基和杀蝇蛆分生孢子浓度,试验对棕色绿僵菌在不同固体培养基、液体培养基、氯化钠浓度和pH值条件下的生长特征和产孢能力进行了测定,并分别统计不同浓度(1×10^(4)个/mL、1×10^(5)个/mL、1×10^(6)个/mL、1×10^(7)个/mL和1×10^(8)个/mL)分生孢子悬液处理后第3,5,7天的蝇蛆累计死亡率。结果表明:棕色绿僵菌在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上培养第21天时的菌落直径最大(8.40 cm),然后从大到小依次为PPDA固体培养基(8.20 cm)、沙氏葡萄糖琼脂培养基(8.10 cm)、枸橼酸固体培养基(7.20 cm)、大豆蛋白胨固体培养基(4.90 cm)、玉米粉琼脂培养基(4.70 cm);在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上培养第21天时的分生孢子产量最高(4.830×10^(7)个/mL),然后从高到低依次为PPDA固体培养基(3.070×10^(7)个/mL)、沙氏葡萄糖琼脂培养基(1.770×10^(7)个/mL)、枸橼酸固体培养基(1.580×10^(7)个/mL)、大豆蛋白胨固体培养基(0.260×10^(7)个/mL)、玉米粉琼脂培养基(0.053×10^(7)个/mL);在萨氏液体培养基中培养第7天时的菌丝干重最高(10.6 mg/mL),然后从高到低依次为马铃薯液体培养基(8.0 mg/mL)、沙氏葡萄糖液体培养基(7.1 mg/mL)、玉米浸液液体培养基(0.2 mg/mL);在萨氏液体培养基中培养第7天时的分生孢子产量最高(5.29×10^(7)个/mL),然后从高到低依次为马铃薯液体培养基(2.86×10^(7)个/mL)、沙氏葡萄糖液体培养基(2.71×10^(7)个/mL)、玉米浸液液体培养基(1.53×10^(7)个/mL)。棕色绿僵菌在氯化钠浓度为0.15 mol/L或pH值为8的马铃薯葡萄糖琼脂培养基上培养第21天时的菌落直径最大,分生孢子产量最高。用棕色绿僵菌分生孢子悬液(浓度分别为1×10^(4)个/mL、1×10^(5)个/mL、1×10^(6)个/mL、1×10^(7)个/mL和1×10^(8)个/mL)处理第3天,家蝇三期幼虫的累计死亡率为13.3%~40.0%;处理第5天,家蝇三期幼虫的累计死亡率为26.7%~66.7%;处理第7天,家蝇三期幼虫的累计死亡率为40.0%~90.0%。浓度为1×10^(6)个/mL、1×10^(7)个/mL和1×10^(8)个/mL的分生孢子悬液处理第7天时家蝇三期幼虫的累计死亡率显著高于浓度为1×10^(4)个/mL、1×10^(5)个/mL的分生孢子悬液(P<0.05),且浓度为1×10^(6)个/mL、1×10^(7)个/mL和1×10^(8)个/mL的分生孢子悬液处理第7天时家蝇三期幼虫的累计死亡率之间差异不显著(P>0.05)。说明棕色绿僵菌的最适培养基为马铃薯葡萄糖琼脂培养基和萨氏液体培养基,培养基最适氯化钠浓度为0.15 mol/L、pH值为8;棕色绿僵菌分生孢子悬液对蝇蛆有较强的侵染杀灭作用,推荐的杀蝇蛆浓度为1×10^(6)个/mL。

橡胶树白粉菌分生孢子DNA的微量提取方法建立

由橡胶树白粉菌(Erysiphe quercicola)引发的橡胶树白粉病是我国天然橡胶产业中的一个重要病害,其对乳胶产量造成了严重威胁。随着预测预报技术的不断进步,结合qPCR检测和孢子捕捉技术有望成为高效预测白粉病流行的新方法。本研究针对橡胶树白粉菌分生孢子DNA的微量提取,通过比较不同预处理方式、不同材质的研磨珠以及不同类型的研磨装置,筛选出了最适合的孢子样品研磨体系。进一步比较了CTAB法与几种商业提取试剂盒的提取效率,最终确定了一种可行的孢子DNA微量提取方法:将白粉菌分生孢子水溶液置于4℃超声处理10 min后加入2 mm氧化锆珠0.2 g、0.4~0.6 mm玻璃珠0.2 g以及0.2 mm氧化锆珠0.2 g,用组织研磨仪在4℃70 Hz条件下研磨40 s,停10 s,20个循环,最后使用CTAB法提取DNA。通过qPCR定量,可以在101个/mL的孢子悬浮液当中检出橡胶树白粉菌DNA,且不受田间复杂情况的干扰,具有高灵敏度和强特异性,为橡胶树白粉病的预测预报提供了可靠的理论依据和有效的技术手段。

