多功能蛋白聚糖与子宫内膜样腺癌的相关性研究

目的 研究子宫内膜样腺癌组织中多功能蛋白聚糖的表达水平,探讨其与临床病理特征及患者预后生存的相关性。方法 选2016年1月-2019年1月在广西壮族自治区人民医院因子宫内膜样腺癌入院患者120例,收集临床及病理数据,对各病例多功能蛋白聚糖表达水平进行评分,采用统计学方法分析多功能蛋白聚糖与临床病理特征及患者预后生存的相关性。结果 多功能蛋白聚糖表达水平与肿瘤组织学分级、分期有显著相关性;与患者总生存期呈负相关。年龄、分级、分期、多功能蛋白聚糖表达水平与患者总生存期密切相关。多因素Cox回归分析显示,多功能蛋白聚糖是子宫内膜癌患者预后的独立危险因素。结论 多功能蛋白聚糖对子宫内膜样腺癌的发生、发展有一定影响,它可能是子宫内膜样腺癌潜在的预后预测指标。

线粒体三功能蛋白缺乏症的研究进展

目的 总结线粒体三功能蛋白(mitochondrial trifunctional protein,MTP)缺乏症的临床表现、诊治情况,为临床识别、诊治该疾病提供思路。方法 以“线粒体三功能蛋白、线粒体三功能蛋白缺乏症等”为关键词进行文献检索,分析总结MTP缺乏症发生原因、临床表现、检查及诊治方法。结果 MTP缺乏症是一种罕见的遗传病,目前发病机制、诊治方案尚未明确。结论 中国目前对MTP缺乏症的认识尚不成熟,相关基因突变与国外存在差异,亟待进一步研究。

双峰驼乳功能蛋白及脂肪酸在泌乳期内的变化研究

为探究泌乳双峰骆驼乳功能性蛋白及脂肪酸变化规律,该研究动态追踪20峰泌乳双峰驼并采集泌乳期330 d内的驼乳,基于超高效液相色谱和气相色谱分析,检测α-乳白蛋白(α-lactalbumin,α-LA)、乳铁蛋白(lactoferrin,LF)、免疫球蛋白(immunoglobulin G,IgG)和溶菌酶4种目标功能蛋白及34种脂肪酸含量变化情况。结果表明,驼乳中共检测到4种目的功能蛋白及32种脂肪酸,色谱峰形尖锐、无杂峰干扰。驼乳4种功能蛋白含量在初乳期极显著高于常乳期(P<0.01),泌乳后期随着泌乳时间延长含量缓慢降低,功能蛋白间具有显著正相关性(P<0.05),其中α-乳白蛋白与IgG具有强正相关。脂肪酸含量在初乳期至常乳期30 d内波动明显,其余时期脂肪酸含量变化不大。长链脂肪酸、多不饱和脂肪酸和中链脂肪酸在泌乳期含量较为稳定;饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸的比例合理,且饱和脂肪酸与不饱和脂肪酸及单不饱和脂肪酸变化趋势相反,在初乳期3~7 d内变化较为明显,在泌乳高峰期90~150 d波动极为明显,少数脂肪酸间具有较强的正相关。驼初乳功能蛋白与脂肪酸的组成及含量优于常乳,结果为深入研究双峰驼的泌乳生理特点及驼乳功能性制品的开发提供基础数据。

