中药炮制学“制霜法”概念及英文翻译探析

目的梳理中药炮制学中制霜法的定义以及英文翻译词,探讨其概念范围和英文翻译词的准确性。方法汇总分析包括中药炮制学教材在内的权威文献中制霜法的概念定义,及其英文翻译词。结果关于制霜法的定义、概念范围及英文翻译在不同文献中存在较大差异,易造成偏颇和混淆。结论制霜法应包括传统的去油制霜、渗析制霜、升华制霜、煎煮制霜4种,难以用单一英文词汇对应“制霜法”一词,根据中文“霜”字的含义和制霜法的中药炮制品性状,可将制霜法翻译为method of making frostlike powder。

千金子制霜前后提取物对正常及癌性腹水模型小鼠泻下逐水效应与毒性研究

目的:筛选千金子泻下逐水药效部位,探究其制霜前后泻下逐水效应及结肠、肾脏毒性的变化。方法:采用H22癌性腹水模型小鼠,以腹水量、粪便含水量、尿量等生物效应指标筛选千金子药效部位;采用H22癌性腹水模型小鼠,灌胃千金子生品、霜品石油醚部位,结合生物效应指标、脏器指数、肾脏功能指标、氧化应激指标、炎症因子含量及水通道蛋白表达考察千金子的泻下逐水效应;采用正常小鼠,以脏器指数、肾脏功能指标、氧化应激指标、炎症因子含量考察千金子制霜前后的毒性差异。结果:千金子制霜前后石油醚部位能够提高癌性腹水模型小鼠粪便含水量、尿量,降低小鼠腹水量(P<0.05,P<0.01),非石油醚部位无显著作用。药效实验结果显示,与模型组比较,各给药组小鼠组织损伤显著减轻,在灌胃石油醚部位后小鼠血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)含量降低,总超氧化物歧化酶(SOD)含量升高,丙二醛(MDA)含量下降,结肠、肾脏组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的含量显著降低,且能抑制结肠、肾脏组织中水通道蛋白1(AQP1)和水通道蛋白3(AQP3)蛋白表达水平。毒性结果显示,与对照组比较,各正常给药组小鼠给药后可见不同程度的结肠、肾脏组织损伤,TNF-α、IL-1β分泌增加,肾功能指标呈上升趋势,SOD含量显著降低,MDA含量显著升高,制霜后该损伤降低。结论:石油醚部位是千金子制霜前后泻下逐水的药效部位,千金子制霜后毒性显著降低的同时,其泻下逐水功效得以保留,表现为减毒存效。

木鳖子制霜炮制前后齐墩果酸含量的比较

目的:比较制霜炮制前后木鳖子中齐墩果酸含量。方法:高效液相色谱法。结果:制霜炮制后木鳖子中齐墩果酸含量为0.528 mg/g。高于生品0.247 mg/g。结论:制霜炮制提高了木鳖子中齐墩果酸的含量。

木鳖子制霜前后脂肪油含量的比较

目的比较木鳖子制霜前后脂肪油含量的不同。方法以乙醚为溶剂,索氏提取法测定脂肪油含量。结果木鳖子生品中脂肪油含量为40%以上,木鳖子霜脂肪油含量18%左右。结论木鳖子制霜后脂肪油含量降低,可以为脂肪油含量建立质量标准。

千金子制霜新工艺的研究

目的:优选千金子最佳制霜工艺。方法:利用新研制的制霜设备,采用正交试验法,选择种仁前处理方式、加热温度和加热时间为三个因素,以千金子霜含油量及主要泻下成分续随二萜酯和千金二萜醇二乙酸苯甲酸酯含量为指标,综合评价其制霜工艺。结果:千金子最佳制霜工艺为:种仁微炒后粉碎成泥状(粒度为40～60目),于55℃加热30min,出油率控制在51%～53%(g/g),出霜率控制在45%～47%。结论:加热温度对千金子霜含油量及主要泻下成分含量有显著影响,种仁前处理方式和加热时间对千金子霜含油量及主要泻下成分影响不明显。

柏子仁制霜工艺优化及脂肪油测定

目的优化柏子仁制霜工艺,并测定脂肪油含量。方法以总皂苷、脂肪油含量为评价指标,炮制温度、炮制压力、炮制次数、炮制时间为影响因素,正交试验优化炮制工艺。气相色谱法测定炮制前后脂肪油含量变化。结果最佳条件为在40℃、120 kPa压力下炮制3次,每次60 min,总皂苷、脂肪油含量分别为0.32%、13.6%。炮制前后,脂肪油含量无明显变化。结论该方法稳定可行,重复性好,可用于柏子仁制霜工艺。

巴豆制霜的质量研究

测定了7种巴豆霜的均匀度、粒度及其含油量。从药剂学角度分析了巴豆制霜的意义,提出了巴豆霜的粒度应达到通过药典规定的6号筛的细粉要求。

千金子去油制霜的研究

千金子去油制霜的研究龚千锋（江西中医学院药学系３３０００６）廖有妮（江西省新余市中医院３３６５２５）关键词千金子，去油制霜，含量测定千金子性温味辛．有毒，具有逐水消肿．破血消症的功效，临床于水肿．痰饮，积滞胀满．二便不通。血瘀经闭．顽癣。疣赘。本品峻...

