响应面法优化千里光中绿原酸提取工艺

研究采用超声波辅助乙醇提取法从千里光中提取绿原酸,以绿原酸提取率为响应值,在单因素试验考察乙醇浓度、提取温度、提取时间和液料比对千里光绿原酸提取率的影响基础上,借助响应面法优化千里光绿原酸提取的工艺参数。结果显示,超声波辅助乙醇提取千里光绿原酸的优化条件为乙醇浓度50%、提取温度47℃、提取时间50 min、液料比20 mL/g。在此条件下,千里光绿原酸提取率可达到1.01%。研究表明,试验确定的提取工艺简单高效,可为千里光绿原酸进一步纯化提取提供参考。

基于高效液相色谱-质谱联用的千里光治疗寻常型银屑病网络药理学分析

目的:探究千里光治疗寻常型银屑病的成分-靶点-通路作用机制,为其进一步研究提供依据。方法:使用高效液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS)检测千里光入血成分;在TCMIP数据库中检索千里光入血成分靶点,并在OMIM、DrugBank、GeneCards、TTD数据库中检索寻常型银屑病靶点,绘制Venn图取两者交集靶点;使用String构建交集靶点蛋白-蛋白相互作用网络,使用Cytoscape 3.8.2构建千里光核心入血成分-交集靶点网络,使用Metascape进行基因本体(GO)功能及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;使用AutoDockTools1.5.7进行分子对接,并用PyMOL实现可视化。结果:共得到千里光入血成分50个,其中核心入血成分9个。核心入血成分靶点85个,寻常型银屑病靶点1 175个,两者交集靶点18个。蛋白互作网络得到关键靶点HSP90AA1、ESR1、AKT1,千里光核心入血成分-交集靶点网络得到主要成分山柰酚、槲皮素,KEGG富集分析得到PI3K-Akt等关键信号通路,GO富集分析中生物过程主要涉及对激素的反应、对炎症反应的调节、细胞对脂质的反应等,细胞组成主要涉及转录调控复合体、囊泡腔、分泌颗粒腔等,分子功能主要涉及激酶结合、蛋白激酶结合、蛋白激酶活性等。山柰酚、槲皮素与核心靶点AKT1分子对接结合能分别为-6.59 kcal/mol、-6.67 kcal/mol。结论:千里光核心入血成分山柰酚、槲皮素可能通过AKT1靶点,作用于PI3K-Akt信号通路发挥对寻常型银屑病的治疗作用。

欧洲千里光SvAPETALA1-5基因对花器官发育的影响

菊科(Asteraceae)是真双子叶植物的一大类,具有复杂的头状花序,目前对其花发育的分子调控机制还知之甚少。APETALA1(AP1)属于MADS-box基因家族,在植物成花诱导和花器官发育中具有关键作用。本研究对欧洲千里光(Senecio vulgaris)AP1同源基因SvAP1-5进行了生物信息学及组织特异性表达分析,并基于VIGS技术创建了SvAP1-5基因沉默植株,并在龙葵(Solanum nigrum)中过表达SvAP1-5,对其功能进行了初步探讨。生物信息学分析结果表明,SvAP1-5基因具有典型的MADS-box和K-box结构,C末端含有FUL基序和paleoAP1基序,属于euFUL分支的AP1类基因。qRT-PCR结果表明,SvAP1-5在苞片、花瓣和心皮中均有表达,其中在心皮内较高表达。与对照相比,SvAP1-5基因沉默导致花瓣不规则裂开,柱头分裂增加,心皮发育不良。而SvAP1-5过表达龙葵植株的果实发育异常,出现类似果实细胞的增生组织。综上所述,在欧洲千里光花发育过程中,SvAP1-5基因可能参与花瓣和心皮的发育,并发挥着重要作用。