曲霉菌分生孢子的休眠及萌发研究进展

综述了曲霉菌分生孢子休眠及萌发的生物学过程,解析了细胞内外生物分子对孢子休眠的维持作用及分子机制,基于细胞生物化学功能及形态学揭示了孢子萌发的变化规律,阐明了信号传导通路对孢子萌发的调控作用,为粮食霉变预防措施的探索及制定提供理论支持。

不同培养条件对尖孢镰刀菌苜蓿专化型分生孢子形成及萌发的影响

为明确有利于尖孢镰刀菌苜蓿专化型(Fusarium oxysporum f.sp.medicaginis,Fom)分生孢子形成及萌发的培养条件,本研究通过十字交叉法测量Fom菌株在马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)、合成低营养琼脂(SNA)和羧甲基纤维素钠(CMC)固体培养基培养不同时间的菌落直径,并通过镜检法和血球板计数法观测以上不同固体及其液体培养基(不加琼脂)培养不同时间的分生孢子产量、比例,以及不同液体培养基中菌株分生孢子萌发率。结果发现,CMC培养基上菌株生长最快(P<0.05)。PDA培养基培养分生孢子产量最高(P<0.05),固、液体培养基分别为(1.05×10^(6))~(7.63×10^(6))和(5.01×10^(6))~(9.49×10^(6))个·mL^(−1),且小分生孢子比例总体相对较高;CMC培养基上大型分生孢子比例最高(P<0.05),固、液体培养基上分别为0.85%~4.40%、2.32%~5.63%。PDA、SNA液体培养基培养分生孢子萌发率较高,且时间越长萌发率越高,培养48 h时分别可达35.98%、47.32%。由此可见,CMC固体培养基有利于Fom生长,其液体培养基诱导菌株大型分生孢子形成效果较好;PDA液体培养基有利于诱导分生孢子形成,尤其是小分生孢子;SNA液体培养基更利于分生孢子萌发。本研究为防治苜蓿镰刀菌根腐病及有关机理研究提供了前期基础。

葡萄灰霉病分生孢子扩散及气象流行因子研究

为了解陕西关中渭北台塬地区葡萄灰霉病的发病规律及流行因子,于2022年5月至10月在渭北地区3个县区葡萄园,采取孢子捕捉仪和气象设备监测病菌分生孢子的发生动态及气候因子,并调查田间葡萄病情指数。结果表明,葡萄灰霉病分生孢子扩散动态呈先升高后降低趋势,高峰期出现在8月25日前后,病情指数动态变化呈“逻辑斯蒂模型”,高峰期在9月27日左右;日平均温度和日平均湿度是影响葡萄灰霉病分生孢子扩散的主要气象因子,日平均温度25℃左右、相对湿度达90%~95%时,分生孢子密度最大。分生孢子扩散高峰早于病情指数高峰约一个月,表明可通过监测灰霉病分生孢子扩散动态与气象因子,预测葡萄灰霉病的田间发生,为病害预报和防控提供理论依据。

不同培养条件对草莓白粉病菌分生孢子萌发的影响

研究草莓白粉病病原菌分生孢子的适宜萌发条件,为草莓白粉病菌发生、病害防治提供参考。以活体保存的羽衣草单囊壳菌(Sphaerotheca aphanis)的分生孢子为试验材料,在室内进行不同pH值、碳源、温度、湿度、光照等处理,研究其对分生孢子萌发率和芽管长度的影响。结果表明:草莓白粉病菌分生孢子萌发和芽管伸长最适pH值为7;分生孢子萌发的适宜温度范围为20~30℃,最佳萌发温度为25℃,致死温度达到42℃以上10 min分生孢子停止萌发;连续24 h光照对孢子萌发有促进作用;2%葡萄糖处理环境下有助于孢子萌发及芽管伸长。综合分析表明,草莓白粉病菌分生孢子最适温度和致死温度分别为25℃和42℃10 min,喜中性、高湿环境,在葡萄糖、光照充足的环境下有利于草莓白粉病菌分生孢子萌发。该研究结果为防治草莓白粉病菌提供了理论基础。