抗沉默功能蛋白1B在幽门螺杆菌感染的人胃癌细胞中的表达及其对AGS细胞株增殖和转移能力的影响

目的检测组蛋白伴侣抗沉默功能蛋白1B(anti-silencing functional protein 1B,ASF1B)在胃癌组织中的表达情况及其与胃癌患者预后之间的关系,探讨ASF1B对人胃癌细胞株AGS增殖、转移能力的影响以及可能的分子机制,分析ASF1B与幽门螺杆菌感染之间的关系。方法分析癌症基因组图谱数据库中泛瘤种的肿瘤组织和癌旁正常组织中ASF1B的表达情况,并通过实时荧光定量聚合酶链反应(real time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测ASF1B在所收集的59例配对的胃癌组织及癌旁正常组织中的mRNA表达水平。分析Kaplan-Meier plotter数据库中胃癌患者ASF1B的表达水平与其预后之间的关系,后通过免疫组织化学检测胃癌组织芯片中ASF1B的表达水平并分析其与胃癌患者临床预后及临床病理参数之间的关系。通过小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术敲低胃癌细胞系AGS中的ASF1B表达,分组为siNC组(阴性对照转染细胞)、siASF1B#1组、siASF1B#2组及siASF1B#3组,后采用CCK-8、平板单克隆实验、Transwell小室迁移实验检测各组细胞的增殖、转移能力。分析基因表达综合数据库的数据集GSE27411中幽门螺杆菌阳性和阴性的胃癌组织中ASF1B的表达水平,并通过RT-qPCR及蛋白质印迹法检测ASF1B在幽门螺杆菌感染前后的胃癌细胞系AGS中的表达水平。结果相关数据库及我们的胃癌队列中的胃癌组织ASF1B的mRNA和蛋白表达水平均高于癌旁正常组织,且胃癌组织中高表达的ASF1B与胃癌患者不良预后相关。此外,与siNC组相比,敲低ASF1B组(siASF1B#1组、siASF1B#2组及siASF1B#3组)的细胞增殖和转移能力均减弱。最后,幽门螺杆菌阳性的胃癌组织及幽门螺杆菌感染后的人胃癌细胞AGS中的ASF1B表达水平均上调。结论ASF1B在幽门螺杆菌感染诱发的胃癌发生发展过程中可能起到重要的促进作用,且高表达的ASF1B与胃癌患者更早发生转移及较差的预后相关,可作为预测胃癌患者复发及预后的分子标志物。此外,敲低ASF1B可显著抑制AGS细胞的增殖和转移能力。

多功能蛋白聚糖对食管鳞癌细胞体外迁移和侵袭的影响

目的探讨多功能蛋白聚糖(versican,VCAN)在食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)KYSE150和EC9706细胞中的表达及其对细胞体外迁移和侵袭的影响。方法从GEO数据库中下载GSE77861数据集,采用生物信息学方法进行数据处理并筛选差异表达基因,筛选出与ESCC预后相关的关键基因VCAN;Western blot检测人正常食管上皮细胞HEEC及4种ESCC细胞系KYSE70、KYSE140、KYSE150、EC9706中VCAN的蛋白表达水平。将KYSE150和EC9706细胞分3组(si-VCAN沉默表达组、si-NC阴性对照组和空白对照组)处理,然后Western blot检测各组VCAN的蛋白表达水平;划痕实验、Transwell实验分别检测沉默表达VCAN对细胞迁移和侵袭能力的影响。结果ESCC细胞系的VCAN相对表达水平高于人正常食管上皮细胞HEEC,且si-VCAN沉默表达组的VCAN表达水平低于si-NC阴性对照组和空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);划痕实验和Transwell实验结果表明,si-VCAN沉默表达组的迁移和侵袭细胞数目较对照组减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论VCAN在ESCC细胞系中高表达,沉默表达VCAN后可抑制ESCC细胞的体外迁移和侵袭。

猪血浆中多种功能蛋白的连续提取工艺

为了充分利用中国丰富的猪血资源,提高猪血产品经济效益和社会效益,该文以提取过程各阶段功能蛋白质含量变化为参考指标,对猪血浆中主要功能蛋白,如凝血酶、纤维蛋白原、白蛋白及免疫球蛋白等进行了连续提取,最终确立了一套切实可行的连续提取工艺:将柠檬酸钠抗凝的血浆经冻融处理,离心得到沉淀纤维蛋白原,在上清液中加入氯化钡,利用吸附法提取凝血酶后再经盐析法分离提取白蛋白及免疫球蛋白。1 L血浆可同时提得纤维蛋白原2.67 g、凝血酶粗品0.22 g(比活力为38.5 U/mg)、白蛋白31.41 g和免疫球蛋白13.86 g。