基于指纹图谱及多成分定量的千里光标准汤剂质量评价

目的:建立不同产地千里光标准汤剂指纹图谱及含量测定方法。方法:建立15批千里光标准汤剂HPLC指纹图谱,结合相似度评价、聚类分析、主成分分析及正交偏最小二乘判别分析进行评价;对15批样品中绿原酸、金丝桃苷、异槲皮苷的含量进行测定,计算其出膏率及转移率。结果:15批千里光标准汤剂样品共标定12个共有峰,指认出7个成分,样品与对照图谱的相似度>0.950;聚类分析可将15批样品聚为2类;主成分分析结果显示,云南、湖北、安徽产地样品的综合得分较高;OPLS-DA筛选出7个质量差异成分;15批样品出膏率为11.18%~18.98%,绿原酸、金丝桃苷、异槲皮苷的含量分别为3.509~22.673 mg/g、0.391~2.620 mg/g、0.277~1.247 mg/g,转移率分别为32.32%~47.58%、10.57%~26.90%、12.36%~33.45%。结论:该研究建立的指纹图谱及含量测定方法准确、稳定、简便,可用于千里光标准汤剂的质量控制和评价。

千里光药材功效关联物质预测研究

目的预测并分析千里光药材功效关联物质。方法采用高效液相色谱(HPLC)法,色谱柱为Shim-pack GIST C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5µm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为345 nm,柱温为25℃,进样量为10µL。建立15批药材样品的HPLC指纹图谱,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)进行相似度评价,确定共有峰。通过聚类分析、主成分分析初步预测潜在功效成分;运用网络药理学技术挖掘成分潜在作用靶点,构建蛋白相互作用(PPI)网络,并进行基因本体论(GO)功能富集分析及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析与成分-靶点-通路网络构建,进一步预测千里光药材潜在功效成分及核心靶点、通路等方面的作用机制。结果共有18个共有峰,指认出其中7个,分别为绿原酸、咖啡酸、金丝桃苷、异槲皮苷、芦丁、异绿原酸A、异绿原酸C,15批药材样品的相似度介于0.892~0.997(仅1批小于0.9);可聚为2类,归纳出4个主成分;7种(共有峰)成分共关联109个靶点,18个关键靶点(包括EGFR,JUN,ESR1,MMP-9等);共富集到GO条目233条,其中生物学过程197条,细胞组成17条,分子功能19条,分别主要涉及细胞对辐射的反应、膜筏、信号受体活性调节等;富集到KEGG通路59条,主要涉及肿瘤信号通路、内分泌耐药通路、松弛素信号通路等。结论千里光药材可能通过咖啡酸、异槲皮苷、金丝桃苷等功效成分作用于EGFR,ESR1,JUN,MMP-9等靶点发挥功效。

基于标准汤剂的千里光配方颗粒中阿多尼弗林碱含量测定

目的对千里光饮片和标准汤剂中阿多尼弗林碱进行含量测定,基于转移率分析千里光饮片和标准汤剂中阿多尼弗林碱的含量,为配方颗粒质量评价提供参考。方法采用超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-MS/MS)法进行检测。色谱柱为C_(18)(HypersiL GOLD,100 mm×2.1 mm,1.9μm),流动相为乙腈-0.5%甲酸溶液(7∶93);柱温30℃;流速0.3 ml/min;进样量2μl;采用三重四极杆质谱检测器,电喷雾离子化(ESI)正离子模式下,离子监测通道选择质荷比(m/z)为366(阿多尼弗林碱)和326(野百合碱)进行检测。结果15批次千里光饮片中阿多尼弗林碱含量范围0~31.6μg/g,均值16.7μg/g;标准汤剂出膏率范围10.2%~21.6%,均值为16.1%;15批饮片中有5批未检测出阿多尼弗林碱,剩余10批标准汤剂阿多尼弗林碱含量范围48.7~138.5μg/g,均值109.3μg/g,±30%范围76.5~142.1μg/g;阿多尼弗林碱转移率范围40.4%~97.3%,均值70.0%。结论千里光是常用中药材,而阿多尼弗林碱是千里光的有毒成分,本研究为千里光配方颗粒研究提供了一定参考,对千里光配方颗粒的含量限度控制具有重要意义。