去油制霜炮制程度对美洲大蠊防治CCl_4致肝损伤作用的影响

目的：研究去油制霜后油脂含量不同对美洲大蠊防治CCl4致小鼠急性肝损伤作用的影响,探索具有防治肝损伤疗效的美洲大蠊霜的油脂含量范围。方法：通过相应方法制备试验样品,采用重量法测定各样品油脂含量;经CCl4致小鼠急性肝损伤模型考察油脂含量对其防治肝损伤药理作用的影响。结果：制得美洲大蠊原粉、3批不同含油量美洲大蠊霜及去油美洲大蠊5个样品,测得油脂含量依次分别为39.0%、31.9%、23.7%、15.0%和0.5%。与模型组比较,油脂含量为15.0%、23.7%的美洲大蠊霜组可减轻CCl4引起的急性小鼠肝损伤,油脂组、去油粉末组、含油量为31.9%的美洲大蠊霜组及原粉末组均未表现出防治作用反而会加重肝损伤。结论：油脂含量对美洲大蠊防治CCl4致肝损伤的药理作用有显著影响。提示对于肝损伤患者或其他疾病伴随肝损伤患者,如需以美洲大蠊全虫入药,则必需通过去油制霜炮制除去部分油脂,使其油脂含量控制在适宜范围内。为保证用药安全有效,根据试验结果暂将油脂含量范围定于15.0%~23.7%。

去油制霜对美洲大蠊减毒增效的影响

目的研究去油制霜对美洲大蠊减毒增效的影响。方法美洲大蠊原粉和炮制品的95%乙醇提取物用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水萃取,TLC法比较各部位成分变化,GC-MS法分析炮制前后脂溶性成分种类及含有量,摇瓶法结合紫外分光光度法测定小分子多肽在正辛醇-水及不同pH(2.23、3.28、4.22、5.23、6.12、7.24、8.23、9.10、10.15、纯水)缓冲液中的Papp。结果石油醚部位炮制后,TLC斑点颜色明显变浅,并随着炮制时间延长和压力增大,其变化更为显著;正丁醇、水部位TLC斑点清晰,无明显变化;乙酸乙酯部位无TLC斑点。脂溶性成分的种类在炮制前后相同,但炮制后其绝对含有量均有所降低。与原粉比较,各炮制品中小分子多肽Papp在不同pH下均有显著差异(P<0.05,P<0.01),在同一pH下也有一定差异。结论去油制霜可影响美洲大蠊脂溶性成分含有量及小分子多肽Papp,可能是其减毒增效的机制。

千金子制霜前后提取物对人胚肾细胞HEK293的体外毒性作用

目的:比较千金子制霜前后提取物对正常人胚肾细胞HEK293的影响,探究千金子制霜减毒的作用机制。方法:采用HEK293细胞为体外模型,随机分为对照组,千金子生品低、中、高质量浓度(100、200、400μg·mL^(-1))组和千金子霜品低、中、高质量浓度(100、200、400μg·mL^(-1))组。细胞体外培养后,分别给予等体积的无血清培养液和千金子生品、霜品提取物溶液,各组均设置3个复孔。采用CCK-8法评价细胞存活率,利用倒置显微镜观察细胞数量及形态变化;碘化丙啶(PI)染色法和AnnexinV-FITC/PI双重染色法检测细胞周期和凋亡情况;试剂盒法检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽(GSH)、肌酐(Cr)和细胞裂解液中尿素氮(BUN)水平。结果:与对照组比较,千金子生品各质量浓度组HEK293细胞存活率降低,细胞形态异常,细胞数量减少,G_(0)/G_(1) 、 G_(1)/G_(2)期细胞比例明显降低,S期细胞比例明显增加,细胞凋亡率升高(P<0.01),LDH、BUN、Cr水平升高(P<0.05,P<0.01),GSH水平降低(P<0.01);与千金子生品组比较,千金子霜品相应质量浓度可显著增加HEK293细胞存活率(P<0.01),改善细胞形态,增加G_(0)/G_(1) 期、 G_(1)/G_(2)期细胞比例,降低S期细胞比例,同时能明显降低LDH、BUN、Cr水平(P<0.05,P<0.01),提高GSH水平(P<0.01)。结论:千金子制霜后可能通过减轻细胞周期阻滞和细胞氧化损伤改善肾细胞功能、减少细胞凋亡,从而降低体外肾毒性。