实验性糖尿病大鼠肝过氧化物酶体脂肪酸β-氧化及D双功能蛋白活性变化的初步研究

为研究过氧化物酶体脂肪酸β 氧化及 D 双功能蛋白在糖尿病脂代谢紊乱中所起的作用 ,分析了链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠肝脏过氧化物酶体数量和过氧化物酶体脂肪酸 β 氧化及D 双功能蛋白活性的改变 ,并用蛋白质印迹检测过氧化氢酶和D 双功能蛋白的表达量 .发现糖尿病大鼠肝脏过氧化物酶体增殖 ,过氧化氢酶蛋白量和酶活性显著增加 ,过氧化物酶体脂肪酸 β 氧化增强 ,D 双功能蛋白含量和酶活性显著降低 ,脂酰CoA氧化酶、L 3 羟脂酰CoA脱氢酶活性显著增加 .对过氧化物酶体脂肪酸 β 氧化增强和D 双功能蛋白活性降低与糖尿病脂代谢紊乱的关系进行了初步探讨 .

冠心病血瘀证血小板差异功能蛋白筛选、鉴定及功能分析

目的寻找冠心病血瘀证患者冠脉事件关键血小板功能蛋白。方法纳入冠心病血瘀证组患者,设立正常对照组,每组分4个小组,即两组各有4次重复。抽取外周血,分离血小板并提取蛋白,将各个提取血小板蛋白样本按小组等体积混合、定量。用荧光差异显示二维凝胶电泳技术筛选、基质辅助激光解析/电离-飞行时间质谱技术鉴定血小板差异功能蛋白。对鉴定成功差异蛋白,用Western-blotting进一步验证。结果筛选出13个差异蛋白点,质谱成功鉴定7个:isoform 1 of integrinalpha-Ⅱb、isoform 2 of integrinalpha-Ⅱb、actin-cytoplasmic1、actin-cytoplasmic 2、cDNAFLJ52842、cDNAFLJ55253、cDNAFLJ43573fis。其中isoform2ofintegrinalpha-Ⅱb(CD41)和actin-cytoplasmic2(Actinγ)成功验证。结论 CD41和Actinγ是冠心病血瘀证的标志蛋白。其他血小板功能蛋白的异常表达可能在冠心病血瘀证事件发生发展中起关键作用。

胃溃灵汤结合针灸治疗消化性溃疡的疗效及对血清免疫功能蛋白和血清炎性反应因子的影响

目的:分析胃溃灵汤结合针灸治疗消化性溃疡的疗效及对血清免疫功能蛋白水平变化、血清炎性反应因子水平的影响。方法:选取2015年5月至2016年6月接收的消化性溃疡患者共70例,并依据就医顺序,随机分成2组,每组35例。对照组给予胃溃灵汤;观察组在对照组的基础上加用针灸治疗。对2组患者临床疗效、治疗前后中医候证积分、免疫球蛋白水平、血清炎性反应因子水平进行测定。结果:观察组总有效率94.29%,对照组总有效率71.43%,2组比较差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗后疲倦乏力、胃脘痛、反酸嗳气、纳差便溏4项中医症候评分明显低于对照组(P<0.05);观察组治疗后免疫球蛋白Ig G、Ig A、Ig M水平显著高于对照组(P<0.05);观察组治疗后IL-6、TNF-α、TGF-β1水平明显低于对照组。结论:针灸结合胃溃灵汤治疗消化性溃疡具有良好效果,并能有效改善患者免疫功能蛋白及血清炎性反应因子水平。

干旱胁迫下植物质膜功能蛋白研究现状

介绍了植物质膜中 3种主要的功能蛋白 ,质膜 H+ - ATPase、质膜 Ca2 + - ATPase、质膜氧化还原蛋白的基本性质和生理功能 ,并对近年来有关逆境下这些膜功能蛋白 (酶 )活性变化的研究进展进行综述 。

