优化法结合制备型高效液相色谱分离纯化虾青素

以雨生红球藻中的虾青素为研究对象,研究其虾青素的皂化工艺条件,通过单因素试验和响应面优化法进行NaOH-甲醇溶液皂化工艺优化,并通过制备型高效液相色谱纯化。最终得出的最佳工艺条件为皂化时间12 h、皂化温度32℃、NaOH-甲醇溶液浓度2.5%,在此条件下测得虾青素含量为(19.423±0.186)μg/mL。进一步通过制备型高效液相色谱对皂化得到的虾青素纯化处理,经液相色谱测定虾青素的纯度达94%以上,利用红外光谱和核磁共振对其纯化产物进行定性分析,通过图谱分析发现制备得到的虾青素与标准品虾青素图谱基本一致。

高速逆流色谱结合制备型高效液相色谱法分离制备大豆皂苷单体

为建立一种有效的同时分离制备多种大豆皂苷单体的方法,先采用高速逆流色谱分离去除大豆皂苷粗提物中的大豆异黄酮,然后对得到大豆总皂苷,优化制备型高效液相的流动相酸(乙酸或三氟乙酸)的含量和梯度洗脱程序,以制备高纯度的大豆皂苷单体。结果表明:流速10mL/min,流动相乙腈(含0.01%三氟乙酸)-水按梯度程序Ⅲ洗脱,出峰数量多、峰形好、分离度高。经高效液相分析与光谱特性、质谱和核磁共振鉴定了11个峰的大豆皂苷种类,包括5种A组、2种B组以及3种2,3-2H-2,5-二羟基-6-甲基-4H-吡喃-4-(DDMP)大豆皂苷。研究结果提供了从含量相对丰富的大豆胚芽中大量分离制备部分或完全乙酰化的A组以及非DDMP和完整DDMP存在的B组大豆皂苷的有效方法。

制备型高效液相色谱在天然产物分离中的应用

制备型高效液相色谱法在天然产物的分离纯化中得到广泛应用。从制备型高效液相色谱法的技术分类及其在天然产物研究中的实际应用方面对目前国内外制备型高效液相色谱技术研究现状进行了综述,对其发展动态进行了展望。

制备型高效液相色谱法纯化紫丁香苷的研究

救必应药材经粉碎过筛后用50%乙醇超声提取,再以大孔吸附树脂XDA-1分离富集获得紫丁香苷粗提物,然后用制备型高效液相色谱法:采用Welchrom C18(4.6 mm×250 mm,10μm)色谱柱,优化条件,获得DACHB50(50 mm×1000 mm)制备色谱柱初始色谱条件;再以Chromatorex C18(10μm,300 g)为制备色谱柱填料,优化条件探索最佳进样量,并制备获得目标化合物。通过薄层色谱法和分析型高效液相色谱法对该化合物进行定性和定量分析,结果表明所得化合物的纯度为98.6%。以X-单晶衍射方法测定该化合物的分子结构信息,并解析数据,进一步确定该化合物是紫丁香苷。

大孔吸附树脂结合半制备型高效液相色谱分离纯化栝楼果皮中的水溶性化学成分(英文)

本文使用大孔吸附树脂结合半制备型高效液相色谱,对栝楼果皮中的水溶性化学成分进行了分离纯化。栝楼果皮水溶性粗提物经大孔吸附树脂粗分为4个部分,每一部分分别使用半制备型高效液相色谱进一步纯化,最终得到3种核苷酸及6种碱基,其化学结构经紫外光谱及核磁共振鉴定为:胞嘧啶、尿嘧啶、次黄嘌呤、鸟嘌呤、黄嘌呤、腺嘌呤、鸟苷、6-异次黄嘌呤核苷及腺苷。本文对于栝楼果皮中水溶性化学成分进行了较为系统的研究,建立起来的分离纯化方法具有简单、快速、经济和易于放大的优点,适合于天然产物中强极性活性成分的大规模制备。

草豆蔻有效成分的半制备型高效液相色谱分离

[目的]建立从草豆蔻中分离纯化4种主要有效成分半制备型高效液相色谱法。[方法]使用C18柱(250 mm×25.4 mm I.D.,10μm),考察了流动相的组成、流速和上样量对分离效果的影响,确定适宜的色谱条件;按制备型色谱条件进行洗脱,根据检测信号在线收集产品流出液,分离所得的馏分经HPLC法进行纯度检测。[结果]适宜的色谱条件是:流动相为甲醇-水梯度洗脱,流速为25 m L/min,上样量为232 mg,检测波长为300 nm。经过一次分离即可得到4种成分,经紫外光谱和核磁共振波谱鉴定4种成分分别为山姜素、松属素、小豆蔻明和桤木酮,经高效液相色谱检测纯度分别为98.7%、99.3%、98.4%和99.1%。[结论]与传统的分离方法相比,该方法具有高效、简便、快速的特点,适用于草豆蔻中主要有效成分的快速制备。

