副猪嗜血杆菌4型灭活疫苗攻毒菌株的筛选

为筛选副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)4型攻毒菌株,对8株HPS进行血清型鉴定,并绘制细菌生长曲线;用豚鼠攻毒实验对其中5个菌株进行毒力测定,同时记录发病豚鼠的临床症状和剖检病变。结果显示8个菌株均为HPS4型,确定了候选菌株的最佳扩大培养时间为8~10h,筛选出毒力最强的CVCC4355。本研究确定CVCC4355可作为HPS4型疫苗产品效力检验的攻毒菌株。

副猪嗜血杆菌4型分离株耐药表型及耐药基因分析研究

为了解掌握副猪嗜血杆菌4型(Haemophilus parasuis serotype4,HPS4)临床分离菌株的耐药性和耐药基因携带情况。试验选用6大类18种常用抗菌药物,通过药敏纸片扩散法对10株HPS4菌株的耐药性进行检测研究,并通过PCR方法检测了菌株携带氨基糖苷类和喹诺酮类药物的耐药基因情况。结果表明,被检菌株对红霉素、阿奇霉素、替米考星、四环素、土霉素、强力霉素和氟苯尼考有很好敏感性,耐药率均为10%;对头孢噻呋、头孢他啶和大观霉素较敏感,耐药率为20%;对氨基糖苷类卡那霉素、阿米卡星、新霉素和喹诺酮类诺氟沙星、左氟沙星、氧氟沙星表现出较高耐药性,耐药率均在50%以上,且所有菌株均表现出3重及以上多重耐药现象。10株HPS4菌株共检出了strB、aphA1、gyrA、parC 4种耐药基因,检出率分别为50%、60%、80%、80%,结合耐药表型结果,表明这4种耐药基因可能是介导HPS4菌株对氨基糖苷类及喹诺酮类药物产生耐药性的主要原因。研究为临床防控副猪嗜血杆菌4型选药用药提供了科学的理论依据,充实了副猪嗜血杆菌耐药谱的数据库,为进一步研究其耐药机制奠定基础。

副猪嗜血杆菌银杏叶黄酮苷佐剂疫苗对小鼠免疫功能的影响

为探讨银杏叶黄酮苷作为副猪嗜血杆菌灭活疫苗佐剂的效果,以小鼠为动物模型,将银杏叶黄酮苷与副猪嗜血杆菌血清4型灭活疫苗研制成副猪嗜血杆菌银杏叶黄酮苷佐剂疫苗,选取体重25 g左右的Balb/c小白鼠,以不同浓度佐剂疫苗免疫小鼠,二免后1周,用副猪嗜血杆菌血清4型强毒株攻毒,观察保护力,同时测定小鼠IgG抗体水平、小鼠外周血T淋巴细胞水平及IL-2、IL-4、IL-10、TNF-α、IFN-γ等细胞因子的水平。结果表明:疫苗中加入0.05 mg/mL银杏叶黄酮苷能提高小鼠存活率及小鼠IgG抗体水平,能显著升高小鼠外周血中CD4+T淋巴细胞比例(P<0.05),显著升高CD4+/CD8+T淋巴细胞的比值,同时,对IL-4和TNF-α的表达也具显著促进作用,结果为银杏叶黄酮苷作为疫苗佐剂的开发利用提供参考。