冠心病血小板功能蛋白与证侯相关性研究

目的研究冠心病血瘀证、非血瘀证与血小板功能蛋白相关性。方法纳入冠心病血瘀证组22例、冠心病非血瘀证组22例,采集血浆分离血小板,提取血小板蛋白,用荧光差异显示二维凝胶电泳筛选差异功能蛋白,基质辅助激光解析/电离-飞行时间质谱对血小板差异功能蛋白进行鉴定。对鉴定成功差异蛋白,Western-Blotting进一步验证。结果筛选,并质谱成功鉴定10个差异蛋白点。冠心病血瘀证组比对照组,血小板功能蛋白有2个:cDNA FLJ53327、cDNA FLJ43573fis表达增多;有8个:Isoform 2 of Integrin alpha-IIb、FGG50kDa protein、A26C1B ANKRD26-like、Actin-cyto-plasmic1、Actin-cytoplasmic 2、cDNA FLJ52842、Fibrinogen beta chain、Keratin type I表达减少。Fibrino-genβ成功验证。结论冠心病不同证侯与血小板功能蛋白表达水平明显相关,部分血小板功能蛋白可能是冠心病不同证侯的物质基础之一。

植物响应水分胁迫的主要功能蛋白

植物对水分胁迫的响应蛋白根据其在抗逆机制中的作用不同分为调节蛋白和功能蛋白,本文就植物抵抗和适应水分胁迫的活性氧清除机制、渗透调节机制及膜修饰机制相关的主要功能蛋白作一综述。

一氧化氮对动物卵巢细胞中功能蛋白基因表达的调节

一氧化氮是一种无机自由基气体,作为细胞内生物信使的作用正日益受到关注。卵巢是雌性动物的重要器官,NO作为一种较小的生物活性分子,可自由穿过细胞膜以相对特异的方式调控卵巢内多种细胞的生理功能。本文探讨了NO的主要作用机制,NO通过环鸟苷酸(cGMP)途径,及多种非cGMP依赖途径来调节卵巢中功能蛋白,如芳香化酶、抑制素、LH受体、环氧化酶及叉头螺旋转移因子(FOXO蛋白)的基因转录、mRNA翻译和相关蛋白的生成,为NO在畜牧生产的实际应运提供理论依据。

大鼠肝脏D-双功能蛋白活性增加与胆汁酸合成的关系

目的研究D-双功能蛋白(DBP)活性增加对胆汁酸合成的影响,从整体水平上探讨DBP在胆汁酸合成中的作用。方法将20只雄性Wistar大鼠随机分为邻苯二甲酸二异辛酯(DEHP)组(n=10)和对照组(n=10)。分别测定两组大鼠血清甘油三酯和总胆固醇的变化,肝脏过氧化物酶体增殖剂激活受体α(PPARα)、DBP和胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)mRNA的变化,以及DBP活性和粪中胆汁酸含量。结果与对照组相比,DEHP组大鼠血清甘油三酯明显降低(P<0.01),肝脏PPARαmRNA表达明显增加(P<0.01)。在DBPmRNA表达及活性升高(P<0.01)的同时,CYP7A1mRNA表达加强,是对照组的1.6倍(P<0.01);粪中胆汁酸排出增加,是对照组的1.9倍(P<0.01)。DBPmRNA水平及其活性与CYP7A1mRNA水平均呈明显的正相关(r=0.89,P<0.01;r=0.95,P<0.01)。结论DBPmRNA表达及活性的升高,可引起CYP7A1表达及胆汁酸合成增加,DBP协同CYP7A1参与胆汁酸的生物合成。

抗肠炎功能蛋白对工业化养殖点带石斑鱼生长性能及肠道形态的影响长性能及肠道形态的影响

为研究抗肠炎功能蛋白添加剂对在现代封闭循环水工厂化养殖条件下的点带石斑鱼生长性能及肠道形态的影响,并确定其在点带石斑鱼幼鱼饲料中的适宜添加量,将抗肠炎功能蛋白分别按0、0.1%、0.2%、0.3%的剂量添加到基础饲料中,饲喂初始规格为（64.80±0.56）g的点带石斑鱼105 d。结果表明：①添加抗肠炎功能蛋白能够提高点带石斑鱼的成活率（SR）,其中0.2%组达到显著性差异（P〈0.05）;提高了点带石斑鱼的增重率（WGR）,降低了饲料系数（FC）,其中0.3%添加组与对照组相比差异显著（P〈0.05）。②添加0.2%和0.3%的抗肠炎功能蛋白后点带石斑鱼肠道黏膜褶间距显著变窄,肠道微绒毛明显比对照组密。抗肠炎功能蛋白能提高点带石斑鱼的生长性能和改善肠道形态结构,建议在工业化养殖点带石斑鱼幼鱼饲料中的适宜添加量为0.2%~0.3%。

