化学发光自显影免疫印迹法(Western Blotting)检测绒山羊皮肤组织中催乳素受体蛋白

采集不同季节绒山羊皮肤组织样品,提取总蛋白,经聚丙烯酰胺凝胶电泳,将电泳结果转移到醋酸纤维薄膜,然后与催乳素抗体结合、辣根过氧化物酶标记二抗结合,后者作用于化学发光底物,暗室中置X-光胶片上自显影数分钟,经显影、定影,得到黑色曝光斑,根据胶片上曝光斑的位置确定出催乳素受体的分子量为87kD。根据不同时期样品黑斑的大小得出各时期催乳素受体表达量与绒毛生长趋势是一致的。

直接杂交法检测痰液中结核分枝杆菌

目的建立了一种高度灵敏、特异、快速和简便的探针杂交检测技术，以解决临床上结核病快速诊断的难题。方法采用简易的方法处理标本，以对结核分枝杆菌特异的生物素标记 １８８ ｈｐ ＤＮＡ探针进行点杂交，与链霉亲合素标记的辣根过氧化酶偶联后，以化学发光自显影方式记录检测信号。结果 此法的敏感性可检出２００个菌，较ＰＣＲ法为高。对２０种分枝杆菌和９种非分枝杆菌检测时发现只有结核分枝杆菌呈阳性。以本法检测１０４例临床标本，结果发现，对其中４５例结核病人痰涂片阳性标本，４１例结核病人痰涂片阴性标本和１８例非结核标本，检测阳性率分别为１００％、６５．９％和０．０％。结论本法简便，特异。

HRP-HBVDNA探针在临检应用中的研究

本文介绍了一种简便的检测血清ＨＢＶＤＮＡ 的方法。参照Ｒｅｎｚ 等人的标记方法，构建了直接酶标ＨＲＰＨＢＶＤＮＡ 探针。此探针经与固定在硝酸纤维素滤膜上的血清靶ＤＮＡ 杂交后，可通过化学发光自显影检测技术观察结果。敏感度可检测０－１ｐｇ 靶ＤＮＡ，相当于同位素探针的灵敏度。对６３ 份ＨＢｓＡｇ ＨＢｅＡｇ 和ＡｎｔｉＨＢｃ ＥＬＩＳＡ 阳性血清以及２４ 份ＨＢｓＡｇ ＡｎｔｉＨＢｃ 阳性，ＨｂｅＡｇ 阴性血清用ＨＲＰＨＢＶ ＤＮＡ 探针进行检测，结果探针ＨＢＶ ＤＮＡ 阳性率分别为１００ ％ （６３） 和５８ ％ （１４） ；对５０ 份ＨＢｓＡｇ，ＥＬＩＳＡ 阴性和ＡＬＴ 正常的血清，探针ＨＢＶ ＤＮＡ 全部阴性。实验结果表明本方法具有很大的推广应用价值。