六妹羊肚菌分生孢子室内产生条件

羊肚菌(Morchella spp.)成功实现大田栽培后,其栽培过程中产生大量分生孢子而形成菌霜。纯培养条件下羊肚菌分生孢子的产生及萌发成为研究重点。为实现羊肚菌分生孢子的室内获取,通过模拟六妹羊肚菌(M.sextelata)室外栽培条件,从培养容器、培养基组分、覆盖物种类、覆盖厚度及覆盖时间这5个方面研究六妹羊肚菌分生孢子产生的室内条件。结果显示:用六棱形玻璃罐头瓶(底径7.6 cm,口径6.6 cm,高9.8 cm,容积280 mL)为容器,以体积比1︰1的土壤(含水量20%)和PDA为培养基,接种六妹羊肚菌菌丝块20 d后,在菌落表面覆盖厚度为1.5 cm的无菌湿润河沙,可在室内获得分生孢子,每平方厘米分生孢子产量为(2.37±0.63)×10^(6)个。

丝状真菌分生孢子及其核型相关基因的研究进展

分生孢子是曲霉、青霉等丝状真菌无性繁殖的主要生殖细胞,分生孢子的核型具有多样性,其多核特性对丝状真菌的生长发育、遗传调控产生诸多影响。分生孢子的形成及其核型变化受到多种基因的调控。通过对丝状真菌分生孢子发育过程及其核型变化调控相关基因的功能进行归纳综述,为更好地利用丝状真菌资源,开展相关物种的遗传操作提供理论基础。

橡胶树白粉菌分生孢子萌发条件及存活时间的研究

对橡胶树白粉菌分生孢子在不同温度、pH值、光照、湿度和碳源条件下的萌发率进行了研究.结果表明,分生孢子萌发的适宜温度范围为23～28℃,最适温度25℃;适宜的pH范围为6～8;在连续黑暗的条件下分生孢子萌发率最高;不同的湿度对分生孢子的萌发的影响无明显差异;分生孢子在麦芽糖中萌发率最低.在保湿和自然条件下,测定白粉菌分生孢子在4、10、20、23、28℃存活时间,结果表明,保湿条件下白粉菌孢子存活时间较自然条件下长,温度对孢子存活时间有很大影响,4℃下白粉菌分生孢子9d后还有存活的孢子,而28℃下白粉菌分生孢子6d后就全部死亡.

绿色木霉L24菌株分生孢子可湿性粉剂的研制

以绿色木霉L24菌株分生孢子(孢子数量为4.03×1011个/g)为有效成分,利用正交设计筛选木霉分生孢子可湿性粉剂配方,并对其生物活性进行田间验证。通过助剂种类和含量的筛选,得到30%木霉分生孢子可湿性粉剂,其组成成分及各自质量分数为:木霉分生孢子粉30%、萘磺酸钠甲醛缩合物7%、十二烷基硫酸钠3%、木质素磺酸钠5%、拉开粉2%、硅藻土53%。植物生长试验表明,该制剂800倍稀释液对2种白菜品种有很好的促生作用;田间药效试验表明,绿色木霉L24菌株制剂对玉米纹枯病和玉米褐斑病有较好的防治效果,300倍稀释液防治效果分别为52.88%和56.28%。

马铃薯早疫病菌分生孢子萌发条件的研究

为了明确马铃薯早疫病菌分生孢子萌发的条件，研究了温度、湿度、pH、光照、营养条件等对马铃薯早疫病菌分生孢子萌发的影响。结果表明，分生孢子在水滴中于30℃1h即可萌发，8h后达到萌发高峰，萌发率为98．4％；萌发的最适温度为30℃；相对湿度85％以上均可萌发，水滴中萌发率最高；pH6-10的条件利于分生孢子萌发；紫外线对分生孢子萌发有抑制作用；无机氮源中的铵态氮和尿素对孢子萌发有抑制作用，有机氮源中半胱氨酸和谷氨酸对孢子萌发有抑制作用；山梨糖不利于分生孢子萌发；光照对分生孢子萌发也有抑制作用；分生孢子致死温度是57℃。