功能蛋白在氯化镧逆转卵巢癌顺铂耐药中的差异表达分析

目的从蛋白质水平研究氯化镧对人卵巢癌顺铂耐药细胞(COC1/DDP)功能蛋白表达的影响,为探讨氯化镧逆转卵巢癌顺铂耐药的机制提供实验依据。方法取对数生长期COC1/DDP细胞分为4组,对照组只加入10%胎牛血清培养基培养,顺铂组加入23.08μg/m L顺铂,氯化镧组和氯化镧+顺铂组分别加入1.5μmol/L氯化镧,处理8 h后氯化镧+顺铂组加入23.08μg/m L顺铂。采用蛋白印迹(Western blot)技术检测顺铂和氯化镧分别作用于COC1/DDP后,4组中ERCC1、Ki67、CDK6、HDAC2、c-Cbl和微管末端结合蛋白1(EB1)6种功能蛋白的表达变化。结果与对照组相比,COC1/DDP的4种功能蛋白ERCC1、Ki67、CDK6、c-Cbl在顺铂组和顺铂+氯化镧组中表达显著下调,差异有统计学意义(P<0.05);且顺铂+氯化镧组较顺铂组表达明显下调,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,顺铂组中HDAC2和EB1表达明显下调,差异有统计学意义(P<0.05);顺铂+氯化镧组与顺铂组、氯化镧组中表达比较有下降趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论氯化镧可能通过多种途径下调ERCC1、Ki67、CDK6和c-Cbl表达,从而介导逆转卵巢癌顺铂耐药。

大鼠胆汁酸合成加强时肝D-双功能蛋白mRNA表达及活性升高

目的通过研究胆汁酸合成代谢加强时D-双功能蛋白(DBP)表达及活性的变化,从整体水平上探讨DBP在胆汁酸合成中的作用。方法Wistar大鼠20只随机分为2组高胆固醇组和对照组。饲养2周后取材,测定血清总胆固醇、粪胆汁酸、肝胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)和DBPmRNA水平以及DBP活性。结果高胆固醇组血清总胆固醇含量升高,CYP7A1mRNA表达加强,粪中胆汁酸排出增加;同时,肝DBPmRNA表达及活性升高。结论大鼠胆汁酸合成加强时,肝DBPmRNA表达及活性升高,表明在整体水平上DBP可能参与了胆汁酸的合成。

猪血浆中凝血酶、免疫球蛋白等功能蛋白的联合提取

实验对猪血浆中白蛋白、免疫球蛋白、纤维蛋白原及凝血酶等功能蛋白进行了联合提取.通过对各步骤中蛋白的检测确立了一套有效的联合提取方法:将柠檬酸钠抗凝的血浆经冻融处理,离心得到纤维蛋白原沉淀,上清通过吸附法提取凝血酶后再经盐析法分离提取白蛋白及免疫球蛋白.1L猪血浆可同时提得白蛋白31.41g、免疫球蛋白13.86g、凝血酶粗品0.22g(比活力为38.5U/mg)、纤维蛋白原2.67g.

昆虫雄性附腺功能蛋白研究进展

昆虫雄性附腺蛋白是精液蛋白的主要来源,对雌雄虫生殖过程具有重要生理功能,按功能可分为精包结构蛋白和功能蛋白两类。精包结构蛋白参与精包的形成:功能蛋白在交配过程中随精子一起转移到雌虫体内,导致雌虫行为和生理的深刻变化,如降低雌虫再交配率、提高产卵量、促进精子转移、储存和竞争等。随着对昆虫雄性附腺功能蛋白研究的深入,特别对果蝇附腺功能蛋白的详细研究,从分子水平上闸述蛋白质序列与功能的关系,明确其作用机制,可为进一步阐明昆虫生殖和进化机制等提供新依据。