基于网络药理学探讨巴豆制霜的作用机制

目的:运用网络药理学方法探讨巴豆制霜增效减毒的机制。方法:通过中医药整合药理学研究平台V2.0获取并筛选巴豆、巴豆霜的成分和靶点,采用admetSAR-2.0获取巴豆主要成分的药动学和毒理学参数。将巴豆、巴豆霜共有靶点和巴豆特有靶点通过STRING 11.0数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用网络,采用DAVID进行京都基因与基因组百科全书通路富集分析,利用Cytoscape 3.8.0构建成分-靶点-通路网络,并进行网络拓扑分析。结果:经分析得到巴豆、巴豆霜共有成分6个和靶点202个,巴豆特有成分31个和靶点107个。巴豆、巴豆霜共有成分均能透过血脑屏障并被人体小肠吸收。巴豆发挥药效涉及尼古丁成瘾、GABA能突触和Rap1信号通路等通路。巴豆表现毒性涉及脂肪酸代谢通路、PPAR信号通路等。巴豆制霜机制可能与苯丙胺成瘾和长时程增强等神经系统通路相关。结论:巴豆制霜具有增效减毒作用,与多个靶点和通路相关,探讨靶点和通路有助于阐释巴豆制霜机制。

制霜对千金子总蛋白结构及肠道毒性的影响

目的 研究制霜对千金子Euphorbiae Semen总蛋白结构及肠道毒性的影响。方法 采用凝胶电泳、紫外光谱、红外光谱、圆二光谱、荧光光谱等研究千金子总蛋白经模拟制霜前后蛋白结构的变化;通过MTT、ELISA、Western blotting法研究千金子总蛋白经模拟制霜前后对IEC-6细胞存活率、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和IL-10含量、闭合蛋白(occludin)和紧密连接蛋白-1(claudin-1)蛋白表达的影响;利用HE染色、Western blotting法探讨千金子总蛋白经模拟制霜前后对小鼠结肠组织病理形态及occludin、claudin-1蛋白表达的影响。结果 千金子总蛋白经模拟制霜后总蛋白变性、溶解度降低(P<0.01),其相对分子质量分布发生改变;280 nm处的紫外特征吸收峰强度降低;荧光强度降低,最大荧光吸收波长发生红移;α-螺旋结构含量减少,β-折叠、β-转角和无规卷曲结构含量增加(P<0.01);红外光谱中酰胺I带向低波数发生位移,且峰形趋于平缓。与千金子总蛋白相应剂量组比较,千金子总蛋白模拟制霜品对TNF-α、IL-1β含量的上调作用、对IL-10含量的下调作用以及对occludin、claudin-1蛋白表达的下调作用均明显减弱(P<0.05、0.01)。结论 千金子制霜减毒的机制可能与制霜后毒性成分总蛋白发生变性,总蛋白结构发生改变,致使千金子总蛋白的肠黏膜刺激性毒性降低有关。

千金子制霜前后提取物对4类肠道菌影响的体外研究

目的研究并对比千金子制霜前后提取物对正常SD大鼠肠道菌群的影响。方法采用酶标比浊法,体外不同浓度千金子制霜前后提取物作用下的细菌生长曲线来研究制霜对长双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、大肠埃希菌和粪肠球菌4种代表性肠道菌的作用,分析其对4种肠道菌生长的影响。结果千金子生品提取物和霜品提取物对4种肠道菌均有抑制作用,且随着给药浓度的增大,抑制作用增强。相同生药量下,千金子生品提取物对4种肠道菌的抑制作用均大于霜品提取物,且低剂量下会使条件致病菌粪肠球菌和大肠埃希菌的数量减少。推测千金子制霜前后均会一定程度影响肠道菌群的稳态,制霜后对4种肠道菌的影响弱于生品,与千金子制霜后泻下作用缓和的研究结果相吻合。结论从肠道微生态角度为切入点,考察千金子制霜前后提取物对肠道菌群数量和生长情况的干预作用,可初步揭示千金子制霜与肠道菌群数量和结构变化可能存在的相关性,为深入揭示千金子制霜减毒微生物学机制奠定基础。

千金子制霜前后提取物对大鼠肠道菌群的影响

目的研究千金子制霜前后提取物对正常大鼠肠道菌群的影响,为进一步阐明千金子制霜减毒机制提供参考。方法大鼠ig高、中、低剂量的千金子生品和霜品提取物,采用平板菌落计数法考察千金子制霜前后大鼠粪便中4类代表性肠道菌群双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌、肠球菌的数量变化。结果平板菌落计数实验结果表明,ig千金子生品与霜品提取物后大鼠出现菌群失调现象,且千金子霜品较生品引起的菌群紊乱程度低,在低剂量给药时可使条件致病菌肠球菌和大肠杆菌的数量减少。结论千金子制霜前后提取物均会影响肠道菌群的生物多样性,影响肠道菌群平衡,且千金子制霜后对4类肠道菌群的作用减弱,引起肠道菌群紊乱程度减小,这与千金子霜品泻下作用缓和的研究结果相一致,表明从肠道微生态角度考察千金子制霜前后对肠道菌群的干预作用,可揭示制霜与肠道菌群数量变化可能存在相关性。