纯培养下拟茎点霉分生孢子的形成及意义

以18种共23个拟茎点霉菌株为材料,比较了在25℃、12h光照(40w日光灯)/d条件下不同培养基上甲、乙型分生孢子的形成情况。结果表明,苜蓿煎汁+Czapek培养基能促使多数拟茎点霉菌株形成甲、乙两型分生孢子,其形态及大小也与自然寄主上的相一致。根据纯培养获得的形态特征对原始描述缺乙型分生孢子特征记载的Phomopsis durionis, homopsis sterculicola, Phomopsis macadamii, Phomopsis lucumicola和Phomopsis tinea进行了补充描述。

环境条件对棉花轮纹斑病菌分生孢子萌发的影响

为了明确影响棉花轮纹斑病发生和流行的因素,对棉花轮纹斑病菌分生孢子萌发的营养条件、光照、温度、湿度等条件进行了研究。结果表明:病菌分生孢子在不同营养条件下萌发率存在显著差异,在SDAY培养液中萌发速度快,萌发率最高;光照对病原分生孢子萌发有显著影响,黑暗处理更有利于分生孢子萌发;分生孢子萌发对温湿度的要求较高,孢子萌发的适宜温度为30℃;空气相对湿度越高分生孢子萌发率越高,在水滴中萌发最好;不同棉花品种叶片研磨液对分生孢子的萌发有显著影响,宁4-14、垦62的叶片研磨液更利于分生孢子萌发。

不同培养基对芒果炭疽病菌分生孢子形成的影响

从广西壮族自治区及海南省芒果树上分离了６个芒果炭疽病菌株，用１０个不同培养基在暗中２６℃下进行培养试验，结果表明，酵母膏培养基对芒果炭疽菌的分生孢子形成具有显著的促进效果。在测试浓度范围内，供试菌株的产孢量基本与酵母膏的含量呈正相关。促进该菌产孢的最适酵母膏浓度为８～１０ｇ／１０００ｍｌ。芒果树嫩叶培养基比成叶对芒果炭疽病菌的分生孢子形成有利。

利用稻瘟霉分生孢子筛选有生物活性的菌株

从广西、贵州等地土壤中分出４１７株真菌．以稻瘟霉分生孢子及菌丝生长异常或抑制为指标，从４１７株真菌中初筛出７４株活性菌株．经多次反复筛选从中得到１３株活性较好且稳定的菌株．其中７株能引起稻种幼根肥大，但不抑制细菌生长．对其中变形活性最好的３８号菌株进行紫外照射诱变处理，使活性由 ６３ μｌ·ｍＬ－１提高到１６ μｌ·ｍＬ－１，其遗传稳定性和热稳定性良好．对其中抑制活性最好的１９０１和 ７４号菌株进行抗真菌实验也显示了较好的活性．

稻曲病菌生长及其分生孢子萌发特性

研究了不同培养基、温度、pH对稻曲病菌生长及其分生孢子萌发的影响.结果表明,PSA适合病菌生长.该菌菌丝生长和分生孢子萌发的温度范围均为15-30℃,最适温度均为28℃;pH 4-11适合其生长和萌发,最适pH均为6.病菌在PSB培养液中培养13 d的菌丝干重最大(16.48 mg.mL-1),培养9 d的分生孢子数量最高(4.19×106个.mL-1).然而,随培养时间的延长,培养液中的菌丝干重、孢子数量和pH明显下降,培养液能抑制水稻种子发芽.在15-33℃和13-23℃自然变温条件下培养48 h分生孢子萌发率分别达81.79%和44.20%,而4℃存放168 h后能使分生孢子在28℃条件下48 h的萌发率下降43.38%,40℃存放6 h后未见分生孢子萌发.水稻品种两优培九、汕优63和甬优6号的孕穗期及灌浆初期的2%稻穗匀浆液对分生孢子萌发有促进作用,培养24 h后分生孢子萌发率均达94%以上,显著高于在PSA、2%蔗糖和2%葡萄糖的固体培养基上的萌发率.