千里光化学成分及抗烟草花叶病毒活性研究

对千里光(Senecio scandens)化学成分及其抗烟草花叶病毒(TMV)活性进行研究,为开发新型植物病毒抑制剂提供理论依据。综合运用硅胶、凝胶、MCI等多种柱层析方法对千里光地上部分乙酸乙酯萃取物化学成分进行分离,利用NMR、MS鉴定其结构;采用活体半叶枯斑法测定化合物对TMV的抑制活性。从千里光乙酸乙酯萃取物中共分离得到13个化合物,根据其理化性质以及波谱数据分别鉴定为24-烯-环阿尔廷酮(1)、3β-羟基-7β-甲氧基-5-豆甾烯(2)、正三十二烷(3)、乌索酸(4)、豆甾醇(5)、(22 E)-ergosta-6,22-diene-3β,5β,8α-triol(6)、山柰酚(7)、3-吲哚甲醛(8)、泽兰黄酮(9)、槲皮素(10)、紫杉叶素(11)、jacaranone(12)、叶绿醇(13)。除化合物7和化合物10外,其余化合物均为首次从该植物中分离得到。活性测定结果表明,化合物8和化合物13具有较强的抗TMV活性。

麻叶千里光中两个新单萜苷化合物

从麻叶千里光(SeneciocannabifoliusLess.)抗菌活性成分中分离得到两个新单萜苷化合物,通过理化性质和谱学分析,鉴定它们的结构为1-(2-hydroxy-2,6,6-trimethyl-4-β-Dglucosyloxycyclohexylidene)butane-2,3-dione(麻叶千里光苷D,cannabisideD)和6hydroxy3(3-O-β-Dglucopyranosylbut1enyl)-2,4,4-trimethyl-cyclohex-2-enone(麻叶千里光苷E,cannabisideE)。

基于生物信息学和网络药理学的千里光调控肝癌的分子机制研究

目的采用生物信息学和网络药理学的技术与方法探究中药千里光调控肝癌的分子机制。方法从中药系统药理学数据库和分析平台、中国台湾中医药数据库和中药分子机制生物信息学数据库获取千里光活性成分及作用靶点;从基因表达公共数据库下载GSE57957、GSE60502和GSE84402三个数据集,运用在线分析工具GEO2R分析差异表达基因(DEGs)并取交集,利用DAVID数据库进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集。借助STRING数据库和Cytoscape3.7版软件构建蛋白互作和“活性成分-靶点-疾病”网络筛选关键基因,利用GEPIA数据库分析表达差异及预后,获得候选靶点并在此基础上用AutoDock4.6版软件对接验证。结果获得2-呋喃甲酸、6-羟基-2-(2-苯乙基)色酮、菊黄素、菊酸、毛茛黄质、1,4-苯二酚、4-羟基苯乙酮和千里光菲灵碱共8个活性成分,作用靶点321个。GSE57957、GSE60502和GSE84402三个数据集分析出245个共同DEGs。“活性成分-靶点-疾病”网络中参与调控肝癌的成分有6个,共同靶点有17个。GO生物学过程涉及乙醇氧化、氧化还原反应、环氧化酶P450途径和脂肪酸长链代谢等,KEGG通路涉及参与脂肪酸降解通路、化学致癌、代谢通路、视黄醇代谢通路和细胞色素P450对外来物质的代谢通路等。蛋白互作网络关键靶点分别为CYP1A1、PTGS2、ESR1和NQO1,其中ESR1和NQO1同时具备显著性差异,并与不良预后有关。分子对接验证显示,NQO1与活性成分结合较为紧密。结论千里光可能通过调控肝癌细胞物质代谢途径,发挥辅助抗肝癌作用。