制备型高效液相色谱法从秦艽中分离制备龙胆苦苷

利用制备高效液相色谱技术，从麻花秦艽根提取物中分离纯化得到高纯有效成分龙胆苦苷。对制备色谱的流动相组成，流速，进样量和检测波长等制备参数进行了优化，采用的制备色谱柱为Shim-pack PREP—ODS（K）（30mm×25cm，15／μm）；流动相为甲醇一水（V：V=1：2），流速为20mL／min；检测波长：270nm；进样体积为3mL，进样量为30mg。在20min的运行时间内，龙胆苦苷与其他成分得到很好的分离，产品纯度达98．2％。此方法简单快捷，可用于制备高纯度的龙胆苦苷。

制备型高效液相色谱的实验方法

制备型高效液相色谱已广泛应用于医药、精细化工、食品等行业,特别适用于分离高附加值、高纯度的产品。通过制备型高效液相色谱分离生育酚各组分的教学实践,探讨了制备型高效液相色谱实验教学内容的设置,以及通过实验教学提高学生独立分析和解决问题能力的方法,强化了学生的应用能力。

制备型高效液相色谱法在海洋生物分离中的应用

以海洋生物氨基酸L-色氨酸和L-赖氨酸为载体,探讨了影响制备型液相色谱制备分离效果的因素。结果表明,在满足分离条件和制备量要求的前提下,当进样量较小时,可以用提高进样浓度的方法来提高制备量;当进样量较大时,可以用加大进样体积的方法来提高制备量。

制备型高效液相色谱技术的研究进展

制备型高效液相色谱是一种快速,有效的分析分离工具。本文介绍了制备型高效液相色谱基础理论及基本装置,介绍了样品的预处理和应用实例,分析了目前制备型高效液相色谱技术存在的问题并对该技术未来的发展进行了展望。

制备型高效液相色谱在生物医药制品领域的应用

制备型高效液相色谱(preparative high performance liquid chromatography,Prep-HPLC)是一种使用高压、大流量液体输送系统在高分辨率、大内径、高载量分离柱上进行样品高纯度分离的液相色谱制备方法.应用该方法分离的产品在纯度、回收率、分离效率等方面远远优于传统的制备方法,因此在生物制品和药物研究、生产领域得到广泛应用[1-3].本文就近年来Prep-HPLC方法的研究进展及其在生物医药制品领域的应用做一综述.……

制备型高效液相色谱系统在天然发酵辅酶Q_(10)及其杂质分离中的应用

建立了制备型高效液相色谱——UC紫外—可见检测器制备天然发酵辅酶Q10及分离样品中主杂质的色谱方法,认为该法具有快速高效、分离度高的特点,可用于天然辅酶Q10的大量制备提取。

半制备型高效液相色谱结合气相色谱-质谱联用法分析卷烟烟气中性香味成分

采用半制备型高效液相色谱结合气相色谱-质谱联用法对卷烟烟气中性香味成分了进行分析。用剑桥滤片捕集卷烟主流烟气粒相物,用同时蒸馏萃取法提取并分离得到中性香味成分。通过对半制备高效液相色谱分离条件和制备馏分体积进行优化,使复杂的烟气中性成分得到预分离,制备出组成相对简单的12个馏分,然后用气相色谱-质谱联用法分析鉴定其中香味成分。结果表明:从各馏分的总离子流色谱图中共鉴定出319种中性成分,其中烃类48种,醛类29种,酮类134种,酯类21种,醇类28种,含氧杂环类18种,含氮化合物32种,酚类7种,醚类2种。方法适合于复杂的烟气中性成分的分析研究。

制备型高效液相色谱快速分离罗布麻花的黄酮类成分

采用从分析梯度模式到制备梯度模式直接放大的制备纯化策略来分离罗布麻花中的黄酮类成分.运用此方法,一步制备得到9个纯化合物.基于1D、2D NMR和LC-ESIMS联用数据,9个黄酮类化合物结构得到确定.