千金子制霜前后提取物在体外对人正常肝细胞LO2的毒性作用研究

目的比较千金子制霜前后提取物对LO2细胞毒性的影响并探究千金子制霜减毒的作用机制。方法将人肝LO2细胞分为7组:千金子生品低、中、高3个剂量组、千金子霜品低、中、高3个剂量组和阴性对照组。将细胞培养48 h后,分别予以100,200,400μg·mL^(-1)的千金子生品、千金子霜品供试品溶液和等体积的无血清细胞培养液,各组设置3个复孔。分别用PI染色法和Annexin V-FITC/PI双重染法来检测细胞周期和凋亡情况,试剂盒法检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和Na^(+)-K^(+)-ATP酶的活力。结果阴性对照组、千金子生品低、高2个剂量组、千金子霜品低、高2个剂量组的细胞G2/M期比例依次为(22.47±2.29)%,(13.63±0.88)%,(6.12±0.83)%,(18.03±0.73)%和(9.88±0.75)%^;这5组总凋亡率依次为(3.87±0.12)%,(9.93±0.05)%,(12.80±0.28)%,(6.90±0.08)%和(9.73±0.09)%。阴性对照组、千金子生品低、中、高3个剂量组、千金子霜品低、中、高3个剂量组的LDH活力依次为(21.66±1.78),(257.77±13.09),(452.44±10.80),(798.65±8.72),(145.16±5.65),(238.10±4.85)和(495.56±5.16) mU·mL^(-1);这7组的SOD活力依次为(17.03±0.41),(8.28±0.35),(6.01±0.37),(2.89±0.27),(12.87±0.21),(10.58±0.24)和(7.71±0.44) U·mg^(-1);这7组的Na^(+)-K^(+)-ATP酶活力依次为(15.84±0.54),(8.47±0.66),(7.00±0.13),(3.64±0.17),(12.88±0.40),(10.79±0.22)和(8.45±0.13) U·mg^(-1)。上述指标,千金子生品低、中、高3个剂量组与阴性对照组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01)^(+)千金子霜品3个剂量组与千金子生品3个剂量组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论千金子制霜后可能通过减轻细胞氧化损伤,降低细胞膜通透性,改善肝细胞功能损伤,减少细胞凋亡来降低体外肝毒性。

千金子制霜前后提取物对TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路的影响研究

目的研究千金子制霜前后提取物对Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)信号通路的影响差异。方法42只BALB/c小鼠按体质量随机分为空白对照组,千金子生品低、中、高剂量组(10.49、20.98、41.96 g/kg)和千金子霜品低、中、高剂量组(10.49、20.98、41.96 g/kg),每组6只,连续灌胃7 d。酶联免疫吸附测定法检测血清白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,蛋白质印迹法和实时荧光PCR法检测结肠组织TLR4、NF-κB p65、NLRP3蛋白和mRNA表达。30只BALB/c小鼠按体质量随机分为空白对照组、千金子生品组、千金子生品+TAK-242组、千金子霜品组、千金子霜品+TAK-242组,每组6只。各给药组灌胃相应药液(20.98 g/kg),连续7 d,千金子生品+TAK-242组和千金子霜品+TAK-242组于给药第1、5、6、7天给药前30 min腹腔注射TAK-242溶液(3 mg/kg)。采用蛋白质印迹法和实时荧光PCR法检测结肠组织NLRP3、NF-κB p65蛋白表达,以及NLRP3、IL-1βmRNA表达。结果千金子生品可导致IL-1β和TNF-α大量释放,上调TLR4、NF-κB p65、NLRP3蛋白和mRNA表达(P<0.05,P<0.01),千金子制霜后对IL-1β、TNF-α分泌,以及TLR4、NF-κB p65、NLRP3蛋白和mRNA表达的促进作用减弱(P<0.05,P<0.01)。加入TLR4的阻断剂TAK-242后,可抑制NLRP3、NF-κB p65蛋白表达,以及NLRP3、IL-1βmRNA表达(P<0.01)。结论千金子生品可能通过激活TLR4介导的NF-κB/NLRP3通路,促进TNF-α和IL-1β释放,诱导结肠组织产生炎性反应,而制霜后对TLR4/NF-κB/NLRP3通路传导及促炎因子分泌的上调作用明显减弱,提示其制霜减毒的作用机制可能与致炎能力下降及干预TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路有关。