千里光配方颗粒的制备工艺及薄层色谱鉴别研究

为开发与利用千里光资源,对千里光配方颗粒的制备工艺以及鉴别方法进行了研究.研究方法参考《中药配方颗粒质量控制与标准制定技术要求》,在单因素实验的基础上,以出膏率、浸出物含量为考察指标,以加水量为考察因素,确定千里光配方颗粒的制备工艺;以对照药材作为对照进行薄层色谱法定性鉴别.结果表明,千里光配方颗粒的制备工艺为煎煮前浸泡30 min,连续煎煮2次,第一次煎煮30 min,第二次25 min;加水量为第一次1200 mL、第二次1000 mL;薄层色谱中可检出特征斑点.以上数据表明千里光配方颗粒制备工艺稳定,薄层鉴别方法操作简单,重复性好,为千里光配方颗粒的开发与利用提供了参考.

千里光化学成分及其心肌细胞保护活性

目的研究千里光Senecionis Scandentis Hebra化学成分及其心肌细胞保护活性。方法千里光95%乙醇提取物采用硅胶、Sephedex LH⁃20、MCI、半制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。检测各化合物对心肌细胞H9c2的保护活性。结果从中分离得到7个化合物,分别鉴定为(R)⁃千里光萜醇(1)、(1S,10S),(4S,5S)⁃germacrone⁃1(10),4⁃diepoxide(2)、12⁃羟基⁃莎草酮(3)、urcumenone(4)、isopterchiayione(5)、curcumadione(6)、gibberodione(7)。化合物2~3、5的H9c2细胞存活率分别为(75􀆰2±0􀆰54)%、(66􀆰4±0􀆰79)%、(59􀆰7±0􀆰91)%。结论化合物1为新化合物,化合物2~7首次从该植物中分离得到。化合物2~3、5对心肌细胞具有保护作用。

麻叶千里光抗菌化学成分的研究(Ⅱ)

目的研究麻叶千里光S enecio cannabif olius抗菌活性成分。方法以革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌S taphy lococcus aureus、枯草芽孢杆菌B acillus subtilis和阴性菌大肠杆菌E scherich ia coli为受试菌,采用体外抑菌圈法追踪抗菌活性部分,利用各种色谱技术进行分离纯化,根据理化性质和谱学数据进行结构鉴定。结果从麻叶千里光中分离得到5个化合物,分别鉴定为5-羟基吡啶-2-甲酸甲酯(E-13)、6-羟基-7,7a-二氢-2-(6H)-苯骈呋喃酮(E-14)、2-(1,4-二羟基环己烷基)-乙酸(E-16)、3-羟基环己酸(E-17)、4-羟基苯甲醛(B-14)。结论它们均为从千里光属植物中首次分到。

麻叶千里光抗菌化学成分的研究(Ⅰ)

目的研究麻叶千里光 (SeneciocannabifoliusLess .)抗菌活性成分。 方法以革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌 (Staphylococcusaureus)、枯草芽孢杆菌 (Bacillussubtilis)和阴性菌大肠杆菌 (Es cherichiacoli)为受试菌 ,采用体外抑菌圈法追踪抗菌活性部分 ,利用各种色谱技术进行分离纯化 ,根据理化性质和波谱学数据进行结构鉴定。结果麻叶千里光水提醇沉物的乙酸乙酯萃取部分显示最强的抑菌活性 ,从该部分分离得到 9个化合物 ,均为酚酸类化合物 ,分别鉴定为 :对 羟基苯乙酸 (p hydroxybenzeneaceticacid ,E 1)、对 二苯酚 (1,4 benzenediol,E 2 )、对 羟基苯乙酸甲酯 (methylp hydroxybenzeneacetate ,E 3)、2 ,5 二羟基苯甲酸 (2 ,5 dihydroxybenzoicacid ,E 4 )、2 ,5 二羟基苯乙酸 (2 ,5 dihydroxybenzeneaceticacid ,E 5 )、2 ,5 二羟基苯乙酸甲酯 (methyl 2 ,5 dihydroxybenze neacetate ,E 6 )、3 羟基 4 甲氧基苯甲酸 (3 hydroxy 4 methoxybenzoicacid ,E 7)、对 羟基苯甲酸 (p hydroxybenzoicacid ,E 8)、邻 羟基苯甲酸 (o hydroxybenzoicacid ,E 9)。结论麻叶千里光对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌抑菌效果明显 ,对大肠杆菌作用较弱。其中E 3～E