利用稻瘟霉分生孢子跟踪分离面包海星中的海星皂苷活性成分

目的研究面包海星中的海星皂苷活性成分。方法以稻瘟霉模型进行活性监测,采用多种层析手段和波谱技术对海星皂苷活性成分跟踪分离并鉴定其结构。结果分离获得14个海星皂苷,鉴定了其中12个结构(1～12),包括7个新的海星皂苷(6～12)。其中大多对稻瘟霉显示活性且对K562和BEL7402肿瘤细胞株显示显著或中等强度的细胞毒性,2个皂苷有溶血作用。结论利用稻瘟霉模型对海星皂苷活性成分进行跟踪分离是可行的,该研究也为进一步开发抗肿瘤新药提供了有价值的先导化合物和科学依据。

环境因子对杨梅凋萎病菌分生孢子萌发及侵染的影响

【目的】开发有效的预测预报和防控技术,以控制凋萎病对杨梅的危害。【方法】研究不同温度、相对湿度及营养溶液对凋萎病菌2个菌株的分生孢子培养2、4、6、12和24 h后萌发的影响,以及不同温度和相对湿度对2个凋萎病菌菌株分生孢子侵染杨梅后5、7、9、11、13和15 d后的影响。【结果】温度和相对湿度对凋萎病菌2个菌株的分生孢子萌发和侵染都有着显著性的影响。20~30℃和25~35℃分别最适合分生孢子萌发和侵染,相对湿度等于或者高于60%时分生孢子培养48 h萌发率接近或者超过50%,最适合侵染的相对湿度是60%~80%。2个菌株的分生孢子在水里都能萌发,但是萌发率较低,0.1%(w)浓度的葡萄糖、马铃薯煎汁、蔗糖、硝酸钾、磷酸二氢钾内分生孢子都能较好地萌发。【结论】杨梅凋萎病菌能够在大范围的温度和相对湿度条件下完成萌发和侵染,并且分生孢子可以利用多种营养萌发。

生长季苹果园冠层空气中斑点落叶病分生孢子飞散动态

通过对生长季苹果园冠层空气中苹果斑点落叶病菌分生孢子逐日和逐小时的捕捉 ,同时记载空气温度、相对湿度和降雨等气象数据 ,分析发现 ,6至 7月份为整个生长季中孢子飞散的高峰期 ,影响孢子飞散的主要气象要素为降雨和风。一天中孢子飞散的动态是昼多夜少 ,9:0 0 - 2 2 :0 0孢子飞散量占全天的87 2 % ,孢子飞散的最高峰为 15 :0 0 - 16 :0 0 ,各小时孢子飞散与相对湿度呈显著负相关 ,而与温度呈显著正相关。

木霉分生孢子和厚垣孢子对黄瓜叶片抗氧化系统及枯萎病防效的影响

采用前期筛选出的对黄瓜枯萎病菌有较好拮抗作用的3株木霉菌,即哈茨木霉菌(Trichoderma harzianum)809、拟康氏木霉菌(Trichoderma pseudokoningii)886和棘孢木霉菌(Trichoderma asperellum)525,利用盆栽试验,测定了木霉菌分生孢子和厚垣孢子对黄瓜幼苗抗氧化能力及对枯萎病防效的影响。结果显示:3株木霉菌分生孢子和厚垣孢子对黄瓜枯萎病的盆栽防效均在66.81%以上,且以拟康氏木霉菌886厚垣孢子防效最高,达到81.46%;当黄瓜幼苗长至三叶一心时,与CK(即只接种病原菌)相比,经哈茨木霉菌809、拟康氏木霉菌886、棘孢木霉菌525分生孢子以及厚垣孢子处理后,黄瓜幼苗叶片相对电导率和丙二醛(MDA)含量均呈下降趋势,而保护性酶包括过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、超氧化物歧化酶(SOD)活性则呈上升趋势,其中以拟康氏木霉菌886厚垣孢子的变化幅度最显著;拟康氏木霉菌886厚垣孢子处理的黄瓜幼苗叶片相对电导率、MDA含量分别比CK下降了47.74%、41.40%;而叶片中的POD、CAT、APX、SOD活性则分别比CK增加了318.11%、155.36%、157.09%和300.34%。研究表明3株木霉菌分生孢子和厚垣孢子均能通过改善黄瓜幼苗叶片抗氧化能力,增加保护酶活性,提高了对黄瓜枯萎病的防治效果。