应用制备高效液相色谱同时制备6种大豆异黄酮单体的方法研究

经大孔吸附树脂纯化大豆异黄酮粗提物后,以制备型高效液相色谱法(PHPLC)分离得到高纯度的大豆异黄酮单体。以SHIM-pack PRC-ODS(20 mm×250 mm,5μm)制备柱,考察了流动相组成及流速、进样量对分离度的影响,确定了最佳色谱条件为乙腈-水流动相梯度洗脱,进样量800μL,流速10 mL/min,在120 min内实现了6种异黄酮单体的基线分离及制备。经超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)鉴定,6种异黄酮单体依次为大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆素、黄豆黄素、染料木素。6种产品的纯度分别为95.54%、90.14%、100%、100%、96.27%、100%。方法具有简便易行、稳定性好、产品纯度高等特点,适用于大豆异黄酮标准品的制备。

人参皂甙R_e R_(g1)标准对照品的高效液相色谱制备研究

目的 研究制备分离纯化高纯度人参皂甙Re、Rg1(GinsenosideRe、Rg1)标准对照品的高效液相色谱(HPLC)方法 ,为人参类保健食品及中草药中人参皂甙Re、Rg1的标准化定量分析方法提供标准对照品。 方法 人参总皂甙制成甲醇溶液 ;干法上柱 ,低压硅胶柱层析 ;步分离 ;真空浓缩 ;HPLC分离制备 ;真空浓缩结晶 ;纯度检测 ;产品。 结果 该法所得产品纯度大于 99% (HPLC) ,制备收得率大于 80 %。 结论 方法简便 ,生产周期短 ,产品质量高 。

高速逆流色谱结合半制备型液相色谱分离茶树紫芽花色苷研究

花色苷是植物中一类具有重要生物活性的次生代谢产物,因其含量较低,使得分离制备花色苷高纯品难度较大。本研究以茶树紫芽为实验材料,以花色苷得率与纯度为考察指标,优化筛选了应用高速逆流色谱结合半制备型液相色谱分离纯化花色苷高纯度的方法。结果表明,茶样经提取、脱脂、阳离子交换树脂分离等前处理后,总花色苷得率28.18 mg/g,纯度为20.38%;以高速逆流色谱分离的最优溶剂体系乙酸乙酯∶正丁醇∶乙腈∶0.1%三氟乙酸水溶液=8∶35∶13∶60(v/v/v/v),除去部分杂质后,总花色苷得率达到160.59 mg/g,纯度为43.64%,再结合半制备型液相色谱分离出5种花色苷组分,纯度最高达90.61%,其优化色谱条件为C18制备柱、波长280 nm、柱温30℃、流动相1%醋酸水溶液(A)-乙腈(B)、流速5 mL/min、进样量1 mL、梯度洗脱(0~55 min,10%~40%B)。研究表明高速逆流色谱结合半制备型液相色谱可有效地分离纯化茶树紫芽花色苷及其组分。

高效液相色谱法制备菊苣酸标准对照品的研究

目的 研究制备分离纯化高纯度菊苣 (cichoric acid)标准对照品的高效液相色谱 (HPL C)方法 ,为该类保健食品及中草药中菊苣酸的标准化定量分析方法提供标准对照品。 方法 原料制成水溶液→静态模分离→醇沉→HPL C分离制备→真空浓缩结晶→纯度检测→产品。 结果 该法所得产品纯度大于 99% ,制备收得率大于 80 %。 结论 方法简便 ,生产周期短 ,产品质量高 ,产品完全可应用作为分析方法的标准对照品。

曲克芦丁对照品的制备液相色谱法分离

采用C18柱,水-乙腈(83∶17) 为流动相,利用制备型HPLC对曲克芦丁原料进行分离纯化制得曲克芦丁对照品。经HPLC检查,纯度达99%以上。用紫外、红外、质谱及核磁共振法确证结构。

超高分辨质谱-高速逆流色谱-半制备液相色谱联用快速测定分析红三叶草中环氧合酶-2抑制剂

利用超高效液相-质谱联用技术(UPLC-MS)对红三叶草乙醇提取物中化学成分进行分析鉴定,以环氧合酶-2作为生物靶分子,运用超滤质谱技术以"受体-配体"亲和及超滤法作为分析方法筛选具有酶抑制,共鉴定出7个活性化学成分,分别为大豆苷、芒柄花苷、大豆苷元、印度黄檀苷、芒柄花素、德鸢尾素、鹰嘴豆芽素A。利用半制备型高效液相色谱(Semi-preparative HPLC)和高速逆流色谱(High-speed counter-current chromatography,HSCCC)技术对环氧合酶-2抑制剂进行分离和纯化,7种成分纯化至>80%,其中6种成分>92%。结果表明采用超滤质谱-半制备液相色谱-高速逆流色谱联用技术可以快速鉴定、筛选和纯化红三叶草中环氧合酶-2抑制剂。为天然药物的开发提供了理论基础和技术平台,可推广应用于其他酶抑制剂的鉴定和分离。