疑似千里光类药物致药物性肝损伤1例分析

目的 分析千里光类药物与药物性肝损伤的关系,为临床用药安全提供参考。方法 对1例服用可疑千里光类药物后导致肝窦阻塞综合征患者进行分析;比对千里光碱(一种吡咯生物碱)标准品与患者血液、尿液样本色谱图,根据因果关系评价表(roussel uclaf causality assessment method,RUCAM)和《中草药相关肝损伤临床诊疗指南》分析评估可疑药物与肝损伤的相关性。结果 该患者肝损伤表现为肝窦阻塞综合征,患者尿样本中可能存在千里光碱的类似物或代谢物,RUCAM量表评分为8分,判断可疑服用药物与肝损伤存在相关性。结论 服用中药时,慎重评估有无千里光类药物成分,出现肝损伤时,应及时停药并进行针对性检查和治疗。

不同基质对全缘千里光碱凝胶剂体外释放和透皮特性的影响

目的 :通过体外释放和透皮实验 ,优选全缘千里光碱凝胶剂基质 ,为制备全缘千里光碱透皮给药抗肿瘤的新制剂提供参考。方法 :利用溶出仪建立体外释放实验 ,体外透皮采用改良的Franz扩散池法 ,并通过RP HPLC法测定释放液和接收液中全缘千里光碱的含量。结果 :全缘千里光碱三种基质的凝胶体外释放符合Higuchi方程 ,释放速率CMC Na凝胶 >HPMC凝胶 >Carbopol凝胶。体外透皮符合零级动力学过程 ,稳态透皮速率HPMC凝胶 >CMC Na凝胶 >Carbopol凝胶。结论 :凝胶剂作为全缘千里光碱透皮吸收新剂型是可行的 ,首选HPMC作为凝胶基质 ,不宜选择Carbopol作基质。

藏药川西千里光中黄酮类成分的分离和结构鉴定

目的:对藏药川西千里光Senecio solidagineus Hand.-Mazz.全草化学成分进行分离鉴定。方法:利用现代色谱方法(硅胶柱色谱、聚酰胺柱色谱)等方法进行分离、纯化,并利用现代波谱技术超导核磁共振(NMR)、质谱(MS)确定其结构。结果:从川西千里光乙醇提取物的极性部位分离鉴定了3个为黄酮苷类化合物,其结构为:5,7,4'-三羟基-黄酮-3-O-β-D-葡萄糖苷(I),5,7,3',4'-四羟基-黄酮-3-O-β-D-葡萄糖苷(II),5,7,3',4'-四羟基-黄酮-3-O-β-D-葡萄糖基-(6→1)-O-鼠李糖苷(III)。结论:这3个化合物均为首次从该植物中分离得到。

艾叶千里光治阴囊湿疹

艾叶、千里光各30克,加水浓煎,取药液温洗患处10~15分钟,每日洗1次,10次为1疗程,一般1~2个疗程可获痊愈。四川彭州胡佑志成都中医药大学副研究员蒲昭和点评:阴囊湿疹,俗称绣球风、肾囊风,为男子常见病。本病是以阴囊痒痛,或现红色丘疹,搔破浸淫出水,且易反复发作、缠绵难愈为特点。

峨嵋千里光A碱的化学结构鉴定

峨嵋千里光A碱系成都制药一厂从峨嵋千里光草(Senecio faberi Hemsl.)中提取分离所得的一种生物碱。药理实验证明它对动物移置瘤具有较稳定的疗效。作者对其结构进行研究,经元素分析、紫外、红外、核磁共振波谱等测定,鉴定A碱为全缘千里光碱(integerrimine或squalidine)。